骨形态形成蛋白修复大面积关节软骨缺损的实验研究

将骨形态形成蛋白(BMP)用于大面积关节软骨缺损的修复,探讨应用方法,观察修复效果。在51只成年兔股骨的髌髁关节面上制造5mm×10mm的骨软骨缺损,深3～5mm。缺损内分别填充骨形态形成蛋白和纤维蛋白粘合剂复合物(BMP/FS)、BMP、FS,植入物均用自体游离骨膜覆盖,并设单纯骨膜覆盖缺损组和空白对照组。术后2、4、8、12周对缺损修复情况行大体和组织学观察。结果显示:BMP/FS组,8周时软骨下骨再生已完成,12周表层新生软骨组织结构接近正常,修复效果明显优于其它组。     

骨膜移植和钻孔术修复关节软骨缺损的实验比较

用中国白兔２４只，在股骨关书面造成６ｍｍ×８ｍｍ全层软骨缺损，分别进行游离骨膜自体移植和钻孔术。术后４、８周取材做组织学及电镜观察并进行比较。结果表明：（１）钻孔、移植骨膜和对照组的优势修复组织分别为类透明软骨、幼稚软骨和纤维组织。（２）修复组织平均数量，移植骨膜明显优于钻孔和对照组。（３）骨膜移植、钻孔和对照组修复组织来源分别为骨膜本身、髓腔和软骨下骨及与缺损毗连的软骨。初步结论：移植骨膜和软骨下骨钻孔均能修复关节软骨缺员，单纯刮除后修复能力最差。     

孔数不同的软骨下骨钻孔术对兔软骨缺损修复的影响

目的：为了观察软骨缺损的修复过程，比较不同数目钻孔术对软骨缺损的修复效果。方法：用中国白兔２４只，在股骨关节面造成６ｍｍ×８ｍｍ全层软骨缺损，分别施行１０孔及５孔钻孔术，术后４、８周取材，做组织学及电镜观察，并进行评估。结果：（１）１０孔、５孔和对照组的优势修复组织分别以类透明软骨，类透明软骨加纤维软骨和纤维组织为主。（２）修复组织厚度１０孔及５孔无显著差异。（３）修复组织覆盖缺损的面积，１０孔＞５孔＞对照组。初步结论：软骨下骨钻孔可修复关节软骨全层缺损；多孔比少孔修复好；非钻孔的缺损修复效果较差。     

自体骨—骨膜移植修复骨软骨缺损：初步报告

根据骨膜具有再生关节软骨能力的特性，我们将取自于胫骨内侧骺端的骨一骨膜用于修复膝关节表面的骨软骨缺损。临床应用５例，包括剥脱性骨软骨炎、软骨下骨坏死及陈旧性髌骨骨折。经１６～２６个月随访，以膝关节功能评分法评价，移植手术获满意效果。摄片及磁共振影像证实缺损得以修复。此结果表明骨一骨膜移植是修复骨软骨缺损的有效方法。     

自体软骨细胞移植修复猪膝关节软骨缺损的实验研究

目的评价传统和复层高密度培养（复层培养）的自体软骨细胞移植修复关节软骨缺损的效果。方法在8头猪16膝髌切迹上下共建立32个全层软骨缺损，右膝为空白和自体骨膜移植对照组，左膝为传统的自体骨膜覆盖下细胞注射移植组和自体骨膜覆盖下复层培养细胞移植组（上下缺损随机进入各对照和实验组）。术后5-6个月对缺损部位行大体、组织学、免疫组织化学检查。采用O’Driscoll软骨组织形态学评分评价软骨缺损的修复质量。结果四组的O’Driscoll软骨组织形态学评分分别为（3．14±1．95）分、（10．57±3．60）分、（16．29±2．63）分、（20．43±1．81）分，各组之间差异均有统计学意义（P〈0．01）。空白对照组缺损被少量的纤维组织覆盖；骨膜移植组被纤维组织和少量的纤维软骨修复，且与周围组织整合差。自体软骨细胞移植（注射组和复层培养组）缺损被塑形良好的修复组织覆盖，组织学、基质特殊染色示修复组织为纤维软骨和透明软骨，与周边软骨和软骨下骨整合良好。复层培养组修复组织的细胞形态、基质染色比注射细胞组更接近正常软骨。结论自体软骨细胞移植可成功修复全层关节软骨缺损。扩增后的软骨细胞经短期复层培养更有利于软骨缺损的修复。     

块形重组合异种骨修复犬桡骨骨缺损

为使异种骨种移植应用于骨干节段性骨缺损治疗。作者将经去抗原处理的牛松质骨骨块与牛骨形态发生蛋白复合形成块形重组合异种骨，通过犬桡骨干中上段２０ｍｍ，骨－骨膜缺损修复模型，综合评价ＭＲＢＸ修复大型动物长骨节段性骨缺损的能力。方法：６只成年犬左侧桡骨节段性骨骨膜缺损处理ＭＲＢＸ，右侧不做修复，为空白对照。     

游离骨-骨膜修复关节软骨缺损的研究

目的 观察自体游离骨－骨膜复合组织移植修复关节软骨缺损的组织形态学演变过程及其分期，探讨骨膜演化为软骨的影响因素，新生软骨退变的主要影响因素。方法 将健康家兔30只随机分为6组，每组5只。随机选择一侧足部跗骨切取骨－骨膜复合组织2块，在双膝股骨髁间人为形成软骨及软骨下骨缺损，植入骨－骨膜块。结果 骨膜组织可演化为透明软骨组织，60个关节中48个形成透明软骨，演变过程可分为3期。结论 手术操作不得当对新生软骨的形态有不良影响，导致新生软骨早期退变的主要因素是未能注意修复的“完整性原则”，及骨膜生发层朝向关节腔。     

关节软骨缺损的修复

关节软骨损伤后仅有有限的自我修复能力。既住行钻孔术使骨髓内的未分化细胞聚集于缺损处进行分化产生软骨，然而所形成的纤维软骨无论在生物学上，还是在生物力学上均与原来的软骨不同，且极易退变。近年来尝试骨膜瓣下植入培养的自体软骨细胞修复缺损，使修复组织在质和量方面均有提高。最近，又发展到用骨形态发生蛋白治疗软骨缺损，该方法更优于软骨细胞值入法，修复进一步深入研究以利临床应用。     

自体骨膜移植治疗关节软骨损伤的研究现状

关节软骨损伤修复大致分两类，即内源性修复和外源性修复。内源性修复也称骨髓刺激术，外源性修复包括生物移植和组织工程化关节软骨，前者包括骨膜、软骨膜移植，软骨细胞移植和骨-软骨移植；后者是体外构建种子细胞-载体复合物注入缺损区或者利用种子细胞悬液注入缺损区再用骨膜或软骨膜覆盖封闭软骨缺损的开口。两者均涉及到骨膜的成软骨作用。骨膜移植应用于临床治疗软骨损伤已有近20a历史，它有取材方便、对机体损害小等特点，但存在许多影响因素，限制了它的应用。本文就骨膜移植治疗关节软骨损伤的现状作一综述。     

3种方法修复关节软骨缺损生物力学的研究

目的评价骨软骨柱镶嵌移植、骨-骨膜柱镶嵌移植和Ⅱ型胶原骨形态发生蛋白(BMP)复合物3种方法修复关节软骨缺损的生物力学变化,为临床应用提供实验依据。方法将20只成年新西兰兔制成膝关节缺损模型,修复1组在缺损局部镶嵌移植骨软骨柱,修复2组为骨-骨膜柱,修复3组为Ⅱ型胶原BMP复合物,空白组软骨缺损处不作处理,另取4只兔作为正常对照。术后12周取材制成宽3mm、长5mm、厚0·5mm的条状试件进行单向拉伸试验、黏弹性蠕变和松弛试验,所得数据结果进行统计学分析。结果3种方法对关节软骨缺损修复的修复物应力-应变曲线、时间-应力曲线和时间-应变曲线都具有一定的黏弹性表现,与对照组比较差异具有显著性(P<0·01),但较正常组仍有差距(P<0·05),其中修复1组标本力学性能强于修复2组和修复3组(P<0·05)。结论骨软骨柱镶嵌移植、骨-骨膜柱镶嵌移植和Ⅱ型胶原BMP复合物3种方法对关节软骨缺损具有良好的修复作用,骨软骨柱移植近期效果最佳,而Ⅱ型胶原BMP复合物来源广泛,适合修复大面积的关节软骨缺损。     

静脉血骨膜瓣生发层朝向对再生关节软骨的影响

在２４条犬髌股关节面上造成２０ｍｍ×２５ｍｍ的软骨缺损，用静脉血营养骨膜瓣移植修复，根据生发层不同朝向，分两组对比研究。结果表明：生发层朝关节腔组新生软骨组织学结构，超微结构，胶原类型及软骨细胞的营养代谢均明显优于生发层朝骨面组。对于临床应用具有指导意义。     

骨膜移植修复骨缺损的实验研究及临床应用

为探寻大块骨缺损修复方法的新途径，进行了自体骨膜游离移植修复骨缺损的实验及临床研究。实验用４２只兔，于双侧胫骨作人工骨缺损模型（６ｍｍ×１８ｍｍ×５ｍｍ）。一侧随机植入自体游离骨膜片，另一侧不植入，作为对照。以组织学、Ｘ线和放射性同位素为观察指标，研究成骨过程。结果表明，骨膜植入侧骨缺损的愈合比对照侧缺损的愈合快一倍。原因可能是骨膜提供了大量成骨细胞并直接呈膜内成骨而非软骨内化骨。在此基础上，为２１例骨缺损患者应用自体胫骨骨膜片植入治疗骨缺损，面积最大１０．５ｃｍ×４ｃｍ×４ｃｍ，最小２ｃｍ×２ｃｍ×２ｃｍ；其中１７例为良性骨肿瘤，４例为骨慢性感染。骨缺损均得到修复，关节功能恢复满意。为腔洞性骨缺损的修复提供了一种新方法。     

冷冻保存胎兔颅骨骨膜修复关节软骨缺损的实验研究

为探讨关节软骨缺损的修复方法，采用家兔３０只，平均分成两组。在每个动物的双侧髌股关节股骨关节面作４ｍｍ×７ｍｍ全层软骨缺损。将经二步冷冻法保存的胎兔颅骨骨膜移植于一组动物一侧后肢作为实验组，另一侧用自体骨膜移植作为自体对照组。在另一组动物的一侧后肢用新鲜胎兔颅骨骨膜移植作为新鲜对照组，另一侧关节软骨缺损不修复作为空白对照组。术后肢体不作外固定。１６周后取材，经大体观察、组织学观察及氨基酸成分分析。结果发现，经冷冻保存的胎兔颅骨骨膜移植后能形成透明样软骨，与自体对照组无显著性差异（Ｐ＞０．０５），与新鲜对照组及空白对照组主要指标有显著性差异（Ｐ＜０．０５）。氨基酸分析示实验组新生物接近纤维软骨（Ｐ＞０．０５）。认为，冷冻胎兔颅骨骨膜移植为关节软骨缺损的修复提供了实验依据。     

异体颅骨、骨形态发生蛋白及骨膜修复颅骨巨大缺损

以异体颅骨和骨形态发生蛋白为材料，应用部分带蒂骨膜瓣和头皮瓣成功修复４例巨大颅骨缺损。缺损范围最小为９ｃｍ×７ｃｍ，最大１３ｃｍ×１１．５ｃｍ。经术后１～２年随访，外观均好，且移植异体骨逐渐被吸收，新生骨已形成。     

BMP／DBM修复关节软骨缺损的实验研究

作者旨在对骨形态生成蛋白／脱钙骨基质（ＢＭＰ／ＤＢＭ）复合体在关节软骨缺损修复中的作用进行探讨。在１６只雄性兔双侧股骨髁间凹各做一直径４ｍｍ，深２．５ｍｍ的全层关节软骨缺损。１６个右膝缺损区植入ＢＭＰ／ＤＢＭ，８个左膝缺损内单独植入ＤＢＭ，另外８个左膝为空白。术后１２周处死动物，取材，石蜡包埋，连续切片，做苏木素一伊红，甲苯胺蓝及ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ染色。结果显示，在ＢＭＰ／ＤＢＭ组，植入物完全被吸收并被新生软骨替代，１４例（１４／１６）愈合，且１２例ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ阳染，新生软骨厚度和特征与邻近正常软骨相似。ＤＢＭ组只有２例（２／８）愈合，ｓａｆｒａｎｉｎ－Ｏ染色全部阴性。空白组未见新生软骨。结果说明，ＢＭＰ／ＤＢＭ能在关节腔内诱导软骨再生，并能以透明软骨修复全层关节软骨缺损。     

自体骨膜移植修复关节软骨缺损生发层不同朝向的比较研究

为了观察骨膜再生软骨中，骨膜生发层不同的朝向是否影响软骨再生。应用人体纤维蛋白粘合剂粘合自体骨膜修复兔关节软骨缺损，对移植骨膜生发层不同朝向（即朝向关节腔或软骨下骨）的差别进行比较。结果表明：６周前，朝向关节腔组增殖较快，６周后两组无明显差别，故生发层的朝向不是一个重要影响因素。另外，应用藏红Ｏ蛋白多糖染色的电镜观察，证实两组再生软骨均为透明软骨。     

异体颅骨,骨形态发生蛋白及骨膜修复颅骨巨大缺损

以体颅骨和骨形态发生蛋白为材料，应用部分带蒂骨膜瓣和头皮瓣成功修复４例巨大颅骨缺损。缺损范围最小为９ｃｍ×７ｃｍ，最大１３ｃｍ×１１．５ｃｍ。经术后１－２年随访，外观均好，且移植异体骨逐渐补吸收，新生骨已形成。     

应用骨形态发生蛋白(BMP)修复关节软骨缺损的实验研究

目的探讨关节软骨全层缺损应用骨形态发生蛋白修复的效果。方法于2004年5月至2005年12月,30只新西兰种成年兔随机分为A,B,C三组,每只兔子左膝股骨髁间凹做一大小为4mm×5mm×2.5mm的全层关节软骨缺损。A,B组缺损内分别填充骨形态发生蛋白/纤维蛋白胶(BMP/FG)及FG,C组为空白。术后28周对缺损修复情况行大体形态、组织学和电镜观察。结果BMP/FG组,缺损组织以透明软骨修复,接近正常组织,而FG组和空白组则以纤维组织修复为主。结论BMP/FG能较好的完成关节骨软骨全层缺损的修复,并随着时间的延长修复的软骨越接近正常软骨,但修复软骨缺损的组织与邻近正常软骨组织连接性仍不是十分理想。     

自体游离骨膜—骨块复合组织移植修复关节骨软骨缺损

用三种类型的自体游离骨膜－骨块复合组织移植修复家兔膝关节的骨软骨缺损。实验结果显示，一个月后三组实验动物的膝关节骨软骨缺损区均被骨块和骨膜再生的新生软骨组织完全充填；不剥离翻转骨膜的骨膜－骨块复合组织移植具有操作简便、不影响骨膜再生软骨之优点；关节滑液能为骨膜再生软骨提供充足的营养。     

微粒骨膜-三维支架修复大面积关节软骨缺损

目的 探讨微粒骨膜-三维支架修复大面积关节软骨缺损的有效性和可行性.方法 于兔股骨滑车关节面制作直径4.5 mm深达软骨下骨板的全层软骨缺损模型,缺损处随机行自体微粒骨膜-纤维蛋白混凝物、单纯纤维蛋白"浇铸"移植.分别于术后3 h、4 d及1、2、4、8、12、24周取材,行大体观察、苏木素.伊红(HE)、Masson及藏红花(safranin-0)染色组织学检查,并进行组织学评分半定量分析.结果 微粒骨膜.三维支架制备简便.微粒骨膜被均匀种植于纤维蛋白三维支架中,可随意"浇铸"充填骨软骨缺损,移植物不易脱落,手术1次完成.术后微粒骨膜在缺损空间内全方位迅速增殖、分化、分泌基质完成缺损骨软骨修复.新生软骨具有与周围正常软骨基本一致的厚度、细胞形态及排列、基质胶原及蛋白多糖染色,且与周边软骨及软骨下骨结合良好.术后4、8、12及24周,两组组织学评分差异有统计学意义(P<0.05).结论 该方法能简单高效地构建工程化组织复合体,随意浇铸充填软骨缺损,完成较大面积关节软骨缺损的生物性修复.