人胃癌原代细胞培养化疗药物敏感性评价

目的:评价人胃癌原代细胞对7种化疗药物的敏感性。方法:取59例手术切除的新鲜胃癌组织标本,应用人胃癌原代细胞短期培养(混杂非肿瘤细胞)与纯化培养MTT法体外药敏试验,测定每种化疗药物对肿瘤细胞的抑制率。结果:药敏试验测定7种化疗药物抑制率除氨甲蝶呤(MTX)外纯化法均高于短期法,表明纯化法较敏感;两种方法测定药物敏感性顺序一致,由高至低依次为顺铂(DDP)、丝裂霉素(MMC)、阿霉素(ADM)、依托泊甙(VP-16)、5-氟尿嘧啶(5-FU)、羟基喜树碱(HCPT)、MTX。结论:7种化疗药物以DDP、MMC、ADM较敏感,VP-16、5-FU次之,HCPT、MTX最差。     

P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白在胃癌的表达与化疗敏感性的相关性研究

目的：探讨胃癌组织中P-糖蛋白（P-glycoprotein,P-gP）、多药耐药相关蛋白（muhidrug resistance-associated protein,MRP）的表达及对胃癌原代细胞培养体外化疗药物敏感性的影响。方法：应用免疫组化法检测P-gP及MRP在48例胃癌及癌旁组织的表达,同时通过胃癌原代细胞培养MTT药敏试验,检测胃癌对7种临床常用化疗药物的敏感性及耐药性,进一步分析药敏试验结果与P-gp、MRP表达的相关性。结果：在48例胃癌中,P-gP及MRP阳性率分别为41．7％、29．2％,共同表达率为25．0％。癌旁组织与癌组织的P-gP、MRP阳性表达率无显著差异。在顺铂（DDP）、丝裂霉素（MMC）、阿霉素（ADM）、鬼臼乙叉甙（VP-16）、5-氟尿嘧啶（5-FU）、羟基喜树碱（HCVF）、甲氨蝶呤（MTX）中,ADM、VP-16、HCVF耐药组P-gP、MRP阳性表达及共表达率较敏感组显著升高。结论：胃癌组织P-gp、MRP表达可导致胃癌原发性耐药。P-gP、MRP介导的MDR是ADM、VP-16、HCPT耐药的重要因素．     

Livin基因表达与食管鳞癌化疗药物敏感性的相关性研究

目的研究原代培养食管癌细胞对化疗药物的敏感性,并进一步探讨其敏感性与食管癌组织中Livin基因表达的关系,为食管癌的临床化疗提供个体化用药的实验资料和依据。方法：取手术切除的新鲜食管癌组织标本,用MTT法检测经化疗药物作用后肿瘤细胞活力及代谢活性的变化;同时取相同食管癌组织制成石蜡切片,用免疫组化检测Livin蛋白的表达。结果：1.Livin阳性表达与5-FU及ADM耐药有关（P〈0.05）;2.TAX、MMC及5-FU与ADM及DDP之间敏感性差异具有统计学意义（P〈0.05）,前者明显高于后者;ADM敏感性明显高于DDP,组间差异具有统计学意义（P〈0.01）;结论：食管癌组织中Livin阳性表达者与5-FU及ADM耐药有关,提示Livin可作为食管癌原发性耐药标志之一。     

腺病毒介导p53基因逆转乳腺癌耐药的实验研究

目的探讨腺病毒介导p53基因（Ad-p53）对人乳腺癌阿霉素（ADM）耐药细胞株MCF-7／ADM的耐药性及多药耐药基因1（MDR1）的影响。方法以Ad-p53转染MCF-7／ADM细胞株,流式细胞术检测p53蛋白变化;锥虫蓝活细胞拒染法观察细胞生长情况;MTT法观察MCF-7／ADM细胞对阿霉素耐药性的变化,实时荧光RT—PCR法检测MDR1 mRNA变化。结果流式细胞术观察到MCF-7／ADM细胞经MOI50的Ad-p53作用48h后,p53蛋白表达率由10．24％升高到36．20％;细胞抑制率为7．4％（P=0．003）;逆转MCF-7／ADM对ADM的耐药倍数11．6倍（P=0．001）;实时荧光RT-PCR检测结果显示MDR1 mRNA相对表达量由1．25±0．01下降至0．91±0．01（P=0．011）。结论腺病毒介导p53基因能抑制MCF-7／ADM细胞MDR1基因的表达,并能部分逆转MCF-7／ADM的耐药性,增加阿霉素化疗敏感性。     

药物敏感试验指导小鼠胃癌化疗对凋亡及P53基因的影响

目的:通过应用药敏试验筛选化疗药物对多次传代的荷瘤鼠进行化疗,了解其疗效以及对移植瘤凋亡及P53基因的影响.方法:用MTT法检测小鼠胃癌细胞对6种化疗药物的敏感性,对荷瘤鼠进行化疗,观察化疗后移植瘤的体积、抑瘤率,检测凋亡及P53基因的表达.结果:用MTT法筛选最敏感的化疗药5-FU对第一代荷瘤小鼠进行化疗,其抑瘤率高,凋亡率高,P53基因的表达下降,与对照组比较有显著性差异;最不敏感的ADM化疗组抑瘤率低,凋亡率低,P53基因的表达高于对照组(P＜0.05).再对已行化疗的胃癌细胞筛选最敏感药物为DDP,最不敏感药物为用MMC,对第二代荷瘤小鼠进行化疗,发现DDP组抑瘤率高,凋亡率高,P53基因的表达较对照组低(P＜0.05);MMC组抑瘤率低,凋亡率低, P53蛋白表达高,与对照组比较无显著性差异.而继用5-FU和ADM化疗对第二代荷瘤小鼠进行化疗,抑瘤率低,凋亡率低,P53基因的表达高,与对照组比较无显著性差异.结论:药敏试验、凋亡及P53基因的检测可作为化疗药物的选择及判断预后的指标.     

利多卡因对抗肿瘤药物的增敏作用研究

目的：研究利多卡因对3种化疗药物的增敏作用。方法：微量细胞培养四氮唑（MTT）法检测肝癌细胞系SSMC7721对3种抗癌药物5-氟脲嘧啶（5-FU）、丝裂霉素（MMC）和顺铂（CDDP）的敏感性。结果：SSMC7721对3种化疗药物（5-FU、MMC及CDDP）均敏感。结论：利多卡因对这3种化疗药物均有明显增敏作用。     

shRNA沉默DNA-PKcs表达对肝癌耐药细胞BEL7402/5-FU耐药性的影响

目的观察shDNA-PKcs沉默DNA-PKcs基因对肝癌耐药细胞Bel7402/5-FU耐药性的影响。方法采用双酶切、测序分析鉴定shDNA-PKcs干扰质粒;用阳离子脂质体法将shDNA-PKcs质粒转染BEL7402/5-FU细胞,根据荧光细胞数计算转染率,Real-time PCR及Western blot检测沉默效率;MTT法检测细胞药物敏感性;Real-time PCR和Western blot检测P-gp mRNA和蛋白表达。结果双酶切鉴定结果显示质粒约为6300bp,测序结果显示插入序列为shDNA-PKcs序列。荧光细胞计数显示质粒的转染率为62.2%。Real time PCR及Western blot检测结果显示DNA-PKcs mRNA及蛋白水平的沉默效率分别为82.6%、71.8%;MTT检测结果显示shDNA-PKcs实验组的ADM和5-FU的IC50值比对照组ADM、5-FU低（P〈0.05）,DDP和MMC的IC50值与对照组比无统计学意义（P〉0.05）。Real time PCR和Western blot检测结果显示实验组P-gp mRNA、蛋白表达水平均比对照组低（P〈0.01）。结论 shDNA-PKcs干扰质粒能够有效抑制BEL7402/5-FU细胞中DNA-PKcs表达,增加细胞对化疗药物的敏感性,其机制可能与P-gp蛋白的下调有关。     

突变型p53与胃癌细胞多药耐药性关系的研究

目的：研究胃癌细胞中突变型p53和MDR-1基因的表达及其与不同化疗药物敏感性的关系。方法：将突变型p53、sv40Tag（封闭p53）导入胃癌细胞株SGC-7901中，研究胃癌细胞中MDR-1基因表达的变化；用MTT法比较各组细胞对化疗药的敏感性。结果：导入突变型p53细胞株的MDR-1基因mRNA表达比导入突变型p53＋sv40Tag细胞株、对照组MDR-1基因mRNA表达强；导入突变型P53细胞株对5-氟脲嘧啶（5-Fu）耐药性与导入突变型P53＋sv40Tag细胞株和对照组比较均有显著性差异（P〈0．05），而后两者之间耐药性差异无显著性（P〉0．05）；导入突变型p53细胞株和导入突变型p53＋sv40Tag细胞株对阿霉素（ADM）耐药性与对照组比较均有显著性差异（P〈0．05），而前两者之间对ADM的耐药性差异无显著性（P〉0．05）。导入突变型p53细胞株、导入突变型p53＋sv40Tag细胞株及对照组细胞株对顺铂（CDDP）耐药性均无显著性差异（P〉0．05）。结论：突变型p53能促进MDR-1 mRNA表达，与肿瘤细胞发生多药耐药密切相关。     

MTT法检测乳腺癌细胞对化疗药物敏感性的研究

目的：探讨3-（4,5）-2-噻唑-（2,5）-二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）药敏试验在指导临床乳腺癌化疗中的作用。方法：应用MTT法检测50例乳腺癌新鲜标本肿瘤细胞对10种化疗药物的敏感度。结果：对乳腺癌细胞抑制率强的药物为PTX、NVB、VP-16、5-FU、DDP,对乳腺癌细胞抑制率较弱的化疗药物为VCR、ADM、MTX、MMC、HCPT。结论：MTT体外药敏试验对指导临床乳腺癌个体化治疗具有重要意义。     

大肠癌细胞对化疗药物的敏感性与p53基因突变的相关性研究

目的研究大肠癌细胞对化疗药物的敏感性与p53基因突变的相关性.方法用MTT比色法检测20位大肠癌患者的癌细胞对化疗药物的敏感性,并用PCR-SSCP技术分析其癌细胞的p53基因突变.结果大肠癌细胞对5-Fu[IR=(54.7±14.1)%]比对MMC[IR=(43.9±10.8)%]及ADM[IR=(43.9±9.4)%]更敏感(P＜0.05),但对DDP有耐药性[IR=(25.9±12.8)%,P＜0.01].p53基因的突变率为45%(9/20).癌细胞对MMC和ADM的敏感性与p53基因突变呈正相关(rmmc=0.589,rabm=0.624,P＜0.005).结论化疗药物MMC和ADM对大肠癌的作用依赖于p53基因的状态,而大肠癌对5-Fu和DDP的敏感性却与p53基因突变无关.     

按质付费的做法足够完美了吗？

Thomas L.Watkins是一位单独开业的全科医生．他的诊所在密歇根州Muskegon市。虽然没有购买电子健康记录系统，但他也有自己的法宝，而且从功能上看并不比电子健康记录逊色：基于网络的注册系统。这个系统有他的全部病人列表．在门诊时会提醒他哪些病人需要预防性用药，哪些病人需要进行长期护理。这个登记系统还会创建工作记录，里面包含了医生的工作时间、病人数量、药物资费等信息。[第一段]     

按质付费的做法足够完美了吗?

Thomos L.Watkins是一位单独开业的全科医生,他的诊所在密歇根州Muskegon市.虽然没有购买电子健康记录系统,但他也有自己的法宝,而且从功能上看并不比电子健康记录逊色:基于网络的注册系统.     

基于移动P2P的医疗信息平台

基于智能手机终端的医疗信息采集、分发和管理平台具有成本低、操作简单、覆盖面广的优势,利于大型公共医疗信息系统在全国范围的推广。针对目前手机通信网络覆盖在偏远地区的不足、手机网络通信费用对于低收入群体过于昂贵等问题,本文提出不使用商业网络连接,建立一个基于分布式智能移动终端P2P通信框架的低成本医疗信息采集、分发和管理平台,支持多种移动终端系统,并能够在系统中形成一个自组织的医疗信息社交网络。目前该系统的通信平台已用于偏远地区怀孕妇女体检和新生儿疫苗注射等医疗信息的传输及管理,取得良好的社会效益。     

贲门癌组织中P53、P16和P21WAF-1蛋白的表达

目的：探讨贲门癌组织中肿瘤抑制基因P53、P16和P21^WAF-1蛋白的表达及其临床生物学意义。方法：采用免疫组织化学法检测60例贲门癌组织中P53、P16和P21^WAF-1蛋白的表达。30例正常人贲门粘膜组织作为正常对照。结果：贲门癌组织中P53蛋白的阳性表达率为66．7％，较正常对照组(13．2％)明显增高；贲门癌组织中P16蛋白的阳性表达率为41．6％，较正常对照组(79．2％)降低；贲门癌组织中P21^WAF-1蛋白的阳性表达率为21．6％，较正常对照组(43．2％)降低，差异有统计学意义。贲门癌组织中至少有一项基因表达改变。且多发生2种以上基因表达改变。结论：P53、P16和P21^WAF-1蛋白在贲门癌发生发展中起重要作用。基因改变的累积可能是贲门癌发生的重要分子生物学基础。     

早期肺癌组织中P16、P21、P53的表达

目的 探讨早期肺癌组织中P21、P53、P16蛋白表达及其相互关系。方法 57例肺癌患者，男49例，女8例；年龄33～83岁，平均60．7岁。腺癌13例，鳞癌43例，腺鳞混合癌1例。采用免疫组织化学SP法检测所有患者标本的基因表达，应用SPSS进行相关性分析(Pearson’s correlation)和多因素分析(COX regression)。结果 P16、P21、P53在病理分期T2期(肿瘤直径≥3cm)患者中的阳性表达率分别是23．1％、43．1％、68．6％，三者之间无相关性。COX回归分析表明P16、P53及肿瘤的病理分期是影响预后的重要指标。结论 P16蛋白缺失、P53蛋白阳性对早期肺癌的影响明显，且不具有明显的相关性，可作为判断预后的独立因素。     

EBV与癌基因P53、P21、P16在食道癌中表达与意义

目的　探讨EBV感染与癌基因P5 3、P2 1、P16在食道癌中的表达与意义。方法　对 6 0例食道癌病例 ,用原位杂交法检测EBV的表达 ,用免疫组化法检测P5 3、P2 1、P16的表达。结果　EBV阳性表达率为 72 % ,P5 3阳性表达率为 83% ,P2 1阳性表达率为 6 5 % ,P16阳性表达率为 30 %。在EBV阳性病例中P5 3、P2 1、P16的阳性病例分别为 2 7、2 8、5例。结论　EBV感染对食道癌的发生有一定的作用 ;P2 1、P16的表达与EBV感染有关 ;P5 3、P2 1、P16的表达程度与肿瘤的预后有关     

P2P数据交换系统的非一致性数据管理

给出了P2P数据交换系统的形式模型,描述了对等体的本地数据一致性约束、对等体间的信任关系以及对等体间的数据交换约束。并在此基础上提出了基于"查询候选数据集"的全局一致性查询处理策略。一个对等体的"查询候选数据集"是满足其本地数据一致性约束和对等体间所有数据交换约束的全局数据库虚拟子视图。提交到一个对等体的查询操作通过在其查询候选集上进行便可以得到全局一致的查询结果。给出了"查询候选数据集"的构造算法。