人乳腺癌组织中CD1C+树突状细胞免疫组化研究

目的观察树突状细胞在人乳腺癌组织中的形态学变化。方法利用CD1C+作为树突状细胞(dendriticcell,DC)的特征性标志分子,用免疫组织化学方法观察20例人乳腺癌组织及癌旁相对正常组织中树突状细胞的分布和形态学变化,同时检测p53蛋白的表达。结果乳癌组织中树突状细胞CD1C+阳性面数密度(4.55±1.32)和平均光密度值(0.13±0.03)明显低正常乳腺组织面数密度(11.16±5.32)和平均光密度值(0.27±0.07,P<0.05);乳癌组织DC数量较正常乳腺组织明显减少(P<0.05)。20例乳腺癌中,p53蛋白阳性表达率为60%;正常组织为阴性。结论树突状细胞及其表达的p53蛋白可能参与肿瘤免疫调节作用。     

结肠癌患者肿瘤浸润性树突状细胞在组织中表达及临床意义

目的:探讨结肠癌患者肿瘤浸润性树突状细胞(TIDC)在组织中的表达及临床意义。方法:自2016 年1 月至2017 年1 月,前瞻性收集我院收治的结肠癌患者117 例,取患者术中肿瘤组织标本,分析结肠癌中肿瘤浸润性树突状细胞与患者临床特征的相关性。结果:与肿瘤细胞为高分化的患者相比,中低分化的患者TIDC 数密度显著降低[(11.24±1.99)% vs(8.65±1.70)%,P =0.00]。与临床TNM 分期为Ⅱ期的患者相比,芋期的患者TIDC 数密度显著降低[(10.94±1.97)% vs(7.91±1.17)%,P =0.000];MHC-Ⅱ阳性树突状细胞(DC)显著降低[(7.04±1.96)% vs (5.78±1.96)%,P =0.001];CD54 阳性DC 显著降低[(8.49±2.62)% vs (5.75±1.99)%,P =0.00]。与术后6 月内未复发的患者相比,复发的患者TIDC 数密度显著降低[(10.29±1.76)% vs (6.82±1.88)%,P =0.000];MHC-Ⅱ阳性DC 显著降低[(9.00±1.78)% vs (5.33±1.94)%,P=0.001];CD54 阳性DC 显著降低[(10.44±1.87)% vs (5.19±1.98)%,P =0.00]。结论:肿瘤浸润性树突状细胞在结肠癌组织中低表达,不成熟的调节性树突状细胞比例增加。     

VEGF和D2-40在食管鳞癌中的表达及其临床意义

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)和D2-40在人食管鳞癌组织内的表达,探讨VEGF的表达与食管鳞癌组织淋巴管密度(LVD)及淋巴结转移之间的关系。方法将67例食管鳞状细胞癌分为有淋巴结转移和无淋巴结转移两组,免疫组化法检测食管鳞癌组织中VEGF和D2-40的表达,并与正常组进行对照。结果 VEGF蛋白主要表达于癌细胞胞浆内,D2-40表达于癌组织内淋巴管内皮细胞,在食管鳞癌的癌组织中VEGF的阳性表达率和D2-40阳性淋巴管密度均高于正常食管组织(P0.05),且有淋巴结转移组的阳性表达率高于无淋巴结转移组(P0.05)。结论 VEGF的高表达可能与食管鳞癌的淋巴管生成和淋巴道转移密切相关。     

CD1C和S-100蛋白在乳腺癌组织树突状细胞的表达

目的观察CD1C和S-100蛋白在人乳腺癌组织中树突状细胞(DC)的表达。方法利用CD1C和S-100蛋白作为DC不同的特征性标志分子,用免疫组织化学方法观察20例乳腺癌组织及癌旁相对正常乳腺组织中CD1C+和S-100+DC的分布和形态学变化。结果乳腺癌组织S-100和CD1C表达阳性树突状细胞的平均光密度值(MOD)均明显弱于正常乳腺组织(P<0.05),面数密度也少于正常乳腺组织(P<0.05),且CD1C+DC数量的减少较S-100+DC数量的减少明显。结论DC可能与乳腺癌的发生、发展及愈后有一定关系,CD1C+DC的影响可能较S-100+DC大。     

人胃癌肿瘤浸润树突状细胞的形态学观察

目的　探讨人胃癌肿瘤浸润树突状细胞 (TIDC)的形态学特征。方法　应用免疫组织化学、光镜和电镜的方法观察人胃癌TIDC的分布和形态学变化。结果　TIDC主要分布癌周区 ,病变早期TIDC比病变晚期数量 (P <0 0 1)。电镜下 ,TIDC体积较大 ,形态不规则 ,表面有许多树突状突起 ,细胞核不规则 ,可见核仁 ,胞质内有丰富的线粒体、核糖体、高尔基复合体和内质网。TIDC与肿瘤浸润淋巴细胞 (TIL)和肿瘤接触方式和形式上呈多样性 ,一对一 ,一对多 ,或形成簇的接触方式 ,有紧密膜接触、指状膜接触和球状膜接触形式。结论　本实验提示TIDC数量多少与肿瘤的进展有关 ,TIDC与肿瘤浸润淋巴细胞和肿瘤细胞之间关系密切。     

人直肠癌肿瘤浸润树突状细胞的形态学观察

目的　探讨人直肠癌肿瘤浸润树突状细胞 ((TIDC)的形态学特征。　方法　通过免疫组织化学、光镜和电镜的方法观察人直肠癌TIDC的分布和形态学变化。　结果　TIDC主要分布在癌周区 ,病变早期TIDC比病变晚期数量多 (P <0 0 1)。电镜下 ,TIDC形态不规则 ,细胞表面有许多树枝状突起。TIDC与肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)和肿瘤细胞之间接触密切。有一对一、一对多或TIL环绕TIDC形成簇。TIDC与TIL接触之间有糖原颗粒簇。　结论　TIDC数量多少与肿瘤的进展相关 ,TIDC与TIL及肿瘤细胞之间关系密切。     

食管鳞状细胞癌组织中Periostin、VEGF的表达及意义

目的：探讨Periostin、VEGF蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测130例食管鳞状细胞癌组织及癌旁正常食管黏膜组织中Periostin、VEGF蛋白的表达。结果食管鳞状细胞癌组织中Periostin和VEGF的阳性率明显高于正常食管黏膜组织(P<0．05)。 Periostin表达与食管鳞状细胞癌浸润深度、淋巴结转移有显著相关性(P<0．05)。 VEGF表达与食管鳞状细胞癌分化程度、浸润深度和淋巴结转移有显著相关性(P<0．05)。 Periostin与VEGF表达呈正相关(P<0．05),66例食管鳞状细胞癌患者获得临床随访资料,随访时间1~48个月,Kaplan-Meier生存曲线分析显示,Peri-ostin阳性组患者的生存率明显低于 Periostin阴性组( P<0．05), VEGF阳性组患者的生存率明显低于 VEGF 阴性组( P <0．05)。结论 Periostin与VEGF表达密切相关,联合检测Periostin、VEGF可作为判定食管鳞状细胞癌侵袭、转移能力的客观指标,对食管鳞状细胞癌的预后判断具有重要意义。     

结肠癌组织VEGF表达与树突状细胞浸润的临床意义及与血清VEGF浓度及其活化水平的相关性

目的:研究结肠癌组织VEGF表达与树突状细胞(DCs)浸润的临床意义,并且探讨其与外周血清VEGF水平及DCs活化水平的相关性。方法:采用免疫组化法测定结肠癌和癌旁组织内VEGF和S-100蛋白的表达。采用酶联免疫吸附实验测定结肠癌患者术前及健康受试者外周血VEGF水平,分离结肠癌患者术前和健康受试者外周血单核细胞,利用TNF-α体外诱导为DCs,流式细胞仪检测DCs表面CD83的表达,分析结肠癌组织VEGF表达与DCs浸润的临床意义以及与外周血清VEGF水平及DCs活化水平的相关性。结果:1结肠癌组织VEGF阳性表达率较结肠癌旁组织显著提高(P0.01),S-100蛋白阳性表达率较结肠癌旁组织显著降低(P0.01);2结肠癌患者外周血VEGF水平较健康受试者显著升高(P0.01),而外周血DCs中CD83水平较健康受试者显著降低(P0.01);3结肠癌组织VEGF和S-100蛋白的表达水平与肿瘤的分化、分期和淋巴结转移程度相关(P0.01);4结肠癌组织VEGF表达与S-100表达呈负相关(P0.01);5结肠癌组织VEGF表达与外周血VEGF正相关(P0.01),与DCs活化水平负相关;6结肠癌组织DCs浸润程度与外周血VEGF负相关(P0.01),与DCs活化水平正相关(P0.01)。结论:结肠癌组织VEGF表达和DCs浸润共同参与结肠癌的进展,并且VEGF可抑制DCs浸润和活化。     

树突状细胞应用于肿瘤免疫治疗的新进展

树突状细胞(dendritic cells, DC)是目前所知的机体内功能最强大的抗原提呈细胞, 它通过吞噬、表达、移动等一系列过程, 启动体内免疫系统.而与之相关的肿瘤免疫逃逸或肿瘤转移已成为DC研究的热点.现对DC与肿瘤免疫治疗方面的新进展做一简要综述.     

胃癌组织及转移淋巴结中DC和NK细胞与VEGF表达及其意义

血管内皮生长因子 (VEGF)和NK细胞在胃癌中的作用已有许多报道〔1 5〕,但树突状细胞 (DC)和自然杀伤 (NK)细胞与VEGF表达及DC与NK细胞在胃癌浸润、转移中的作用还未明确 ,因此 ,我们采用免疫组化方法对其进行了观测 ,结果报告如下。材料和方法临床资料 :选择 5 8例 (男 4 3例 ,女 15例 ,平均年龄 5 5 .8± 2 5 .2岁 )胃癌手术患者作为研究对象 ,其中5 0 %为低分化胃癌 ,4 0 %为中度分化胃癌 ,10 %为高分化胃癌。肿瘤大小平均为 6 .2± 5 .3cm。病理组织学类型为管状癌 2 8例 ,粘液癌 17例 ,未分化癌 9例 ,乳头状癌 4例。试剂 :标记D…     

Hepatocyte progenitors in man and in rodents--multiple pathways, multiple candidates

In severe injury, liver-cell progenitors may play a role in recovery, proliferating, and subsequently differentiating into mature liver cells. Identifying these progenitors has major therapeutic potential for ex vivo pharmaceutical testing, bioartificial liver support, tissue engineering and gene therapy protocols. Potential liver-cell progenitors have been identified from bone marrow, peripheral blood, cord blood, foetal liver, adult liver and embryonic stem cells. Differences and similarities are found among cells isolated from rodents and humans. This review will discuss identifying markers and differentiation potential in in vitro and in vivo models of these putative progenitors in both humans and rodents.     

On the possible origin of extra-epithelial enterochromaffin cells by budding from the crypts of Lieberkuhn

This study was undertaken to test Pierre Masson's still unconfirmed theory that extra-epithelial enterochromaffin cells in the gut arise in adult life by budding from the crypts of Lieberkuhn under conditions of low grade inflammation. Appendices (900) were reviewed and 19 were selected for serial section study because in random sections they showed lateral fusion of the crypts, one of the key features described by Masson. Ten specimens without crypt fusion served as controls. Sixteen of the 19 study specimens and one of the control specimens showed budding, averaging one bud in every 88 sections. Most buds were in direct contact with Schwann cells in the adjacent lamina propria and 45 per cent of them contained enterochromaffin cells. There was also histologic evidence linking buds and lateral crypt fusion to low grade inflammation. Masson's ideas are, therefore, confirmed insofar as the existence of buds and their relationship to enterochromaffin cells, Schwann cells, and inflammation is concerned. The actual separation of buds from the crypts to form extra-epithelial enterochromaffin cells has yet to be proved.     

大鼠肝卵圆细胞的诱导、分离及鉴定

目的建立大鼠肝卵圆细胞的增殖模型,并探索其分离及鉴定方法。方法雄性Wistar大鼠每天1次连续灌胃给予不同剂量二乙酰氨基芴(2-AAF熏5、10、15、20、25mg/kgBW),第5天行标准的2/3肝切除术,术后按各自剂量继续给予11天,不同时间取肝脏组织,行甲胎蛋白、细胞角蛋白18及19染色并观察。以确定的2-AAF最佳剂量制备大鼠肝干细胞增殖模型,Seglen胶原酶原位灌注结合Percoll密度梯度离心分离纯化大鼠肝卵圆细胞,光镜、电镜下观察细胞特点,并进行上述细胞表型标志免疫组化染色。结果2-AAF15mg/kgBW能建立较理想的肝卵圆细胞增殖模型。HE染色可见汇管区及中央静脉周围大量增殖的嗜碱性小细胞,电镜下观察此种细胞具有卵圆形细胞核、细胞质少而淡、核/浆比例较大等特点,免疫组化染色证实甲胎蛋白、细胞角蛋白18和19染色阳性,白蛋白及白细胞共同抗原(LCA)染色阴性。分离所得底层细胞,光镜下表现大小不等、不规则圆形细胞,体积较小,细胞核/浆比例较大,电镜下细胞表面可见少量短而小的微绒毛状突起,余同增殖细胞特点,免疫组化染色与增殖细胞表现相同细胞表型特点。结论本方法可成功诱导、分离、纯化大鼠肝卵圆细胞,符合肝卵圆细胞的形态特点、超微结构及细胞表型标志特点。     

人外周血树突状细胞-乳腺癌细胞融合细胞

目的：探讨树突状细胞—肿瘤细胞融合细胞的形态特性，为研制融合细胞疫苗提供形态学依据。方法：将免疫磁珠法分离的人外周血树突状细胞与人乳腺癌细胞株MCF7融合，瑞氏—姬姆萨染色观察；扫描电镜观察树突状细胞、融合细胞的表面超微结构。结果：树突状细胞与MCF细胞按10：1比例融合后，一个乳腺癌细胞可以与一个或多个树突状细胞相融合；扫描电镜下可见分离的树突状细胞表面有突起，树突状细胞/MCF7融合细胞具两种亲代细胞的表面超微结构特点。结论：树突状细胞与人乳腺癌细胞融合后无明显的形态改变。     

人羊膜上皮细胞上清液对人肝癌BEL-7402细胞的体外抗肿瘤作用

目的探讨人羊膜上皮细胞(h AECs)上清液对体外培养的肝癌细胞系BEL-7402细胞迁移、增殖与凋亡的影响。方法 BEL-7402细胞随机分为5组,其中对照组不加h AECs上清液,其余4组加入体积分数分别为6.25%、12.5%、25%和50%的h AECs上清液作用24 h后,通过划痕实验、MTT试验和流式细胞术检测BEL-7402细胞迁移、增殖和凋亡;Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达量。结果 h AECs上清液能剂量依赖性地抑制BEL-7402细胞迁移、增殖并诱导凋亡(P0.05);25%和50%h AECs上清液组BEL-7402细胞caspase-3和caspase-8蛋白的切割片断蛋白定量明显高于对照组(P0.05)。结论 h AECs上清液对体外培养的BEL-7402细胞具有一定的抗肿瘤作用。     

两种不同纯度的嗅鞘细胞在体外存活与生长的比较

比较80%和50%两种纯度的嗅鞘细胞在体外培养条件下的存活与生长,为嗅鞘细胞体内移植选用最佳纯度提供依据。分离、培养并纯化成年SD大鼠嗅鞘细胞,将纯化的嗅鞘细胞和收集到的贴壁成纤维细胞进行约80%和50%的比例混合后接种,继续培养1d或3d。所有细胞于不同时间点行P75免疫细胞化学荧光染色,以鉴定嗅鞘细胞的初始及其后培养过程中数量和纯度的变化。观察细胞状态,计数细胞总数和P75免疫阳性细胞数目,求得各组嗅鞘细胞数量和纯度并行统计学分析。结果显示:两种不同纯度嗅鞘细胞在培养1d时形态正常,3d时纯度为50%的嗅鞘细胞胞体依然饱满,突起更加纤长,数量和纯度亦无明显下降。而纯度为80%的嗅鞘细胞在培养3d时已出现胞体萎缩和突起变短,数量从1d时每一观察区域内的35±13显著下降为23±5(P=0.02),但纯度未发生明显变化。结果表明50%纯度嗅鞘细胞的存活及生长状态优于80%者,提示细胞体内移植时应考虑选取50%纯度的嗅鞘细胞。     

The molecular makeup and function of regulatory and effector synapses

Summary:  Physical interactions between T cells and antigen-presenting cells (APCs) form the basis of any specific immune response. Upon cognate contacts, a multimolecular assembly of receptors and adhesion molecules on both cells is created, termed the immunological synapse (IS). Very diverse structures of ISs have been described, yet the functional importance for T-cell differentiation is largely unclear. Here we discuss the principal structure and function of ISs. We then focus on two characteristic T-cell–APC pairs, namely T cells contacting dendritic cells (DCs) or naive B cells, for which extremely different patterns of the IS have been observed as well as fundamentally different effects on the function of the activated T cells. We provide a model on how differences in signaling and the involvement of adhesion molecules might lead to diverse interaction kinetics and, eventually, diverse T-cell differentiation. We hypothesize that the preferred activation of the adhesion molecule leukocyte function-associated antigen-1 (LFA-1) and of the negative regulator for T-cell activation, cytotoxic T-lymphocyte antigen-4 (CTLA-4), through contact with naive B cells, lead to prolonged cell–cell contacts and the generation of T cells with regulatory capacity. In contrast, DCs might have evolved mechanisms to avoid LFA-1 overactivation and CTLA-4 triggering, thereby promoting more dynamic contacts that lead to the preferential generation of effector cells.     

Harnessing innate and adaptive immunity for adoptive cell therapy of renal cell carcinoma

The development of immunotherapies for renal cell carcinoma (RCC) has been the subject of research for several decades. In addition to cytokine therapy, the benefit of various adoptive cell therapies has again come into focus in the past several years. Nevertheless, success in fighting this immunogenic tumor is still disappointing. RCC can attract a multitude of different effector cells of both the innate and adaptive immune system, including natural killer (NK) cells, γδ T cells, NK-like T cells, peptide-specific T cells, dendritic cells (DC), and regulatory T cells (Tregs). Based on intensive research on the biology and function of different immune cells, we now understand that individual cell types do not act in isolation but function within a complex network of intercellular interactions. These interactions play a pivotal role in the efficient activation and function of effector cells, which is a prerequisite for successful tumor elimination. This review provides a current overview of the diversity of effector cells having the capacity to recognize RCC. Aspects of the functions and anti-tumor properties that make them attractive candidates for adoptive cell therapies, as well as experience in clinical application are discussed. Improved knowledge of the biology of this immune network may help us to effectively harness various effector cells, placing us in a better position to develop new therapeutic strategies to successfully fight RCC.     

皮肤树突状细胞亚群研究进展

皮肤树突状细胞(DC)作为重要的抗原提呈细胞,在机体免疫应答或自身耐受的发生中扮演着非常重要的角色.皮肤免疫系统中定居着多种DC亚群,主要包括表皮层中的郎格汉斯细胞(LC)与真皮层中的各种真皮DC亚群.健康皮肤中的DC亚群主要有表皮LC、真皮DC(dDC)和浆细胞DC(pDC),dDC又分为Langerin+ dDC及Langerin-dDC等.但在炎症性皮肤,如过敏性皮炎、银屑病等病变皮肤中则存在着炎症性DC亚群.DC由于其复杂的异质性群体,导致了其各亚群的特殊化功能.皮肤DC亚群的特殊化功能,为皮肤性疾病的临床治疗及新型疫苗的研发设计等都提供了良好的新策略.