阿托伐他汀对氧化低密度脂蛋白诱导人内皮细胞环氧化酶-2表达的影响

目的探讨阿托伐他汀对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）干预后人内皮细胞环氧化酶-2（COX-2）表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,待细胞生长到融合状态时加入ox-LDL,对照组不加任何干预,作用24 h后,分别加入不同浓度的阿托伐他汀（1、10及30μmol/L）继续培养24 h。采用逆转录聚合酶链式反应技术分别测定各组COX-2 mRNA的表达。结果Ox-LDL可诱导COX-2 mRNA的表达;不同浓度的阿托伐他汀可抑制ox-LDL诱导的COX-2 mRNA的表达,并呈浓度依赖性（P〈0.05）。结论内皮细胞源性COX-2在动脉粥样硬化斑块形成中可能起着重要的促炎作用;阿托伐他汀可抑制人脐静脉内皮细胞COX-2 mRNA的表达。     

阿托伐他汀对内皮细胞增殖和内皮脂酶mRNA表达的影响

目的探讨阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞增殖和内皮脂酶mRNA表达的影响。方法不同浓度阿托伐他汀(2、4、6、8及10μmol/L)与人脐静脉内皮细胞分别孵育2、4、8、12及24 h后,用半定量逆转录聚合酶链反应法检测人脐静脉内皮细胞内皮脂酶mRNA的表达,用嗜银蛋白分析法观察人脐静脉内皮细胞的增殖情况。结果阿托伐他汀抑制人脐静脉内皮细胞内皮脂酶mRNA表达,该作用呈剂量依赖性和时间依赖性。阿托伐他汀作用下,人脐静脉内皮细胞内嗜银蛋白颗粒随浓度的增加和作用时间的延长减少趋势越明显。两因素直线相关分析显示,内皮脂酶mRNA表达与嗜银蛋白颗粒数呈正相关关系(r=0.963,P<0.01)。结论阿托伐他汀抑制人脐静脉内皮细胞的增殖,抑制人脐静脉内皮细胞内皮脂酶mRNA的表达,且呈时间—剂量依赖性。人脐静脉内皮细胞的增殖与人脐静脉内皮细胞内皮脂酶mRNA的表达呈正相关。     

阿托伐他汀通过调节Bcl-2/Bax蛋白表达抑制高糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡

目的研究阿托伐他汀对高浓度葡萄糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响以及其分子机制。方法将培养的人脐静脉内皮细胞与不同浓度的葡萄糖(5.6 mmol/L、17.6 mmol/L、33.3 mmol/L)及阿托伐他汀(0.1μmol/L、1μmol/L、10μmol/L)作用24 h后用吖啶橙/溴化已啶荧光染色观察凋亡细胞形态,四甲基偶氮唑蓝比色法测定人脐静脉内皮细胞增殖率,流式细胞仪和W estern Blotting分别检测细胞早期凋亡率及Bcl-2/Bax蛋白表达。结果随着葡萄糖浓度的增加,人脐静脉内皮细胞增殖率逐渐降低(P0.05),细胞早期凋亡率逐渐升高(P0.05)。人脐静脉内皮细胞Bcl-2蛋白表达逐渐减弱,Bax蛋白表达逐渐增强。用不同浓度的阿托伐他汀干预后,人脐静脉内皮细胞的增殖率逐渐升高(P0.05),而凋亡率逐渐降低(P0.05);人脐静脉内皮细胞Bcl-2蛋白表达逐渐增强,Bax蛋白表达逐渐减弱。其中,与高糖组比较,10μmol/L阿托伐他汀干预组能提高Bcl-2蛋白表达(P0.05),抑制Bax蛋白表达(P0.05)。结论阿托伐他汀可能通过调节Bcl-2/Bax蛋白表达抑制高浓度葡萄糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡。     

阿托伐他汀通过ERK1/2通路抑制内皮微粒诱导的人脐静脉内皮细胞ICAM-1的表达

目的探讨阿托伐他汀对内皮细胞微粒(EMPs)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响及其与ERKl/2信号通路的关系。方法将HUVECs分为不同浓度EMPs作用组与阿托伐他汀干预组。应用Western印迹检测磷酸化ERK1/2和ICAM-1蛋白的表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ICAM-1 mRNA的表达。结果 EMPs可诱导HUVECs ICAM-1 mRNA和蛋白及磷酸化ERK1/2蛋白表达增加,且具有浓度和时间依赖关系(均P<0.01);阿托伐他汀及ERK1/2特异性抑制剂PD98059显著抑制EMPs诱导的HUVECs ICAM-1 mRNA和蛋白及磷酸化ERK1/2蛋白的表达(均P<0.01)。结论阿托伐他汀通过ERK1/2信号通路抑制EMPs诱导HUVECs ICAM-1表达。     

阿托伐他汀对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞肝X受体α及其靶基因表达的影响

目的研究阿托伐他汀对炎症刺激物脂多糖干预后人脐静脉内皮细胞中肝X受体α及其靶基因腺苷三磷酸结合盒转运体A1、固醇调节元件结合蛋白1表达的影响。方法体外培养人脐静脉内皮细胞,进行以下干预实验:对照组加入2μL磷酸盐缓冲液;脂多糖干预组用终浓度为100μg/L脂多糖溶液干预细胞24 h;(2)对照干预组和阿托伐他汀干预组先用二甲基亚砜或不同浓度(0.1、1.0及10.0μmol/L)的阿托伐他汀预干预2 h,然后加入100μg/L脂多糖溶液共同干预22 h。用实时定量聚合酶链反应测定肝X受体α及其靶基因腺苷三磷酸结合盒转运子A1、固醇调节元件结合蛋白1的mRNA表达量。结果与对照组相比,脂多糖干预组肝X受体α及其靶基因mRNA表达明显受到抑制(P<0.05);与对照干预组相比,阿托伐他汀干预组随给药浓度增加肝X受体α及其靶基因mRNA表达逐步升高(P<0.05)。结论脂多糖可明显抑制人脐静脉内皮细胞中肝X受体α及其靶基因表达;阿托伐他汀在一定范围内可呈剂量依赖性上调肝X受体α及其靶基因表达,提示其抗动脉粥样硬化作用可能部分通过肝X受体信号通路发挥作用。     

氧化低密度脂蛋白对人单核细胞组织因子和基质金属蛋白酶-9活性的影响以及阿托伐他汀的干预作用

目的:探讨他汀类降脂药阿托伐他汀潜在的降脂外机制。方法:人单核细胞来源的巨噬细胞,加入50mg/L氧化低密度脂蛋白(oxLDL)共培养10d,加或不加入不同浓度的阿托伐他汀(浓度范围0.01~0.5μmol/L);酶谱学分析基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的活性;一期凝固法测定组织因子(TF)的促凝活性。结果:阿托伐他汀可抑制单核-巨噬细胞的增殖,呈现一定的剂量依赖关系(P<0.05),加入100μmol/L羟甲戊酸后,这种抑制作用消失;0.1μmol/L的阿托伐他汀可显著抑制单核-巨噬细胞表达MMP-9的活性;阿托伐他汀可呈剂量依赖性抑制TF的促凝活性(P<0.05)。结论:阿托伐他汀不仅可抑制单核-巨噬细胞的增殖,而且可抑制单核巨噬细胞活化下表达的MMP-9的活性以及TF的促凝活性。     

阿托伐他汀对THP-1源性巨噬细胞CD40及MMP-9的抑制作用

目的观察他汀类药物对人单核/巨噬细胞(THP-1细胞)基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达是否存在抑制作用及其作用是否与CD40-CD40L信号通路有关,探讨他汀类药物可能的非调脂抗动脉粥样硬化机制。方法先加入不同浓度的阿托伐他汀(1.25μmol/L、2.50μmol/L、5.00μmol/L)作用1h,再向培养的THP-1细胞中加入氧化型低密度脂蛋白(80mg/L)共同孵育24h,分别运用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测CD40及MMP-9mRNA,酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定培养基的MMP-9浓度。结果阿托伐他汀抑制THP-1细胞CD40和MMP-9mRNA的表达,同时抑制MMP-9蛋白的表达(P<0.05),并呈浓度依赖性。结论阿托伐他汀能抑制THP-1细胞CD40的表达以及MMP-9的表达和分泌,这种作用可能是他汀类药物减轻动脉粥样斑块炎症,防止斑块破裂的机制之一。     

阿托伐他汀抑制同型半胱氨酸诱导的内皮细胞凋亡涉及NADPH氧化酶及p38MAPK途径

目的观察阿托伐他汀对同型半胱氨酸（Hcy）诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及活性氧的影响,并探讨其作用机制。方法Hcy单独或联合阿托伐他汀、N-乙酰半胱氨酸（NAC）、还原型辅酶Ⅱ（NADPH）氧化酶抑制剂（DPI）或p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶（p38MAPK）阻断剂（SB203580）处理人脐静脉内皮细胞后,检测细胞凋亡率,活性氧水平,NADPH氧化酶活性,caspase-3 mRNA的表达和p-p38MAPK的表达。结果阿托伐他汀明显抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡及活性氧的产生,并能拮抗Hcy诱导的NADPH氧化酶的激活,p38MAPK蛋白的磷酸化及caspase-3 mRNA表达的增加。NAC、DPI、SB203580可产生相同的作用。结论阿托伐他汀可能通过抑制NADPH氧化酶的激活,p38MAPK磷酸化途径抑制Hcy诱导的人脐静脉内皮细胞活性氧的产生和细胞凋亡。     

氟伐他汀对抗磷脂综合征患者血清诱导的人血管内皮细胞MMP-9的影响

目的探讨氟伐他汀对抗磷脂综合征（APS）患者血清诱导的人血管内皮细胞基质金属蛋白酶-9（MMP-9）表达的影响及可能机制。方法体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVEC）,分别用培养基、健康人血清、APS患者血清、APS患者血清加不同浓度氟伐他汀及APS患者血清加不同浓度氟伐他汀加甲羟戊酸处理。双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）检测培养液中MMP-9浓度,RT-PCR检测MMP-9mRNA表达水平,Western-blot印迹法检测核因子-κBp65（NF-κBp65）蛋白表达水平。结果与对照组相比,APS患者血清可诱导MMP-9及NF-κBp65表达增加（P〈0.05）,而氟伐他汀对上述效应有剂量依赖性抑制作用（P〈0.05）,这种作用可以被甲羟戊酸阻断。结论氟伐他汀可能通过抑制NF-κB途径来抑制APS患者血清诱导的人血管内皮细胞MMP-9表达增加。     

阿托伐他汀通过过氧化体增殖物激活型受体γ促进一氧化氮生成抑制炎性因子产生

目的 观察阿托伐他汀是否能通过激活人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ从而改善血管内皮功能.方法 将体外培养的人脐静脉内皮细胞的实验分为两部分,实验一分组:①对照组;②脂多糖组(1.0 mg/L);③阿托伐他汀1.0 mmol/L组;④脂多糖+阿托伐他汀1.0 mmol/L组;⑤脂多糖+阿托伐他汀5.0mmol/L组,经孵育24 h后,收集细胞和培养上清液,用RT-PCB方法测定不同浓度阿托伐他汀对人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ表达的影响,并用硝酸还原酶法测定不同浓度阿托伐他汀干预对脂多糖诱导后细胞培养上清液中的一氧化氮生成的影响,ELISA方法测定细胞培养上清液中人可溶性细胞间黏附分子含量的影响.实验二分组:①对照组;②阿托伐他汀5.0 mmol/L组;③0.2 mmol/L GW9662组;④脂多糖+阿托伐他汀5.0mmol/L组;⑤GW9662+脂多糖+阿托伐他汀5.0 mmol/L组,观察过氧化体增殖物激活型受体γ特异性阻断剂GW9662对阿托伐他汀与脂多糖共同作用后人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ表达及培养上清液中一氧化氮、人可溶性细胞问黏附分子1含量变化的影响.结果 不同浓度阿托伐他汀可上调人脐静脉内皮细胞的过氧化体增殖物激活型受体γ表达,且随着药物浓度的增加其上调受体表达的作用增强.不同浓度阿托伐他汀可干预脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞液中一氧化氮生成减少及人可溶性细胞间黏附分子1含量的增加,且随着药物浓度的增加上述作用增强.过氧化体增殖物激活型受体γ特异性阻断剂GW9662可部分阻断阿托伐他汀上述作用.结论 阿托伐他汀可能部分通过激活人脐静脉内皮细胞的过氧体增殖物激活型受体γ受体,促进一氧化氮生成,抑制炎性因子的产生,改善血管内皮功能.     

Cyclin-dependant kinase inhibitors CIP1 (p21) and KIP1 (p27) in ovarian cancer

Purpose: Deregulation of the cell cycle is one of the important prerequisites for cancer development. p21 and p27 are both universal inhibitors of cyclin-dependant kinases and can therefore influence cell cycle or tumor progression. The aim of this study was to determine the influence of p21 and p27 expression on survival and chemotherapy response. Methods: 165 patients with ovarian cancer have been examined for p21 and p27 expression by immunohistochemistry on formalin-fixed, paraffin-embedded tissue using the monoclonal primary antibody WAF1 (Oncogene Science) and KIP1 (Transduction Laboratories). Results: High p21 expression (>50%) correlates only with early tumor stage (P=0.04). There was no correlation found between p21 and p27 expression. Patients with high p27 expression (>25%) had a longer DFS (disease free survival) in both univariate and multivariate analysis (P=0.05 and P=0.043) than patients with low p27 expression. A longer overall survival (OS) could only be proven for the group of high p27 expression in univariate analysis (P=0.03). Conclusion: p27 is an independent prognostic factor for ovarian cancer for DFS though this was not true for OS.     

葡萄糖转运蛋白基因多态性与糖尿病和糖尿病肾病的关系

目的：探讨葡萄糖转运蛋白（ＧＬＵＴ１）基因多态性与糖尿病及糖尿病肾病（ＤＮ）的关系。 方法：应用ＰＣＲ方法对１３１例Ⅱ型糖尿病（ＮＩＤＤＭ）患者ＧＬＵＴ１基因多态性与ＮＩＤＤＭ及ＤＮ发生之间的关系进行了观察，并结合患者体重指数（ＢＭＩ）和胰岛素敏感指数（ＩＳＩ）进行分析。 结果：①ＮＩＤＤＭ组患者Ｘｂａ Ｉ（＋／－）基因型的发生频率明显高于正常人群（６２％ｖｓ３３％，Ｐ〈０．０１），而Ｘｂａ Ｉ（     

103例甲型H1N1流感临床分析

目的:探讨2009年甲型H1N1流感的临床特点及预后。方法:回顾性分析2009年8月至2010年1月北京安贞医院98例甲型H1N1流感患者及5例外院会诊重症患者的临床资料。结果:本组病例中平均年龄(31.06±13.43)岁。主要临床表现为发热(100%)、咳嗽(88.3%)及畏寒(81.6%)等。重症及危重症患者中病死率为22.2%,并发症居前3位的是细菌感染、急性呼吸窘迫综合征(ARDS)、多脏器功能衰竭(MODS),其发生率分别为85.7%、57.1%及28.6%。慢性基础性疾病为重症及危重症病例发生的重要影响因素。结论:甲型H1N1流感以青壮年发病为主,主要临床表现为呼吸道症状,重症病例中多存在二重感染,并有可能存在凝血障碍,呼吸性碱中毒,低氧血症或Ⅰ型呼吸衰竭,且存在慢性基础性疾病更易发生。     

四川省2009甲型H1N1流感的流行病学特征

目的分析四川地区甲型H1N1流感流行病学特点,为今后新发传染病的防控提供参考。方法回顾性分析我院2009年收治的271例甲型H1N1流感病例的来源、年龄及时间分布。结果 1.271例甲型H1N1流感病例,男∶女为1.09∶1,随着病情加重发病年龄逐渐增加,病程亦逐渐延长;2.轻症患者均无基础疾病,危重症患者基础疾病较重症患者多且重;3.绝大多数患者年龄在10~30岁（211例,77.87%）,轻症及重症中无≤2岁及≥65岁的患者,危重症中≥65岁者2例;4.疫情早期（5~9月）患者均为轻症,以输入病例为主（52例,19.19%）,疫情后期以本土暴发病例为主（9月以后）有危重症出现。结论新发传染病疫情早期以轻症、输入病例为主,后期随着社区聚集性疫情,有重危症患者出现;患者年龄、基础疾病是该疾病严重程度的重要影响因素。     

Truncated and full-length glucagon-like peptide-1 (GLP-1) differentially stimulate intestinal somatostatin release

Glucagon-like peptide-1^7–36NH2 (GLP-1^7–36NH2) is a potent stimulator of insulin secretion, as well as of somatostatin-14 (SS-14) release from the pancreatic and gastric D-cells. To investigate the possible effects of this peptide on release of intestinal somatostatin (SS-28 and SS-14), rat intestinal cultures were treated with 10⁻¹²–10⁻⁶ M GLP-1^7–36NH2, as well as with the structurally related peptides, GLP-1^1–36NH2 and GLP-2. Both forms of GLP-1 stimulated dose-dependent increases in intestinal somatostatin; secretion reached 643±126% of controls (p<0.001) after treatment with 10⁻⁶ M GLP-1^7–36NH2, and 398±76% of controls (p<0.001) after 10⁻⁶ M GLP-1^1–36NH2. Thus, GLP-1^7–36NH2 was more effective than GLP-1^1–36NH2 in stimulating secretion of intestinal somatostatin-like immunoreactivity (SLI) (p<0.05). GLP-2 did not affect intestinal somatostatin release. Gel permeation analysis demonstrated that 10⁻⁶ M GLP-1^7–36NH2 stimulated SS-28 by 2.9±0.4-fold and SS-14 by 9.1±3.7-fold, whereas GLP-1^1–36NH2 exerted equivalent effects (2.8±0.9-fold) on both forms of somatostatin. These findings define a novel biological role for GLP-1^7–36NH2 in the regulation of intestinal somatostatin secretion, and demonstrate that GLP-1^1–36NH2 exerts unique biological activities in this system.     

由血管紧张素(1-7)重新认识RAS系统

对血管紧张素 (1- 7)的研究使我们对肾素 -血管紧张素系统 (RAS)有了更全面的认识。血管紧张素 (1-7)通过特异性的受体发挥生理作用。血管紧张素Ⅰ和血管紧张素Ⅱ经过特异的肽链内切酶变为血管紧张素 (1 -7) ,再经血管紧张素转换酶作用降解为无活性的血管紧张素 (1- 5 )。血管紧张素 (1- 7)具有抗增殖、扩张血管、抗氧化应激及促进纤溶的作用。     

Extreme efficiency of anti-interleukin 1 agent (anakinra) in a Japanese case of CINCA syndrome

We describe a case of severe CINCA syndrome in a Japanese male infant. We recently managed with anti-interleukin 1 agent (anakinra). Anakinra immediately led to improvement of both the clinical symptoms and the laboratory findings.     

北京地区反流性食管炎患者谷胱甘肽转硫酶P1基因基因多态性分析

目的探讨GSTP1基因型多态性表达与反流性食管炎的关系。方法选择反流性食管炎患者119例和正常对照者121例,通过PCR-RFLP方法检测GSTP1基因型。结果GSTP1突变型基因表达反流性食管炎组(32·77%)显著高于对照组(20·66%),P<0·05。结论GSTP1基因型多态性与反流性食管炎发病风险相关。     

Imbalance of tissue-type plasminogen activator (t-PA) and its specific inhibitor (PAI-1) in patients with rheumatoid arthritis associated with disease activity

Summary The relationship between plasma fibrinogen, D-dimer (DD), t-PA and PAI-1 and their correlation with disease activity (DA) were studied in 45 patients with rheumatoid arthritis (RA) (group B) to further understand the implication of fibrinolysis in the pathophysiology of RA. The control group constituted 24 healthy subjects (group A). A Stoke index (SI) of DA was assigned to each patient. Patients were divided into two groups: C, minimal-mild DA (SI 1–7); D, moderate-severe DA (SI 8–17). Fibrinogen was elevated in RA correlating positively with SI and CRP. Hypercoagulability counteracted by reactive fibrinolysis was inferred from a 10-fold increase of DD in group B as compared to group A. The relatively lower levels of DD in group D compared to group C and their negative correlation with SI (r_s=–0.45, –0.49, p=0.0006) indicate the tendency of fibrinolysis to decrease with the increase of DA. Significant elevation of t-PA and PAI-1 were found in group B compared to group A. While t-PA progressively decreased with the increase of DA (r_s=–0.45, p=0.0019), a positive relation of PAI-1 to DA was observed (r_s=0.42, p=0.0042). A 2-fold increase of PAI-1/t-PA molar ratio in group D compared to groups A and C as well as its positive correlation with SI (r_s=0.63, p=0.0001) indicate the displacement of balance between t-PA and PAI-1 in favour of the inhibitor with the increase of DA in RA. The involvement of inflammatory mediators in PAI-1/t-PA imbalance was proposed from the relation of fibrinolytic abnormalities with the activity of systemic inflammatory process.     

2009年甲型H1N1流感大流行重症病例的治疗

本文就呼吸支持、药物治疗（抗病毒药物、皮质类固醇、抗菌药物、乌司他丁）、血浆疗法与营养支持及抗凝疗法等方面介绍了重症甲型H1N1流感的救治经验。随着病例的增加,这些经验对临床医生有很好的指导意义。