苦瓜皂苷对人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用的影响

目的 研究苦瓜皂苷抑制乳腺癌MCF-7细胞的作用及其诱导凋亡的机制.方法 采用MTT法观察苦瓜皂苷对MCF-7细胞的生长抑制作用;HE染色观察皂苷作用后癌细胞的形态学变化;免疫荧光染色检测Bcl-2的阳性表达率变化;流式细胞术分析细胞周期及细胞凋亡率.结果 MTT法得到苦瓜皂苷与MCF-7细胞生长抑制率之间存在浓度依赖关系,半数致死量IC50为159.02 mg/L;HE染色观察到经苦瓜皂苷作用24h后的MCF-7细胞出现典型的凋亡形态学特征;免疫荧光检测到苦瓜皂苷作用细胞24h后,Bcl-2的阳性表达率为22.35％,远小于对照组75.61％;流式细胞术表明苦瓜皂苷处理细胞后,S期细胞数明显增加,细胞周期被阻滞在S期,随着皂苷作用时间的延长细胞凋亡率增加.结论 苦瓜皂苷可抑制体外培养MCF-7细胞乳腺癌细胞的增殖,其抑制作用与细胞凋亡机制有关.     

康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的观察康莱特注射液对人乳腺癌MCF-7细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法取对数生长期人乳腺癌MCF-7细胞,分为对照组和康莱特不同浓度组(10、20、40μL/mL)。RPMI-1640培养基培养24 h后药物处理,采用MTT法检测康莱特注射液对MCF-7细胞增殖抑制率,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡,Hochest荧光染色法检测细胞核变化,ELISA及Western blot检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果康莱特注射液作用12、24、48 h对MCF-7细胞增殖均有显著的抑制作用(P0.05,P0.01);与对照组比较,康莱特注射液作用48 h后G1/G0、G2/M期细胞比例增加(P0.001,P0.01),S期细胞比例下降(P0.01),细胞凋亡率升高(P0.05,P0.001),Bcl-2蛋白表达明显降低、Bax蛋白表达明显升高(P0.01,P0.001)。结论康莱特注射液能抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖,阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡,其机制与降低Bcl-2蛋白表达和增加Bax蛋白活性有关。     

雷公藤内酯醇与紫杉醇联合抗MCF-7乳腺癌活性的体外研究

目的:观察雷公藤内酯醇与紫杉醇联合用药对人乳腺癌MCF-7细胞是否有协同效应,并初步探讨其作用机制。方法:将对数生长期细胞随机分为4组,分别为雷公藤内酯醇单药组、紫杉醇单药组、两药联合组和正常对照组。MTT比色法检测各组细胞的生长抑制率;流式细胞术检测各组细胞凋亡和周期;Western blot法检测各组ERα蛋白的表达。结果:雷公藤内酯醇在较低配比下与紫杉醇联合有强协同抑制作用;联合组细胞凋亡率明显高于单药组(P0.05);雷公藤内酯醇组S期细胞比例明显增加,紫杉醇组与联合组G2/M期的细胞比例明显增高(P0.05);雷公藤内酯醇和联合组均能较紫杉醇组更明显下调ERα蛋白表达。结论:雷公藤内酯醇在低剂量配比下与紫杉醇联合,对人乳腺癌MCF-7细胞有强协同抑制作用。协同抑制作用机制可能与阻断雌激素信号通路有关。     

农药氰戊菊酯与雌二醇联合作用对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的:旨在通过乳腺癌MCF-7细胞对农药氰戊菊酯和雌二醇联合作用进行研究,评价氰戊菊酯和雌二醇联合作用的环境雌激素活性。方法:MTT法检测氰戊菊酯和雌二醇联合对MCF-7细胞生长的作用;用流式细胞仪检测氰戊菊酯和雌二醇联合对MCF-7细胞周期分布情况;采用Western Blot法测定氰戊菊酯和雌二醇联合对MCF-7细胞ERK1/2,P-ERK1/2蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,氰戊菊酯与雌二醇联合后能促进MCF-7细胞增殖,但增殖作用比单独应用氰戊菊酯或雌二醇效应低,两者呈拮抗作用;流式细胞仪分析氰戊菊酯和雌二醇联合作用后与空白组比较,增殖效应不明显;Western Blot结果显示,氰戊菊酯和雌二醇联合对ERK1/2蛋白无明显影响,但可以促进P-ERK1/2蛋白的表达,但与氰戊菊酯和雌二醇单独作用比较,P-ERK1/2蛋白的表达较弱。结论:氰戊菊酯与雌二醇联合作用于MCF-7细胞,增殖效应低于单独作用组,两者联用具有拮抗作用,可通过对ERK信号传导通路的影响而发挥促进细胞增殖的作用。     

黄芪注射液在生理量雌二醇环境下对人乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的:探讨黄芪注射液在生理剂量雌二醇环境下对人乳腺癌MCF-7细胞增殖与凋亡的影响.方法:实验设细胞对照组,他莫昔芬对照组和生理剂量雌二醇环境下5个不同剂量的黄芪注射液组.用MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪分析细胞周期,PI染色检测凋亡率,DAN ladder观察凋亡条带.结果:各剂量组黄芪注射液均无促MCF-7细胞增殖效应,且随作用时间延长,均能抑制MCF-7细胞增殖(P＜0.05),并呈剂量依赖性.在质量浓度为2×10-1～2×10-4 g/mL时,各剂量黄芪注射液作用24 h均可使MCF-7细胞周期阻滞于G0/G1或S期(P＜0.05).高剂量(2×10-1g/mL)黄芪注射液作用72 h可诱导MCF-7细胞凋亡.结论:一定剂量范围内的黄芪注射液可抑制激素受体阳性乳腺癌细胞的增殖,并诱导其凋亡,阻滞细胞的有丝分裂于G0/G1或S期.     

藻红蛋白诱导乳腺癌MCF-7细胞凋亡与细胞周期的关系

目的 研究藻红蛋白 (PE) 对人乳腺癌 MCF-7 细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡作用。方法 采用 MTT 法和 SRB 法检测 PE 对人乳腺癌 MCF-7 细胞增殖的抑制作用。采用倒置显微镜、荧光显微镜 Hoechst 33258 染色观察 MCF-7 细胞凋亡细胞形态。Annexin V-FITC/PI 双荧光染色观察细胞凋亡过程中特异的磷脂酰丝氨酸 (PS) 外翻情况确定凋亡的出现。流式细胞仪观察 PE 对 MCF-7 细胞周期的影响。结果 PE 对 MCF-7 细胞有较强的生长抑制作用,并且呈一定的剂量依赖性,其 72 h 的 IC₅₀ 值为 147.82 μg/mL,GI₅₀ 值为 109.76 μg/mL。倒置显微镜下与基本贴壁的饱满、边沿清晰的对照组细胞比较,给药组细胞有明显的细胞变粗糙,贴壁细胞减少的现象,而且浓度越高,作用时间越长,悬浮细胞越多。荧光显微镜下可见各给药组 MCF-7 细胞出现不同程度深染亮点的细胞核质,染色质浓集固缩并伴有凋亡小体形成。激光共聚焦显微镜下可见给药组细胞膜被染成绿色,细胞核被染成红色。流式细胞仪显示 PE 可阻滞 MCF-7 细胞从 S 期进入 G₂/M 期,促使细胞凋亡。结论 PE 对 MCF-7 细胞有较强的抑制作用,可使其凋亡,其作用机制与周期阻滞有关。     

灵芝多糖联合5-氟尿嘧啶对LoVo细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharide)联合5-氟尿嘧啶对人结肠癌LoVo细胞体外增殖及凋亡的影响。方法采用MTT法测定单用灵芝多糖、5-氟尿嘧啶和两药合用对人结肠癌LoVo细胞的协同抑制作用,应用联合指数法分析两药物之间相互作用,流式细胞术(flow cytometry,FCM)检测灵芝多糖联合5-氟尿嘧啶对LoVo细胞周期的和凋亡抑制率的变化。结果 MTT结果显示灵芝多糖和5-氟尿嘧啶单独用药均能显著抑制LoVo细胞增殖。低质量浓度灵芝多糖(<14.70 mg/mL)和5-氟尿嘧啶(<0.29 mg/mL)联用组呈协同效应(CI<1),与5-氟尿嘧啶单独用药组相比有极显著差异(P<0.01),并呈时间依赖性。FCM结果显示联合用药组作用24 h后其凋亡率(14.42%)高于5-氟尿嘧啶单独用药组(11.37%);作用48 h后其凋亡率(28.92%)高于5-氟尿嘧啶单独用药组(23.29%)。低浓度联合用药组可使LoVo细胞阻滞于S期,高浓度联合用药组使LoVo细胞阻滞于G2/M期和S期。结论低浓度灵芝多糖与5-氟尿嘧啶联用具有协同抑制人结肠癌细胞株LoVo细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期。     

桂枝茯苓汤对乳腺癌细胞株线粒体凋亡途径相关蛋白和细胞周期的影响

目的:观察桂枝茯苓汤对乳腺癌细胞株MCF-7的凋亡相关蛋白和细胞周期的影响。方法:将浓度为300μg/m L、900μg/m L的桂枝茯苓汤分别作用MCF-7细胞24 h、48 h后,采用四甲基偶氮唑盐法(MTT)法检测细胞抑制率,流式细胞仪方法检测MCF-7细胞周期各时向DNA含量的变化,细胞免疫化学方法检测线粒体凋亡通路相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3/9和Bid的表达情况。结果:与空白对照组比较,桂枝茯苓汤各浓度组细胞抑制率明显升高(P0.05),其中G0/G1期细胞DNA含量明显升高(P0.05),桂枝茯苓汤可以降低Bcl-2蛋白的表达,同时可以促进Bax、Caspase-3/9和Bid蛋白的表达。结论:桂枝茯苓汤能体外诱导乳腺癌细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡通路有关。     

贝母素甲抑制人乳腺癌细胞MCF-7/TAM增殖及其对细胞凋亡的影响

目的:探讨贝母素甲抑制耐三苯氧胺人乳腺癌细胞MCF-7/TAM的增殖及其机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析法检测贝母素甲作用于MCF-7/TAM细胞后的抑制率;用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率;用免疫细胞化学法检测Bcl-2表达变化。结果:贝母素甲对MCF-7/TAM细胞有明显的抑制作用,呈浓度和时间依赖性。作用48h后能诱导细胞凋亡,细胞周期被阻滞于G1期(P0.05)。免疫细胞化学法检测Bcl-2表达减弱(P0.01)。结论:贝母素甲可抑制MCF-7/TAM细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

异乌药内酯对人乳腺癌MCF-7细胞的生长抑制作用及其机制研究

目的研究异乌药内酯对人乳腺癌MCF-7细胞生长的抑制作用及其作用机制。方法体外培养MCF-7细胞,分为对照组及不同浓度异乌药内酯处理组。采用MTT实验检测异乌药内酯对MCF-7细胞增殖的影响;采用流式细胞术和TUNEL染色法检测异乌药内酯对MCF-7细胞周期、线粒体膜电位及细胞凋亡的影响;采用Western blotting法检测与细胞凋亡密切相关的蛋白表达情况。结果异乌药内酯以时间和剂量依赖性抑制MCF-7细胞增殖、促进细胞凋亡;能够将MCF-7细胞周期阻滞在G2/M期,诱导线粒体膜电位去极化;上调cleaved Caspase-3和促凋亡蛋白Bax表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2表达,诱导MCF-7细胞的凋亡。结论异乌药内酯对MCF-7细胞的增殖抑制作用呈剂量和时间依赖性,其作用机制可能是通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

靛玉红衍生物PHⅡ-7通过抑制c-fos表达抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖

目的:探讨靛玉红衍生物PHⅡ-7抗乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖作用的初步机制。方法:MTT法检测PHⅡ-7的体外杀伤活性;RT-PCR法、Western blot法检测基因、蛋白表达水平;构建干扰c-fos的短发夹RNA真核表达载体,转染MCF-7/ADR细胞,并建立稳定转染的细胞系;采用细胞计数法绘制生长曲线探讨c-fos表达下调对乳腺癌细胞增殖的影响。结果:PHⅡ-7剂量依赖性地抑制乳腺癌敏感株MCF-7及耐药株MCF-7/ADR增殖;c-fos在耐药株MCF-7/ADR表达明显高于敏感株MCF-7;PHⅡ-7明显抑制c-fos的表达;shRNA显著抑制了c-fos蛋白表达,细胞增殖也被显著抑制。结论:靛玉红衍生物PHⅡ-7浓度依赖性地抑制乳腺癌耐药株MCF-7/ADR增殖,其作用可能与抑制原癌基因c-fos有关。     

淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞作用的影响

目的:探讨淫羊藿素(ICT)对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞的作用.方法::以在37℃、5％ CO2培养箱培养的人乳腺癌MCF-7为研究对象,用不同浓度的淫羊藿素单独作用及与雌二醇联合作用,测定人乳腺癌MCF-7细胞的增殖率,并检测该过程中雌激素受体ERα的表达情况.结果:当ICT浓度大于1×10-10mol·L-1时单独使用能促进ERα阳性人乳腺癌MCF-7细胞增殖,能诱导ERα基因的表达;淫羊藿素与雌二醇联合作用抑制MCF-7细胞增殖,抑制ERα的表达.结论:淫羊藿素与雌二醇联合作用具有抑制E2诱导的人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用;淫羊藿素与雌二醇联合作用可抑制ERα基因的表达.     

冷饭藤挥发油成分GC-MS分析及对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响

目的:分析冷饭藤挥发油的化学成分并探讨对人乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。方法:采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)联合NIST08和WILEY275谱库检索,同时结合Kováts保留指数(Retention index,RI)对其化学成分进行定性。采用MTT法测定冷饭藤挥发油对人乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用。结果:从冷饭藤挥发油中共鉴定出50个化合物,占所提取物挥发油总量的98.421%。挥发油对MCF-7细胞生长有抑制作用,且其作用具有浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为377.61 mg·L-1。结论:冷饭藤挥发油主要成分为莰烯(17.770%)、龙脑(12.080%)、(1,7,7-三甲基降冰片烷-2-YL)乙酸(8.239%)和d-杜松烯(7.315%)。冷饭藤挥发油对人乳腺癌MCF-7细胞增殖起到抑制作用,且呈浓度依赖性。     

银杏叶聚戊烯醇同系物体外抑制乳腺癌MCF-7细胞株增殖作用及机制研究

目的:研究银杏叶聚戊烯醇同系物体外抑制MCF-7细胞增殖的作用并初步探讨作用机制.方法:经制备反相高效液(RT-HPLC)获得银杏叶聚戊烯醇同系物,MTT法检测其对MCF-7细胞增殖的影响,选取抑制细胞增殖作用强的同系物P3,用流式细胞仪检测5,10,20 mg·L-1 P3对MCF-7细胞周期、细胞凋亡的影响.结果:经提取分离获得10个银杏叶聚戊烯醇同系物,依次命名为P1,P2,P3……P10,其中P3对MCF-7细胞株增殖的抑制作用最强,IC50为10.32 mg·L-1,其作用机制低浓度时以阻滞细胞周期于G2/M期为主,高浓度可诱导凋亡.结论:银杏叶聚戊烯醇同系物P3为银杏叶提取物抑制MCF-7增殖的活性成分,其作用机制与阻滞细胞周期,诱导细胞凋亡有关.     

Design, synthesis, and bioactivities of steroid-linked taxol analogues as potential targeted drugs for prostate and breast cancer

The female steroid hormone 3,17beta-estradiol (2) was selected as an agent to target taxol (1) to estrogen receptor (ER) positive breast cancer cells. Estradiol-taxol conjugates (ETC) were synthesized through linkages from the 11- or 16-position of estradiol to the 2'-, 7-, or 10-position of taxol. All conjugates were cytotoxic to the A2870 ovarian cancer cell line, although less so than taxol. The MCF-7 breast cancer cell line (ER-alpha positive) and MDA-MB-231 breast cancer cell line (ER-alpha negative) were also used to evaluate the selectivity and cytotoxicity of these conjugates. One conjugate showed some selectivity for ER positive cells, but it was less potent than taxol. Two ETC hemisuccinates were also prepared to improve the solubility of the conjugates. The corresponding Na and triethanolammonium salts were slightly more cytotoxic than the acid form but were much less cytotoxic than the corresponding ETC.     

消岩汤剂拆方配伍对MCF-7乳腺癌细胞生长及凋亡机制研究

[目的]观察消岩汤和各拆方组药物对MCF-7乳腺癌细胞增殖活性,促进凋亡的作用,与化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)联合应用的效果。[方法]消岩汤全方和根据功效拆分的清热解毒组、活血化瘀组、解毒祛瘀组(清热解毒组+活血化瘀组)、益气扶正组和全方组。以噻唑蓝法(MTT)检测MCF-7乳腺癌细胞的细胞增殖活性,与5-Fu化疗药物联合作用的效果,用Hoechst33258法检测细胞的凋亡情况。[结果]各组均有不同程度地抑制细胞活性和促进凋亡,清热解毒组优于全方组优于解毒祛瘀组优于活血化瘀组优于益气扶正组,与5-Fu化疗药物合用表现出协同和相加作用。[结论]消岩汤在体外实验中能够抑制MCF-7乳腺癌细胞生长,促进凋亡,与5-Fu化疗药物合用有一定的化疗增效作用,清热解毒组药物在抑瘤和增效作用方面,与全方接近,提示清热解毒组中药为体外实验中全方抗肿瘤作用及化疗增效作用的有效组分。     

SAHA��TRAIL����Ӧ�öԴƼ��������������ٰ�ϸ��MCF-7�������Ƶķ��ӻ���

??OBJECTIVE To study the effects of suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA) and TRAIL treatment on cell proliferation and apoptosis for ER positive breast cancer cell line MCF-7. METHODS Human breast cell lines (MCF-7) were evaluated for the expressions of cell viability,cell apoptosis and cell cycle by muse cell analyzer. The mRNA levels of related apoptotic factors in MCF-7 cells were detected by real time PCR and solid phase apoptosis antibody microarray. RESULTS After the combination with SAHA and TRAIL,the ability of cell proliferation and cell viability were depressed,and the cell apoptosis was induced. The cell cycle assay showed that the MCF-7 cells were arrested in G₀/G₁ phase with SAHA and TRAIL treatment. CONCLUSION The combinatorial treatment of SAHA and TRAIL has a significantly inhibitory effect on cell growths of ER positive breast cancer MCF-7 cell.     

MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖的敏感性研究

目的:采用MTT法检测多种肿瘤细胞对硒酸酯多糖(KSC)的敏感性。方法:以30、60、120mg/L3种不同浓度的KSC分别处理HepG-2、Bel-7402、MCF-7、SGC-7901、A5495种肿瘤细胞,采用MTT法检测KSC对5种肿瘤细胞的抑制率。结果:KSC对多种肿瘤细胞都有明显的抑制增殖作用,KSC120mg/L作用72h后,对上述5种细胞株的抑制率分别为69.31%、62.24%、53.29%、52.03%、33.62%。结论:KSC对多种肿瘤细胞都有抑制作用,尤其是对肝癌细胞的抑制作用最强,具有治疗肝癌潜在的应用价值。     

Photodynamic therapy of Pheophorbide a inhibits the proliferation of human breast tumour via both caspase-dependent and -independent apoptotic pathways in in vitro and in vivo models

Breast cancer is conventionally treated by surgery and radiotherapy, with adjuvant chemotherapy and hormonotherapy as supplementary treatments. However, such treatments are associated with adverse side effects and drug resistance. In this study, Pheophorbide a (Pa), a photosensitizer isolated from Scutelleria barbata, was analysed for its antiproliferative effect on human breast tumour cells. The IC (inhibitory concentration)(50) of the combined treatment of Pa and photodynamic therapy (Pa-PDT) on human breast tumour MCF-7 cells was 0.5 μm. Mechanistic studies in MCF-7 cells demonstrated that Pa was localized in the mitochondria, and reactive oxygen species were found to be released after Pa-PDT. Apoptosis was the major mechanism responsible for the tumour cell death, and mitochondrial membrane depolarization and cytochrome c release highlighted the role of mitochondria in the apoptotic mechanism. Up-regulation of tumour suppressor protein p53, cleavage of caspase-9 and poly (ADP-ribose) polymerase suggested that the caspase-dependent pathway was induced, while the release of apoptosis-inducing factors demonstrated that the apoptosis was also mediated by the caspase-independent mechanism. In vivo study using the mouse xenograft model showed a significant inhibition of MCF-7 tumour growth by Pa-PDT. Together, the results of this study provide a basis for understanding and developing Pa-PDT as a cure for breast cancer.     

七叶皂苷钠通过抑制AKT,ERK上游信号SRC活性诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

探讨七叶皂苷钠对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡诱导作用及其可能的作用机制。运用MTT法检测七叶皂苷钠对MCF-7细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜观察细胞形态学变化;DAPI染色后在荧光显微镜下检测细胞核变化;采用Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率;采用Western blotting检测凋亡相关蛋白(PARP,cleaved caspase-8,pro-caspase-3)和细胞存活相关信号分子(AKT,ERK)及其共同上游激酶SRC的磷酸化变化情况。结果显示,不同浓度七叶皂苷钠作用于乳腺癌MCF-7细胞后,以剂量依赖方式抑制MCF-7细胞增殖;诱导细胞凋亡(典型的凋亡形态学变化、细胞核改变和细胞凋亡率显著增加);细胞凋亡相关蛋白PARP切割增加,cleaved caspase-8表达增加,pro-caspase-3表达减少进一步验证了七叶皂苷钠的凋亡诱导作用;七叶皂苷钠显著抑制细胞存活相关信号分子(AKT,ERK)的磷酸化,其共同上游激酶SRC的活化亦显著下降。结果表明,七叶皂苷钠通过抑制SRC的活化,阻断信号向下游信号分子AKT,ERK的传递,抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖,诱导细胞凋亡。