针刺血清调控内质网应激反应对无镁诱导培养大鼠海马神经元惊厥性损伤的保护作用

目的:观察针刺血清对无镁诱导惊厥样放电海马神经元凋亡数及内质网应激伴侣葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)和半胱氨酸蛋白酶蛋白-12(Caspase-12)表达的影响,探讨针刺血清对海马神经元惊厥性损伤的保护机制。方法:SD大鼠腹腔注射戊四唑诱发急性惊厥后分为针刺组及对照组。针刺组取"百会""大椎"针刺,每日1次,共7d。末次针刺后,针刺组大鼠取血清作为针刺血清,对照组取血清作为非针刺血清。以无镁诱导惊厥样放电的原代培养胎鼠海马神经元为模型,根据对培养10d海马神经元的不同处理分为正常细胞外液组(简称正常组)、无镁细胞外液组(简称无镁组)、针刺血清组和非针刺血清组。正常组将无血清培养液换成细胞外液培养3h后换液培养,其他各组用无镁细胞外液培养3h后换液培养。4组分别于换液培养2、12、48h3个时间点采用TUNEL法和Western blot法分别检测海马神经元凋亡情况及GRP 78、CHOP和Caspase-12蛋白表达情况。结果:正常组仅见少量凋亡海马神经元;无镁组3个时间点凋亡海马神经元数均较正常组明显增加(P0.01);针刺血清组3个时间点凋亡海马神经元数与无镁组比较明显减少(P0.05,P0.01),与非针刺血清组12、48h比较凋亡海马神经元数明显减少(P0.01)。与正常组比较,无镁组3个时间点海马神经元CHOP和Caspase-12蛋白表达均明显增强(P0.05,P0.01),2h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达明显增强(P0.05);与无镁组比较,针刺血清组3个时间点神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P0.01,P0.05),12、48h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P0.05,P0.01),3个时间点神经元Caspase-12蛋白表达均显著减少(P0.05,P0.01);与非针刺血清组相比,针刺血清组2、12h时间点海马神经元GRP 78蛋白表达均明显增强(P0.01,P0.05),12、48h时间点海马神经元CHOP蛋白表达明显减少(P0.05),3个时间点海马神经元Caspase-12蛋白表达均明显减少(P0.01,P0.05)。结论:针刺血清能明显减少海马神经元凋亡数,上调GRP 78蛋白表达,下调CHOP和Caspase-12蛋白表达,发挥维持内质网稳定性的重要作用。     

针刺对惊厥性脑损伤大鼠海马神经元Caspase-12蛋白及内质网Ca2+表达的影响

目的:观察针刺对惊厥性脑损伤大鼠不同时点海马神经元内质网Ca²⁺表达、细胞凋亡和Caspase-12蛋白表达的影响,探讨针刺维持内质网钙稳态及抑制细胞凋亡级联反应的可能作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组、针刺组,每组36只。采用腹腔一次性注射惊厥剂量(50 mg/kg)戊四唑造成大鼠惊厥。针刺组于惊厥后即刻针刺“百会”“大椎”30 min。各组分别于惊厥发作后2、12、48 h采用TUNEL法检测海马神经元细胞凋亡情况;采用内质网Ca²⁺荧光探针技术检测大鼠海马神经元内质网Ca²⁺表达;采用免疫组织化学法观察各组大鼠海马组织中Caspase-12蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组2、12、48 h海马神经元凋亡细胞数明显增加(P<0.01),海马神经元内质网Ca²⁺表达降低(P<0.01),Caspase-12蛋白表达升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组在惊厥发作2、12、48 h海马神经元凋亡减轻,凋亡细胞数明显减少(P<0.05,P<0.01),...     

温脾通络开窍汤对老年性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA3区JNK蛋白表达的影响

目的:观察温脾通络开窍汤对老年性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA3区神经元JNK蛋白表达的影响。方法:将120只大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组及石杉碱甲组共6组,除假手术组外,其他组大鼠均在海马CA3区注射冈田酸诱导老年性痴呆模型,假手术组在海马CA3区注射等体积的10%二甲亚砜。观察大鼠的学习记忆能力及海马CA3区神经元JNK蛋白表达的变化。结果:①与假手术组比较,模型组大鼠在空间探索实验中跨越平台的次数明显减少(P0.01);与模型组比较,各用药组均能增加大鼠跨越平台的次数(P0.05或P0.01);与石杉碱甲组比较,中药低、中剂量组大鼠跨越平台的次数明显减少(P0.01),而中药高剂量组大鼠跨越平台的次数与石杉碱甲组无显著性差异(P0.05)。②与假手术组比较,模型组大鼠海马CA3区JNK蛋白阳性表达显著升高(P0.01);与模型组比较,各用药组大鼠海马CA3区JNK蛋白阳性表达均有显著下降(P0.01);各用药组中石杉碱甲组降低效果最为明显,优于中药中、低剂量组(P0.05),中药高剂量组与石杉碱甲组效果相当(P0.05)。结论:温脾通络开窍汤可以改善AD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与下调CA3区JNK蛋白表达有关。     

对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠海马CA3区神经元凋亡GRP78蛋白表达的影响

目的研究对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠海马CA3区神经元凋亡及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达的影响,从内质网应激(ERS)角度探讨其抗抑郁作用机制。方法将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、对药酸枣仁-合欢花组、盐酸文拉法辛组;采用孤养加慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立抑郁症大鼠模型,并用糖水消耗实验观察各组大鼠的行为学变化,用苏木素-伊红(HE)染色法观察海马CA3区神经细胞形态及数量。应用DNA原位末端缺口标记(TUNEL)法检测海马CA3区神经元凋亡情况,应用免疫组化法检测海马CA3区ERS通路的关键因子GRP78蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠糖水偏爱值下降(P 0.01),海马CA3区神经细胞数量减少(P 0.01)、凋亡细胞数和细胞凋亡率增加(P 0.01)、GRP78蛋白表达增加(P 0.01);与模型组比较,对药酸枣仁-合欢花组、盐酸文拉法辛组大鼠糖水偏爱值升高(P 0.05),海马CA3区神经细胞数量增加(P 0.05)、凋亡细胞数和细胞凋亡率降低(P 0.05或P 0.01)、GRP78蛋白表达增加(P 0.05)。结论对药酸枣仁-合欢花能显著改善抑郁模型大鼠的抑郁行为,具有抗抑郁功效,其机制可能与提高海马CA3区GRP78蛋白表达,抑制胱天蛋白酶-12(Caspase-12)表达,减缓ERS引起的细胞凋亡,维持内质网(ER)的稳定有关。     

参元丹对缺血再灌注心肌细胞内质网应激相关因子GRP78、CHOP表达的影响

目的:观察参元丹对缺血再灌注心肌细胞内质网应激相关因子Grp78、CHOP表达的影响。方法:离体培养新出生1~3 d大鼠心肌细胞,并分为正常组、模型组、参元丹组及空白血清组。应用三气培养箱制造缺血(2 h)/再灌注(4 h)模型。采用RT-PCR法测定内质网应激相关因子GRP-78、CHOP因子的表达。结果:模型组细胞内Grp78、CHOP表达均明显上升(P0.01)。与模型组比较10%参元丹组中,Grp78(P0.01)及CHOP(P0.05)均有明显下降,10%空白血清组Grp78、CHOP较模型组无明显变化。结论:参元丹可以通过减轻内质网应激减少心肌细胞的凋亡,保护心肌细胞。     

补气活血法联合生物反馈治疗排便推力不足型功能性排便障碍的疗效评价

目的研究对药酸枣仁-合欢花对抑郁模型大鼠海马CA3区神经元凋亡及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达的影响,从内质网应激(ERS)角度探讨其抗抑郁作用机制。方法将雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、模型组、对药酸枣仁-合欢花组、盐酸文拉法辛组;采用孤养加慢性不可预见性温和应激(CUMS)建立抑郁症大鼠模型,并用糖水消耗实验观察各组大鼠的行为学变化,用苏木素-伊红(HE)染色法观察海马CA3区神经细胞形态及数量。应用DNA原位末端缺口标记(TUNEL)法检测海马CA3区神经元凋亡情况,应用免疫组化法检测海马CA3区ERS通路的关键因子GRP78蛋白表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠糖水偏爱值下降(P 0.01),海马CA3区神经细胞数量减少(P 0.01)、凋亡细胞数和细胞凋亡率增加(P 0.01)、GRP78蛋白表达增加(P 0.01);与模型组比较,对药酸枣仁-合欢花组、盐酸文拉法辛组大鼠糖水偏爱值升高(P 0.05),海马CA3区神经细胞数量增加(P 0.05)、凋亡细胞数和细胞凋亡率降低(P 0.05或P 0.01)、GRP78蛋白表达增加(P 0.05)。结论对药酸枣仁-合欢花能显著改善抑郁模型大鼠的抑郁行为,具有抗抑郁功效,其机制可能与提高海马CA3区GRP78蛋白表达,抑制胱天蛋白酶-12(Caspase-12)表达,减缓ERS引起的细胞凋亡,维持内质网(ER)的稳定有关。     

阿尔茨海默病大鼠自噬相关蛋白Beclin-1和凋亡相关蛋白p53表达变化及电针的调控作用

目的观察电针对大鼠海马自噬相关蛋白Beclin-1和凋亡相关蛋白p53表达的影响,探讨电针治疗阿尔茨海默病(AD)的作用机制。方法将大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组和电针组。电针组取"百会"和"涌泉"进行电针治疗,每日1次,7 d为1个疗程,共治疗4个疗程。疗程结束后尼氏染色观察各组海马CA1区组织形态的变化并计数尼氏体阳性细胞,Western blot检测Beclin-1和p53蛋白的表达。结果模型组CA1区尼氏体阳性的细胞数目较正常组显著减少(P0.01),电针组锥体细胞和尼氏体表达较模型组明显增多(P0.05)。与正常组比较,模型组海马组织中Beclin-1蛋白表达降低、p53蛋白表达升高(P0.05);与模型组比较,电针组Beclin-1蛋白表达明显升高(P0.01),p53蛋白表达降低(P0.05)。结论电针治疗可对抗β-淀粉样蛋白诱导的神经元凋亡,改善AD海马组织形态变化。     

针刺对戊四唑诱发癫痫大鼠海马PI3K、Akt蛋白表达的影响

目的:观察针刺对戊四唑诱发癫痫大鼠海马神经元PI3K、Akt蛋白表达的影响。方法:SD大鼠60只随机分为5组(n=12):癫痫模型组、LY294002组、针刺治疗组、针刺+LY294002组、正常对照组。各组分别于癫痫发作后4h与24h两个时间段左心灌注固定取脑组织,免疫组化法测PI3K、Akt蛋白表达。结果:针刺+LY294002组和LY294002组两个时间段均未见明显PI3K和Akt蛋白表达;癫痫模型组可见PI3K和Akt蛋白阳性表达,其中癫痫发作4h表达较24h明显(P0.01);针刺组PI3K和Akt蛋白阳性表达量明显增多,其中4h时间点蛋白阳性表达量增加更为明显(与24h时间点比较,P0.05)。结论:针刺具有明显调节PI3K和Akt蛋白表达,其作用与细胞内PI3K/Akt信号转导通路有关。     

通络益智散对脑缺血再灌注损伤大鼠海马亚区c-Fos蛋白表达的影响

目的:探讨通络益智散对脑缺血损伤大鼠海马亚区c-Fos蛋白表达的影响。方法:动物随机分为模型组、通络益智散组和尼莫地平组,尼莫地平组、通络益智散组分别灌胃给予尼莫地平0.001 g·kg-1,通络益智散1.57 g·kg-1,模型组给予蒸馏水。预防性灌胃给药7 d后,采用双侧颈总动脉缺血再灌注法制造大鼠脑缺血损伤模型,缺血再灌后2 h、4 h分别免疫组化法检测各组大鼠海马亚区c-Fos蛋白表达情况,并进行组间均数比较。结果:各组海马CA1、CA2、CA3、齿状回、下托区均可见c-Fos的阳性表达。与模型组比较,通络益智散、尼莫地平组海马各亚区c-Fos蛋白表达数量在造模后2h、4h明显降低(P0.01)。通络益智散组与尼莫地平组比较无明显差异(P0.05)。各组c-Fos蛋白数量在脑缺血损伤后2 h均达到高峰,4 h出现下降,对比有明显差异(P0.01)。结论:通络益智散能够抑制脑缺血损伤c-Fos蛋白表达,具有神经保护作用。     

助脾散精方对IR模型大鼠胰岛素信号通路相关 蛋白及胰岛素降解酶的影响

目的:观察助脾散精方(ZPSJ)对胰岛抵抗(IR)模型大鼠胰岛素信号通路相关蛋白胰岛素受体(InsR)、胰岛素受体底物-1(IRS-1)及胰岛素降解酶(IDE)的影响.方法:SD大鼠尾iv链脲佐菌素(STZ)加高糖高脂饮食复制IR模型,分为正常组、模型组、罗格列酮组(罗格列酮7.2×10-4g·kg-1·d-1)和ZPSJ治疗组(含生药6.41 g·kg-1·d-1).结果:IR模型组大鼠海马CA1区InsR,IRS-1阳性表达的神经元明显增多,ZPSJ治疗组,InsR,IRS-1表达明显减少(P＜0.01).IR模型组大鼠海马CA1区IDE阳性表达的神经元明显减少,ZPSJ治疗组IDE表达明显增加,与模型组比较有显著性差异(P＜0.01).结论:ZPSJ方能减少IR模型大鼠海马组织InsR,IRS-1的表达,同时增加海马组织IDE的表达.     

电针预处理对全脑缺血再灌注损伤大鼠海马葡萄糖调节蛋白78和生长停滞及DNA损伤基因153表达的影响

目的:探讨电针预处理对短暂性全脑缺血再灌注大鼠海马葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)和生长停滞及DNA损伤基因153(GADD 153)表达的影响。方法:SD大鼠随机分为假手术组、缺血组和电针预处理组,每组48只。采用四血管阻断法建立全脑缺血再灌注模型。电针预处理组于模型建立前5d电针刺激"大椎""百会"两穴,30min/d。分别于再灌注6、12、24、48h处死动物。Western blot方法检测海马GRP 78和GADD 153表达;HE染色法计数存活神经元数目;TUNEL法测定凋亡神经元数目。结果:与假手术组相比,缺血组再灌注12、24、48h海马存活神经元计数减少,各时点凋亡神经元数目增多(P0.05),缺血组在再灌注6、12、24、48h海马GRP 78和GADD 153表达上调(P0.05);与缺血组比较,电针预处理组再灌注24、48h时海马存活神经元计数升高,在12、24、48h凋亡神经元数目减少(P0.05),再灌注各时点GRP 78表达上调,GADD 153表达下调(P0.05)。结论:电针预处理对缺血再灌注大鼠有显著的脑保护作用,这可能与其上调脑缺血区GRP 78表达,下调GADD 153的表达,从而减轻内质网应激反应有关。     

通督调神针刺对脑缺血再灌注大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α和C反应蛋白的动态影响

目的:观察通督调神针刺法对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)的动态影响,探索针刺治疗的最佳时间点。方法:将72只成年Wistar雄性大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组和针刺组,各组按缺血再灌注6h、24h、48h各分为3个亚组,每组6只。采用线栓法复制局灶性脑缺血模型。针刺组于相应时间点针刺"百会""风府""大椎",治疗30min。运用双抗体夹心ABC-ELISA法检测大鼠手术侧脑组织中TNF-α、CRP的水平。结果:模型组神经功能评分较空白组和假手术组明显升高(P0.01);针刺组较模型组神经功能评分明显下降(P0.01);再灌注6h针刺组较针刺组其它时间降低更明显(P0.01)。模型组脑组织中TNF-α、CRP的水平与空白组和假手术组相比较均显著上调(P0.01),其中,缺血再灌注6h脑组织中TNF-α、CRP的含量达到峰值;针刺组脑组织中TNF-α、CRP的水平与模型组相应时点比较均明显下调(P0.01)。结论:通督调神针刺可以显著减轻脑缺血再灌注模型大鼠神经功能缺损情况,降低其脑组织中TNF-α和CRP的水平可能是作用机制之一。在缺血再灌注6h进行针刺为最佳治疗时间点。     

针刺对脑缺血小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 :观察针刺对脑缺血小鼠脑组织胶质纤维蛋白的影响。方法 :选用NIH雄性小鼠3 8只 ,随机分为正常组 (n =10 )、假手术组 (n =10 )、模型组 (n =8)、针刺组 (n =10 )。针刺“百会”、“神庭”、“率谷”、“脑户”穴 ,1天 1次 ,共 10次。用免疫组化法观测胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。结果 :模型组海马结构中GFAP免疫组化染色阳性反应普遍增强 ,正常组和假手术组的阳性反应一致 ,而针刺组的阳性反应介于模型和正常鼠之间。结论 :针刺对小鼠学习记忆能力的改变与使GFAP阳性反应数减少有关     

电针对戊四唑点燃型癫痫大鼠脑电及海马神经元内Ca~(2+)含量的影响

目的:探讨电针抗癫痫的可能机制。方法:SD大鼠20只随机分为正常组、模型组、尼莫地平组、电针组。除正常组外,其它3组均制作戊四唑慢性点燃癫痫模型。电针组电针"百会"大椎",尼莫地平组腹腔注射尼莫地平。记录各组大鼠治疗后痫样波发作潜伏期及痫波密度,使用激光共聚焦显微镜观察大鼠海马神经元内Ca2+的荧光强度。结果:电针组脑电痫样波发作潜伏期较模型组明显延长(P<0.05),痫波密度与模型组比较明显变小(P<0.05)。模型组大鼠海马神经元Ca2+荧光强度较正常组明显升高(P<0.01),电针组Ca2+荧光强度较模型组明显降低(P<0.05),尼莫地平组Ca2+荧光强度较模型组明显降低(P<0.01)。结论:电针可调节戊四唑点燃型癫痫大鼠脑电及海马内Ca2+含量,电针的抗癫痫作用可能与之有关。     

磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信号转导通路与针刺保护癫痫继发海马神经元损伤的关系

目的:观察针刺对戊四唑(PTZ)诱发癫痫大鼠海马神经元损伤的保护作用及该保护作用与磷脂酰肌醇-3-激酶(PI 3K)/蛋白激酶B(Akt)信号转导通路的关系。方法:SD大鼠120只随机分为5组:正常组、PTZ组、LY 294002组、针刺+LY 294002组、针刺组,每组24只。针刺组、针刺+LY 294002组针刺"百会"大椎"30min,共治疗5次。正常组、PTZ组、针刺组先侧脑室注射二甲基亚砜5μL,LY 294002组、针刺+LY 294002组侧脑室注射LY 294002(5μL),30min后正常组腹腔注射生理盐水2mL,其余各组腹腔注射PTZ(50mg/kg),于注射后4h与24h取脑组织。分别用HE染色法于光镜下观察海马结构改变,用电镜观察海马超微结构。结果:癫痫发作后4h光镜、电镜均可见大鼠海马神经元损伤,24h后损伤进一步加重。LY 294002组大鼠海马神经元损伤明显加重。针刺+LY 294002组大鼠海马神经元损伤明显,与LY294002组比较未见明显好转。针刺组大鼠海马神经元损伤明显减轻。结论:针刺具有明显保护癫痫继发脑神经元损伤作用,其保护作用与细胞内PI 3K/Akt信号转导通路有关。     

针刺对甲基苯丙胺染毒大鼠海马区多巴胺mRNA、乙酰胆碱酯酶mRNA表达的影响

目的:观察针刺对甲基苯丙胺(methamphetamine,MA)染毒大鼠海马区单胺类递质及胆碱酯酶的影响,探讨针刺对MA染毒大鼠神经毒性改善作用的相关机制。方法:SD大鼠随机分为正常组、模型组和针刺组,每组10只。采用腹腔注射MA复制染毒大鼠模型。针刺组大鼠针刺"百会""大椎",每次30min,每天1次,治疗10d。运用生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组大鼠海马区5-羟色胺(5-hydorxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)、乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)、乙酰胆碱酯酶(acetylcholine esterase,AChE)的含量;荧光定量PCR法测定海马区5-HT mRNA、DA mRNA、AChE mRNA的表达水平。结果:模型组5-HT、DA、ACh、AChE含量及5-HT mRNA、DA mRNA、AChE mRNA的表达水平均较正常组增高(P0.01,P0.05),针刺组治疗后同模型组相比上述指标均明显降低(P0.01,P0.05)。结论:针刺"百会""大椎"可有效调节MA染毒大鼠海马区神经递质水平,改善MA染毒后造成的脑5-HT、DA、AChE异常。     

针刺对骨骼肌钝挫伤模型大鼠肝细胞生长因子表达的影响

目的:观察针刺对大鼠骨骼肌钝挫伤后修复过程中肝细胞生长因子(HGF)蛋白表达的影响,探讨针刺治疗骨骼肌损伤的作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、针刺治疗组、针刺对照组,后3组每组再分为即刻、24h、48h3个亚组,每组各8只。采用重物自由落体打击法造成急性骨骼肌钝挫伤模型,模型组和针刺治疗组进行造模。针刺治疗组和针刺对照组采用毫针透刺损伤腓肠肌全肌束的方法干预,并于针刺后的即刻、24h、48h分别进行腓肠肌损伤部位取材。模型组于相应时间点取材,空白组同48h组时间点取材。HE染色光镜观察大鼠腓肠肌形态学改变,Western blot方法检测各组HGF蛋白表达量。结果:HE染色光镜下,模型组及针刺治疗组各时间点可见不同程度的肌纤维损害,针刺治疗组肌纤维损害程度较模型组轻,以针刺后24h和48h显著;针刺对照组各时间点仅出现轻度损伤,48h后已基本恢复正常。与空白组相比,模型组各时间点腓肠肌HGF蛋白表达均显著升高(P0.05,P0.01),针刺对照48h组HGF蛋白表达显著升高(P0.05);与模型组各时间点相比,针刺治疗24h、48h组HGF蛋白表达显著下降(P0.01,P0.05);模型组、针刺治疗组和针刺对照组HGF蛋白表达随时间的推移呈现上升趋势。结论:骨骼肌钝挫伤可使大鼠骨骼肌HGF蛋白表达升高;针刺干预可下调急性期骨骼肌损伤局部HGF蛋白表达。     

通督调神灸法抗轻度认知功能障碍大鼠海马β-淀粉样蛋白过度表达的机制研究

目的:观察通督调神灸对轻度认知障碍(MCI)大鼠行为学、海马β-淀粉样蛋白(Aβ)表达的影响,探讨通督调神灸抗Aβ过度表达的作用机制。方法:SD大鼠随机分为正常组12只、模型组36只,采用D-半乳糖、亚硝酸钠联合腹腔注射复制MCI大鼠模型。造模成功大鼠随机分为空模组、艾灸组、西药组,每组12只。艾灸组大鼠隔附子饼灸"百会",温和灸"天门""大椎",每次20min,1次/d,治疗2周;西药组大鼠用尼莫地平灌胃,每日3次,共2周。Morris水迷宫测试进行行为学检测,用免疫组化技术检测海马Aβ表达水平,反转录PCR法检测海马早老素-1(PS-1)mRNA、膜酸性蛋白酶-1(BACE-1)mRNA的表达水平,酶联免疫吸附法检测血清白介素(IL)-6含量。结果:空模组大鼠Morris水迷宫逃避潜伏期较正常组明显延长(P0.01),穿越目标平台次数减少(P0.01),跨越目标象限占整个游泳时间百分比明显降低(P0.01),与正常组相比,空模组海马中Aβ、PS-1mRNA、BACE-1mRNA表达及血清IL-6水平明显增高(P0.01)。与空模组相比,艾灸组、西药组大鼠海马组织Aβ、PS-1mRNA、BACE-1mRNA表达及血清IL-6水平显著下降(P0.01)。与西药组相比,艾灸组Aβ、PS-1 mRNA、BACE-1 mRNA表达及血清IL-6水平降低(P0.05)。结论:通督调神灸可能通过降低脑内PS-1mRNA、BACE-1mRNA表达水平,进而阻断Aβ的产生,并通过降低血清IL-6水平,进而阻断Aβ过度表达引发的炎性反应级联效应,以达到治疗MCI的目的。     

电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠骨髓及外周血CD34~+内皮祖细胞的影响

目的:观察电针对局灶脑缺血/再灌注大鼠骨髓及外周血CD 34+内皮祖细胞(EPCs)数量、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)表达的影响,探讨电针动员骨髓CD 34+EPCs入血,促进脑缺血修复的机制。方法:雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组。采用线栓法制备局灶脑缺血/再灌注大鼠模型,局灶脑缺血2h后将各组分为再灌注12、24、48h3个时间点,每个时间点12只大鼠。取大鼠"百会"穴及左侧"四关"穴("合谷"/"太冲")为电针穴位,刺激时间30min,每日1次。采用神经行为学评分法评价大鼠神经功能缺损情况,流式细胞术检测骨髓及外周血CD 34+EPCs数量,Western blot法检测骨髓p-AKT蛋白的表达。结果:模型组再灌注后各时间点均有不同程度的神经功能缺损,电针可明显改善大鼠再灌注后48h神经功能评分(P0.05)。与假手术组比较,模型组各时间点骨髓及外周血CD 34+EPCs数量及骨髓p-AKT蛋白的表达明显增多(P0.01,P0.05);与模型组比较,电针组再灌注后各时间点外周血CD 34+EPCs数量及骨髓p-AKT蛋白的表达亦明显增多(P0.05,P0.01),同时电针组再灌注后12、24h骨髓CD 34+EPCs数量相对模型组明显上调(P0.05,P0.01)。结论:电针可上调局灶脑缺血/再灌注大鼠骨髓及外周血CD 34+EPCs数量,促进骨髓CD 34+EPCs动员入血,其作用可能与电针进一步激活骨髓磷脂酰肌醇-3-激酶/AKT通路相关。