外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响

目的 探讨外源核苷酸对小鼠胸腺细胞凋亡的影响。方法 首先建立了体内细胞凋亡模型,25只4周龄雄性小鼠腹腔注射地塞米松(25mg／kg)4、8、16、24h后取胸腺淋巴细胞进行细胞凋亡检测。确定建立体内细胞凋亡模型的条件为注射地塞米松(25mg／kg)后16h取小鼠胸腺细胞。外源核苷酸对小鼠胸腺淋巴细胞凋亡的影响,60只小鼠分成阴性对照、阳性对照、核苷酸1组、核苷酸2组,共4组,每组15只小鼠,均饲喂半纯合饲料。对照组每天灌胃生理盐水,核苷酸1组和2组分别灌胃12．5mg和25mg的核苷酸,连续饲养14d后阳性对照组和核苷酸组小鼠腹腔注射地塞米松溶液,诱导小鼠胸腺淋巴细胞凋亡,阴性对照组注射等量的生理盐水,16h后分离脾脏和胸腺,测定脾脏及胸腺指数,并采用琼脂糖凝胶电泳和流式分析方法检测胸腺淋巴细胞凋亡情况以及细胞游离Ca^2 浓度([Ca^2 ]i)。结果 核苷酸1组和2组小鼠的增重分别为3．71、4．01g,阴性对照组小鼠增重为2．74g,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠的脾脏、胸腺重量以及脏器指数低于阴性对照,添加核苷酸对这些脏器指数没有明显影响;注射地塞米松后小鼠胸腺细胞DNA出现梯形条带,注射地塞米松后阳性对照组和核苷酸组小鼠胸腺细胞内Ca^2 水平分别升高至167．37nmoL／L、191．16nmol／L、180．78nmol／L,高于阴性对照(103．76nmoL／L)。细胞凋亡率也分别由阴性对照组的0．31％升高到11．93％、9．82％、11．15％,补充核苷酸对细胞内Ca^2 水平和细胞凋亡率均没有显著影响。结论 外源核苷酸对地塞米松诱导的小鼠胸腺细胞凋亡没有显著影响。     

褪黑素对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用

目的 探讨褪黑素(MLT)对小鼠淋巴细胞电离辐射损伤的防护作用及其机制。方法 采用流式细胞术和荧光分光光度法在离体和整体条件下分别检测小鼠淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率。在此基础上,腹腔注射MLT,观察2 Gy X射线全身照射后24 h小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量及胸腺细胞³H-TdR掺入率和Con A、LPS诱导的脾T、B淋巴细胞转化率的变化。结果 离体研究中,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞体外接受0.5~6.0 Gy照射后,凋亡小体百分率、DNA裂解率均呈剂量依赖性增加,而照射前预先加入2 mmol/L MLT,细胞凋亡小体百分率、DNA裂解率与单纯照射组比较均显著降低。整体研究中,2Gy全身照射前腹腔注射MLT,小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡小体百分率和DNA裂解率显著低于单纯照射组,接近或低于假照水平,MLT剂量在0.1~2.5 mg/kg范围内均有作用,但无明显剂量依赖性。小鼠胸腺、脾脏淋巴细胞数量、胸腺细胞³H-TdR掺入率及有丝分裂原诱导的脾脏T、B淋巴细胞转化率在2 Gy全身照射后均显著低于假照组(P <0.001)。0.5~10 mg/kgMLT预先腹腔注射,胸腺、脾脏淋巴细胞数显著高于0 mg/kg体重组(单纯照射),其中0.5 mg/kg体重组增高最显著;胸腺细胞³H-TdR掺入率显著增高(P <0.01或P <0.001),以0.5 mg/kg体重组增高最显著;Con A诱导的T细胞转化率显著增高,也以0.5 mg/kg体重组为著;LPS诱导的B细胞转化率增高,以10mg/kg体重组最显著。结论 MLT在体内和体外均可减轻电离辐射诱导的小鼠淋巴细胞损伤,对免疫功能具有保护作用。     

环境雌激素双酚A对小鼠脾细胞周期的影响

[目的]观察环境雌激素双酚A对小鼠脾细胞周期的的影响。[方法]每天分别以0.9mg/kg、9mg/kg、18mg/kg剂量给予小鼠腹腔注射双酚A,分别在连续染毒14d后处死小鼠,取脾,测定脾细胞周期。[结果]小鼠脾细胞G1期、G2期明显增加,而S期明显减少。[结论]双酚A可以诱导小鼠脾细胞G1、G2期阻滞,抑制脾脏细胞的分裂增殖。     

五氯酚钠急性染毒对小鼠免疫细胞损伤影响

目的观察五氯酚钠对小鼠细胞免疫、体液免疫和巨噬细胞功能的毒性作用。方法将五氯酚钠以25,50和100mg/kg经灌胃方式一次给予小鼠,然后观察给药后3,24和48h小鼠各项免疫功能的变化,采用T淋巴细胞增殖法测定细胞免疫功能,采用B淋巴细胞增殖法测定体液免疫功能,采用巨噬细胞吞噬能力和分泌NO的能力来测定巨噬细胞功能。结果100mg/kg五氯酚钠染毒后3h,小鼠的脾脏和胸腺相对重量较对照组降低,脾脏B淋巴细胞的增殖能力受到抑制,腹腔巨噬细胞的吞噬功能和NO生成能力受到抑制。25和50mg/kg五氯酚钠在染毒后24 h依然对脾细胞中B淋巴细胞增殖能力产生抑制作用。这种抑制效应到48h时完全消失。结论五氯酚钠一次染毒在25～100 mg/kg剂量范围内对小鼠体液免疫和细胞免疫功能产生抑制作用,100mg/kg对巨噬细胞功能产生抑制作用,对细胞免疫功能未见影响。     

辅酶Q10对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的:探讨辅酶Q10对小鼠免疫功能的影响。方法:分别以230.0 mg/kg BW、115.0 mg/kg BW、57.5 mg/kg BW剂量的辅酶Q10给小鼠连续灌胃30 d后,分别测定ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化功能、小鼠的迟发型变态反应、小鼠抗体生成和溶血素水平、单核-巨噬细胞碳廓清能力、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力以及NK细胞活性。结果:辅酶Q10能够增强小鼠的脾淋巴细胞增殖、转化作用,提高小鼠的迟发型变态反应程度,促进小鼠的抗体生成细胞增殖,提高小鼠的血清溶血素水平,增强小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清功能,提高小鼠NK细胞活性。结论:提示辅酶Q10具有增强小鼠免疫力的作用。     

应激活化蛋白激酶介导氯化镉致肾上腺皮质细胞凋亡作用探讨

目的 了解氯化镉（CdCl2)对豚鼠肾上腺皮质细胞应激活化蛋白激酶（stress activated protein kinase,SAPK）活性的影响及与凋亡的可能关系。方法 以0．625、1．25和2．50mg/kg CdCl2整体腹腔注射染毒雄性豚鼠,分别于染毒1h和12h处死动物,取肾上腺皮质进行SAPK活性测定（免疫沉淀－蛋白印迹杂交－化学发光法）和电镜观察细胞凋讯。结果 整体染毒1h、SAPK活性随CdCl2染毒剂量的增加呈增加的趋势;染毒12h,各组SAPK活性变化不明显。电观察染毒1h肾上腺皮质细胞未见凋亡征象;但染毒12h可见早期细胞凋亡。结论 SAPK活化在CdCl2诱导肾上腺皮质细胞凋亡过程中可能起重要作用。     

不同途径给予胶原蛋白肽对免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的寻找胶原蛋白肽提高小鼠免疫功能的最佳给药途径。 方法将小鼠随机分为灌胃组和腹腔注射组,两组均再分为对照组、模型组和100、300、600 mg胶原蛋白肽组,共计10个小组,每组6只小鼠。模型组和胶原蛋白肽组均采用糖皮质激素诱导小鼠免疫抑制,灌胃组和腹腔注射组的胶原蛋白肽组小鼠分别采用灌胃和腹腔注射的方式,连续7 d给予100、300、600 mg胶原蛋白肽/kg体重,对照组和模型组小鼠同时给予等渗盐水,于第8天处死小鼠,分别检测胸腺和脾脏指数、外周血白细胞分类及计数、CD⁴/CD⁸比值以及脾脏T淋巴细胞增殖能力。 结果与模型组相比,腹腔注射胶原蛋白肽从低剂量组或中剂量开始即对小鼠脾脏指数、中性粒细胞百分比及绝对值、淋巴细胞百分比及CD^4＋/CD^8＋比值和脾脏淋巴细胞增殖能力均具有显著改善作用(P<0.05),而且部分指标与对照组无显著差异(P>0.05)。而灌胃组只有600 mg胶原蛋白肽组对上述除脾脏指数之外的指标有显著改善作用(P<0.05),但与对照组比较,差异仍有统计学意义(P< 0.05)。 结论腹腔注射胶原蛋白肽对免疫抑制小鼠免疫功能的改善作用优于灌胃。     

蜂胶对小鼠免疫功能影响的实验研究

目的 探讨蜂胶软胶囊对小鼠免疫功能的影响.方法 用清洁级ICR近交系雌性小鼠,以0.08、0.17、0.50 g/kg·BW设3个剂量组,大豆油溶剂为对照组.按体重经口灌胃30 d,分别测定小鼠胸腺指数、脾指数,进行脾淋巴细胞转化和迟发型变态反应实验,检测抗体生成细胞和血清溶血素,小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验和碳廓清及NK细胞活性测定.结果 与对照组相比,0.50 g/kg·BW剂量组能明显增强ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力,提高迟发型变态反应能力,血清溶血素水平和碳廓清能力也明显提高;0.17、0.50 g/kg·BW剂量组能明显促进抗体生成细胞的生成,增强NK细胞活性.结论 蜂胶具有增强免疫力作用.     

精氨酸双糖苷对环磷酰胺致免疫抑制小鼠免疫功能的影响

目的研究精氨酸双糖苷(arginyl-fructosyl-glucose,AFG)对环磷酰胺(CTX)诱导的免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法取BALB/C小鼠脾淋巴细胞,以不同浓度AFG(1,2,4,6,8,10μg/ml)刺激淋巴细胞的体外转化。另取ICR小鼠80只,随机分为8组:正常对照组(N)和免疫抑制模型组(M)给予生理盐水,免疫抑制给予AFG组:M+AFG-H,M+AFG-M和M+AFG-L,三组分别给予50,30,10 mg/kg bw AFG,正常给AFG组:N+AFG-H,N+AFG-M和N+AFG-L三组对应给予高中低50,30,10 mg/kg bw AFG。免疫抑制对照组及M+AFG-H,M+AFG-M,M+AFG-L在第1、2、3、9、16、23、30 d小鼠腹腔注射CTX 80mg/kg。测定AFG对BALB/C小鼠淋巴细胞体外转化的影响。30 d后处死ICR小鼠,测定胸腺指数和脾脏指数。AFG对脾淋巴细胞自然转化,T细胞转化,B细胞转化的影响,以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白细胞介素-2(IL-2)含量。结果高中低剂量AFG均能显著提高免疫抑制小鼠的脾脏指数和胸腺指数(P0.01,P0.05=。AFG对于体外脾淋巴细胞转化的促进作用随浓度的增大而增大,加药剂量为1~10μg/ml时,转化率呈浓度依赖性。AFG中剂量能显著促进免疫抑制小鼠脾细胞的自然转化(P0.05),而AFG低剂量能极显著促进脾淋巴细胞的自然转化(P0.01);高剂量AFG对于免疫抑制小鼠T淋巴细胞的转化具有显著性(P0.05);高中低剂量AFG均能显著促进免疫抑制小鼠B淋巴细胞的转化(P0.01,P0.05)。AFG高中低剂量均能显著提高免疫抑制小鼠血清中TNF-α(P0.01),其中高中剂量均能显著增加IL-2含量(P0.01,P0.05)。结论 AFG具有很强的免疫增强活性并能拮抗CTX的免疫抑制作用。     

免疫低下模型的建立及流式细胞术的检测研究

目的：探讨环磷酰胺致免疫低下模型的建立,并试图研究应用流式细胞术检测小鼠自然杀伤细胞（NK）和T淋巴细胞的应用。方法：以环磷酰胺强化注射、少量多次注射、一次大剂量注射分别建立免疫低下模型,30 d后处死,取外周血和脾,分别检测小鼠外周血自然杀伤细胞（NK）亚群和外周血T淋巴细胞亚群,同时进行脾NK细胞活性测定、ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞转化试验,观察环磷酰胺对外周血T淋巴细胞、NK细胞免疫功能的影响。结果：环磷酰胺强化注射、少量多次注射均可使小鼠外周血和脾的活化的NK细胞和T淋巴细胞比例及T淋巴细胞转化增殖能力、脾NK细胞活性降低。结论：环磷酰胺强化注射可以长时降低小鼠细胞免疫功能的作用,适用于建立保健食品免疫低下模型;流式细胞术检测T淋巴细胞和NK细胞分化抗原在保健食品免疫调节功能评价中有较好应用价值。     

氯化镉对小鼠脏器系数及睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因突变的影响

[目的]研究氯化镉对发育中的小鼠睾丸、肾、肝等脏器系数及对睾丸生殖细胞线粒体DNA控制区（D-Loop）基因突变的影响,探索氯化镉对睾丸影响的机制。[方法]取7周龄雄性ICR小鼠40只[体重（19.5±2.5）g],随机分为低（1μmol/kg）、中（5μmol/kg）、高（10μmol/kg）剂量氯化镉腹腔注射染毒组和阴性对照组共4组,每组10只,隔天染毒,共10次,对照组腹腔注射等体积的生理盐水。第21天取小鼠双侧睾丸、肾和肝,测定脏器系数;提取睾丸生殖细胞基因组DNA,聚合酶链反应（PCR）扩增线粒体D-Loop基因,纯化后测序分析基因突变。[结果]高剂量组睾丸脏器系数明显低于对照组（P〈0.001）,但肝脏器系数明显高于对照组（P〈0.05）;低剂量组肾脏脏器系数明显高于对照组（P〈0.001）。测序结果显示各组小鼠睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因未检测到突变。[结论]高剂量的氯化镉对小鼠睾丸和肝脏脏器系数产生影响,低剂量的氯化镉对小鼠肾脏脏器系数产生影响。氯化镉处理小鼠21d,未检测到睾丸生殖细胞线粒体D-Loop基因突变。     

亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆能力及抗氧化功能的影响

[目的]研究亚慢性铝暴露对大鼠学习记忆能力和抗氧化功能的影响,以探讨铝的神经毒性作用及其机制。[方法]体重(200±10)g的雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组、低剂量铝暴露组、中剂量铝暴露组和高剂量铝暴露组,每组10只。对照组大鼠以1ml去离子水灌胃,低、中、高铝暴露组大鼠分别以75、150、300(mg/kgbw)AlCl3溶液灌胃,并用去离子水补足1ml,1次/d,连续灌胃7周。观察各组大鼠的体重、摄食量、学习记忆能力、血清和脑组织乙酰胆碱酯酶(AchE)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。[结果]各组大鼠摄食量无明显差异;高剂量铝暴露组体重降低幅度明显大于正常组,差异有统计学差异(P﹤0.05)。被动回避试验显示,各组大鼠避暗潜伏期无明显差异。染毒组大鼠血清铝浓度有上升趋势,但与对照组相比无明显差异。随着染铝剂量的增加,脑中AchE活性降低,MDA含量升高,SOD活性下降,但各组大鼠血清MDA含量、SOD活性差异无统计学意义。[结论]亚慢性铝暴露大鼠体重明显下降,脑乙酰胆碱酯酶活性降低,且抗氧化防御功能受损;但未明显损害学习记忆能力。     

快杀灵对雄性小鼠精子毒性的实验研究

[目的]研究快杀灵对雄性小鼠精子的毒性作用。[方法]用不同总剂量 (9.1mg/kg、18.2mg/kg、36.4mg/kg)快杀灵给小鼠经口连续灌胃10天染毒 ,于末次染毒后25d处死小鼠 ,称重睾丸、附睾 ,并计算精子活动度、精子数及畸形率。[结果]精子数量在18.2mg/kg、36.4mg/kg组与对照组比较差异有显著性 (P<0.01)。精子畸形率在36.4mg/kg组与对照组差异有显著性 (P<0.01) ,精子活动度在3个实验组与阴性对照组差异均有显著性 (P<0.01) ,睾丸、附睾重量与阴性对照组比较 ,差异有显著性 (P<0.01)。[结论]快杀灵对小鼠具有一定的精子毒性作用     

微胶囊化番茄红素片对小鼠免疫功能的影响

目的研究微胶囊化的番茄红素片剂对小鼠免疫功能的影响。方法按照卫生部《保健食品检验与评价技术规范》中增强免疫力功能的检验方法,以某品牌微胶囊化番茄红素片为样品,将实验小鼠按体重随机分为5批,每批4组,每组10只,分别进行小鼠脾淋巴细胞转化试验和自然杀伤(NK)细胞活性测定、二硝基氟苯诱导小鼠迟发性变态反应(DTH)试验、抗体生成细胞检测和血清溶血素测定、小鼠碳廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验。每批小鼠均分为溶剂(纯净水)对照组、低剂量组(83mg/kg b.w)、中剂量组(167mg/kg b.w)、高剂量组(500mg/kg b.w),各剂量组小鼠连续灌胃30d后测定各项指标,实验前后称体重,研究微胶囊化番茄红素片对小鼠免疫功能的影响。结果低、中、高剂量组小鼠的NK细胞活性均高于对照组(P0.05)。低、中剂量能促进ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化能力(P0.01,P0.05),提高抗体生成细胞数(P0.05)。在受试剂量下番茄红素片对小鼠迟发型变态反应、半数溶血值、小鼠碳廓清能力、巨噬细胞吞噬鸡红细胞的能力无影响(P0.05)。结论微胶囊化的番茄红素片在适宜剂量下具有增强小鼠免疫力的功能。     

硒对镉诱导的在体大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡和细胞增殖的影响

目的　研究亚硒酸钠对氯化镉诱导的大鼠肝细胞DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化以及DNA相对含量的影响。方法　选用雄性SD大鼠 ,每组 5只 ,用 5 μmol/kg亚硒酸钠分别与5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉联合作用 ,腹腔注射染毒。用单细胞凝胶电泳研究DNA损伤 ,用末端标记法 (TUNEL)和流式细胞术检测大鼠肝细胞凋亡 ,用流式细胞术研究细胞增殖周期和DNA相对含量。结果　 5 μmol/kg的亚硒酸钠对 5、10和 2 0 μmol/kg的氯化镉引起的DNA损伤和细胞凋亡显示出良好的拮抗作用 ,也可使DNA损伤率和细胞凋亡率显著下降。 5 μmol/kg的亚硒酸钠明显抑制5 μmol/kg氯化镉引起的G0 /G1期细胞减少 ,并使 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起减少的G2 /M期细胞显著增多。 5 μmol/kg的亚硒酸钠还对 10 μmol/kg和 2 0 μmol/kg氯化镉引起的DNA相对含量的下降表现出拮抗作用。结论　一定剂量的亚硒酸钠对一定剂量的氯化镉诱导的DNA损伤、细胞凋亡、细胞增殖周期变化和DNA相对含量下降具有一定的拮抗作用     

不同方式给予植物凝集素对昆明白小鼠淋巴细胞转化率的影响

[目的]观察和比较通过不同途径注入植物凝集素后昆明白小鼠淋巴细胞的转化率,已期为相关应用提供依据。[方法]采用口服、腹腔注射、皮下注射、肌肉注射和阴道注入5种方法给予植物凝集素。剂量为4 mg(PHA)/只/22～25 g b.w。72 h后直接取血涂片,瑞氏染液染色后油镜观察各种淋巴细胞的比例,以此计算整体淋巴细胞的转化率。[结果]口服、腹腔注射、皮下注射、肌肉注射和阴道注入各组平均转化率分别为17%、36%、39%、47%、24%。[结论各实验组与对照组的转化率之间有显著差异。整体淋巴细胞的转化率与不同给药方式有关系。几种给药方式相比,肌肉注射引起的淋巴细胞转化率最高,口服组的转化率相对较低。     

罗汉果皂甙提取物对1型糖尿病小鼠细胞免疫功能的影响

目的:探讨罗汉果皂甙提取物(mogrosideextract,MG)对1型糖尿病(type1diabetesmellitus,TIDM)小鼠脾脏淋巴细胞亚群及细胞因子表达的影响。方法:给予Balb/c小鼠腹腔注射200mg/kgbw四氧嘧啶造模(TIDM)。成模后按血糖随机分为,糖尿病对照组,低、高剂量MG治疗组(150、300mg/kgbw);正常小鼠也按血糖随机分为正常对照组以及低、高剂量MG组。连续灌胃30d,实验结束时测小鼠血糖水平,流式细胞仪检测脾脏淋巴细胞CD4、CD8亚群以及细胞因子IFN-γ,TNF-α和IL-4的表达,并观察胰腺组织学变化。结果:与正常对照组相比,TIDM小鼠血糖显著升高,脾脏CD8+淋巴细胞数目显著增加,CD4/CD8比值降低;IFN-γ、TNF-α的表达水平升高。MG尤其是低剂量组能降低血糖,改善胰腺的病变程度以及下调IFN-γ、TNF-α的表达水平,增加TIDM小鼠脾脏CD4+淋巴细胞数目,使CD4/CD8比值恢复正常,此外,还可显著增加正常小鼠和TIDM小鼠脾脏淋巴细胞IL-4的表达水平,但对正常小鼠其它各项指标无明显影响。结论:MG能通过免疫调节机制对TIDM小鼠脾脏淋巴细胞的抗原表达进行调控,拮抗TIDM时出现的细胞免疫功能失衡,进而对TIDM起到一定的治疗作用。     

绞股蓝总皂甙对氯化镉所致睾丸生殖细胞毒性的影响

目的：观察绞股蓝总皂甙（GPS）对雄性小鼠染镉后对睾丸生殖细胞的保护作用。方法：预先灌服GPS200mg/kg／d，连续16d后，腹腔注入氯化镉（Cd)3mg/kg/d 5d，观察睾丸病理切片和精子畸形率。结果：预服GPS的小鼠染镉后，其精子畸形率 比单纯染镉组下降53．01％（P＜0．01）。睾丸病理切片单纯染镉组出现病理改变，与预服GPS组相比未见明显差别。表明GPS对Cd所致小鼠精子畸形率有较好的抑制作用。结论：GPS可用于防治Cd对生殖系统的损害作用。     

微量元素锌影响老年小鼠免疫功能的实验研究

[目的]观察微量元素锌对老年小鼠免疫功能的影响,判定微量元素锌对老年小鼠的免疫作用.[方法]测定老年小鼠脾悬液中淋巴细胞转化率和腹腔液中巨噬细胞吞噬率.[结果]锌(8～10mg/kg)可显著提高老年小鼠淋巴细胞增殖反应、巨噬细胞吞噬百分率及吞噬指数(P<0.01).[结论]适量的锌可增强老年小鼠细胞免疫功能,提高机体巨噬细胞吞噬功能.