银杏叶提取物抗大鼠肾缺血/再灌注损伤的实验研究

目的:探讨银杏叶提取物(EGb)能否诱大鼠肾脏表达HO-1并减轻其缺血/再灌注损伤。方法:采用切除右肾,夹闭左肾动脉50min/再灌注24h的动物模型。32只雄性Wistar大鼠随机均分为4组:假手术组、缺血再灌注(I/R)组、EGb组(术前24h腹腔注射EGb20mg/kg)、EGb ZnPPⅨ组(EGb20mg/kg ZnPPⅨ45μmol/kg),检测肾组织中HO-1蛋白表达及HO-1活力、丙二醛(MDA)含量、总抗氧化能力(TAOC)和血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)含量及肾组织形态学改变。结果:①EGb明显诱导肾内HO-1表达并使其活力增加(P<0.01);②同假手术组比较,I/R组Cr、BUN、MDA升高(P<0.05),TAOC降低(P<0.05),肾组织损伤严重,I/R前用EGb诱导HO-1表达可逆转上述病理改变(P<0.05),用HO的抑制剂ZnPPⅨ可部分抑制EGb的保护作用。结论:EGb通过诱导肾内HO-1表达,可明显改善大鼠的I/R性肾损伤,其作用机制可能同HO-1增强肾组织抗氧化能力有关。     

血红素氧合酶-1与大鼠肾缺血再灌注损伤关系的研究

目的 :探讨血红素氧合酶 -1(hemeoxygenase -1,HO -1)与大鼠急性肾缺血再灌注损伤 (IRI)的关系。方法 :建立大鼠肾缺血再灌注损伤模型 ,分别检测48只大鼠缺血前及再灌注24h后肾IRI组织中HO -1的活性与含量 ,以及血尿素氮 (BUN)、肌酐 (Cr)、超氧化物岐化酶 (SOD)和丙二醛 (MDA)的水平。结果 :HO -1的活性与SOD呈正相关 (r=0.663 ,P<0.001),与BUN、Cr、MDA呈负相关 (r= -0.723 ,P<0.001 ;r= -0.630 ,P<0.005 ;r= -0.629,P<0.01) ;HO -1的含量与SOD呈正相关 (r=0.570,P<0.001),与BUN、Cr、MDA呈负相关 (r= -0.646,P<0.005;r= -0.577 ,P<0.001 ;r= -0.530 ,P<0.01)。结论 :HO -1与IRI关系密切 ,可通过清除氧自由基 (OFR)而减轻IRI及保护肾功能。     

氯化亚锡对大鼠肾缺血再灌注损伤的作用和血红素氧合酶-1表达的影响

目的：探讨氯化亚锡（SnCl2）对大鼠肾急性缺血再灌注损伤的改善作用和血红素氧合酶-1（HO-1）表达的影响。方法：建立大鼠肾缺血再灌注模型,随机将动物分为假手术组、对照组及实验组。实验组存肾脏缺血前24h皮下注射SnCl2 100mg／kg,肾脏缺血45min再灌注24h后切取肾脏,分别应用免疫组织化学及双抗夹心ELISA检测HO-1蛋白的表达,并测定肾组织中超氧化物岐化酶（SOD）的活性及丙二醛（MDA）的含量。同时测定血尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）水平。结果：对照组缺血再灌注前后血Cr、BUN水平、SOD活性及MDA含量差异均有统计学意义（P〈0．05）,而假手术组、实验组差异均无统计学意义（P〉0．05）。假手术组、对照组及实验组大鼠肾组织匀浆中HO-1含量依次增高（P〈0．05）。结论：应用SnCl2预处理诱导HO-1的表达可通过清除氧自由基的毒性作用而减轻大鼠肾缺血再灌注损伤。     

血红素氧合酶-1抗大鼠肾缺血再灌注损伤细胞凋亡实验研究

目的 探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对肾缺血再灌注（IR）损伤中细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 24只雄性Wistar大鼠随机均分为单纯IR组、HO-1诱导组及HO-1抑制组,分别给予生理盐水、血晶素、锌原卟啉Ⅸ（ZnPPⅨ）腹腔内注射预处理.8h后行右肾切除用于检测HO-1蛋白表达及活性,左肾动脉夹闭缺血50min再灌注18h,检测血Cr、BUN及肾组织中丙二醛（MDA）浓度、髓过氧化物酶（MPO）活性及bcl-2蛋白表达与细胞凋亡指数（AI）.结果 血晶素与ZnPPⅨ预处理分别显著诱导与抑制了肾内HO-1蛋白表达及活性.与单纯IR组比较,HO-1诱导组Cr、BUN、MDA浓度及MPO活性显著降低,bcl-2蛋白表达升高伴AI明显下降,而HO-1抑制组Cr、BUN、MDA、MPO升高,HO-1表达降低伴AI显著升高.结论 HO-1可能通过抗炎、抗氧化、上调bcl-2蛋白表达等作用抑制肾IR损伤中的细胞凋亡.     

重组腺相关病毒介导的HO-1基因转染对大鼠移植肾缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组血红素氧合酶-1基因（Heme oxygenase-1,HO-1）腺相关病毒（rAVV-HO-1）对大鼠自体移植肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法将48只雄性成年Lewis鼠随机分为两组。转染组（n=24）在供肾切取时应用rAVV-HO-1原位灌注;对照组（n=24）用磷酸盐缓冲溶液（PBS）原位灌注。所有供肾保存于4℃的UW液中24 h后行自体移植,同时切除对侧肾脏。留取术后3h、3d、7d的血清和尿标本以比较血肌酐、尿蛋白;取移植后3 h、3 d、7 d时的肾组织标本,以RT-PCR、免疫组化分析移植肾HO-1基因及蛋白的表达,间接法测定HO-1的活性。结果将rAVV-HO-1原位灌注后,转染组移植后3 h、3 d、7 d移植肾HO-1mRNA的表达强度分别为（0.55±0.13）,（0.82±0.19）和（0.39±0.09）,对照组移植后3 h、3 d、7 d的HO-1mRNA表达强度分别为（0.11±0.07）、（0.10±0.09）和（0.09±0.03）,转染组在各时间点的HO-1 mRNA表达都明显高于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。免疫组化结果显示转染组移植后3 h可见HO-1蛋白表达,而对照组无表达。3 d、7 d后转染组移植肾可见HO-1蛋白强阳性表达,而对照组仅可见HO-1蛋白微弱表达,两组具有显著差异。转染组移植后7 d血肌酐水平为（2.14±0.87）mg/dL,明显低于对照组（7.33±2.31）mg/dL,移植后7 d治疗组尿蛋白为（5.10±1.23）μg/mL,明显少于对照组（11.61±3.39）μg/mL,差异均有统计学意义（P〈0.05）。移植后3 d、7 d治疗组胆红素浓度明显高于对照组（P〈0.05）。结论用rAVV-HO-1转染大鼠移植肾可以诱导移植肾中HO-1的稳定表达,并对移植肾缺血再灌注损伤具有保护作用。     

HO-1的表达对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 本研究采用Sprague-Dawlev(SD)大鼠为供体和受体,建立原位肝移植模型.将48只雄性SD大鼠随机分为:对照组,供肝收获前无任何处理;CoPP组,供肝收获前24h供体腹腔注射CoPP5mg/kg;ZnPP组,供肝收获前24h供体腹腔注射ZnPP 20mg/kg.每组16只.供受体各8只,受体不做任何处理.肝移植后3 d每组各处死3个受体进行检测:(1)肝功能;(2)肝脏移植物HO-1的表达;(3)肝脏移植物细胞凋亡;(4)肝脏移植物缺血再灌注损伤的程度.每组留下5个受体观察其肝移植后的生存时间.结果 (1)CoPP组的ALT(65±27.8),AST(187.2±43.2)明显低于对照组ALT(346.4±45.1),AST(474.4±89.7)和ZnPP组ALT(577.8±75.3),AST(1084.4±127.9)(P<0.01).(2)CoPP组的HO-1表达明显高于其他组(P<0.05).(3)CoPP组的凋亡阳性细胞百分率(3.2±0.8)%明显低于对照组(12.5±2.4)%和ZnPP组(25.8±3.1)%(P<0.05).(4)CoPP组与对照组、znPP组比较,肝细胞损伤轻,炎症细胞浸润少.CoPP组的Suzuki评分(0.76±0.59)明显低于对照组(1.32±0.741和ZnPP组(1.80±0.70)(P<0.05).(5)CoPP组的中佗生存时间(100d)明显长于对照组(12 d)和ZaPP组(93 d)(P<0.01或<0.05).结论 HO-1表达上调对肝脏移植物缺血再灌注损伤有保护作用.     

益肝灵保护大鼠肾缺血再灌注损伤的实验研究

目的探讨益肝灵对肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法建立肾缺血再灌注模型，大鼠右肾切除，左侧肾蒂夹闭45min后再灌60min。用益肝灵预防性治疗，检测并比较肾组织及血清中MDA及SOD的活性变化。结果益肝灵能明显押制缺血再灌所致的血及肾组织中MDA的升高和SOD的活性降低。结论益肝灵对肾缺血再灌注损伤具有保护作用。     

大鼠肾缺血再灌注过程中脂质过氧化损伤的实验研究

目的 探讨急性肾缺血再灌注损伤的机制。方法 采用大鼠双侧肾蒂夹闭的肾缺血再灌注损伤模型，测定肾组织丙二醛(MDA)水平和超氧化物歧化酶(SOD)的活性，光镜下观察肾组织病理变化。结果 肾缺血再灌注后肾组织中MDA含量呈进行性增高，而单纯肾缺血MDA无明显变化；单纯肾缺血和缺血后再灌注肾组织中SOD活性呈进行性降低；缺血和再灌注组均有不同程度肾损害。结论 脂质过氧化参与肾缺血再灌注损伤。     

钴原卟啉诱导HO-1高表达抗大鼠心肌缺血/再灌注损伤的实验研究

目的 探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护效应及作用机制.方法 采用HO-1诱导剂钴原卟啉(CoPP) 和抑制剂锌原卟啉(ZnPP) 分别进行干预处理后建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型,观察大鼠再灌注后I/R左心室心肌超微结构变化;检测HO-1蛋白在大鼠心肌的表达情况;测定大鼠左心室心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量.结果 再灌注前使用CoPP 进行预处理可以诱导HO-1蛋白表达上调.HO-1蛋白表达上调可以减少缺血/再灌注后心肌细胞坏死,提高心肌组织中SOD含量,并降低MDA含量.结论 CoPP诱导的HO-1过表达可以抑制心肌缺血/再灌注损伤后细胞坏死,从而减轻心肌再灌注损伤,抗氧自由基是其机制之一.     

诱导血红素氧合酶-1对小肠移植缺血再灌注损伤的影响

目的：探讨诱导血红素氧合酶-1（HO-1）是否可减轻大鼠小肠移植缺血再灌注损伤及其机制。方法：SD大鼠分成3组：Ⅰ组：血晶素（Hemin）组（n=20）；Ⅱ组：Hemin＋卟啉锌（ZnPP）组（n=20）；Ⅲ组：生理盐水组（n=20）。建立小肠移植缺血再灌注损伤模型。移植后6、12、24、48h分别从各组随机取5只大鼠，切取移植小肠进行HO-1活性测定．普通病理学检查及细胞凋亡检测。结果：术后各时段Ⅰ组HO-1活性均显著强于Ⅱ组及Ⅲ组（P〈0．05），而Ⅱ组和Ⅲ组比较无显著差异（P〉0．05）。各组移植肠缺血再灌注损伤以术后12h最为明显。Ⅰ组表现轻度，而Ⅱ组和Ⅲ组表现中度缺血再灌注损伤。术后各时段Ⅰ组细胞凋亡数少于Ⅱ组和Ⅲ组，差别有统计学意义（P〈0．05），而Ⅱ组和Ⅲ组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论：诱导HO-1可通过抑制细胞凋亡而减轻移植肠缺血再灌注损伤。     

阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1对大鼠肝脏缺血再灌注的保护作用

目的:探讨阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1(HO-1)对大鼠肝脏缺血再灌注的保护作用及其机制。 方法:48只雄性Wistar大鼠,随机分成6组（每组8只）：正常组(N)、阿霉素组(DOX)、原卟啉锌-Ⅸ组(ZnPP)、缺血再灌注组(IR)、阿霉素+缺血再灌注组(DOX-IR)和阿霉素+原卟啉锌+缺血再灌注组(DOX-ZnPP-IR)。测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)含量作为肝功能指标;放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和内皮素(ET)作为应激标志物指标;应用Western blotting法和免疫组织化学S-P法观察HO-1蛋白表达;透射电子显微镜观察细胞超微结构变化。 结果:DOX-IR组ALT、AST、ET-1和TNF-α值均显著低于IR组 (P<0.05);DOX组与正常组比较,肝功能、ET-1和TNF-α值差异无显著性 (P>0.05);DOX-ZnPP-IR组与IR组比较,肝功能值差异无显著性(P>0.05)。Western blotting法和免疫组织化学S-P法检测显示DOX 组和DOX-IR组 HO-1蛋白表达增加,HO-1在正常肝脏内的表达呈阴性。透射电镜检查IR组肝细胞细可见明显的细胞器损害现象,DOX -IR细胞器受损较轻。 结论：阿霉素预处理可以提高器官对缺血再灌注损伤的耐受性,其机制可能与阿霉素所诱导的HO-1表达有关,小剂量阿霉素对大鼠肝脏未造成明显损害。     

肺缺血再灌注损伤时血红素氧合酶-1的变化及意义

目的:探讨肺缺血再灌注损伤时血红素氧舍酶-1(HO-1)的变化规律及意义.方法:40只健康日本大耳白兔随机分成假手术对照(C)组、肺缺血再灌注(IR)组、肺缺血再灌注 氯铁血红素(H)组和肺缺血再灌注 锌原卟啉(Z)组.各组在缺血前后,再灌注1 h、2 h、3 h分别抽血检测一氧化碳血红蛋白(COHb)浓度,实验结束时取肺组织测湿/干重比(W/D)、肺泡损伤数(IAR)、HO酶活力并观察细胞超微结构的改变.结果:与C组相比,IR组COHb浓度随缺血和再灌注时间的延长而逐渐升高,H组这种趋势更加明显,Z组升高较缓和;IR组W/D、IAR升高,H组下降而Z组明显增加;IR组HO酶活力增加,H组上升更加显著而Z组明显降低;超微结构显示H组较IR组损伤减轻而Z组加重.结论:HO-1诱导可能通过一氧化碳(CO)介导减轻肺缺血再灌注损伤.     

Protective effect of heme oxygenase-1 on lung injury induced

Background Intratracheal instillation of blood induces self-repaired acute lung injury. However, the mechanism of repair has been unclear. Heme-oxygenase （HO）-1, which catalyzes heme breakdown, acts as an inducible defense against oxidative stress and plays an important role in inflammation. The objective of this study was to test the role of HO-1 in lung injury caused by intratracheal instillation of red cells. Methods Forty healthy, male Sprague-Dawley rats were randomly divided into five groups： normal group, saline group, erythrocyte group, erythrocyte＋zinc-protoporphyrin （ZnPP, HO-1 inhibitor） group and saline＋ZnPP group. At 2 days after intratracheal instillation of red cells, lung tissues and lavage samples were isolated for biochemical determinations and histological measurements. Results Histological analysis revealed that administration of ZnPP worsened the acute lung injury induced by instilled erythrocytes. HO-1 was over-expressed in the erythrocyte group and in the erythrocyte ＋ ZnPP group. Compared with the erythrocyte ＋ ZnPP group, the levels of total protein, lactate dehydrogenase and tumor necrosis factor-a in the lavage were lower （P 〈0.01）, while the level of interleukin-10 was higher in the erythrocyte group （P 〈0.01）. Conclusion HO-1 protects against erythrocyte-induced inflammatory injury in lung.     

银杏叶提取物抗大鼠肺缺血/再灌注损伤的实验研究

目的 探讨银杏叶提取物(EGb761) 能否通过诱导血红素氧合酶-1(HO-1)活性减轻肺缺血/再灌注损伤.方法 采用呼气末无创血管夹夹闭阻断左主支气管、左肺动脉和左肺静脉30 min后再灌注2 h建立缺血/再灌注(I/R)动物模型.40只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:假手术组、I/R组、EGb组(术前24 h腹腔注射EGb 20 mg/kg)、EGb ZnPP组(EGb 20 mg/kg 再灌注前15 min静脉注射ZnPP Ⅸ 40 μmol/kg),检测肺湿重/干重比、肺泡损伤数、肺组织中HO-1的活性和肺组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Pxase)活性变化.结果 ①EGb761明显诱导肺组织HO-1活性增加(P<0.01);②同假手术组比较,I/R组肺湿重/干重比及肺泡损伤数增加(P<0.01),肺组织GSH-Pxase活性降低(P<0.01),缺血/再灌注前用EGb761可逆转上述病理改变(P<0.01),用HO-1的抑制剂ZnPP Ⅸ可部分抑制EGb761的保护作用.结论 EGb761通过HO-1的抗氧化作用减轻肺缺血/再灌注损伤.     

血红素加氧酶-Ⅰ在大鼠肝硬化性肾损伤中的保护作用

目的探讨改变肝硬化大鼠肾中血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)表达水平对肾的保护作用和可能的作用机制。方法将32只雄性SD大鼠随机分为4组:假手术组、肝硬化组、氯高铁血红素组和锌原卟啉组。胆总管结扎建立大鼠肝硬化模型,氯高铁血红素组胆总管结扎5周后隔日腹腔注射氯高铁血红素(30μmol/kg),锌原卟啉组胆总管结扎5周后隔日腹腔注射锌原卟啉(10μmol/kg)。4周后检测肾的各项生化指标,观察各组肾形态学改变,检测肾中HO-1的含量。结果肝硬化组血肌酐(serum creatinine,Scr)、胱抑素-C(cystatin C,Cys-C)、肌酐清除率(creatinine clearance rate,Ccr)水平分别为(44.52±3.31)μmol/L、(0.75±0.04)mg/L、(2.40±0.37)ml/min;氯高铁血红素组Scr、Cys-C、Ccr水平分别为(36.96±1.68)μmol/L、(0.50±0.03)mg/L、(3.40±0.62)ml/min;锌原卟啉组Scr、Cys-C、Ccr水平分别为(72.18±3.86)μmol/L、(0.91±0.05)mg/L、(1.03±0.30)ml/min。氯高铁血红素组Scr、Cys-C水平较肝硬化组明显降低(均P<0.01),而Ccr明显升高(P<0.01)。锌原卟啉组Scr、Cys-C水平较肝硬化组明显升高(均P<0.01),而Ccr明显降低(P<0.01)。且氯高铁血红素组肾组织病理明显改善。结论腹腔注射氯高铁血红素提高肝硬化大鼠肾中HO-1表达水平可以减轻肾损伤程度。     

Effect of Heme Oxygenase-1 Inducer Hemin on Chronic Renal Failure Rats

The role of HO-1 inducer, hemin, in chronic renal failure (CRF) rats and its possible mechanism of action was studied. 5/6 subtotal nephrectomy was performed to establish chronic renal failure model. Rats were randomly assigned to 4 groups: sham-operated group, CRF group,ferrous gluconate group and heroin group. At the 10th week after operation, serum creatinine,BUN, RBC, HGB and HCT were measured. Renal pathologic changes were observed. RT-PCR and immunohistochemistry were used to detect the expression and distribution of HO-1. RT-PCR and radioimmunoassay was used to determine the expression of ET-1 in the kidney and plasma. The results showed that as compared with CRF group, serum creatinine and BUN in hemin group were reduced significantly and nephrogenic anemia was improved markedly. Glomerular mesangial proliferation and interstitial lesion were also ameliorated significantly. Heroin not only increased the expression of HO-1 but also reduced the expression of ET-1 in the kidney. The level of ET-1 protein in the plasma was also reduced after heroin treatment. Most of these indexes were not obviously changed in ferrous gluconate group. It was suggested that through inducing the expression of HO-1 and reducing the level of ET 1 in the kidney and plasma, heroin plays an important protective role in 5/6 subtotal nephrectomized rats.     

葛根素对兔肺缺血再灌注损伤中血红素加氧酶-1的影响

目的:观察葛根素对兔肺缺血再灌注损伤(IRI)中血红素加氧酶-1(HO-1)的影响.方法:30只健康日本大耳白兔随机分成假手术对照组(C组)、肺缺血再灌注组(IR组)和葛根素组(Pur组).复制兔单侧肺缺血再灌注损伤模型,对比观察各组肺湿干重比(W/D)、肺泡损伤数(IAR)、HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白的表达.结果:IR组与Pur组W/D、IQA均比C组为高(P＜0.01),但Pur组显著低于IR组(P＜0.01);与C组相比,IR组HO-1活性、HO-1mRNA及其蛋白表达增加(P＜0.01),Pur组上升更加显著(P＜0.01).结论:葛根素能增加HO-1的活性,上调HO-1mRNA及其蛋白的表达,对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用.