中药复方冬菊对鼠舌白斑癌变的阻断作用

目的 观察中药复方冬菊对4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)诱导的大鼠舌白斑癌变的阻断作用.方法 Wistar大鼠85只,随机分为癌变模型组(n=35)、中药干预组(n=35)、正常对照组(n=5)和中药对照组(n=10).以4NQO饮水喂养诱导大鼠舌白斑癌变,中药复方冬菊水溶液灌胃干预癌变过程,取9、13、20、24、32周舌背黏膜标本进行组织病理学观察,免疫组化SP法检测细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果中药干预组舌背黏膜异常增生发生率和cyclin D1的阳性表达率明显低于癌变模型组(P＜0.01或P＜0.05).结论中药复方冬菊有确切的抗白斑癌变功效,对细胞周期的阻滞是其抗癌机制基础之一.     

MMP12和TIMP2mRNA在大鼠舌黏膜癌变过程中的表达

目的 观察基质金属蛋白酶-12(MMP12)及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP2) mRNA在4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠舌黏膜癌变过程中的动态变化,探讨其在实验性大鼠舌黏膜癌变中的作用.方法 60只雌性SD大鼠随机分为3组,分别给予正常饮水、25 ppm(mg/L)的4NQO水溶液16、24周.舌部病变组织分成两等分,分别进行组织病理学分析和荧光定量PCR检测.结果 (1)4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,正常饮水组无组织病理学改变,4NQO诱癌大鼠16周舌黏膜出现上皮中-重度异常增生,诱癌24周后主要病理学变化为舌鳞状细胞癌.(2)与正常组织相比,MMP12 mRNA表达水平在癌前病变中升高1.51倍,在舌癌中升高4.86倍(P＜0.01),MMP12 mRNA表达随病理程度增加呈现递增趋势;与正常组织相比,TIMP2 mRNA在癌前病变中表达升高2.62倍(P＜0.01),在舌癌中表达升高2.06倍(P＜0.05),TIMP2 mRNA表达随病理程度增加呈现先增加后下降的趋势;舌黏膜癌变过程中MMP12与TIMP2 mRNA表达比例失调.结论 MMP12、TIMP2 mRNA的高表达参与4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变过程,两者表达的比例失调与舌黏膜癌变密切相关.     

4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶的表达

目的:观察大鼠实验性舌癌癌变过程中胎盘型谷胱甘肽S-转移酶(GST-P)的表达特点.方法:6周龄雄性SD大鼠42只,随机分为2组.实验组动物(n=30)的饮水中加入体积分数为0.001%的4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液7 mg/(kg·d).对照组(n=12)则仅给予饮用水.实验第2周、4周、8周、12周、16周和26周末,处死大鼠,其中实验组各5只,对照组各2只.处死动物后,从会厌部至口底前缘整体分离舌体,观察其大体形态,常规组织处理,免疫组化法检测舌黏膜组织内GST-P.结果:对照组大鼠未出现任何舌黏膜病变,舌体标本均呈GST-P阴性.实验第8周末,实验组大鼠舌黏膜开始出现上皮异常增殖,实验第16周末即有1只大鼠发生舌癌,26周实验组大鼠均出现舌癌.2周时实验组大鼠舌黏膜内开始出现GST-P阳性细胞,随着时间的推移,GST-P阳性灶数目和大小逐渐增加.结论:GST-P可能与舌癌的发生有关.GST-P阳性反应早于大鼠舌黏膜的形态学改变,可作为反映癌前细胞代谢特点的良好标记.     

Eag1在大鼠口腔舌黏膜癌变过程中的表达

目的:研究4-亚基硝氧喹啉(4NQO)诱发大鼠口腔黏膜癌变过程中各阶段Eag1的蛋白表达,探讨Eag1与OSCC发生发展的关系.方法:利用4NQO诱导SD大鼠的口腔黏膜癌变,采用免疫组织化学(SP法)检测各样本Eag1蛋白的表达.结果:随着大鼠舌黏膜异常增生程度的增加,Eag1蛋白表达明显升高.Eag1在大鼠舌黏膜癌中的表达明显高于正常上皮及轻度上皮异常增生组织.结论:Eag1蛋白表达随着上皮异常增生程度的加重而表达增加,Eag1可能会成为口腔黏膜具有恶变潜能的重要指标.     

4NQO 诱导大鼠舌黏膜癌变过程中波形蛋白的表达研究

目的：研究舌黏膜癌变过程各阶段中波形蛋白的表达,探讨其在舌鳞状细胞癌（TSCC）发生、发展中的意义。方法采用4‐硝基喹啉‐1‐氧化物（4NQO）饮水法诱导大鼠TSCC的发生,收集发生过程中正常舌黏膜、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中度上皮异常增生、重度上皮异常增生及T SCC组织标本共56例。采用免疫组织化学法检测波形蛋白的表达情况,并采用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）法检测各组织的波形蛋白mRNA表达量。结果免疫组织化学中,随着大鼠舌黏膜异常增生程度的增加,波形蛋白表达阳性率明显上升,各组间差异有统计学意义（χ2＝10．685,P＜0．05）。病变各组与正常舌黏膜组比较, mRNA表达差异均具有统计学意义（P＜0．05）;轻度、中重度上皮异常增生组、鳞癌组与上皮单纯增生组进行比较,鳞癌组差异有统计学意义（P＜0．05）。上皮单纯增生、轻度、中重度上皮异常增生组、鳞癌组波形蛋白 mRNA表达量分别是正常舌黏膜组的1．22、1．28、1．29、1．42倍。结论在4NQO诱导大鼠舌黏膜癌变过程中,波形蛋白随病变程度的增加表达增高,这与肿瘤的侵袭密切相关,有可能作为舌黏膜上皮癌变的预测指标。     

MMP12/TIMP2 mRNA在大鼠舌黏膜癌变过程中表达的研究

目的 观察基质金属蛋白酶-12（Matrix Metalloproteinase-12,MMP12）及基质金属蛋白酶组织抑制因子-2(Tissue inhibitors of matrix metalloproteinases-2,TIMP2) mRNA在4－亚基硝氧喹啉（4-nitroquinoline-1-oxid, 4NQO）诱发大鼠舌黏膜癌变过程中的动态变化,探讨其在实验性大鼠舌黏膜癌变中的作用。方法 60只雌性SD大鼠随机分为三组,分别给予正常饮水、25ppm（㎎∕L）的4NQO水溶液16周、24周建立大鼠舌黏膜癌变模型。舌部病变组织分成两等分,分别进行组织病理学分析和荧光定量PCR检测。结果 (1)4NQO诱发大鼠舌黏膜癌变过程中,正常饮水组无组织病理学改变,4NQO诱癌大鼠16周舌黏膜出现上皮中-重度异常增生,诱癌24周后主要病理学变化为舌鳞状细胞癌。(2) 与正常组织相比,MMP12 mRNA表达水平在癌前病变中升高1.51倍、在舌癌中升高4.86倍（P<0.01）,MMP12 mRNA表达随病理程度增加呈现递增趋势;与正常组织相比,TIMP2 mRNA在癌前病变中表达升高2.62倍（P<0.01）,在舌癌中表达升高2.06倍（P<0.05）,TIMP2 mRNA表达随病理程度增加呈现先增加后下降的趋势;舌黏膜癌变过程中MMP12与TIMP2 mRNA表达比例失调。结论 MMP12,TIMP2 mRNA的高表达参与4NQO诱发的大鼠舌黏膜癌变过程,二者表达的比例失调与舌黏膜癌变密切相关。     

明胶酶在舌鳞癌发生、演进中的表达和意义

【目的】通过检测明胶酶在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和鳞癌组织中的表达,探讨其在舌鳞癌的发生和演进中的变化和作用。【方法】应用免疫组织化学的方法检测14例口腔正常黏膜、22例白斑、7例白斑癌变和59例舌鳞癌组织中明胶酶(MMP-2和MMP-9)蛋白的表达。【结果】①MMP-2在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和舌鳞癌组织中阳性率分别为29%、50%、86%和83%;MMP鄄9在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和舌鳞癌组织中阳性率分别为50%、100%、100%和83%。②正常黏膜组织中MMP-2的阳性率明显低于白斑癌变(P=0.016)和舌鳞癌组织(P=0.000);白斑组织中MMP-2的阳性率明显低于舌鳞癌组织(P=0.001);白斑癌变组织中MMP鄄2的阳性率明显低于伴有淋巴结转移的舌鳞癌组织(P=0.019);舌鳞癌组织中无淋巴结转移组的阳率明显低于伴有淋巴结转移组(P=0.006)。③正常黏膜组织中MMP-9的阳性率明显低于白斑(P=0.021)和白斑癌变组织(P=0.016);白斑和白斑癌变组织中MMP-9的阳性率低于无淋巴结转移的舌鳞癌(P=0.002和0.007);舌鳞癌组织中无淋巴结转移组的阳率明显低于伴有淋巴结转移组(P =0.033)。【结论】明胶酶在舌鳞癌发生和演进过程中表达明显增加,并可能在这一过程中起着重要作用。     

明胶酶在舌鳞癌发生、演进中的表达和意义

【目的】通过检测明胶酶在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和鳞癌组织中的表达，探讨其在舌鳞癌的发生和演进中的变化和作用。【方法】应用免疫组织化学的方法检测14例口腔正常黏膜、22例白斑、7例白斑癌变和59例舌鳞癌组织中明胶酶(MMP-2和MMP-9)蛋白的表达。【结果】①MMP-2在1：3腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和舌鳞癌组织中阳性率分别为29％、50％、86％和83％；MMP-9在口腔正常黏膜、白斑、白斑癌变和舌鳞癌组织中阳性率分别为50％、100％、100％和83％。②正常黏膜组织中MMP-2的阳性率明显低于白斑癌变(P=0．016)和舌鳞癌组织(P=0．000)；白斑组织中MMP-2的阳性率明显低于舌鳞癌组织(P=0．001)；白斑癌变组织中MMP-2的阳性率明显低于伴有淋巴结转移的舌鳞癌组织(P=0．019)；舌鳞癌组织中无淋巴结转移组的阳率明显低于伴有淋巴结转移组(P=0．006)。③正常黏膜组织中MMP-9的阳性率明显低于白斑(P=0．021)和白斑癌变组织(P=0．016)；白斑和白斑癌变组织中MMP-9的阳性率低于无淋巴结转移的舌鳞癌(P=0．002和0．007)；舌鳞癌组织中无淋巴结转移组的阳率明显低于伴有淋巴结转移组(P=0．033)。【结论】明胶酶在舌鳞癌发生和演进过程中表达明显增加．并可能在这一过程中起着重要作用。     

中药复方金三莪对肝纤维化大鼠的治疗作用及其机制研究

目的　观察中药复方金三莪抗大鼠肝纤维化的疗效及其机制。方法　将 5 0只 Wistar大鼠随机分为 4组 :A组为正常组 (n=8) ,B组为肝纤维化模型组 (n=14 ) ,C组为金三莪治疗低剂量组 (n=14 ) ,D组为金三莪治疗高剂量组 (n=14 )。B,C,D组大鼠 sc CCl4 诱导大鼠肝纤维化模型 ,C,D组大鼠于造模第 4周开始 ig金三莪 ,剂量分别为 0 .6 ,1.2 g/10 0 g,每日 1次 ;A,B组 ig生理盐水 1ml/kg,第 8周处死全部大鼠。免疫组化技术检测转化生长因子 - β1 (TGF- β1 ) ,Smad3及 Sm ad7在肝内的表达及定位 ;常规生化方法检测肝功能 ;放射免疫方法检测透明质酸 (HA )含量 ;Van Gieson染色和 HE染色观察肝组织病理形态学改变。结果　肝纤维化模型大鼠经金三莪治疗后肝组织内 TGF- β1 及 Smad3表达降低 ,而 Sm ad7的表达增加 ,与模型组大鼠比较差异显著 (P<0 .0 5 ) ,TGF- β1 及Sm ad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆 ,Smad7则主要在肝细胞浆表达。与模型组比较 ,金三莪治疗后大鼠血清丙氨酸氨基转移酶 (AL T) ,天门冬氨酸氨基转移酶 (AST) ,HA含量显著减低 (P<0 .0 5 ) ;肝小叶结构趋于正常 ,纤维间隔明显变薄 (P<0 .0 1)。结论　中药复方金三莪能有效减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度 ,其机制与抑制     

4NQO诱导大鼠舌黏膜癌变过程中E-cad及PCNA的表达研究

目的 研究上皮钙依赖黏附蛋白(E-cad)和增殖细胞核抗原(PCNA)在大鼠口腔黏膜癌变过程中的表达变化,探讨其相关性.方法 采用4硝基喹啉一1一氧化物(4NQO)饮水法诱导大鼠舌癌变模型,免疫组织化学SP法检测82只大鼠舌癌变过程不同病理阶段组织中E-cad、PCNA蛋白的表达,分析E-cad与PCNA相关性.结果 在正常黏膜、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中重度上皮异常增生和舌鳞状细胞癌组织中,E-cad的阳性率分别是100％、95.24％、92.86％、80.00％.68.75％,差异均有统计学意义(P＜0.05);PCNA的阳性率分别是9.52％,14.29％、35.71％,50％、56.25％,差异有统计学意义(x2=16.676,P<0.05).二者的蛋白表达呈负相关(r=-0.614,P＜0.01).结论 E-cad和PCNA有望成为舌黏膜癌变的生物标志物之一.     

CK19与E－cad在大鼠舌黏膜癌变过程中外周血的表达

目的：研究大鼠舌黏膜癌变过程中外周血的细胞角蛋白19（CK19）和E－钙黏蛋白（E－cad）的表达及相关性。方法90只SPF级SD雄性大鼠,按照随机数字表法分为6组,利用4NQO饮水法诱导75只大鼠（实验组）舌黏膜癌变,15只大鼠（对照组）饮用SPF级动物专用纯净灭菌水,于不同时期分批乙醚麻醉抽取外周血,颈椎脱臼处死取舌体组织做病理诊断,采用酶联免疫吸附试验（ ELISA）检测外周血中CK19和E－cad在大鼠舌黏膜癌变过程中的动态变化,Pearson相关系数及线性回归模型分析E－cad与CK19相关性。结果 E－cad和CK19在正常黏膜、上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中重度上皮异常增生和舌鳞状细胞癌组外周血中浓度分别为（259．92±89．75）、（402．85±93．52）、（412．39±64．08）、（466．25±66．72）、（539．14±108．07） ng／L和（593．45±134．06）、（784．45±108．53）、（848．58±99．68）、（951．94±85．31）、（1004．22±127．65） ng／L。上皮单纯增生、轻度上皮异常增生、中重度上皮异常增生和舌鳞状细胞癌组外周血中E－cad和CK19表达显著高于正常黏膜（ P＜0．05）;E－cad和CK19的表达呈正相关（r＝0．738, P＜0．001）。结论外周血中CK19和E－cad表达上升是大鼠舌黏膜癌变过程中的早期事件。     

细胞增殖调控基因在反流性食管炎及其并发症中的表达变化

胃镜检查或手术中取得正常对照组(25例)、反流性食管炎(RE,35例)、Barrett食管(BE,20例)及食管腺癌(EA,9例)患者的食管组织标本,采用免疫组化法检测cyclin D_1、CDK_1和CDK_4基因表达。结果发现EA组的cyclin D_1和CDK_4表达较正常对照组显著增强(P<0.01,P<0.05),SE组的cyclin D_1表达亦较对照组增强(P<0.05),EA组的cyclin D_1表达较RE组增强(P<0.05),而其他组间的cyclin D_1或CDK_4表达以及各组间CDK_1表达均无显著性差异。提示BE、EA患者食管组织中cyclin D_1、CDK_4基因的表达明显改变,反流可能为导致此系列疾病的机制之一,而CDK_1的作用不显著。检测cyclin D_1和CDK_4的表达可能对RE和BE患者的预后监测具有较大意义。     

细胞周期素D1和p27kip1在肾癌中的表达及其意义

目的:探讨cyclin D1、p27kip1在普通型肾细胞癌(conventional renal cell carcinoma,CRCC)发生、发展中的作用。方法:用定量RT-PCR和Western-blot方法检测25例CRCC组织和10例肿瘤远端的正常肾皮质中cyclin D1和p27kip1的mRNA和蛋白的含量;用免疫组化方法检测76例CRCC中cyclin D1、p27kip1的表达;分析cyclin D1、p27kip1的表达与肿瘤分期、分级及术后生存率的相关性。结果:CRCC中cyclin D1的mRNA和蛋白含量分别为0.488±0.399和1.069±0.371,高于正常对照组0.089±0.066和0.281±0.253(P均<0.01);cyclin D1的表达与肿瘤体积大小有关,体积大者cyclin D1高表达(P<0.05);CRCC中p27kip1mRNA和蛋白含量分别为0.191±0.111和0.146±0.051,低于正常对照组0.374±0.216和1.004±0.318(P均<0.01),随着p27kip1表达的降低,肿瘤的细胞核Fuhrman分级、TNM分期增高;p27kip1阳性组患者的5年生存率为84.26%,高于p27kip1阴性组25.25%(P<0.01)。结论:cyclin D1高表达和p27kip1的低表达与CRCC的发生有关;p27kip1的低表达可能促进肿瘤的演进,检测p27kip1可作为评价CRCC预后的参考指标。     

Cyclin D1、P53在口腔鳞癌中的表达及意义

目的：研究ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３蛋白在口腔鳞癌中的表达及与口腔鳞癌发生、发展间的关系。方法：应用免疫组化ＳＰ法,检测了４０例口腔鳞癌中ＣｙｃｌｉｎＤ１、Ｐ５３蛋白的表达情况。结果：５７．５％（２３／４０）的口腔鳞癌ＣｙｃｌｉｎＤ１过表达。正常口腔粘膜Ｐ５３蛋白均为阴性;５２．５％（２１／４０）的口腔鳞癌Ｐ５３蛋白阳性,两组间差异有显著性（Ｐ＜０．０５）。其中高分化鳞癌阳性率为３６．８％（７／１９）;中分化鳞癌阳性率为６６．７％（１４／２１）,差异具有显著性（Ｐ＜０．０５）。结论：ＣｙｃｌｉｎＤ１过表达及Ｐ５３蛋白异常协同作用引起口腔鳞癌细胞的失控性生长,在口腔鳞癌的发生、发展中发挥着重要的作用。     

舌鳞癌组织中Cyclin D1、P27及c-erbB-2的表达及意义

目的:研究舌鳞癌组织中,cyclinD1、P27及cerbB2的表达水平与舌癌临床分期和病理分级之间的关系。方法:应用免疫组织化学SP法回顾性研究62例舌鳞癌组织中的cyclinD1、P27及cerbB2的表达水平。结果:舌鳞癌组织中的cyclinD1的表达水平与T分期、淋巴结是否转移和病理分级显著相关;P27的表达水平与淋巴结是否转移和病理分级显著负相关,与T分期无显著性相关;cerbB2的表达水平与淋巴结是否转移显著相关,与病理分级相关,与T分期无显著性相关。结论:cyclinD1、P27及cerbB2的表达水平与舌癌的发生发展有关,可能提示舌癌患者的预后。