降脂宁抗动脉粥样硬化作用的效应机制研究

目的：观察中药降脂宁对栽脂蛋白E基因缺陷（ApoE-/-）小鼠动脉粥样硬化的影响及其作用机制。方法：将ApoE-/-小鼠随机分为4组：降脂宁大剂量组、降脂宁小剂量组、阿托伐他汀阳性药物组压模型组。给药第12周后全部处死，主动脉根部切片，HE染色，观察动脉斑决形成程度，测定斑块面积与管腔面积之比。酶法测定血清总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）含量，ELISA法测定血清中脂联素（Adiponectin）含量。结果：给药12周后，主动脉HE染色可见降脂宁大、小两个剂量组均可显著抑制ApoE-/-小鼠主动脉根部动脉粥样硬化斑块的形成，斑块面彬管腔面积均小于模型对照组（P〈0．001）。此外。与模型组比较，降脂宁大剂量可降低ApoE-/-鼠血清TC水平（P〈0．01）；降脂宁小、大剂量组均可降低血清TC水平。此外，与模型组比较，降脂宁大、小剂量组均可升高ApoE-/-小鼠血清脂联素含量（P〈0．001）。结论：降脂宁具有较好的抑制动脉粥样硬化形成的作用，与其降血脂及升高脂联素水平的作用有关。     

降脂灵抗动脉粥样硬化作用机制的实验研究

目的:观察中药降脂灵对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法:将55只6周龄ApoE-/-小鼠随机分为5组:降脂灵大剂量组(2700mg/kg.d)、降脂灵中剂量组(1350mg/kg.d)、降脂灵小剂量组(675mg/kg.d)、阿托伐他汀阳性药物组(15mg/kg.d)及空白对照组。给药第8周后全部处死,主动脉根部切片、HE染色,观察动脉斑块形成程度,测定斑块面积与管腔面积之比。酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三脂(TG)含量,化学法测定血清抗氧化指标一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)。结果:给药8周后,主动脉HE染色可见降脂灵大、中、小3个剂量组均可显著抑制ApoE-/-小鼠主动脉根部动脉粥样硬化斑块的形成,斑块面积/管腔面积比值均小于空白对照组(分别为0.0148±0.0178,0.0287±0.0301,0.0366±0.0280,P<0.001)。此外,与空白对照组比较,降脂灵大、中剂量组ApoE-/-小鼠血清TC、TG水平显著降低(分别为TC:501.88mg/dl±42.2mg/dl,293.60mg/d±163.30mg/dl,328.73mg/dl±138.82mg/dl,P<0.01;TG:197.00mg/dl±39.65mg/dl,152.05mg/dl±45.06mg/dl,127.86mg/dl±35.13mg/dl,P<0.01);降脂灵大、中、小3个剂量组均可升高血清中NO含量(分别为:11.34umol/L±4.57umol/L,42.40umol/L±11.94umol/L,51.82umol/L±17.68umol/L,48.57umol/L±12.52umol/L,P<0.001),并降低MDA含量(25.3nmol/L±4.82nmol/L,5.28nmol/L±3.25nmol/L,5.26nmol/L±2.78nmol/L,5.71nmol/L±1.18nmol/L,P<0.001)。结论:降脂灵具有较好的抑制动脉粥样硬化形成的作用,与其降血脂及提高机体抗氧化能力的作用有关。     

解毒活血法对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块PPAR-γ和炎性因子的影响

目的:研究解毒活血法对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块PPAR-γ(过氧化物酶体增殖物激活受体)和血清炎性因子的影响。方法:将ApoE-/-小鼠分为模型组、辛伐他汀组、罗格列酮组、黄连解毒汤组、血府逐瘀组、黄连解毒汤加血府逐瘀汤组、四妙勇安汤大剂量组、四妙勇安汤小剂量组共8组,采用免疫组化技术和原位杂交技术法分别检测小鼠动脉粥样硬化斑块内PPAR-γ蛋白和mRNA表达;血清Hs-CRP、IL-1测定采用酶联免疫吸附(双抗体夹心)法。结果:四妙勇安汤与模型组比较,可以显著提高动脉粥样硬化斑块内PPAR-γ的mRNA表达,其作用强度约为罗格列酮的96%,PPAR-γ蛋白表达阳性面积与模型组比较无显著性差异,但有明显增加趋势,与辛伐他汀作用强度类似;四妙勇安汤可以显著降低ApoE-/-小鼠血清hsCRP水平,但对血清IL-1水平无明显影响。结论:四妙勇安汤具有抗动脉粥样硬化作用,其机制可能是通过提高ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化斑块PPAR-γ的mRNA表达、降低血清HsCRP水平而抑制炎症反应,从而抑制动脉粥样硬化斑块的炎症反应,达到稳定斑块、防治动脉粥样硬化疾病的作用。     

冠心康对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块及MCP-1、NF-κB表达的影响

目的 观察中药复方冠心康对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE-/-)动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块病理形态及病灶处单核细胞趋化蛋白l(MCP-1)、核因子-κB(NF-κB)的影响.方法 50 只6 周龄ApoE-/-小鼠予高脂饲料喂养建立实验性动脉粥样硬化小鼠模型.10 只6 周龄C57BL/6J 小鼠为正常组,给予普通饲料.至第12 周龄时,将ApoE-/-小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组及冠心康高(3.456 g/mL)、中(1.728 g/mL)、低剂量组(0.864 g/mL),继续给予高脂饲料,每日灌胃给药1 次.连续灌胃8 周后,取主动脉进行苏木素-伊红染色观察病理形态改变,免疫组织化学法检测斑块处MCP-1、NF-κB 的表达含量.结果 与模型组比较,各给药组管腔面积(LA)大、血管内膜厚度(IMT)薄、斑块面积(PA)小、纤维肌性成分(FS)少、脂质中心面积(CA)小、最小纤维帽厚度(FCT)薄、斑块面积与管腔面积之比(PA/LA)小、脂质中心面积与斑块面积之比(CA/PA)小、脂质中心面积与纤维肌性成分之比(CA/FS)大,MCP-1 和NF-κB 平均光密度值小(P <0.05).冠心康高剂量组作用明显优于辛伐他汀组(P <0.05).冠心康低、中、高剂量组之间比较不存在量效关系,但以冠心康高剂量组作用最为明显.结论 冠心康对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化有一定的干预作用,可减少MCP-1、NF-κB 的表达,延缓动脉粥样硬化的进展.     

基于ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型的四妙勇安汤活性部位配伍规律研究

目的:观察四妙勇安汤活性部位配伍方(N8,N16,N18)对载脂蛋白E基因缺陷(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响。方法:48只8周龄ApoE-/-小鼠随机分为6组:四妙勇安汤活性部位配伍方N8、N16、N18(1 g/kg.d)组、辛伐他汀组(15 mg/kg.d)、罗格列酮组(10 mg/kg.d)及模型组,各组同时饲以高脂饲料,对照组采用C57小鼠8只,给药第16周后,采用小动物成像系统观察主动脉弓动脉粥样斑块形成程度;主动脉根部切片、HE染色,测定斑块面积与管腔面积比值(PA/LA);酶法测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)含量。结果:与模型组比较,N16组可显著抑制ApoE-/-小鼠主动脉弓粥样硬化斑块的形成,明显减少PA/LA值;与模型组比较,N8、N16、N18各组均有降低ApoE-/-小鼠血清TC、TG、LDL水平的作用。结论:四妙勇安汤活性部位配伍方具有较好的抑制动脉粥样硬化形成的作用。     

降脂抗氧化合剂对ApoE-/-小鼠5-脂氧化酶通路表达的影响

目的:探讨降脂抗氧化合剂对ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)5-脂氧化酶(5-LO)通路表达的影响。方法:采用高脂饲料连续喂养12周ApoE-/-小鼠,建立动脉粥样硬化动物模型,将已经形成动脉粥样硬化的ApoE-/-小鼠分为模型对照组、降脂抗氧化合剂低剂量组、降脂抗氧化合剂高剂量组、阳性药(辛伐他汀)对照组,每组10只。同时选用同遗传背景正常C57BL/6J小鼠10只,作为正常对照组,予饲喂普通饲料。阳性药(辛伐他汀)对照组以0.05 g·kg-1·d-1ig,降脂抗氧化合剂低、高剂量组分别含生药17.41,69.66 g·kg-1·d-1ig,正常对照组及模型对照组分别给予同体积的蒸馏水,连续ig 28 d后,心脏取血用于酶联免疫测定,取腹主动脉,采用HE染色对腹主动脉的形态学改变进行观察;提取腹主动脉RNA,进行RT-PCR检测5-LO基因的表达量;同时采用ELISA方法检测血清中白三烯B4(LTB4)及白三烯D4(LTD4)的蛋白含量。结果:与正常组比较,模型组的动脉硬化病变、组织5-LO、血清LTB4及LTD4水平都有明显加重或升高(P<0.01)。与模型组比较,高剂量的降脂抗氧化合剂较低剂量的降脂抗氧化合剂可以更显著下调5-LO的基因表达量(P<0.01),病理切片HE染色显示给药降脂抗氧化合剂后,高剂量给药组血管的组织形态较模型组有明显改变,和阳性药组结果类似,显示出药物对动脉粥样硬化具有较好的治疗效果;血清ELISA法结果显示高剂量的降脂抗氧化合剂可以显著降低血液LTB4及LTD4水平,与模型组间比较差异显著(P<0.01)。结论:降脂抗氧化合剂可降低组织5-LO的水平,改善动脉粥样硬化血管组织形态,减少脂质沉积,还可以降低血清LTB4及LTD4水平,改善炎症,达到治疗动脉粥样硬化的目的。     

冠心康对载脂蛋白E基因敲除动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块及MCP-1、NF-B表达的影响

目的观察中药复方冠心康对载脂蛋白E（ApoE）基因敲除（ApoE-/-）动脉粥样硬化小鼠主动脉粥样斑块病理形态及病灶处单核细胞趋化蛋白l（MCP-1）、核因子-κB（NF-κB）的影响。方法 50只6周龄ApoE-/-小鼠予高脂饲料喂养建立实验性动脉粥样硬化小鼠模型。10只6周龄C57BL/6J小鼠为正常组,给予普通饲料。至第12周龄时,将ApoE-/-小鼠随机分为模型组、辛伐他汀组及冠心康高（3.456 g/mL）、中（1.728 g/mL）、低剂量组（0.864 g/mL）,继续给予高脂饲料,每日灌胃给药1次。连续灌胃8周后,取主动脉进行苏木素-伊红染色观察病理形态改变,免疫组织化学法检测斑块处MCP-1、NF-κB的表达含量。结果与模型组比较,各给药组管腔面积（LA）大、血管内膜厚度（IMT）薄、斑块面积（PA）小、纤维肌性成分（FS）少、脂质中心面积（CA）小、最小纤维帽厚度（FCT）薄、斑块面积与管腔面积之比（PA/LA）小、脂质中心面积与斑块面积之比（CA/PA）小、脂质中心面积与纤维肌性成分之比（CA/FS）大,MCP-1和NF-κB平均光密度值小（P〈0.05）。冠心康高剂量组作用明显优于辛伐他汀组（P〈0.05）。冠心康低、中、高剂量组之间比较不存在量效关系,但以冠心康高剂量组作用最为明显。结论冠心康对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化有一定的干预作用,可减少MCP-1、NF-κB的表达,延缓动脉粥样硬化的进展。     

铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂及TNF-α,IL-6的影响

目的:考察铁皮石斛对ApoE-/-小鼠血脂、炎症相关蛋白的影响,探讨其抗动脉粥样硬化的作用机制.方法:将ApoE-/-小鼠以高脂饲喂养4w构建AS小鼠模型,分别用辛伐他汀(3 mg·kg-1)、铁皮石斛(1.5,3 g·kg-1)对小鼠灌胃给药,8w后处死,酶法检测血清血脂;ELISA检测血清中TNF-α,IL-6表达;苏丹Ⅳ染色观察主动脉瓣处斑块形成情况;HE和油红0染色观察小鼠主动脉管腔内粥样斑块;免疫组化法检测TNF-α和IL-6在主动脉壁的表达.结果:铁皮石斛可显著降低小鼠血清中TG,TCHOL,LDL-C水平,下调血清中TNF-α,IL-6表达;可明显减少ApoE-/-小鼠主动瓣处粥样斑块的面积和ApoE-/-小鼠主动脉管腔内粥样斑块的面积,可明显降低TNF-α,IL-6在主动脉内表达.结论:铁皮石斛能有效降低ApoE-/-小鼠血清中有关脂质含量,降低血清和主动脉内TNF-α,iL-6的表达,降低炎症反应的发生,缓解动脉粥样硬化损伤.     

调脂通脉颗粒对ApoE基因敲除小鼠血脂及sICAM-1、sVCAM-1的影响

目的:探讨调脂通脉颗粒对载脂蛋白E(ApoE)基因敲除小鼠血脂、动脉粥样斑块及黏附分子的影响。方法:6周龄雄性ApoE-/-小鼠随机分为模型组、血脂康组、调脂通脉颗粒低中高剂量组,C57BL/6小鼠作为对照组,每组8只,高脂饮食结合药物喂养12周,血清检测观察血脂变化,主动脉弓根部石蜡切片苏木素伊红(HE)及马松(Masson)染色观察组织形态学变化,酶联免疫法(ELISA)检测血清可溶性细胞间黏附分子(sICAM-1)、可溶性血管细胞间黏附分子(sVCAM-1)表达。结果:血脂检测表明与正常对照组比较,调脂通脉颗粒各组、血脂康组、模型组小鼠血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)水平均显著升高(P<0.01),模型组、调脂通脉颗粒低剂量组小鼠血清甘油三酯(TG)水平明显升高(P<0.01);HE、Masson染色表明对照组主动脉内膜光滑未见粥样斑块形成;模型组主动脉内膜增厚伴易损斑块形成;血脂康组及调脂通脉颗粒高剂量组内膜增厚伴稳定斑块形成。ELISA法检测表明与正常组比较,调脂通脉颗粒各组、血脂康组、模型组小鼠血清sICAM-1、sVCAM-1水平显著升高(P<0.05),与模型组比较,调脂通脉颗粒高剂量组小鼠血清sICAM-1、sVCAM-1水平显著降低(P<0.05)。结论:调脂通脉颗粒可在一定程度上降低血清TG及sICAM-1、sVCAM-1水平,从而减缓AS病变。     

重组水蛭素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化斑块的影响及机制

目的探讨重组水蛭素对载脂蛋白E基因敲除(Apo E-/-)小鼠动脉粥样硬化斑块的影响及机制。方法高脂饲喂7~8周龄Apo E-/-小鼠24只,按体重、窝别进行随机配对分组,分为药物组及模型组,每组12只,以12只高脂饲喂的7~8周龄C57BL/6J小鼠为正常对照组。药物组于10周龄起隔日给予重组水蛭素0.25 mg/kg腹腔注射,连续注射5周;模型组给予等量生理盐水注射;正常对照组不进行任何处理,均给予高脂饮食饲喂20周龄时处死。检测血清TC、TG、LDL-C、HDL-C、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、E-选择素(E-selectin)、白细胞介素-6(IL-6)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)水平;HE染色及形态计量学测定主动脉根部斑块面积/管腔面积及细胞外脂质面积/斑块面积;Western blot测定主动脉钙库操纵性钙通道信号分子,包括基质交感分子1(STIM1)、Orai1蛋白、瞬时受体电位通道1(TRPC1)变化。结果 20周龄时模型组小鼠主动脉血管壁脂质斑块形成。与正常对照组比较,模型组小鼠TC、TG、LDL-C明显升高(P0.01),血清炎症因子hs-CRP、IL-6、E-selectin、MMP-2水平亦明显升高(P0.01,P0.05);小鼠主动脉STIM1、Orai1及TRPC1蛋白表达增多(P0.01);与模型组比较,药物组小鼠斑块面积/管腔面积及细胞外脂质面积/斑块面积明显下降(P0.05,P0.01);血清TC、LDL-C、hs-CRP、E-selction、IL-6、MMP-2水平亦降低(P0.05,P0.01);主动脉根部STIM1、TRPC1、Orai1蛋白表达下调(P0.05,P0.01)。结论水蛭素能改善Apo E-/-小鼠的血脂、内皮功能,下调STIM1、Orai1、TRPC1的表达,并通过影响上述环节进而延缓动脉粥样硬化的发生与发展。     

基于Wnt/β-catenin通路探讨通心络胶囊对ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠炎症水平的影响

目的 探究通心络胶囊对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化形成的影响及其通过Wnt/β-catenin信号通路产生的作用机制。方法 将24只ApoE-/-小鼠随机分为正常饮食组（n=6）及高脂饮食组（n=18）。高脂饮食组喂养8周后，随机分为阿托伐他汀组（n=6）、通心络胶囊组（n=6）、模型组（n=6），并分别给予阿托伐他汀4.8 mg/kg、通心络胶囊超微粉1.5 g/kg以及同体积的生理盐水，每日1次，持续8周。末次给药后禁食12 h，收集各组小鼠主动脉组织进行苏木素-伊红（HE）及油红O染色，观察主动脉斑块情况；收集小鼠血清，采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量；并通过蛋白免疫印迹法（Western blotting）和实时荧光定量聚合物酶链式反应（Real-time PCR）检测主动脉组织中Wnt1、Wnt3a、β-catenin蛋白及基因表达量的变化。结果 与正常组相比较，模型组小鼠的斑块面积明显增加，血清中的炎症因子TNF-α和IL-6含量增加。与模型组相比较，通心络胶囊能够明显降低ApoE-/-小鼠粥样硬化斑块面...     

散结通脉方对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化主动脉钙库操纵性钙通道信号分子及血清炎症因子的影响

目的研究散结通脉方对ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化模型血清中炎症因子含量及主动脉根部Orai1、STIM1蛋白表达的影响。方法采用高脂饲料(2%胆固醇、0.4%胆酸盐、10%脂肪、69.6%普通饲料)喂养ApoE~(-/-)小鼠12周建立动脉粥样硬化斑块模型,造模同时灌胃给予供试药品混悬液治疗。给药周期结束,检测各组动物血清TC、TG、HDL-cho、LDL-cho含量及TC/HDL-cho比值;血清hs-CRP、E-selectin、IL-6含量;主动脉根部STIM1、Orai1蛋白表达。结果散结通脉方13.5、6.75和3.40 g/kg 3个给药组具有明显降低模型动物血清TC、TG和LDL-cho的作用,与动脉粥样硬化模型组比较,分别为P0.01或P0.05;13.5 g/kg剂量组血清E-selectin、IL-6水平明显低于模型组,具有统计学差异(P0.05);13.5、6.75 g/kg 2个剂量组主动脉根部Orai1、STIM1蛋白表达及血清中hs-CRP水平均明显低于模型组,具有统计学差异(P0.01或P0.05);3.40 g/kg剂量组主动脉根部Orai1蛋白表达明显低于模型组,具有统计学差异(P0.05)。结论散结通脉方可以通过下调钙离子信号蛋白的表达抑制血管平滑肌细胞增殖迁移,并通过发挥调脂、抗炎等多种效应,对动脉粥样硬化发生发展过程中多因素多环节起到调节作用,进而延缓甚或逆转不稳定斑块的病理进程。     

降脂消斑片对动脉粥样硬化兔VEGF与主动脉病理变化的影响

目的:观察降脂消斑片对动脉粥样硬化兔VEGF与主动脉病理变化的影响。方法:运用高脂高胆固醇饲料喂养12周以造成日本大耳白兔动脉粥样硬化模型,用降脂消斑片灌胃给药治疗4周,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测血清中VEGF的含量,同时观察主动脉及粥样硬化斑块病理学改变。结果:与模型组比较,降脂消斑片能明显降低血清中VEGF的含量,差异有统计学意义(P0.01);病理学结果显示,降脂消斑片干预后,主动脉粥样斑块面积减少、斑块厚度变薄,斑块较非干预组稳定。结论:降脂消斑片可以降低兔AS模型血清中VEGF的含量,减轻主动脉粥样硬化斑块及血管内膜的脂质浸润程度,稳定动脉粥样硬化斑块。     

定心方下调ApoE基因敲除小鼠内脏脂肪素表达的研究

目的:观察定心方对ApoE基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)主动脉粥样硬化病变的影响,并初步探讨血清内脏脂肪素(visfatin)在其中的作用。方法:将40只8周龄ApoE-/-小鼠随机分为5组。模型组灌服等剂量生理盐水;定心方低、中、高剂量组灌服定心方药液9.295g/(kg.d)、18.59g/(kg.d)、37.18g/(kg.d);辛伐他汀组灌服辛伐他汀5mg/(kg.d)。另设相同基因背景和周龄的C57BL/6J小鼠为空白对照组。12周后测定小鼠体质量、血清生化指标及visfatin、hs-CRP、TNF-a水平;对主动脉粥样硬化病变进行病理学检查。结果:与模型组相比,定心方低、中、高剂量组小鼠体重增加值明显降低(P<0.05),定心方高剂量组血脂水平及血清visfatin、hs-CRP、TNF-α含量显著低于模型组(P<0.01)。定心方低、中、高组斑块面积分别较模型组减少39.3%、75.0%、86.5%(P<0.01)。结论:定心方可降低ApoE-/-小鼠血脂水平,抑制动脉粥样硬化的形成,其作用机制可能与降低血清visfatin水平有关。     

何首乌总苷对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块部位核转录因子-κB蛋白表达的影响

目的通过复制载脂蛋白E基因缺陷小鼠模型,研究何首乌总苷对载脂蛋白E基因缺陷小鼠动脉粥样硬化斑块部位核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达的影响。方法将24只8周龄ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠随机分为模型组、何首乌总苷高、低剂量组和普罗布考组各6只。4组均给予0.15%胆固醇高脂饲料喂养建立动脉粥样硬化动物模型。同时,模型组给予0.9%氯化钠注射液0.3mL/d,何首乌总苷高、低剂量组分别给予何首乌总苷150、25mg/(kg.d)(0.3mL/d),普罗布考组给予普罗布考0.3mL/d(与高脂饲料的质量比为1∶100)。饲养16周后进行指标检测。观察比较各组小鼠主动脉斑块部位蛋白表达的免疫组织化学染色,分析核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达。结果与模型组比较,何首乌总苷高、低剂量组和普罗布考组均可明显下调ApoE-/-小鼠主动脉斑块NF-κB蛋白表达(P0.05,P0.01)。结论何首乌总苷通过影响NF-κB等炎性因子的表达,抑制动脉粥样硬化斑块的胶原纤维降解,从而稳定斑块,预防斑块的破裂,避免临床不良事件的发生。     

补肾降脂方通过PPARγ-LXRα-ABCA1通路干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的效应机制

目的探讨补肾降脂方通过PPARγ-LXRα-ABCA1通路干预ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化(AS)的效应机制。方法采用高脂饮食喂饲ApoE~(-/-)小鼠复制AS模型,随机分为ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食喂饲组(模型组)、ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食喂饲+补肾降脂方组(补肾组)、ApoE~(-/-)小鼠+高脂饮食喂饲+阿托伐他汀组(他汀组),同品系、同周龄雄性C57BL/6小鼠为正常对照组(正常组),每组25只。各组给予相应干预12周。HE、油红O染色法分别检测小鼠主动脉窦、肝脏组织病理形态及脂质蓄积,Filipin染色法检测小鼠主动脉窦游离胆固醇;ELISA法检测小鼠外周血血清脂质(TC、TG、LDL-C、HDL-C)含量;Western blot法检测小鼠主动脉、肝脏组织PPARγ、LXRα及ABCA1蛋白表达。结果高脂饮食喂饲的ApoE~(-/-)小鼠呈典型的AS病变,主动脉窦可见大面积AS斑块及红染脂质,游离胆固醇增多;肝脏组织可见肝细胞结构紊乱,红染脂质蓄积;血清TC、LDL-C含量升高,HDL-C含量降低;主动脉及肝脏组织PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达降低。与模型组比较,补肾组小鼠主动脉窦AS斑块面积、红染脂质、游离胆固醇均减少;肝脏组织肝细胞结构大部分清晰可见,红染脂质减少;血清TC、LDL-C含量降低;主动脉及肝脏组织PPARγ、LXRα、ABCA1蛋白表达上调。结论补肾降脂方可能通过调控PPARγ-LXRα-ABCA1通路进而有效干预治疗动脉粥样硬化。     

基于TRPA1调控泡沫细胞胆固醇代谢作用探讨枳实薤白桂枝汤治疗AS的作用机制

目的：基于主动脉瞬时受体电位通道锚蛋白1(TRPA1)调控泡沫细胞胆固醇代谢作用探讨枳实薤白桂枝汤对动脉粥样硬化(AS)小鼠疾病进展的影响与作用机制。方法：采用高脂饲料在载脂蛋白E敲除(ApoE-/-)小鼠上建立AS模型,随机分为枳实薤白桂枝汤低、中、高剂量组(2.97、5.94、11.88 g·kg^-1)与辛伐他汀组(0.002 g·kg^-1),每组织喂食高脂饲料同时给药,C57BL/6J小鼠作为正常组使用普通饲料喂养,每组10只。上述过程结束后,取小鼠主动脉与血清。采用苏木素-伊红(HE)染色法观察主动脉根部病理变化;大体油红观察主动脉脂质斑块情况;检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,并用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-18水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)与免疫组化分析TRPA1、三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体A1(ABCA1)、ATP结合盒转运体G1(ABCG1)及甘露糖受体(CD206)表达情况...     

血竭提取物对ApoE基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块稳定性及清道夫受体CD36表达的影响

目的观察血竭提取物对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块成分、血脂及清道夫受体CD36 mRNA表达的影响,探讨血竭提取物稳定斑块的作用及可能机制。方法33只6～8周龄ApoE-/-小鼠予高脂饮食喂养13周后,随机分为3组:模型组、血竭提取物(450.5 mg/kg)组、辛伐他汀(9.01 mg/kg)组(阳性对照组),每组11只。继续高脂喂养并给予相应药物治疗13周后,检测血脂,取主动脉根部4个切面,分别行HE染色和Movat染色,采用易损指数[(细胞外脂质成分 泡沫细胞)/(平滑肌细胞 胶原成分)]综合评价药物对小鼠主动脉斑块稳定性的影响。实时荧光定量PCR法检测主动脉内CD36 mRNA的表达。结果给药13周后,血竭提取物组和辛伐他汀组的斑块易损指数较模型组均有不同程度的降低(P<0.01),两组间比较无显著差异(P>0.05)。血竭提取物组血清总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平与模型组比较显著降低(P<0.05、0.01),而主动脉内CD36 mRNA的表达与模型组比较亦显著降低(P<0.01)。结论血竭提取物可通过改善斑块内部成分来稳定易损斑块,其机制与调节血脂、抑制清道夫受体CD36 mRNA的表达有关。     

丹红注射液对动脉粥样硬化小鼠主动脉斑块的干预作用及基因组DNA甲基化水平和甲基化转移酶的影响

目的:研究丹红注射液对高脂喂养的ApoE基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化(As)斑块的干预作用及基因组DNA甲基化水平和DNA甲基化转移酶(DNMTs)的影响。方法:将40只8周龄雄性ApoE~(-/-)小鼠高脂饲料喂养6周后随机分为模型组、阿托伐他汀钙片(商品名:立普妥)(阳性对照组)、丹红注射液低剂量组和高剂量组(n=10),给予药物腹腔注射6周后。检测其血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)水平。行HE染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块面积。采用高效液相色谱(HPLC)法检测小鼠血清基因组甲基化水平,采用ELISA法检测各组小鼠血清DNMTs水平。免疫组化染色,图像分析测量小鼠主动脉As斑块内DNMT1的表达。结果:与模型组相比,丹红注射液高剂量和低剂量组小鼠血清TG水平明显降低(P0.01)、丹红注射液高剂量组LDL-C水平明显降低(P0.01),丹红注射液低剂量组HDL-C水平明显升高(P0.05),丹红注射液高剂量组小鼠动脉粥样硬化指数显著降低(P0.01)。丹红注射液高剂量和低剂量组小鼠血清基因组甲基化和DNMTs水平显著降低(P0.01)。丹红注射液与模型组相比,丹红注射液组As小鼠的校正后主动脉As斑块面积显著降低,以及斑块内DNMT1表达显著降低(P0.01)。结论:丹红注射液可降低As小鼠血脂水平,减少As斑块面积,其机制可能与降低As小鼠血清基因组甲基化水平和整体DNMTs水平和抑制As小鼠主动脉斑块DNMT1表达有关。     

冠心平对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化氧化与抗氧化指标的影响

目的观察冠心平对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型血清氧化与抗氧化指标超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(AOC)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平的调节作用。方法将ApoE-/-小鼠模型分别给予普通饲料、模型组高脂饲料、阿托伐他汀组(6.67 mg/kg)、苯磺酸氨氯地平组(1.67mg/kg)、冠心平低剂量组(0.75 g/kg)、高剂量组(1.5 g/kg)。用药3个月后,观察不同组别小鼠血清SOD、AOC、MDA、GSH、ox-LDL的变化。结果冠心平能调节ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型血清SOD、AOC、MDA、GSH、oxLDL的水平。结论冠心平具有升高动脉粥样硬化的ApoE-/-小鼠血清SOD、AOC、GSH和降低MDA、ox-LDL水平作用,推测其具有抗动脉粥样硬化的功效。