MicroRNA 调节肿瘤细胞凋亡及中药的影响

微RNA（microRNA,miRNA）是一类新发现的非编码RNA,它的异常表达与肿瘤病理过程密切相关,起到癌基因或抑癌基因的作用。本文就近几年miRNA 调节肿瘤细胞凋亡的相关研究,并结合目前已报道的中药及其有效成分对miRNA 的影响进行了综述。提出中药及其成分可以通过影响表达异常的miRNA 进而调控相应靶基因或靶蛋白,诱导肿瘤细胞凋亡的抗癌作用机制,为今后阐明中药抗癌机制提供了新的研究思路。     

基于网络药理学的罗汉果治疗肿瘤的作用机制研究

目的使用网络药理学探索罗汉果与肿瘤间的相互作用关系,分析罗汉果活性成分抗肿瘤的作用机制。方法数据库数据检索罗汉果活性成分,再筛选与肿瘤相关的活性成分和靶蛋白,导入在线数据库分析靶蛋白功能,再对活性成分、靶蛋白及其信号通路构建网络药理图,最后对关键蛋白进行验证。结果筛查出罗汉果中4个与肿瘤相关的活性成分,18个与肿瘤相关的活性成分的蛋白靶蛋白。信号通路分析显示罗汉果活性成分通过癌症通路、IL-17信号通路、流体剪切应力与动脉粥样硬化等信号通路发挥作用;构建了罗汉果活性成分的网络药理图,筛选出了PTGS2、HSP90AA1和AKR1C3为靶蛋白的关键蛋白,并在肿瘤数据库中验证更多靶蛋白在多种肿瘤中的表达显著改变。结论初步预测了罗汉果抗肿瘤作用的基本药理基础及功效机制,为下一步深入验证奠定了良好理论基础。     

桦木酸对S_(180)荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡及细胞周期的影响

目的以S180荷瘤小鼠为研究对象,研究桦木酸的抗肿瘤作用,旨在开发新的药物资源.方法观察S180荷瘤小鼠瘤重抑制率、利用DNA结合荧光探针直接对肿瘤细胞DNA染色后FCM分析肿瘤细胞凋亡、细胞周期的影响以及P 53蛋白的表达率.结果桦木酸各剂量能明显抑制S180肿瘤细胞的生长,且桦木酸低、中剂量组能够明显增加S180肿瘤细胞G0/G1期和降低S期的肿瘤细胞数目,升高S180肿瘤细胞P53蛋白的表达率.结论桦木酸可能通过影响肿瘤细胞生长周期及P53蛋白的表达诱导肿瘤细胞凋亡而达到抗肿瘤作用.     

尪痹胶囊免疫相关通路及作用靶点的生物信息学分析

目的运用生物信息学方法分析尪痹胶囊免疫相关通路及作用靶点,为尪痹胶囊的作用及机制研究提供思路和依据。方法在台湾中医药资料库中检索尪痹胶囊各组分中药含有的化学成分,在Pubchem中检索与这些化学成分相互作用的靶蛋白,将靶蛋白上传至生物信息分析软件IPA,经数据分析,得到靶蛋白免疫相关的生物学通路及作用靶点,对这些信息进行生物学解析。结果检索到尪痹胶囊的靶蛋白共232个,构建靶点网络,并分析尪痹胶囊作用的免疫相关通路,其中与细胞免疫相关的前五个通路为巨噬细胞移动抑制因子调控的固有免疫通路,活化和未活化的T淋巴细胞IL-2表达调节通路,淋巴细胞CD27信号转导通路,OX40信号通路,T淋巴细胞4-1BB信号转导通路。结论尪痹胶囊可以通过作用于JUN、NF-κB、NF-κBIA、RelA分子对免疫相关通路起到调节作用。     

GLUT1靶向型中药活性成分纳米递送系统的研究进展

肿瘤细胞在缺氧条件下利用糖酵解为其提供物质与能量,满足快速生长和增殖的能量需求,即“Warburg效应”。即使在有氧条件下,肿瘤细胞也主要依靠糖酵解提供能量。因此,参与葡萄糖代谢过程中的葡萄糖转运蛋白1（GLUT1）在肿瘤发生、发展及耐药中发挥着重要作用,被认为是恶性肿瘤治疗的重要靶点之一。近年来,肿瘤糖代谢方面的研究逐渐成为热点。已有研究表明,多种因子参与对肿瘤能量代谢的调控,其中尤以GLUT1的作用最为关键。该文综述了GLUT1靶向型中药活性成分纳米递送系统在肿瘤治疗中的最新研究进展,旨在揭示GLUT1靶向型中药活性成分纳米递送系统在化疗药物递送的可行性和有效性。GLUT1靶向型中药活性成分纳米递送系统可以克服传统靶向策略及高渗透长滞留（EPR）效应的瓶颈。综上所述,GLUT1靶向型中药活性成分纳米递送系统为肿瘤的靶向治疗提供了新的策略,并在肿瘤的预防和治疗中具有广阔的应用前景。     

基于网络药理学方法探讨蛇床子治疗骨质疏松可能的分子途径

目的采用网络药理学方法探讨蛇床子抗骨质疏松的可能分子途径。方法利用中药系统药理学数据库(TCMSP)筛选蛇床子活性成分,预测靶蛋白和相互作用蛋白;用TTD和CTD数据库查询骨质疏松靶蛋白,预测相互作用蛋白,构建药物–靶蛋白–疾病交互网络;用DAVID数据库富集并分析靶蛋白信号通路;通过Systems Dock软件将蛇床子活性成分与重要的靶蛋白进行分子对接验证。结果筛选得到蛇床子活性成分19个、靶蛋白72个、骨质疏松疾病靶蛋白118个;经相互作用蛋白(PPI)网络交集后,获得药物和疾病共同靶蛋白91个;富集得到26条信号通路;β-谷固醇、豆甾醇、24-epicampesterol、poriferast-5-en-3β-ol与SRC、ESR1靶蛋白具有良好的分子对接活性。结论蛇床子可能通过激活甲状腺激素信号通路中的SRC和ESR1起到治疗骨质疏松的作用。     

桔梗汤止咳祛痰的网络药理学研究

目的探索桔梗汤止咳祛痰功效的潜在活性成分群和分子作用机制。方法在文献挖掘、多个数据库联用检索与痰多咳嗽相关靶蛋白基础上,利用分子计算结合网络特征分析获得桔梗汤的主要活性成分和潜在的靶点蛋白,并构建分子-蛋白调控网络。结果基于痰多咳嗽相关病变机制,初步筛选出38个靶蛋白和472个小分子;分子对接结果中发现桔梗汤中78个分子(结构特征分析均符合"类药五原则")与靶蛋白相互作用的对接得分较高(Score≥7),其中5个成分来自桔梗,73个成分来自甘草。依据分子对接结果,选取对接得分较高(Score≥7)的128条分子-靶蛋白数据对,通过插件Network analyzer分析网络特征,识别出桔梗汤26个主要活性成分(皂苷和黄酮类化合物等)和13个靶蛋白。结论桔梗汤主要通过其所含的皂苷、黄酮类化合物与TLR4、MMP9、IKK2等多个靶蛋白的作用,起到调控呼吸道过度炎症反应、改善肺功能、抑制黏蛋白过表达、降低咳嗽中枢对刺激反应等作用,最终实现止咳祛痰功效。     

Hederacolchiside A1通过调节PI3K / Akt / mTOR信号通路诱导肿瘤细胞凋亡

目的：Hederacolchiside A1在体外对各种肿瘤细胞表现出细胞抑制和细胞毒活性,但其机制尚不清楚。本研究主要探讨白头翁中提取分离的Hederacolchiside A1的抗肿瘤活性和机制。 方法：用MTT法检测Hederacolchiside A1对A549,SMMC-7721,BEL-7402和MCF-7细胞增殖的抑制作用。通过流式细胞术分析鉴定经Hederacolchiside A1处理的肿瘤细胞凋亡状况。 结果：根据Western blotting和JC-1染色结果：hederacolchiside A1降低肿瘤细胞线粒体膜电位和Bcl-2蛋白表达水平,并升高cleaved caspase-3蛋白表达水平。此外,hederacolchiside A1可有效地抑制磷脂酰肌醇（-3）激酶（PI3K）,蛋白激酶B（Akt）和雷帕霉素靶蛋白（mTOR）表达水平。体内研究表明,在肝癌H22移植瘤模型中,Hederacolchiside A1（3.0,4.5和6.0mg / kg,ip）可显著抑制肿瘤的重量;在人乳腺癌MCF-7移植瘤模型中,用Hederacolchiside A1（3.25,7.5和15.0mg / kg,ig）进行治疗,观察到类似的抑制活性。 结论：这些数据表明,Hederacolchiside A1可通过调节PI3K / Akt / mTOR信号传导途径诱导肿瘤细胞凋亡从而抑制肿瘤细胞的增殖。     

程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在胃癌中作用的研究进展

程序性细胞死亡因子4(PDCD4)是新发现的与细胞周期及凋亡相关的抑癌基因,主要通过蛋白转录及翻译过程来抑制肿瘤细胞生长,也是第1个被发现作用于蛋白翻译阶段的肿瘤抑制物,研究表明其与胃癌的发生发展及预后密切相关,从PDCD4抗肿瘤机制、胃癌中表达、多基因关系、中药干预治疗胃癌后影响等多方面对其进行综述,为未来胃癌的中西医治疗提供一个潜在分子靶点。     

瑞香狼毒药材中蛋白质部位的体外活性研究

目的 建立瑞香狼毒药材蛋白质部位体外活性研究的方法.方法 琼脂糖扩散法测定总蛋白的抑菌活性;MTT细胞培养法测定总蛋白及分离得到的6个分子量蛋白对肝癌细胞生长的抑制作用及对正常细胞的毒性作用.结果 体外活性研究结果表明,总蛋白没有抑菌活性但具有抗肿瘤活性和细胞毒性;分离得到的6个分子量的蛋白中2、3、4、6对肿瘤细胞有抑制作用,1、3、4对正常细胞有毒性作用.结论 实验方法可作为瑞香狼毒药材中蛋白质生物活性研究的方法,为瑞香狼毒蛋白质部位的毒性蛋白及活性蛋白的研究提供了方法依据.     

Intervention Effect of Shenling Baizhu Powder(参苓白术散) on Tumor Apoptosis in Lewis Lung Cancer Mice Through TLR4/MyD88 Pathway

目的:观察参苓白术散通过TLR4/MyD88通路对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织凋亡的干预效果和机制,探讨培土生金法对肺癌的部分治疗机制.方法:40只SPF级雄性C57小鼠,采用腋窝皮下接种肺癌Lewis细胞悬液法建立Lewis肺癌小鼠模型,造模成功后,随机分成Lewis肺癌组、顺铂组、中药组和中药+顺铂组,每组10只.根据人的使用剂量,按照体表面积折算法进行人和小鼠等效剂量换算.各药物组小鼠给予相应药物,Lewis肺癌组小鼠给予等体积生理盐水.给药14d后,采用TUNEL染色法检测小鼠肿瘤组织细胞凋亡情况,并计算细胞凋亡指数;采用免疫组化法测定Toll样受体4(TLR4)、MyD88和Caspase-3的蛋白表达水平;采用Western blotting法测定TLR4、MyD88和Caspase-3蛋白表达水平.结果:与Lewis肺癌组比较,顺铂组肿瘤增长抑制率为38.59％,肿瘤细胞凋亡指数升高,TLR4和MyD88阳性细胞数量减少,平均光密度值明显降低(P＜0.01),蛋白表达水平降低(P＜0.01),Caspase-3阳性细胞数量增加,平均光密度值升高(P＜0.01),蛋白表达水平升高(P＜0.01);中药组肿瘤增长抑制率为30.14％,肿瘤细胞凋亡指数升高,TLR4和MyD88阳性细胞数量减少,平均光密度值降低(P＜0.01),蛋白表达水平降低(P＜0.01),Caspase-3阳性细胞数量增加,平均光密度值升高(P＜0.01),蛋白表达水平升高(P＜0.01);中药+顺铂组肿瘤增长抑制率为44.51％,肿瘤细胞凋亡指数升高,TLR4和MyD88阳性细胞数量减少,平均光密度值降低(P＜0.01),蛋白表达水平降低(P＜0.01),Caspase-3阳性细胞数量增加,平均光密度值升高(P＜0.01),蛋白表达水平升高(P＜0.01).与顺铂组、中药组比较,中药+顺铂组肿瘤细胞凋亡指数升高,TLR4、MyD88和Caspase-3蛋白表达水平的变化更明显.结论:参苓白术散可以降低Lewis肺癌小鼠TLR4、MyD88蛋白表达水平,增加Caspase-3蛋白表达水平,通过调控TLR4/MyD88通路,促进肿瘤细胞凋亡.     

基于反向分子对接和网络药理学的臭椿酮抗肿瘤作用机制研究

目的利用反向分子对接技术和网络药理学分析方法,建立臭椿酮抗肿瘤的"化合物-靶标-通路-疾病"网络,并探究其潜在的作用机制。方法借助于Pharm Mapper服务器寻找臭椿酮抗肿瘤的潜在靶蛋白,并通过Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)数据库对获取的靶点进行相关通路分析,进一步利用Cytoscape软件构建臭椿酮的"化合物-靶点-通路-疾病"相互关联网络。结果数据分析结果表明,臭椿酮对人源靶蛋白的102个潜在活性靶点、17条KEGG通路的作用与肿瘤相关。臭椿酮抗肿瘤作用于MAP2K1、PI3KR1、EGFR、GRB2、MDM2、MET等靶蛋白,其中有18、14和11个靶蛋白基因分别富集在肿瘤通路、蛋白多糖肿瘤通路、前列腺癌通路中,有6个靶蛋白基因分别富集在胶质瘤、黑色素瘤、子宫内膜癌、非小细胞肺癌通路中,主要通过细胞因子和细胞因子受体相互作用、磷脂酰肌醇3-激酶-蛋白激酶B信号通路、过氧化物酶体增殖物激活受体信号通路等起到抗肿瘤的作用。结论臭椿酮有望作为治疗前列腺癌、非小细胞肺癌、胶质瘤、黑色素瘤等多种肿瘤的一个新的潜在药物,该研究为臭椿酮治疗肿瘤的靶标研究、药理活性与临床应用研究提供了理论支撑。     

应用蛋白质组学技术研究琼玉膏抗衰老的作用机制

琼玉膏为古代养生名方,抗衰老作用已应用于临床近千年,但其作用机制未明,困扰其开发利用.笔者根据中医肾藏精主骨生髓的理论,以下丘脑为研究对象,应用现代蛋白质组和生物信息学等技术,获得候选靶蛋白,通过基因沉默等分子生物学技术确定靶蛋白,以期阐明琼玉膏延缓衰老的关键机制,为将来更好地开发利用提供科研思路和方法.     

基于葡萄糖转运体的中药调控2型糖尿病胰岛素抵抗研究新进展

胰岛素抵抗是2型糖尿病的主要病理机制之一,主要表现为肝脏、骨骼肌以及脂肪等胰岛素敏感的靶组织对葡萄糖的摄取和利用障碍。研究表明,葡萄糖转运体蛋白是胰岛素信号传导通路的重要靶蛋白,参与组织细胞对葡萄糖的利用。本文主要从中药及其复方通过多途径、多靶点促进葡萄糖转运体的易位及其基因表达而改善2型糖尿病胰岛素抵抗研究新进展进行综述,以期为2型糖尿病的防治提供新思路。     

蜂毒素抗肿瘤作用机制的研究进展

蜂毒素对多系统肿瘤细胞均有杀伤作用,其机制主要是通过破坏细胞膜及影响细胞内外离子浓度从而对肿瘤细胞直接杀伤,干扰细胞周期以抑制肿瘤细胞增殖、通过调控相关凋亡基因和蛋白来促进肿瘤细胞凋亡及在肿瘤生长环境下通过调控血管内皮生长因子来抑制肿瘤血管生成等多种途径。蜂毒素作为抗癌药物是极有潜力的,其抗癌作用机制多样,能多靶点的遏制肿瘤生长繁殖的各个途径,若对其进行更为深入的研究,必将为抗肿瘤新药的研制与开发提供新的思路和动力。     

姜黄素乳剂对化疗诱导小鼠S180肿瘤细胞多药耐药相关蛋白表达的影响

目的:探讨姜黄素对化疗诱导的肿瘤多药耐药干预的分子生物学基础,以指导临床应用姜黄素干预肿瘤多药耐药的产生。方法:化疗同时给予姜黄素乳剂4周,流式细胞荧光检测肿瘤细胞耐药蛋白P-糖蛋白(P170)、肺耐药蛋白(LRP)和拓扑异构酶(TOPOⅡ)。结果:姜黄素乳剂明显降低化疗诱导后耐药细胞P170、LRP的表达率和TOPOⅡ活性。结论:姜黄素通过调节相关耐药蛋白,干预化疗诱发的肿瘤细胞多药耐药的产生。     

西黄丸调节MEKK1/SEK1通路抑制小鼠乳腺癌生长机制研究

目的研究西黄丸抑制4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤的生长及其可能的发生机制。方法建立4T1乳腺癌荷瘤小鼠模型,以西黄丸低、中、高剂量ig给药14 d,剥离肿瘤组织称重,TUNEL染色检测肿瘤细胞的凋亡,Real-time PCR法检测肿瘤组织中MEKK1和SEK1 mRNA表达,免疫荧光染色法和Western Blot法检测肿瘤组织中MEKK1和SEK1蛋白表达。结果与阴性对照组比较,给药组肿瘤体积及质量随西黄丸剂量的升高而降低;TUNEL染色显示凋亡的肿瘤细胞增加;Real-time PCR显示肿瘤组织中MEKK1和SEK1 mRNA表达升高;免疫荧光染色和Western Blot显示肿瘤组织中MEKK1和SEK1蛋白表达水平上调;以上结果均与西黄丸呈剂量依赖性,P 0.05具有统计学差异。结论西黄丸可能通过促进4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤细胞凋亡抑制肿瘤的生长,其机制可能与西黄丸上调4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤组织中MEKK1、SEK1 mRNA和蛋白表达有关。     

金黄色葡萄球菌肠毒素E的克隆表达及其生物活性研究

 目的克隆金黄色葡萄球菌肠毒素E(SEE)基因,获得重组SEE蛋白(rSEE),并对rSEE进行生物活性分析。方法通过PCR从金黄色葡萄球菌FR1326菌株基因中得到肠毒素SEE的成熟肽基因,将其克隆至融合表达载体pGEX-4T-1,转化大肠杆菌进行表达并对融合蛋白进行亲和色谱纯化,通过MTF法研究其生物活性。结果成功构建了SEE的表达载体,并得到高纯度的重组蛋白。MTY法结果表明,rSEE具有良好的促淋巴细胞增殖的能力以及肿瘤细胞的杀伤活性。结论具超抗原活性和高纯度的rSEE,为进一步研究该蛋白的抗肿瘤机制,构建靶向抗肿瘤融合蛋白奠定了基础。     

香菇C91-3菌丝发酵液中蛋白的分离纯化及其抗肿瘤机理研究

目的研究香菇C91-3菌丝体发酵液中的粗蛋白LFP91-3的分离纯化方法,提取具有抗肿瘤活性的蛋白组分,并初步鉴定其药效及特性。方法 LFP91-3经盐析、透析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离。用考马斯亮蓝法测定各管收集液中的蛋白浓度,依此绘制洗脱曲线,按曲线对收集液分组;用MTT比色法分别测定各组蛋白收集液对肿瘤细胞的生长抑制作用。对抑瘤率最大的一组各管收集液分别做SDS-PAGE电泳银染,取电泳条带相对较单一的峰尖部数管收集液合并,即为本实验的提取蛋白,以MTT比色法测定其对肿瘤细胞的生长抑制作用。用考马斯亮蓝法和硫酸-苯酚定糖法测定提取蛋白中蛋白和糖的比例。流式细胞仪检测提取蛋白诱导肿瘤细胞的早期凋亡率和晚期凋亡率;透射电镜观察经该蛋白作用的肿瘤细胞的凋亡形态。结果 LFP91-3经分离纯化,可得Ⅰ～Ⅳ共4组蛋白峰,且第3组的收集液抑瘤率最高。SDS-PAGE电泳结果显示第3峰顶部23～26管收集液主要含有19 kDa左右的蛋白,其他分子量的蛋白含量极低。测得该蛋白中蛋白和糖比例约为3∶1。MTT法显示提取蛋白在体外能明显抑制鼠肉瘤细胞株S180细胞的生长。流式细胞仪检测结果表明提取蛋白能在体外诱导S180细胞凋亡。透射电镜下,经提取蛋白作用的S180细胞,呈明显的凋亡形态。结论粗蛋白LFP91-3经盐析、透析、Sephadex G-100凝胶过滤层析分离共得到4组蛋白,第3组对S180细胞的抑制作用最强,其中第23～26管收集液主要含有分子量为19 kDa左右的蛋白,而且含有糖成分,提示可能为糖蛋白。该提取蛋白对S180细胞的生长具有较强的抑制作用,此作用与诱导肿瘤细胞凋亡有关。     

从网络角度研究腰痹通胶囊整体调控腰椎间盘突出的分子作用机制

目的研究腰痹通胶囊(三七、川芎、延胡索,等)治疗腰椎间盘突出的分子作用机制。方法采用文献挖掘、分子对接以及分子-靶蛋白网络特征分析的方法研究腰痹通胶囊中化合物群与靶蛋白的相互作用。结果分子对接发现腰痹通胶囊中有46个活性成分,且大部分具有良好的口服生物利用度和较高的中枢神经暴露量,进一步网络分析发现,其中coptisine、diligustilide、corypalmine、chuanxiongterpene等11个化合物为其主要活性成分,可通过与p38、CGRP、MMPs、TNFα等19个靶蛋白作用,抑制过度性炎症反应和椎间盘内毛细血管浸入,降低神经对刺激的敏感性,调控椎间盘内胶原、蛋白聚糖的代谢平衡,从而缓解疼痛,改善腰椎间盘突出。结论通过网络分析明确了腰痹通胶囊调控腰椎间盘突出的分子作用机制,诠释了其科学内涵,有助于推动后续药效物质基础研究和分子机制实验研究。