胃癌肿瘤干细胞的分离与成脂分化

背景：肿瘤干细胞是否存在于所有肿瘤中仍有争议。 目的：从人胃癌细胞中分离并鉴定类肿瘤干细胞，对胃癌的发生机制进行探讨。 方法：原代培养胃癌细胞，并通过流式细胞术检测CD44和CD29等细胞因子的阳性表达率，分选阳性细胞进行成脂诱导。 结果与结论：胃癌细胞中CD44、CD29的阳性百分率分别为5.67%和5.53%，CD44和CD29阳性细胞具有成脂能力，证明胃癌肿瘤细胞中存在具有分化能力的类肿瘤干细胞。     

肿瘤干细胞的调控机制及其临床意义

肿瘤干细胞是存在于肿瘤组织中的少部分具有干细胞性质的细胞群，其自我更新和分化受到严格的调控。肿瘤干细胞是肿瘤形成、复发与转移的根源。目前，对于肿瘤干细胞的调控机制存在着若干理论，包括异常信号传导通路、非整倍核型发生、原癌基因激活与抑癌基因失活和端粒酶耗损理论等。通过研究肿瘤干细胞的各种调控机制，寻找和鉴定特异性的肿瘤干细胞表面分子标志物，寻找肿瘤干细胞与肿瘤发生密切相关的基因，确定出针对肿瘤干细胞进行治疗的靶位并选择性地杀伤肿瘤干细胞，从而为临床可能根治肿瘤和防止肿瘤复发与转移提供新的思路。     

间充质干细胞与肿瘤生长发展关系的研究现状

背景：间充质干细胞是具有多向分化潜能的一类组织干细胞,肿瘤可以诱导间充质干细胞迁移进入肿瘤组织。针对间充质干细胞对肿瘤生长发展的影响目前已经进行了大量的研究。 目的：综述间充质干细胞在肿瘤生长发展过程中的作用。 方法：应用计算机检索2000-01/2009-06 PubMed数据库(网址http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PubMed)相关文章,检索词为“mesenchymal stem cell,myofibroblast,neoplasms”,并限定文章语言种类为English。共检索到文献8 372篇,37篇文献符合纳入标准。 结果与结论：间充质干细胞能够迁移进入肿瘤组织并且可以促进肿瘤的生长发展,这一过程可能与间充质干细胞促进肿瘤间质重构、促进肿瘤血管形成、抑制肿瘤局部机体免疫相关。但是也有一些研究结果表明间充质干细胞可以抑制肿瘤生长。因此进一步加深间充质干细胞与肿瘤关系的研究可能会增加人们对肿瘤发病机制的理解。     

肿瘤干细胞与肿瘤血管生成研究进展★

背景：最近研究结果证实，肿瘤中存在一小部分肿瘤干细胞，肿瘤干细胞兼有成体干细胞和胚胎干细胞的自我更新和多能性特征，在肿瘤发展中起重要作用。血管内皮生长因子可调节内皮增殖、血管生成，调节血管通透性及血栓形成。 目的：文章就肿瘤干细胞与肿瘤血管生成的研究进展做一综述。 方法：应用计算机检索Pubmed数据库(2000-01/2009-10)，以“Cancer stem cells，Vascular endothelial growth factor，New vascularize”为检索词；同时应用计算机检索CNKI数据库(2000-01/2009-10)和万方数据库(2000-01/2009-10)，以“肿瘤干细胞血、管内皮生长因子、新生血管化”为检索词。 结果与结论：计算机初检得到153篇，中文13篇，英文140 篇。阅读标题和摘要进行初筛，排除因研究目的与此文无关的35篇，内容重复性文献30篇，Meta分析57篇，共保留31篇做进一步分析。由多种因素调控的血管新生是肿瘤生长和转移过程中的必需环节，干细胞参与并促进肿瘤血管新生，从而促进肿瘤的生长和转移，而修饰后的干细胞则可以起到反向的作用。同时，干细胞也可以作为治疗物质的载体定位肿瘤病灶，特别是在寻找亚临床病灶及远处转移病灶方面具有潜在的优越性。     

表皮干细胞的鉴定方法

获得纯化的人类和动物表皮干细胞不仅可为构建有生理功能的人工皮肤提供种子细胞，对了解皮肤组织器官发育、肿瘤疾病发生也具有重要意义，是转基因和组织工程技术中的重要靶细胞。利用慢周期性和自我更新能力是鉴别表皮干细胞最基本且较可靠的实验手段，但这两种方法的应用很不方便。目前位于表皮干细胞表面的糖蛋白已作为其特异性标志而受到关注。因表皮干细胞的特异性分子标志、识别标准、分布定位及体外培养条件下生物学特性的变化等诸多方面都还存在争议，限制了其基础研究与临床应用。     

CD133:脑胶质瘤干细胞标志物?

过去十五年,癌症研究中的重大进展之一为"肿瘤干细胞"模式的提出.该模式认为,恶性肿瘤的发生类似于正常组织发生,最初起源于与"正常干细胞"具有相类似的自我更新和多向分化潜能特性的"肿瘤干细胞"[1].细胞表面分子CD133在各类肿瘤干细胞的分选及鉴定中广泛应用[2].然而最近,CD133分子在脑胶质瘤、结直肠癌、肺癌等恶性肿瘤组织中作为肿瘤干细胞标志物的作用受到了质疑,例如,在脑胶质瘤中的研究表明,CD133阴性的肿瘤细胞在体外实验中也可具备自我更新及多向分化能力,在免疫缺陷鼠中亦可有效导致肿瘤发生;而且CD133阴性肿瘤细胞在免疫缺陷鼠中所诱发的肿瘤可包含CD133阳性肿瘤细胞[3].因此,CD133分子作为肿瘤于细胞,尤其是脑胶质瘤干细胞标志物的特异性成为当前研究的热点.     

干细胞在骨性关节炎治疗中的理论与应用

骨性关节炎与关节软骨组织代谢失衡有关，由于关节软骨的磨损和丢失，导致疾病的进一步发展。干细胞具有向中胚叶组织如软骨、骨、脂肪等组织分化的能力，最近的研究发现软骨中也有间充质干细胞的表达。文章综述了间充质干细胞的特性及功能，以及应用干细胞治疗骨性关节炎的临床方法，应用局部激活、募集和输注合适的干细胞群落是研究关节软骨损伤修复和恢复关节动态平衡的新方法。运用干细胞技术合成组织工程化软骨用于疾病治疗，对关节软骨的缺损修复及骨关节病的治疗具有重要意义。     

人脑胶质瘤中肿瘤干细胞的体外培养及生物学特性

背景：有研究者提出，脑内存在少量正常的神经干细胞能够向肿瘤组织迁移。这需要对从胶质瘤体外培养得到的肿瘤干细胞与正常的神经干细胞进行鉴别。 目的：从人脑胶质瘤组织中分离脑胶质瘤干细胞进行体外培养，并对其干细胞特性加以鉴定，观察脑肿瘤干细胞的生长特性。 设计、时间及地点：细胞学观察实验，于2007-02/12在解放军第四军医大学细胞工程研究中心完成。 材料：7份肿瘤标本来源于胶质瘤患者，间变性星形细胞瘤标本3份，多形性胶质母细胞瘤标本4份。 方法：将获取的胶质瘤细胞置于含2%B27、表皮细胞生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、左旋谷胺酰氨、胰岛素、青霉素和链霉素生长因子的无血清DMEM/F12培养基中，重新悬浮为单细胞悬液，以1×108 L-1接种于含有B27、表皮细胞生长因子及碱性成纤维细胞生长因子的DMEM/F12培养基中培养分离培养肿瘤干细胞球。取第5代的肿瘤干细胞球，离心后除去原培养基，用含有体积分数为0.10胎牛血清的DMEM/F12培养基接种于放置有多聚赖氨酸包被盖玻片的小平皿中，观察肿瘤干细胞分化情况。 主要观察指标：利用细胞免疫荧光及组织免疫组织化学法检测脑肿瘤干细胞在细胞培养或组织切片中CD133及巢蛋白表达。 结果：在胶质瘤中存在一定量的细胞能在无血清培养基中存活并悬浮生长，并增殖形成克隆性脑肿瘤干细胞球，细胞核较大，核质比例高，具有肿瘤细胞的特性，与原肿瘤组织标本的苏木精-伊红染色比较，肿瘤干细胞分化后的子代细胞中大部分与胶质瘤细胞相似。原代及传代脑肿瘤干细胞表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白和CD133。 结论：人脑胶质瘤中存在一定量的肿瘤干细胞，并能在体外将其分离培养，能够自我更新增殖、诱导分化，表达神经干细胞标志物CD133。     

脑转移瘤微环境研究简

肿瘤转移是恶性肿瘤的重要生物学特征之一，也是恶性肿瘤患者预后不良的主要因素之一。对转移瘤形成的研究有多种理论，如：转移肿瘤干细胞理论，“种子和土壤”学说。近年研究发现，肿瘤微环境（tumor microenvironment）对于肿瘤形成、增殖、侵袭及转移具有重要意义，转移瘤的形成与其周围的微环境存在密切关系，本文就肿瘤微环境与转移瘤的关系做一综述。     

神经干细胞与脑胶质瘤干细胞☆

所有的肿瘤组织并不是由均一的肿瘤细胞所组成的,不同的细胞具有不同的增殖、浸润和转移能力,亦即肿瘤的异质性。其中存在少数担当着干细胞角色的肿瘤细胞,具有干细胞的基本特性,包括自我更新能力、无限的增殖能力和多向分化潜能,为肿瘤干细胞。神经干细胞具有很强的自我更新机制,获得较少突变即有可能恶性转化,而且干细胞存活时间较长,这意味着干细胞比成熟细胞发生细胞复制的错误几率更大,因外界环境的刺激而发生突变的机会更多,最终形成脑胶质瘤干细胞,同时调节神经干细胞增殖和自我更新的基因在脑胶质瘤的脑胶质瘤干细胞中也表达,这也是支持神经干细胞是脑胶质瘤干细胞来源的;也有推测认为它可能起源于已分化的细胞,由这些细胞突变发生去分化得来,并通过基因突变而获得了干细胞自我更新的特性,从而形成脑胶质瘤干细胞。通过探讨神经干细胞与脑胶质瘤干细胞,为脑胶质瘤的治疗提供依据。     

结直肠癌组织中CD44+肿瘤细胞与S期标志物增殖细胞核抗原的关系*◆

背景：目前尚未找到结直肠癌干细胞理想的标志物,结合周期蛋白能更精确的找到GO/G1期癌干细胞。 目的：了解结直肠癌组织中CD44和增殖细胞核抗原PCNA的表达及CD44+肿瘤细胞与S期标志物增殖细胞核抗原PCNA的关系。 方法：采用组织芯片检测、免疫组织化学和双重免疫组织化学染色技术检测61例结直肠癌组织、10例正常肠黏膜组织中增殖细胞核抗原PCNA和CD44表达情况。 结果与结论：在结直肠癌组织中,PCNA+细胞数远多于CD44+细胞数,CD44+癌细胞形态有两种,一种核较大,染色质边集,呈空泡状,核膜核仁清晰,这些细胞大多数呈PCNA阳性;另一种核较小,染色质致密,呈小圆形,部分表达PCNA。在大多数病例中,CD44+细胞中90%以上的瘤细胞同时为PCNA阳性,只有(3.38±2.08)%细胞为单纯PCNA阳性。说明结直肠癌组织中大多数CD44+细胞呈现S期标志物PCNA阳性,处于S期;只有极少数CD44+/PCNA-处于G0/G1期的细胞可能为肿瘤干细胞。     

筛选鉴定Thy-1标记阳性肝癌细胞系中的卵圆细胞样干细胞：可能是肝肿瘤干细胞吗？☆

背景：肝癌的转移复发被认为可能存在有肿瘤干细胞,后者在肿瘤细胞中数目极少,使得临床鉴别存在一定困难。Thy-1是卵圆细胞的表面标记蛋白,通过特异性标记物间接证明肿瘤中存在肿瘤干细胞是目前研究的重点。 目的：探讨肝癌细胞中是否存在Thy-1标记阳性的卵圆细胞,并进行筛选鉴定。 方法：流式细胞仪检测卵圆细胞标记蛋白Thy-1在肝癌细胞HepG2,BEL7402及正常肝细胞QSG7701的阳性表达情况,免疫磁珠分选Thy-1标记阳性的肝癌细胞,免疫荧光鉴定分选效率。裸鼠皮下接种实验设立3组,Thy-1+细胞组裸鼠于背部皮下接种分选的Thy-1+细胞5×105/只,HepG2细胞阳性对照组同法接种HepG2细胞0.5×107/只,Thy-1-细胞阴性对照组同法接种分选的Thy-1-细胞0.5×107/只,1个月后观察各组成瘤性。 结果与结论：卵圆细胞表面标记蛋白Thy-1在肝癌细胞HepG2,BEL7402中的表达明显高于正常肝细胞QSG7701(P < 0.05)。Thy-1+细胞组免疫荧光染色阳性率为85%,HepG2细胞阳性对照组为1%,Thy-1-细胞阴性对照组几乎无免疫荧光表达。HepG2细胞阳性对照组、Thy-1+细胞组5只裸鼠全部成瘤,且瘤体体积相对较大;而Thy-1-细胞阴性对照组仅有1只裸鼠成瘤,瘤体体积明显小于前2组(F=144.568,P < 0.05),提示肝癌细胞中存在Thy-1标记阳性的卵圆细胞样干细胞,其可能是肝癌细胞中的肿瘤干细胞。     

脑肿瘤干细胞的研究进展

近来的研究显示,脑肿瘤中存在少量具有自我更新,增殖和分化潜能的“脑肿瘤干细胞(BTSC)”。尽管它们的数量极低,却是脑肿瘤发生、发展和复发的根源。本文对脑肿瘤干细胞理论研究的进展进行阐述,同时对该项研究的意义和价值进行分析。     

肠癌细胞系SW-620中肿瘤干细胞相关SP亚群分析*

背景：在某些恶性肿瘤中,SP细胞具有肿瘤干细胞的特性,如人脑瘤、乳腺癌等肿瘤干细胞的研究就是采用了这种方法。目前关于肠癌干细胞的研究尚处于探索阶段,国内外尚无肠癌干细胞分离、鉴定成功的报道。 目的：分析肠癌细胞系SW-620中是否包含肿瘤干细胞相关的SP亚群。 方法：制备SW-620细胞悬液,经Hoechst33342和PI染色,实验组加入Hoechst33342至终浓度为5 mg/L,维拉帕米组同时加入维拉帕米至终浓度5 mg/L,流式细胞仪分析SP亚群,共选取3次实验的结果。 结果与结论：通过Hoechest33342蓝光和红光双参图,实验组SP细胞亚群位于左下角两种荧光均阴性或很弱的区域,经3次检测,肠癌细胞株SW620中SP比例分别为0.1%,1.0%和0.5%,经维拉帕米阻断后SP细胞比例均为0。提示人肠癌细胞系SW620中存在SP亚群细胞,即提示肠癌干细胞存在的可能;维拉帕米可抑制染料外从排而明显减少SP细胞的比例。     

胶质瘤起源细胞与分子病因研究

神经干细胞和胶质瘤干细胞的研究成功,对早有定论的胶质瘤起源细胞学说发出了挑战.在胶质瘤细胞中,为数不多的干细胞是生成肿瘤的细胞已经证实,但肿瘤干细胞是否起源于神经干细胞仅仅只是推测.两者间的分子关系是研究的切入点,推测调控分子就是胶质瘤发生的分子病因.     

BALB/c裸鼠与SCID小鼠皮下种植人肝癌模型的比较★

背景：建立良好的肝癌模型是进一步研究肝癌诊断、治疗的基础，目前各种模型较多，但是进行评价的很少。 目的：比较两种免疫缺陷小鼠种植性肝癌的成瘤情况。 方法：免疫磁珠法从Huh7肝癌细胞中分选出CD133+肝癌干细胞，取1×106个细胞分别种植于BALB/c祼鼠及SCID小鼠颈背部皮下，观察两组20 d的成瘤及死亡情况，游标卡尺分别测量种植性肝癌的直径，以大于0.5 cm为成瘤成功。 结果与结论：24只BALB/c裸鼠中18只成瘤成功；24只SCID小鼠中16只成瘤成功。行χ2检验，两组成瘤效果差异无显著性意义(P > 0.05)，两组死亡情况比较，差异有显著性意义(P < 0.05)。结果提示BALB/c组死亡率低，且价格低廉，更适合建立肝癌皮下种植模型。     

利用藻酸盐与骨髓间充质干细胞及前列腺癌细胞混合培养：观察干细胞对癌细胞增殖速度及成簇大小的影响☆

背景：肿瘤外环境研究的模型主要集中在实验室细胞的二维培养与体外动物实验,缺乏三维立体模型的研究与构建。 目的：体外模拟肿瘤骨转移的三维模型,并比较在有无骨髓间质干细胞时前列腺癌细胞的增殖速度与成簇大小以及成簇率。 方法：清洁级SD大鼠2只用于提取骨髓间质干细胞。利用藻酸盐模拟骨髓微环境,将前列腺癌细胞与SD大鼠骨髓间质干细胞在藻酸钙中共培养。通过显微镜与组织切片观察细胞在模型中的生长情况。利用绿色荧光蛋白转染肿瘤细胞,通过培养在普通光及荧光显微镜下观察三维模型中肿瘤单克隆的生长扩增情况。 结果与结论：有干细胞存在共培养的三维藻酸钙微环境中前列腺癌细胞的成簇速度、数量及成瘤率均较对照组高。对照组在7.75 d、有干细胞的混合培养组在6.00 d能形成单克隆细胞簇, 10 d后对照组瘤簇细胞计数为(95.13±11.63)个;有干细胞的混合培养组为(112.53±14.67)个,荧光细胞克隆形成率对照组为(77.10±6.85)%;有干细胞的混合培养组为(64.55±6.21)%;两者相比均有显著性意义。结果提示前列腺癌细胞与骨髓基质干细胞在藻酸钙微球环境中,有利于细胞增殖及成簇性发展。     

Stem cells and the origin and propagation of brain tumors

In recent years there has been a flood of interest in the relationship between brain tumors and stem cells. Some investigators have focused on the sensitivity of normal stem cells to transformation, others have described phenotypic or functional similarities between tumor cells and stem cells, and still others have suggested that tumors contain a subpopulation of ;;cancer stem cells' that is crucial for tumor maintenance or propagation. Although all these concepts are interesting and provide insight into the origins and properties of brain tumors, the use of similar terms to describe them has led to confusion. The goal of this review is to sort out some of that confusion and highlight what we know and what we have yet to learn.     

肿瘤干细胞的分离与纯化研究进展

随着肿瘤干细胞学说的日趋成熟,针对干细胞的靶向治疗已成为新的理论,分离与纯化肿瘤干细胞是研究的重要组成部分。目前国内外主要根据肿瘤干细胞已知的细胞表型和生物学特性,用流式细胞仪分选法、磁性激活细胞分选法和旁群细胞分选法来分离与纯化肿瘤干细胞,为肿瘤的临床诊断与治疗提供了依据。