O139群霍乱弧菌毒力岛区域分子特征分析

目的 比较O139群霍乱弧菌国际标准株M045和O1群E1 Tor型霍乱弧菌国际标准株N16961基因组中毒力岛区域分子特征.方法 从MO45基因组中筛选含有毒力岛上游的VC0815基因及其上游基因片段并克隆到pNEB193中命名为pNEBVC081545,绘制pNEBVC081545的限制性酶切图谱并与N16961同段序列限制性酶切图谱进行比较.在pNEBVC081545中选择VC0815基因上游的一段侧序列进行亚克隆,测序后与N16961同段序列比较.结果 pNEBVC081545限制性酶切图谱中VC0815基因上游序列图谱中第1个碱基位置是限制性内切酶位点为KpnⅠ,第732位为Sal Ⅰ,第819位为Hpa Ⅰ,第1578位为Bgl Ⅱ,第1600位为Hind Ⅱ,第1943位为Xba Ⅰ,第3247位为EcoR Ⅰ,此段序列限制性内切酶图谱与N16961同段序列限制性酶切图谱完全相同.对Sal Ⅰ和EcoR Ⅰ之间的序列进行亚克隆,并对该段序列测序,测序结果表明该段核酸序列与N16961中同段序列完全相同.结论 O139霍乱弧菌可能是E1 Tor霍乱弧菌O抗原突变而产生的菌群.     

O139霍乱弧菌分子遗传学研究动态

O139霍乱弧菌作为一种新出现的霍乱病原体,有许多重要的分子特征:溶源性噬菌体CTXΦ具有生物特异性免疫机制,而且有不依赖TCP菌毛的普遍性转导的感染方式;VPI毒力岛由噬菌体VPIΦ携带,可以在菌株间水平转移,这些都为设计生物安全性菌苗提出了难题。染色体上的RTX毒素家族具有细胞毒性;SXT携带多种抗生素抗性基因,可以发生位点特异性重组;pTLC,一种静息质粒也与噬菌体的复制等功能有关;该菌携带多种菌毛噬菌体,可能参与遗传交换,这些对O139霍乱弧菌的致病性和流行都将产生影响。     

O139霍乱弧菌分子遗传学研究动态

Ｏ１３９霍乱弧菌作为一种新出现的霍乱病原体,有许多重要的分子特征：溶源性噬菌体ＣＴＸХ具有生物特异性免疫机制,而且有不依赖ＴＣＰ菌毛的普遍性转导的感染方式;ＶＰＩ毒力岛由噬菌体ＶＰＩХ携带,可以在菌株间水平转移,这些都为设计生物安全性菌苗提出了难题。染色体上的ＲＴＸ毒素家族具有细胞毒性;ＳＸＴ携带多种抗生素抗性基因,可以发生位点特异性重组;ｐＴＬＣ,一种静息质粒也与噬菌体的复制等功能有关;该菌携带     

O139血清群霍乱弧菌的感染

感染性腹泻属于国际检疫传染病，1962年5月国际检疫委员会第十次会议将其列入实施严格检疫的范畴，但收效甚微，未能有效地制止其传播和蔓延，迄今已波及世界五大州的100多个国家和地区，我国目前的发病也是上升趋势。引起感染性腹泻的弧菌科细     

广西首次分离 O139群霍乱弧菌的病原学特征

目的 了解O139群霍乱弧菌的病原学特征。方法 采用经典的微生物学、噬菌体-生物分型方法进行生化、药敏和流行菌株的分型,并用家兔肠段结扎方法进行霍乱肠毒素检测。结果 4株菌与O139群霍乱诊断血清发生强凝集反应。与O1群多价血清不凝集;在庆大琼脂平板上菌落较O1群霍乱弧菌混浊、隆起。霍乱肠毒素检测均为中等毒力,对氟哌酸、丁胺卡那霉素敏感,对9种抗菌药物耐药。结论 霍乱肠毒素检测为中等毒力,具备引起流行的能力,为流行株。因此加强监测,及时做好防治措施十分必要。     

O1群和O139群霍乱弧菌致病性的比较研究

目的:比较O1群和O139群霍乱弧菌的致病性。方法:对O1群霍乱弧菌Eltor型小川1b型3株和稻叶1d型3株,及O139群霍乱弧菌6株,从酸敏感性、肠粘膜粘附、产肠毒素及相关基因等方面对两群菌株的致病性做以比较。结果:O1群和O139群霍乱弧菌的酸敏感范围为pH3.05～4.60;平均肠粘膜吸附菌数分别为4.04×106和3.58×106cfu/cm2;兔肠段积液平均分别为1.85和1.80ml/cm;兔红细胞凝集效价分别为1∶128和1∶64;12株霍乱弧菌都携带有ctxA、zot、ace、tcpA基因。结论:O1群和O139群霍乱弧菌的致病性是一致的。     

5株O139群霍乱弧菌生物学性状研究

目的研究从病人和水产品中分离到的5株O139群霍乱弧菌的生物学性状。方法参照《霍乱防治手册》对5株菌的生长特征、生化特征、血清学反应及药物敏感性进行鉴定；应用多重PCR方法对所试菌株进行毒力相关基因检测，用Vero细胞测定方法检测ctxA阳性菌株霍乱肠毒素的表达。结果5株O139群霍乱弧菌生物学性状和血清学反应与阳性对照菌体O139群霍乱弧菌MO45基本相同；2株来自重型病人和1株来自水产品的菌株ctxA、zot、ace、tcpA、tcpI、hlyA、rtxA、rtxC、ompU、tarR 11种毒力相关基因全部阳性。经Vero细胞测定，其霍乱肠毒素效价达到1：160；在2株来自轻型病人的菌株中仅hlyA、rtxA、rtxC、toxR 4种毒力相关基因为阳性。结论O139群霍乱弧菌致病(泻)的决定基因簇并非仅为ctxA、zot、ace、cep等毒力相关基因。     

霍乱弧菌O139和El Tor菌株tcpA分子特征的研究

[目的]从霍乱弧菌XJ93006、MO45、XJ89079中克隆毒素协同调节菌毛亚单位A（tcpA）基因（包括侧序列）并测序比较。[方法]PCR扩增tcpA片段;克隆该片段;提取质粒经鉴定后测序并利用DNAMAN对该序列进行序列分析,比较。[结果]成功构建XJ93006、MO45、XJ89079 tcpA基因的重组质粒。三株霍乱弧菌及与N16961 tcpA基因及其两侧核酸序列同源性XJ89079和N16961为100%,XJ93006和XJ89079为99.8%,XJ93006和MO45为99.5%,XJ89079和MO45为99.7%。[结论]该研究初步认为我国新疆VC O139与本地EVC关系密切。     

重庆市九龙坡区冬季检出O139群霍乱弧菌

O139群霍乱弧菌一般在夏秋季节流行与传播，各地疾病预防控制中心（疾控中心）也把夏秋季作为监控与预防的重点。但是，重庆市九龙坡区疾控中心2003年12月23日接到一起疑似霍乱疫情报告，经对疑似病例采样检验，从粪便中分离出O139群霍乱弧菌，证实在冬季也会出现O139群霍乱弧菌爆发和流行。     

活白水鱼体表检出O139群霍乱弧菌

目的 了解奉贤区海水产品中霍乱弧菌的污染状况,为霍乱防治工作提供实验依据.方法 依据<霍乱防治手册第5版进行霍乱弧菌分离培养、生化及血清学鉴定,同时用PCR方法进行检测.结果 从活白水鱼体表检出1株O139剪群霍乱弧菌.结论 本次检出的1株O139剪群霍乱弧菌为流行株,具有引起流行和大流行的潜力,因此要加强对海水产品的主动监测,预防霍乱的散发和暴发流行.     

实时荧光定量PCR检测O139群霍乱弧菌研究

目的：利用荧光定量PCR技术,建立一种快速、准确、特异检测O139群霍乱弧菌的定量方法。方法：选取O139群霍乱弧菌糖基转移酶基因（LPSgt）作为检测的靶基因,设计引物和TaqMan探针,探针的两端均进行荧光标记。对PCR扩增体系进行优化,进一步评价实时荧光定量PCR方法的特异性、灵敏度、重复性后,对收集的临床样本进行鉴定。结果：本文所建立的实时荧光定量PCR方法可准确、特异的检测和鉴定O139群霍乱弧菌,其他菌株均无阳性结果产生;该方法的灵敏度可达到10 cfu/ml;定量检测的批间和批内的变异系数均小于5%;对85例临床样本进行评价,结果获得9例O139群霍乱弧菌阳性,与常规培养法结果完全一致。结论：本文建立的检测O139群霍乱弧菌实时荧光定量PCR方法快速、准确,结果可靠,实用性强,可对结果进行定量分析,为O139群霍乱弧菌的实验室诊断和现场流行病学调查提供了较好的分析手段。     

霍乱弧菌O∶139血清型生物学特征的研究

霍乱弧菌 O∶ 139血清型是近年来新发现的一种霍乱弧菌血清型 ,曾多次在国内外引起霍乱流行 ,深受各国医务工作者的广泛关注。由于此型弧菌发现较晚 ,对其生物学特征还不甚了解 ,况且国内外对此资料报导甚少 ,因而给医务及检验人员鉴定、诊断霍乱带来较大困难。为了弄清霍乱弧菌 O∶ 139型的生物学特征 ,为医务及检验人员鉴定、诊断霍乱提供科学依据 ,今将我站 1999年 4月在江桥污水监测样中检测出的霍乱弧菌O∶ 139的生物学特征描述如下 :1　材料及方法1.1　样品来源 :齐市江桥污水排放口污水1.2　培养基 :1.10倍浓缩碱性蛋白胨水增菌液 …     

霍乱弧菌O:139血清型生物学特征的研究

霍乱弧菌O:139血清型是近年来新发现的一种霍乱弧菌血清型,曾多次在国内外引起霍乱流行,深受各国医务工作者的广泛关注.由于此型弧菌发现较晚,对其生物学特征还不甚了解,况且国内外对此资料报导甚少,因而给医务及检验人员鉴定、诊断霍乱带来较大困难.为了弄清霍乱弧菌O:139型的生物学特征,为医务及检验人员鉴定、诊断霍乱提供科学依据,今将我站1999年4月在江桥污水监测样中检测出的霍乱弧菌O:139的生物学特征描述如下:     

活自水鱼体表检出O139群霍乱弧菌

目的了解奉贤区海水产品中霍乱弧菌的污染状况，为霍乱防治工作提供实验依据。方法依据《霍乱防治手册》第5版进行霍乱弧菌分离培养、生化及血清学鉴定，同时用PCR方法进行检测。结果从活白水鱼体表检出1株O139剪群霍乱弧菌。结论本次检出的1株O139势群霍乱弧菌为流行株，具有引起流行和大流行的潜力，因此要加强对海水产品的主动监测，预防霍乱的散发和暴发流行。     

萍乡地区O139群霍乱弧菌TcpA基因序列分析

目的　探讨O13 9群霍乱JX株的TcpA基因序列 ,分析该株基因的特点。方法　采用PCR扩增技术 ,检测含O13 9群霍乱标本 ,对TcpA基因阳性者进行核苷酸序列测定 ,分析基因变异情况。结果　发现阳性标本中 ,对其中 1株进行了TcpA基因序列测定 ,该序列与TcpAET(O13 9株 )同源性为 10 0 % ,与EVC序列同源性为 96%。结论　本株与O1群 (EVC)遗传关系最近 ,对萍乡地区霍乱防治具有重要意义。     

一株O139群霍乱弧菌的检出报告

1999年 6月 ,我们从一上吐下泻的患者排泄物中分离出一株 O1 39群霍乱弧菌 ,对其生物学性状进行了检测 ,现报告如下。1　病例简介患者 ,女性 ,5 5岁 ,退休工人。1999年 6月 1日中午发病 ,以腹泻开始 ,继以呕吐 ,无发热 ,无腹痛 ,无里急后重。每日大便二十数次 ,性状为水样。呕吐物初为食物残渣 ,继为水样。患者表情淡漠 ,声音嘶哑、眼窝深陷 ,唇舌极干 ,皮肤无弹性 ,指纹皱瘪 ,肌肉抽搐 ,霍乱症状较为典型。2　病原学检查结果2 .1　形态特点　将患者排泄物接种于 PH8.5的碱性蛋胨水(AP)中 ,37℃培养 18小时 ,挑取增菌液在镜下观察动力 ,动…     

O139群霍乱弧菌的流行概况及其研究进展

自1817年以来，全球已发生了七次世界性的霍乱大游行，前六次是由古典生物型霍乱弧菌所致，至今仍在游行的第七次大游行是由动乱尔托生物型霍乱弧菌引起。其病原体均属O2群霍乱弧菌，根据抗血清对菌体抗原（O抗原）的凝集作用，可将霍乱弧菌分为     

1株O139群霍乱弧菌的分离鉴定

霍乱是由O1群和O139群霍乱弧菌引起的甲类传染病,是当今3种国际检疫传染病中最严重的一种。准确快速检测霍乱弧菌并检测毒力基因携带情况,对判断疫情的性质,进而采取适当的控制措施至关重要。2010年9月,桐乡市肠道门诊监测中检出1株0139群霍乱弧菌并作了毒力基因检测和耐药性测定,现报道如下。     

从活甲鱼体表检出O139群霍乱弧菌

自 1992年印度首次检出由O1 39群霍乱弧菌引起的霍乱大暴发以来 ,由于人流和物流频繁 ,交往增多 ,O1 39群霍乱弧菌作为霍乱病原对世界各地的威胁日益严重 ,时有暴发流行发生。2 0 0 2年 10月中下旬我区发生了一起人群感染菌型与市场销售的活甲鱼体表检出的菌型相一致的O1 39群霍乱暴发流行。现将其分离培养及鉴定结果报告如下 :1　流行病学调查2 0 0 2年 10月 19日我区某酒楼从某海鲜商行购进甲鱼 7.5kg ,用于午餐宴。 2 0日出现首例病人。该酒楼新开业不久 ,该日进餐人员较多 ,菜肴制作上生、熟未能彻底分开 ,当班厨师在制作甲鱼莱肴后 ,…     

O139群霍乱弧菌L型诱导实验观察

目的：探讨O139群霍乱菌的L型变异。方法：采用抗生素,胆盐和蒸馏水实验室诱导方法进行观察,结果：发现O139群霍乱弧菌MO45菌株经上述3法诱导可发生L型变异,其菌落特征和菌体形态均与L型的描述相符,结论：实验结果证实O139群霍乱弧菌可诱导成L,其变异过程与ElTor弧菌相似,检测自然界中亦存在O139群霍乱弧菌的L型。