固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定血清中3种抗癫痫药物

目的应用固相萃取-反相高效液相色谱法测定血清中抗癫痫药物。方法用Elut Bond C18小柱预处理样品，甲醇为洗脱剂；采用Waters Nova RC18柱，流动相为甲醇：水-45：55；检测波长230nm，流速1ml／min，内标(苯乙酮)法定量。结果苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的浓度线性范围分别为4．1～62．6μg／ml(r=0．9968)、3．9～60．1μg／ml(r=0．9971)和1．6～21．2μg／ml(r=0．9945)，最低检测限分别为0．05μg／ml、0．05μg／ml和0．01μg／ml；相对回收率分别为90．6％～103．6％、93．4％～118．3％和91．2％～101．1％；批内变异系数均小于6．0％，批间变异系数均小于8．0％。结论固相萃取-反相高效液相色谱法简便、灵敏、准确、稳定，适合于以上3种抗癫痫治疗药物的同时监测。     

双抗体夹心ELISA检测肺炎支原体抗原方法的建立

目的建立检测肺炎支原体(MP)抗原的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并探讨其临床应用的可行性。方法采用不同株MP单抗,用双抗体夹心ELISA检测MP抗原,优化该方法检测MP抗原的最佳实验条件。对MP标准株及147份临床标本进行测定,观察双抗体夹心ELISA的敏感性和特异性及该方法与聚合酶链反应(PCR)检测的符合率。结果包被单抗量为20μg／ml,酶标记单抗1：200稀释时,阳性对照与阴性对照吸光度之比(P／N值)最大,检测MP抗原敏感度达2μg／ml,和其他支原体没有交叉反应;147份临床标本PCR检测阳性率13．6％(20／147),双抗体夹心ELISA检测阳性率12．2％(18／147),两者符合率达95．9％。结论建立的双抗体夹心ELISA检测MP抗原具有快速、简便、灵敏度高、特异性强等优点。     

表皮生长因子酶联免疫吸附检测方法的建立

目的建立酶联免疫吸附法(ELISA)检测人血清(浆)或尿液中表皮生长因子的含量。方法以rhEGF为包被抗原，表皮生长因子(epidermal growth factor，EGF)为竞争的抗原，两者与一定量的抗EGF多抗反应。以抑制率为纵坐标，EGF的对数值为横坐标建立标准曲线。结果实验结果表明，理想的包被抗原浓度为1μg／ml，抗EGF多抗工作浓度为1:100000，酶标二抗工作浓度为1:3000，可测量最适范围为0.25-32ng/ml，最小检测量为0．5ng／ml，批内和批间变异系数分别为3．48％和5．46％。得到回归方程y=-0．1281Ln(X)十0．8116(r=-0.9938)和标准曲线。结论建立快速定量测定EGF含量的酶联免疫吸附试验。     

心肌营养素-1 ELISA测定法的建立及初步应用

目的 应用生物素-链霉亲和素酶联免疫吸附法(BSA-ELISA)建立血浆心肌营养素-1(CT-1)测定法,并初步应用于冠心病患者血浆CT-1水平的检测。方法 用鼠抗重组人CT-1单抗包被酶标板,加入待测抗原,并依次加入生物素化羊抗重组人CT-1多克隆抗体、辣根过氧化物酶标记链霉亲合素,用H2O2-邻苯二胺显色。检测35名冠心病患者及对照组血浆CT-1含量的变化。结果 方法的线性范围为10～2000pg／ml,检测下限为10pg／ml,批内变异系数为1．76％～7．64％,批间变异系数为5．96％～9．04％。结论 该方法简便、快速,特异性、敏感性、重复性均在临床检测可接受范围内,标准曲线线性良好,适用于基础研究与临床检验。     

自身免疫性疾病患者血清BlyS、抗-BlyS及其特异性免疫复合物的测定研究

目的 研究B淋巴细胞刺激因子（B lymphocyte stimulator，BlyS）、抗-BlyS（BlyS-Ah）及其特异性免疫复合物（BLyS—IC）在各种自身免疫病（AID）患者中的检出水平及其在AID中的作用。方法 优化试验反应条件，建立检测BlyS、BlyS-Ab及BlyS-IC的酶联免疫吸附试验（ELISA）测定法，并进行方法学考核和临床检测。结果 优化的ELISA对BlyS的最低检出量可达0．4μg／L，在3．2～400．0μg／L浓度范围内呈现良好的线性关系（r〉0．99）。BlyS-Ab精密度平均变异系数（CV）为7．4％，特异阻断抑制试验最高抑制率达83．3％。在系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿关节炎（RA）、混合性结缔组织病（MCTD）等AID及抗核抗体（ANA）阳性的其他内科疾病（包括肾小球。肾炎、过敏性紫癜和呼吸系统疾病）患者血清中BlyS质量浓度、BlyS—Ab及BlyS—IC水平均明显高于正常对照组（P〈0．01）。ANA滴度与患者血清BlyS及BlyS-Ab水平呈平行升高趋势，但未发现BlyS水平与ANA某一特定荧光核型有相关关系。结论 成功建立了人血清BlyS、BlyS-Ab及BlyS—IC的ELISA测定法，该方法敏感、特异、可靠。在SLE、RA和MCTD等患者中均有高水平的BlyS，同时伴随ANA、BlyS—Ab及BlyS-IC的升高。BlyS—Ab和BlyS—IC可能有助于AID诊断，并对阐明AID发病机制有一定意义。     

S-腺苷同型半胱氨酸单克隆抗体的制备及应用

目的通过制备S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)-BSA偶联物和SAH单克隆抗体(mAb)，建立同型半胱氨酸(Hcy)免疫学测定方法。方法以二磺基琥珀酰辛二酸盐为连接剂制备SAH—BSA偶联物；PEG细胞融合技术制备SAH mAb，间接酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定SAH mAb的特异性，以竞争ELISA测定Hcy。结果制备的SAH—BSA偶联物的克分子比为3～5，SAH mAb与Ado、半胱氨酸、蛋氨酸等无交叉反应；但与S-腺苷蛋氨酸为0．1～0．2μmol／L时，存在交叉反应。初步建立的Hcy竞争ELISA测定区间为1～50μmol／L，回收率为98％～101％，变异系数为1％～3％。与高效液相层析法有高度相关性(r=0．9836)。结论我们制备的SAH—BSA偶联物和SAH mAb及建立的竞争EHSA法适用于Hcy测定。     

散射免疫比浊法测定血清铁蛋白的临床运用

目的：探讨散射免疫比浊法测定血清铁蛋白的临床运用价值。方法：研究散射免疫比浊法测定血清铁蛋白的精密度、准确性和灵敏度，同时与酶标免疫测定法进行相关性研究。结果：批内变异系数在1．5％-5．7％，批间变异系数在1．7％～6，7％：灵敏度为2．4μg／L；不同浓度样本的回收率分别为104．9％和97，8％；与酶标免疫测定法的相关系数为0．999。结论：散射免疫比浊法测定血清铁蛋白准确度高，重复性好，操作简单，快速。     

人巨细胞病毒被膜磷蛋白pp65重组抗原酶联免疫吸附法的建立与两种方法的比较分析

目的用我们研制的一种新人巨细胞病毒(HCMV)重组被膜磷蛋白pp65为抗原，建立快速、简便和特异的检测HCMVIgM的间接酶联免疫吸附法(REC—EL．ISA)。方法用自行设计、表达的新的HCMV pp65重组抗原，建立REC—ELISA，并检测100份临床疑似为HCMV感染者血清中HCMV—IgM，同时与全病毒为抗原的间接ELISA法(简称全病毒一ELISA法)和美国BioCheck试剂盒(简称BioCheck法)检测结果进行比较。结果REC—ELISA法重组抗原最适量为3．5μg／孔，HRP标记二抗为1：800，血清稀释度为1：100；稳定性试验阳性变异系数(CV)为9．5％，重复性试验平均CV值：批内CV 4．5％，批间CV 9．6％。REC—ELISA法、全病毒-ELISA法和BioCheck法检测HCMV IgM的阳性率分别为44％、50％和45％；REC—ELISA法的敏感性为95．6％，其特异性(98．2％)高于全病毒-ELISA法(90．9％)；正确指数为92．8％，与BioCheck法一致性为97．0％。结论用pp65重组抗原建立的REC—ELISA法具有高度特异性与敏感性，且操作简单、快速，重复性好；与全病毒抗原相比，重组抗原可规模化、标准化生产，且更安全、经济，具有良好的临床应用前景。     

广州地区ermB和mef E基因介导对红霉素耐药的肺炎链球菌及其耐药性分析

目的了解广州地区对红霉素耐药的肺炎链球菌中ermB及mefE基因分布，比较ermB基因与mefE基因对红霉素耐药的肺炎链球菌的耐药性。方法用克林霉素纸片法检测199株对红霉素耐药的肺炎链球菌，并用浓度梯度法检测其耐药性。结果199株对红霉素耐药的肺炎链球菌中，ermB、mefE基因介导的耐药率分别为70．9％(141／199)和29．1％(58／199)。141株ermB基因介导对红霉素耐药的肺炎链球菌，对青霉素(MIC500．19μg／ml、MIC901．5μg／ml)、阿莫西林／克拉维酸(MIC500．19μg／ml、MIC901．0μg／ml)、头孢曲松(MIC500．19μg／ml、MIC900．75μg／ml)、头孢呋辛(MIC500．38μg／ml、MIC902．0μg／ml)、头孢克洛(MIC502．0Vg／ml、MIC9032．0μg／ml)的不敏感率分别为58．2％、0．7％、21．3％、46．1％和51．1％。58株mefE基因介导对红霉素耐药的肺炎链球菌，对青霉素(MIC500．5μg／ml、MIC901．5Vg／ml)、阿莫西林／克拉维酸(MIC500．38μg／ml、MIC901．0μg／ml)、头孢曲松(MIC500．38μg／ml、MIC900．75μg／ml)、头孢呋辛(MIC501．0μg／ml、MIC903．0μg／ml)、头孢克洛(MIC506．0μg／ml、MIC9048．0μg／ml)的不敏感率分别为67．2％、0、19．0％、58．6％和62．1％。结论广州地区对红霉素耐药的肺炎链球菌，其耐药机制以ermB基因介导为主；ermB基因介导的红霉素耐药水平高于mefE基因介导的耐药性。     

用基因工程抗原建立ELISA检测莱病特异IgM抗体

目的 利用伯氏疏螺旋体基因工程抗原外膜蛋白C（OspC)建立间接ELISA，检测莱姆病特异性抗体IgM。方法 基因工程抗原OspC的包被浓度和酶标抗μ链单抗所用浓度及血清稀释倍数，均由方阵滴定法确定，并进行精密度、特异性试验、阻断试验和干扰试验。结果 OspC最佳浓度为150μg/L，批内平均变异系数4．6％，批间平均变异系数14．2％，用ELISA测定临床已确诊莱姆病33例，57例正常体检者，同时与进口ELISA试剂盒比较，两方法符合率97．8％。结论 该方法特异性强、敏感性高、实验结果可靠,是莱姆病早期诊断的好方法。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

31例误诊哮喘原因分析

目的通过对中央气道不全性梗阻和支气管结核、术后痰栓形成误诊为支气管哮喘的分析,探讨误诊原因及正确诊断的方法。方法对误诊为支气管哮喘的3l例患者的临床资料进行分析。结果临床特征以刺激性咳嗽为主,其次为活动后胸闷、气促,肺部闻及哮鸣音,胸部影像学多无特征性改变或极易漏诊,支气管舒张试验阳性率低,诊断前缺乏气管镜及病理检查,均误诊为支气管哮喘。结论中央气道不全梗阻性病变或炎性病变包括支气管结核、术后痰栓形成时原发疾病症状不典型,肺部影像学检查无异常表现或极易漏诊,故该类以表现为咳嗽、喘息、活动后胸闷,进而出现严重呼吸困难的患者常被误诊为支气管哮喘,延误诊治。支气管镜及病理检查再结合肺CT是鉴别诊断的重要方法。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据

目的评价胰腺癌治疗的Cochrane系统评价证据,以及纳入系统评价的临床随机对照试验（RCT）的方法学质量。方法检索Cochrane Library数据库（2009年第4期）中有关胰腺癌治疗的系统评价,并运用RewMan5.0.21对所纳入研究的偏倚进行评估。结果共检索到胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的系统评价、放化疗治疗不能手术的进展期胰腺癌的系统评价共2篇系统评价,共纳入79个RCT。依照Cochrane协作网推荐的质量评价方法,对所纳入RCT的偏倚进行评估,表明均存在不同程度的偏倚,方法学质量普遍较低。结论 Cochrane系统评价是公认的最高质量的研究证据,但目前缺少足够强度的证据来支持胆道支架置入术姑息治疗梗阻型胰腺癌的疗效。其他治疗手段的疗效如胰腺癌围手术期的营养支持治疗等还需要通过进一步的完成系统评价来评估。建议推行临床试验透明化,实施临床试验注册制度以及按照CONSORT声明严格规范RCT的报告,以便于总结胰腺癌治疗的临床证据。     

护理干预对提高中风患者生活质量的效果观察

目的探讨提高中风患者生活质量的护理方法。方法将50例中风患者随机分为对照组23例和实验组27例,对照组给予针灸内科常规护理,实验组在此基础上给予心理护理和康复训练。结果两组患者治疗护理后日常生活活动(ADL)能力和贝克抑郁量表(BDI)评分均有好转,但实验组疗效明显优于对照组(P<0.05)。结论实施针对性心理护理和康复训练可明显提高中风患者的治疗效果。     

中国人四肢瘫日常生活能力评定量表的信度研究

目的研究四肢瘫日常生活能力评定量表评测四肢瘫患者的重测信度及观察者间信度。方法由1位评定者应用四肢瘫日常生活能力评定量表对20例四肢瘫患者进行评定,评定后1周内再次对该患者进行评定;另1位评定者在第1位评定者初次评定后2 d内对该患者进行评定。结果第1位评定者两次评定总分的组内相关系数为0.994(P<0.01);第1位评定者与第2位评定者评定总分的组内相关系数为0.971(P<0.01)。结论四肢瘫日常生活能力评定量表具有良好的重测信度及观察者间信度。     

乳腺叶状肿瘤的影像分析

目的 分析乳腺叶状肿瘤的X线钼靶摄片和超声表现.方法 收集经手术病理证实的19例乳腺叶状肿瘤,术前均行超声检查,其中15例行X线钼靶摄片,回顾分析其临床特点和影像学表现.结果 19例乳腺叶状肿瘤中,良性8例,交界性6例,恶性5例.15例患者X线钼靶摄片中病灶均为高密度孤立肿块影,呈圆形(8例)或浅分叶状(7例),边界清晰(10例)或部分不清(5例),部分肿块周边见"晕"征(4例).超声检查6例发现囊性变,6例表现为后方回声增强.病灶为圆形(8例)、浅分叶状(8例)或有角状突起(3例).所有病例均未发现腋下转移淋巴结及周围组织浸润等恶性征象.结论 认识乳腺叶状肿瘤的病理类型和临床特点,结合影像表现综合分析,可提高术前诊断率.     

肇庆市居民颈椎病流行病学调查

目的 :调查肇庆市居民颈椎病发病情况及相关问题。方法 :通过分层随机抽样选择该市区18～70岁居民5000人为研究对象 ,入户或至单位询问调查。结果 :该市居民颈椎病发病率为8.11% ,男女差异无显著性 ,随着年龄的增长 ,发病率逐渐增加。经多因素分析 :体位姿势不正确、情绪紧张、潮湿、疲劳是发病的主要诱因。结论 :该病严重影响肇庆市居民的健康 ,做好防治应从早做起 ,综合防治。     

超声评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响

目的 探讨超声在评价放疗对颈动脉溃疡斑块形成的影响的价值。方法 回顾性收集经病理学证实为头颈部肿瘤、放疗前后的颈动脉超声资料以及其他基线资料完整的患者93例,比较放疗前后放疗侧颈动脉和非放疗侧颈动脉粥样硬化斑块和溃疡斑块的总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积。结果 放疗前后颈动脉超声检查的平均间隔时间为（6.1±1.9）年;放疗前放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积与非放疗侧比较差异均无统计学意义（P均>0.05）;放疗后放疗侧斑块总数量、平均内膜-中膜厚度、最大斑块面积、溃疡斑块的总数量、最大溃疡斑块的面积、最大溃疡口的面积均较非放疗侧加重,差异有统计学意义（P均<0.05）。结论 放疗可导致头颈部肿瘤患者颈动脉粥样硬化斑块的形成和进展,且斑块具有易损性特点。