纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子对大鼠损伤坐骨神经血管新生的影响

目的 探讨局部应用纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子对损伤坐骨神经组织血管生成的影响.方法 将36只Wistar大鼠左侧坐骨神经切断,神经两断端原位缝合,制作大鼠坐骨神经损伤动物模型.然后将大鼠随机分成实验组(纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子给药组)与对照组(血管内皮生长因子基因转染给药组),每组18只,于用药后4、8、12周行肉眼观察、神经微血管计数检查.结果 实验组用药后4、8周的神经微血管计数显著低于对照组(P<0.05),用药后12周两组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 纤维蛋白凝胶可以作为血管内皮生长因子的载体,纤维蛋白凝胶携载血管内皮生长因子给药可以促进神经血管新生.     

脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合体在兔骨关节软骨损伤修复中的作用

目的 探讨脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合体在新西兰大白兔骨关节软骨损伤修复中的意义。方法 12只兔随机分为两组,每组6只,观察组兔膝关节内植入复合支架材料,另对照组6只体内注射等量生理盐水。结果 实验组兔软骨缺损区充填充分,修复后的软骨组织呈现半透明、乳白色,色泽圆润、表面光滑,且Wa-kitani评分显著优于对照组（P〈0．05）。结论 脱钙骨基质／纤维蛋白凝胶复合支架可用于关节软骨缺损的修复。     

关节止痛胶囊对骨髓基质干细胞凝胶复合体修复兔膝关节软骨缺损的影响

目的：探讨关节止痛胶囊对骨髓基质干细胞凝胶复合体修复兔膝关节软骨缺损的影响。方法：采用密度梯度离心＋贴壁培养法分离、纯化和扩增骨髓基质干细胞（BMSCs）,取第三代BMSCs制备纤维蛋白凝胶复合体。将40只新西兰兔随机分为四组：I组缺损不做任何处理;Ⅱ组缺损中植入未加细胞因子的凝胶复合体;Ⅲ组和Ⅳ组缺损种植人含细胞因子的凝胶复合体,Ⅱ组和Ⅳ组每天给予关节止痛胶囊灌胃。分别于术后第4、8、12周后取材,进行大体及组织学观察。结果：传代后BMSCs增殖速度快,易扩增可获取足够数量的细胞来修复软骨缺损。术后12周,大体观察,Ⅳ组缺损内修复组织大体形态与周围正常软骨无明显差异,没有裂隙,边界模糊,表面光滑,按之有韧性,几乎与周围关节面平齐,不易区分;组织学观察,Ⅳ组缺损完全由透明软骨组织填充,软骨细胞排列规则,新生软骨的厚度与正常软骨厚度基本相同。结论：骨髓基质干细胞凝胶复合体加关节止痛胶囊能修复关节软骨缺损,关节止痛胶囊在体内可以诱导骨髓基质干细胞向软骨细胞分化,促进凝胶复合体修复软骨缺损。     

人发角蛋白桥接周围神经缺损的功能评价

目的 通过在神经再生室内植入人发角蛋白,观察神经的功能恢复情况,为桥接周围神经缺损寻求新的替代材料.方法 将18只新西兰兔的左侧坐骨神经切断,造成10mm缺损,实验组用人发角蛋白桥接,对照组用空硅胶管桥接,术后检测坐骨神经功能指数、电生理、腓肠肌湿重,观察神经功能的恢复情况.结果 8周时,试验组坐骨神经功能指数值优于对照组(P＜0.01);12周时,试验组坐骨神经功能指数、潜伏期和神经传导速度及波幅明显好于对照组(P＜0.01).结论 人发角蛋白能促进兔坐骨神经功能的恢复是桥接周围神经缺损的理想材料.     

高血胆固醇兔下肢缺血动物模型的建立及形成机制探讨

目的探讨建立高血胆固醇兔下肢缺血模型的方法及其形成机制,观察缺血肢体血运重建情况。方法将34只日本大耳兔随机分成对照组11只,喂以普通饲料;实验组23只,喂以高胆固醇饲料并静脉注射牛血清蛋白;6周后结扎离断股动脉,建立下肢缺血模型,观察血脂水平、颈总动脉斑块形成情况和测定股动脉内膜／中膜厚度比值（I／M）;10周后血管造影观察血管形成情况。结果6周后实验组兔均出现高胆固醇血症,其中12只见颈总动脉粥样硬化斑块（动脉粥样硬化组）,9只未见粥样硬化斑块（高血胆固醇组）,TC、TG、LDL—C、I／M均明显高于对照组（均P〈0.05）;动脉粥样硬化组TC、TG、LDL—C、I／M亦明显高于高血胆固醇组（均P〈O．05）。血管造影示实验组兔新生血管明显少于对照组,镜下可见动脉内皮细胞损害、平滑肌细胞增生。结论高胆固醇饲料喂养结合免疫反应损伤法可成功建立高血胆固醇兔下肢缺血模型,该方法简便易行、可靠,可引起内皮结构和功能损害、内膜增厚,其病理改变与人类动脉粥样硬化的病理过程相似,这为内皮祖细胞移植治疗老年下肢缺血提供了可靠的实验依据。     

粒细胞集落刺激因子对家兔后肢缺血治疗作用观察

目的:观察粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对缺血性疾病的治疗作用.方法:25只家兔均切断左侧股动脉及其分支,制作实验兔左后肢缺血模型后,随机分2组:实验组(n=15)皮下注射重组人G-CSF(rhG-CSF)动员兔自体干细胞释放和迁移至缺血组织,对照组(n=10)给予等体积生理盐水.连续监测血常规;术后4周,2组均行腹主动脉造影观察侧支循环血管形成情况,取内收肌和腓肠肌组织行HE染色并计数微血管密度,应用免疫组织化学方法检测内收肌和腓肠肌组织中血管内皮生长因子(VEGF)阳性表达的血管数.结果:实验组家兔侧支循环血管条数、微血管密度及VEGF阳性表达的血管数均大于对照组(P均＜0.05),缺血状态得到改善.结论:应用G-CSF使骨髓干细胞动员后,可促进缺血组织血管新生,增加缺血组织血液灌注,改善肢体缺血状态.     

血管化同种异体神经复合体桥接修复兔坐骨神经缺损的实验研究

目的 探讨将经化学去细胞处理的同种异体神经复合体预血管化处理后移植修复兔长段坐骨神经缺损的可行性,以及早期血管化移植体对神经功能恢复的影响.方法 将雪旺细胞与血管内皮细胞联合培养后种植于经化学去细胞处理的同种异体神经段中,形成预血管化的神经复合体并将其用于修复兔坐骨神经缺损（实验组）,对照组移植体中单纯种植雪旺细胞无血管内皮细胞.术后4、8、16周对2组动物行肌电图检查,观察神经功能恢复情况,然后,手术取材,应用光镜、电镜观察坐骨神经再生和髓鞘形成情况,应用图像分析系统对髓鞘厚度以及有髓神经纤维轴突的直径、数目进行量化分析.结果 大体观察,术后4、8、16周2组动物全身及局部均未出现明显的排斥反应.无论是在足部溃疡恢复,还是在神经传导速度、再生神经纤维的数量、超微结构的恢复方面实验组均优于对照组.结论 应用预血管化的组织工程人工神经移植体修复兔坐骨神经缺损,能有效地促进受损神经的功能恢复.     

血管内皮生长因子基因转染对放疗后组织血管生成的影响

目的：研究血管内皮生长因子基因转染对放疗后损伤区组织血管生成的影响。方法：用重组质粒pcDNA3／VEGF165转染大鼠右后肢照射区肌肉组织细胞,每次每只大鼠转染质粒200μg,共治疗2次,间隔2周,治疗结束后行VEGF蛋白检测、血管染色体视学图像分析、血管超微结构观察以及血管造影等。结果：经重组质粒pcDNA3／VEGF165基因转染后,照射区组织VEGF蛋白明显增高,微血管密度、平均截面积、平均管径和血管造影计数均达到正常组织水平,血管超微结构基本恢复正常。结论：VEGF基因转染治疗可逆转放疗对大鼠组织血管造成的损伤,有效地恢复血管生成能力。     

基质金属蛋白酶血管内皮生长因子与兔角膜新生血管生长与退化的相关

目的:观察兔角膜新生血管的生长及退化过程中,基质金属蛋白酶、血管内皮生长因子的表达。方法:将45只健康新西兰大白兔随机取5只,为正常对照组,余40只作角膜缝线,建立角膜新生血管动物模型,随机分为阳性对照组和200μg/ml的GM6001用药组,用免疫组化及图像分析来研究两组的VEGF、MMP-9的表达和变化,并进行微血管计数。结果:在术后不同时间点,GM6001用药组MMP-9平均积分光密度(MMP-9 IOD)、VEGF IOD均较阳性对照组明显减少,差异有显著意义(P<0.001);VEGF IOD、MMP-9 IOD、微血管计数间有高度相关性(r=0.9840,r=0.7260)。结论:VEGF、MMP-9表达与角膜新生血管的形成与退化平行。GM6001可抑制和延迟实验性CRNV的形成。     

基质金属蛋白酶-9在兔角膜新生血管模型的表达

目的：研究兔正常角膜及损伤后角膜中MMP-9的表达,探讨其与角膜新生血管的关系。方法：将45只健康新西兰大白兔随机取5只,为正常对照组,余40只作角膜缝线,建立角膜新生血管动物模型,用免疫组化和图像分析研究MMP-9的平均积分光密度（MMP-9IOD）微血管计数。结果：在术后不同时间点,MMP-9IOD,微血管计数间有高度相关性（r=0．7260）。结论：MMP-9表达与角膜新生血管的形成与退化平行。     

体外诱导骨髓间充质干细胞构建纤维蛋白胶软骨模块

目的:探讨体外构建骨髓间充质干细胞、改良纤维蛋白胶及生长因子的组织工程软骨模块的可行性。方法:分离兔骨髓间充质干细胞,种植在改良纤维蛋白胶支架内。实验组培养液中加入TGF-β1和BMP-6,对照组未加入诱导因子。体外进行形态组织学观察。1、2、3和4周取材作Masson染色、Ⅱ型胶原染色和扫描电镜观察。结果:细胞在支架上贴附,增殖。实验组中Masson染色可见胞浆及细胞周围有胶原形成;Ⅱ型胶原免疫组化染色阳性。结论:TGF-β1和BMP-6可诱导骨髓间充质干细胞成软骨分化,在改良纤维蛋白胶支架内体外成功构建组织工程软骨模块。     

自体骨髓间充质干细胞移植促进交叉韧带重建后腱骨愈合的研究

目的探讨自体骨髓间充质干细胞对促进兔前交叉韧带重建后腱骨愈合的影响。方法采用骨髓穿刺法获取兔骨髓,体外分离、培养、扩增获得骨髓间充质干细胞。18只成年新西兰大白兔随机分为两组,每组9只,每只兔行双侧前交叉韧带重建手术,实验组将骨髓间充质干细胞和生物蛋白胶混合注入兔前交叉韧带重建模型的肌腱和骨道间隙内,对照组只注射生物蛋白胶,分别在2、4、8周各时间点每组处死3只兔子取材。组织学观察腱骨界面的愈合情况。结果对照组,术后8周在腱骨界面之间为瘢痕组织,腱-骨结合较紧密,有类Sharpey纤维成分。实验组,术后2周腱骨结合部位已经出现未成熟的类软骨细胞,术后8周为较成熟的软骨细胞,排列较整齐,从肌腱向骨道逐渐移行,类似于正常前交叉韧带的止点结构。结论前交叉韧带重建后,自体骨髓间充质干细胞移植于腱骨界面,形成类似正常前交叉韧带止点样结构,有利于促进腱骨愈合。     

纳米微囊缓释VEGF促血管化修复大鼠周围神经缺损的研究

目的评价应用纳米微囊缓释VEGF促血管化及其修复周围神经缺损的效果。方法化学去细胞神经内显微注入纳米微囊缓释VEGF,修复大鼠15mm坐骨神经缺损为实验组（A组）,对照组为化学去细胞神经显微注入VEGF组（B组）和化学去细胞神经移植组（c组）,比较A、B、c组血管化时间。术后12周,检测肌电图、小腿三头肌湿重、神经微血管密度及再生轴突计数,评价其修复周围神经缺损的效果。结果术后,A组神经中心血管化的时间为7d,B、C组为13d。术后12周,A组神经传导速度、动作电位波幅、小腿三头肌湿重,微血管密度和神经轴突再生密度高于B、c组。结论纳米微囊缓释VEGF促进去细胞神经血管化,有利于神经轴突再生和功能恢复。     

骨形态发生蛋白-2复合纤维蛋白缓释胶修复骨缺损的实验研究

［摘要］目的　探讨纤维蛋白胶作为骨形态发生蛋白-2（BMP-2）的缓释载体修复骨缺损,促进早期成骨的作用,为临床应用提供实验依据．方法　实验制备纤维蛋白胶/ BMP-2复合物,BMP-2在复合物中的浓度为1 μg/mL．将36只健康成年家兔随机分成3组,均造成双侧桡骨外侧中1/3段长8 mm,宽2 mm,深1 mm的骨缺损．实验组:植入纤维蛋白胶与BMP-2的复合物对骨缺损进行修复;对照组:在骨缺损区单独植入纤维蛋白胶进行修复;空白组:骨缺损区不植入任何材料,骨缺损自然愈合．于术后 2周、4周、8周分期处死动物,每个时间点每组取样本4只,采用X线检查、组织学观察、骨钙素（OC）免疫组化检测骨缺损部位成骨情况．结果　X线检查显示,实验组术后4周,骨痂形成的量较对照组和空白组明显增多．Masson染色显示,实验组术后2周有少量骨基质沉积．对照组骨小梁稀疏．空白组骨缺损区由纤维组织充填,未见新骨形成．术后4周,实验组骨缺损区有较多的新骨形成,骨小梁排列规则,连成网格状．对照组骨小梁仍较稀疏．空白组仅见少量稀疏的骨小梁,小梁间有较多纤维组织充填．骨钙素（OC）免疫组化结果显示:术后第2周,实验组、对照组和空白组OC表达分别达到高峰,其中实验组表达量大于对照组和空白组（P＜0.01）．术后第4周,实验组、对照组和空白组OC表达均明显下降（P＜0.01）,但实验组表达量大于对照组和空白组（P＜0.01）．术后8周3组的OC表达无明显差异（P＞0.05）．结论　纤维蛋白胶/BMP-2复合物具有缓慢释放BMP-2的作用,能够持续促进骨缺损区骨组织的再生和钙化,加速骨缺损的愈合,为临床提供一种有效促进骨愈合的方法．     

微骨折结合bFGF纤维蛋白胶复合物修复关节软骨缺损的实验研究

目的探讨微骨折结合碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor bFGF）与纤维蛋白胶复合物对关节软骨缺损的修复作用。方法选择健康成年新西兰大白兔24只,随机分为A实验组、B对照组、C对照组、D空白对照组,每组6只（12膝）,所有兔子均造成股骨髁间窝直径4mm全层软骨缺损。A实验组：软骨缺损区造成微骨折并注入1μg bFGF和0．1ml纤维蛋白胶的混合物;B组：软骨缺损区造成微骨折并注入0．1ml纤维蛋白胶;C组：软骨缺损区注入1μg bFGF和0．1ml纤维蛋白胶的混合物;D组：软骨缺损区注入0．1ml纤维蛋白胶;术后8、12周处死动物取标本每次每组3只（6膝）,大体观察膝关节活动度及修复组织与周边组织的结合情况,苏木素一伊红染色和甲苯胺蓝染色观察修复组织的形态。根据Wakitani评分标准测定各组不同时间点标本光镜组织学评分,进行统计学分析。结果术后8、12周大体观察与织学观察结果,实验组关节软骨缺损的再生修复均明显优于对照组,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论微骨折和碱性成纤维细胞生长因子都有促进软骨修复的作用,两者结合起来对软骨再生具有更明显的促进作用。     

周围神经吻合后NGFFG胶膜包埋的实验研究

目的观察小鼠坐骨神经离断后,神经生长因子-纤维蛋白胶(NGF FG)混合胶膜吻合口包埋对坐骨神经再生的促进作用。方法随机将昆明小白鼠40只分为吻合包埋组(实验组)和单纯吻合组(对照组),实验组外膜吻合后加用NGF FG胶膜包埋,对照组单纯外膜缝合。分别于术后4、8、12周,检测坐骨神经功能指数（SFI）、动作电位的振幅（NAP）及神经传导速度(NCV);光镜观察再生神经纤维数量、通过率和纤维组织侵入情况;电镜观察神经纤维及轴突的直径、结构和髓鞘厚度。结果术后4、8、12周不同时间点实验组的NAP及NCV均大于对照组（P＜0.05）,术后4周两组动物SFI均开始恢复,随时间的推移恢复率逐渐提高,实验组恢复情况优于对照组（P＜0.05）。光镜下单位面积吻合口内再生神经纤维数量实验组明显多于对照组,电镜下两组再生神经纤维、轴突直径及髓鞘厚度差异不明显,均低于正常神经纤维,实验组再生神经纤维的微观结构较对照组清晰,成熟度好于对照组。结论纤维蛋白胶可以作为外源性神经生长因子的有效载体,用含有神经生长因子的纤维蛋白胶包埋离断周围神经的吻合口,能促进神经纤维的再生并有效防止吻合口与周围组织的粘连,减少纤维组织的侵入、神经纤维瘤的形成。     

纤维蛋白胶封闭肺创面漏气的实验研究

目的:通过动物实验探讨纤维蛋白胶(FG)封堵肺创面漏气的效果.方法:选取新西兰兔27只,随机分为3组,即FG组、医用化学胶组和空白对照组,每组9只.建立兔肺漏气模型,空白对照组不做处理关胸观察,另两组分别以FG以及化学胶涂布创面,进行加压试验,观察封堵效果.术后第3,7,14天开胸观察并取组织行HE染色.结果:空白对照...     

THE EFFECT OF BASIC FIBROBLAST GROWTH FACTOR SLOW-RELEASE MICROCAPSULES ON ANGIOGENESIS IN INFARCTED RABBIT MYOCARDIUM

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮ　　Ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ (ｂＦＧＦ)ｉｓａｎｉｎｔｅｎｓｅｌｙｍｉｔｏｇｅｎｉｃａｓｗｅｌｌａｓａｎｇｉｏｇｅｎｉｃｓｉｎｇｌｅｃｈａｉｎ 1 7 2ｋＤｐｅｐ ｔｉｄｅ ,ｗｈｉｃｈｉｓｗｉｄｅｌｙｄｉｓｔｒｉｂｕｔｅｄｉｎｂｌｏｏｄｖｅｓｓｅｌｓ ,ｃａｒｄｉａｃｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｏｔｈｅｒｏｒｇａｎｓ .ＩｎｖｉｖｏａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆｂＦＧＦｌｅａｄｓｔｏｍｙｏｃａｒｄｉｕｍａｎｇｉｏｇｅｎｅｓｉｓｔｈａｔｈａｓｂｅｅｎｄｅｍｏｎ…     

VEGF与TNFR联合治疗股骨头坏死实验研究

目的 探讨应用血管内皮细胞生长因子(VEGF)与肿瘤坏死因子受体(TNFR)联合治疗股骨头坏死的治疗效果.方法 新西兰兔30只,26只兔耳缘静脉注射马血清,臀肌注射醋酸泼尼松龙,制造激素性股骨头坏死动物模型.动物随机分为4组:A组:VEGF/TNFR 治疗组;B组:VEGF治疗组;C组:对照组;D组:正常对照组.治疗组骨穿刺针行经皮注射血管内皮细胞生长因子脂质体及TNFR至股骨头.于治疗后,应用ELISA法测血清中TNF-α浓度的变化,病理组织学观察股骨头骨组织、骨髓造血组织及血管的变化.结果 VEGF/TNFR治疗组,TNF-α浓度及活性明显降低,HE染色结果 :VEGF/TNFR治疗组可见软骨细胞修复性增生,骨髓腔造血组织出现增生,栓塞的血管旁边出现新生的血管.结论 VEGF/TNFR联合治疗股骨头坏死能促进新血管生成及骨修复.