人细胞色素p450 IA2基因的构建及其功能检测──该基因在啮齿类细胞中代谢

本文首先构建了含人类细胞色素ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ的ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２的真核表达载体，并分别将其转染到Ｖ７９细胞和原代大鼠肝上皮细胞中．Ｎｏｒｔｈｃｒｎ杂交和免疫组化实验显示，Ｖ７９转染细胞中有人ｐ４５０ＩＡ２的ＲＮＡ和蛋白水平的表达。细胞毒实验和ＨＧＰＲＴ位点突变率检测结果证明，外源性ｐ４５０ＩＡ２基因可在Ｖ７９细胞中代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１．转染有ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２质粒的原代大鼠肝细胞可代谢活化５ｎｇ／ｍｌ的黄曲霉毒素Ｂ１．本研究说明了人ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ在ＭＭＬＶ的５′ＬＴＲ系统驱动下，可在体外啮齿类细胞中代谢活化黄曲霉毒素Ｂ１．它为ＡＦＢ１致癌机制的研究提供了一个新的、更为有效的途径。     

EB病毒诱发人胚鼻咽上皮细胞c—myc活化和p53的改变

ＥＢ病毒诱发人胚鼻咽上皮细胞ｃ－ｍｙｃ活化和ｐ５３的改变孙宁陈小毅吴枫郭忠民沈淑静关键词ＥＢ病毒鼻咽上皮细胞基因，ｃ－ｍｙｃ基因，ｐ５３中图号Ｒ７３９．６３已证明鼻咽癌发生与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）关系密切〔１〕，而某些癌基因如ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ－２...     

人细胞色素p450IA2基因的构建及其功能检测：——该基因在啮齿类细胞中代谢活

本文首先构建了含人类细胞色素ｐ４５０ＩＡ２ｃＤＮＡ的ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２的真核表达载体，并分别将其转染到Ｖ７９细胞和原代大鼠肝上皮细胞中，Ｎｏｒｔｈｃｎ杂交和免疫组化实验显示，Ｖ７９转染细胞中有人ｐ４５０ＩＡ２的ＲＮＡ和蛋白水平的表达。细胞毒实验和ＨＧＰＲＴ位点突变率检测结果证明，外源性ｐ４５０ＩＡ２基因可在Ｖ７９细胞中代 谢活化黄曲霉毒素Ｂ１。转染有ｐＺｉｐ－ｐ４５０ＩＡ２质粒的原代大鼠肝细     

生长因子对人卵巢癌HO—8910细胞中基因表达的影响

为了解人卵巢癌ＨＯ－８９１０培养细胞体外受表皮生长因子（ＥＧＦ）或转化生长因子－ｂｅｔａｌ（ＴＧＦβ１）作用后的生长调控机制，对细胞中原癌基因、生长因子／受体基因ｍＲＮＡ的表达动态进行了相对定量分析。结果表明：ＴＧＦβ１能明显抑制ＨＯ－８９１０细胞ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ２、ＴＧＦ－β１及ＥＧＦＲ基因的表达。ＥＧＦ能显著增强ＥＧＦＲ基因的表达，同时对ｃ－ｍｙｃ及ｃ－ｅｒｂＢ２的转录亦有一定的促进作     

生长因子对人卵巢癌HO－8910细胞中基因表达的影响

为了解人卵巢癌ＨＯ－８９１０培养细胞体外受表皮生长因子（ＥＧＦ）或转化生长因子－ｂｅｔａ１（ＴＧＦβ１）作用后的生长调控机制，对细胞中原癌基因、生长因子／受体基因ｍＲＮＡ的表达动态进行了相对定量分析。结果表明：ＴＧＦβ１能明显抑制ＨＯ－８９１０细胞ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｅｒｂＢ２、ＴＧＦ－β１及ＥＧＦＲ基因的表达。ＥＧＦ能显著增强ＥＧＦＲ基因的表达，同时对ｃ－ｍｙｃ及ｃ－ｅｒｂＢ２的转录亦有一定的促进作用，但对ＴＧＦβ１的表达有明显的抑制效应。ＥＧＦ及ＴＧＦβ１对细胞中基因表达的调节具有不同的时间效应，且这些基因表达的改变相互之间存在一定的相关性。实验结果在分子水平上佐证了体外接受生长因子调控信号后，细胞生长状态改变的观察结果     

维甲酸对喉癌细胞株Hep－2的生长及癌基因的抑制作用

为了探索维甲酸用于喉癌保守治疗的可能性，我们研究了它在体外对人喉癌细胞株Ｈｅｐ－２的生长抑制作用及癌基因的变化。结果表明，维甲酸浓度为４～８μｍｏｌ／Ｌ时抑制率可达３５．４％，并使Ｈｅｐ－２细胞的软琼脂克隆形成率降至对照的１９．５％；核酸探针杂交表明，细胞经１０μｍｏｌ／Ｌ维甲酸处理３天后Ｃ－ｍｙｃ平均拷贝数由９．２降至１．２，Ｃ－ｍｙｃ及ｃ－Ｈａ－ｒａｓ的ＲＮＡ水平分别降至对照的１５．３％和５０．５％；ｃ－ｅｒｂＢ－２基因处理后无显著变化。上述结果说明，维甲酸在体外对喉癌细胞株Ｈｅｐ－２的生长有明显抑制作用且与Ｃ－ｍｙｃ及ｃ－Ｈａ－ｒａｓ基因的调控有重要关系。     

重组腺病毒介导反义c-myc基因对人肝癌细胞系的治疗作用

目的：探讨重组腺病毒介导反义ｃ－ｍｙｃ基因（Ａｄ－ＡＳｍｙｃ）治疗人肝癌细胞的作用。方法：观察Ａｄ－ＡＳｍｙｃ对人肝癌细胞系的转导效率,通过细胞生长曲线、克隆形成实验、ＤＮＡ片段化分析、ＲＴ－ＰＣＲ、裸鼠皮下移植瘤治疗实验,分析Ａｄ－ＡＳｍｙｃ对人肝癌细胞系Ｂｅｌ－７４０２、ＱＳＧ－７７０１、ＳＭＭＣ－７７２１和ＨＣＣ－９２０４细胞生长和ｃ－ｍｙｃ基因表达及裸鼠肿瘤生长的抑制作用。结果：Ａｄ－ＡＳｍｙｃ可高效转导人肝癌细胞系,抑制细胞生长;转染细胞克隆形成能力降低,克隆成活率为对照组的５３．９％～６９．１％,ｃ－ｍｙｃ基因表达下降;Ａｄ－ＡＳｍｙｃ处理肝癌细胞,ＤＮＡ凝胶电泳出现明显的梯形条带,瘤内注射Ａｄ－ＡＳｍｙｃ可抑制裸鼠皮下移植瘤生长。结论：重组腺病毒介导的反义ｃ－ｍｙｃ基因转移,有可能成为肝癌基因治疗     

原癌基因c－myc在睾丸肿瘤中扩增与表达分析

目的研究ｃ－ｍｙｃ基因与睾丸肿瘤的关系。方法应用核酸分子杂交方法检测２７例睾丸肿瘤（精原细胞瘤２３例，胚胎性瘤２例，畸胎瘤和淋巴瘤各１例）组织中ｃ－ｍｙｃ基因的扩散，并用免疫组织化学的亲和素－生物素－过氧化物酶复合物（ＡＢＣ）法检测ｃ－ｍｙｃ蛋白表达水平。结果２７例睾丸肿瘤中ｃ－ｍｙｃ基因扩增２例（７．４％），与肿瘤病理分级、临床分期无关；ｃ－ｍｙｃ蛋白阳性表达１２例（４４．１％），而正常睾丸组织和肿瘤旁组织为阴性，且与分化程度和病期早晚有关。结论睾丸肿瘤中ｃ－ｍｙｃ基因扩增不显著，但ｃ－ｍｙｃ蛋白表达与肿瘤恶性程度有明显相关性，可能成为睾丸肿瘤预后的指标。     

肝细胞肝癌及癌周组织中P~（53）、C－myc基因产物表达的研究

应用免疫组化ＡＢＣ法，对肝癌高发区６２例肝细胞癌组织及癌周肝组织进行了Ｐ５３和Ｃ－ｍｙｃ基因产物的标记。结果显示，肝细胞肝癌组织中Ｐ５３与Ｃ－ｍｙｃ基因蛋白均过量表达，阳性率分别为７４．１９％与６７．７４％，均高于有关文献报道的检测率。癌周肝组织中Ｐ５３与Ｃ－ｍｙｃ阳性检出率均低于癌组织。ＨＢｓＡｇ阳性病例、癌周伴肝硬变病例Ｐ５３与Ｃ－ｍｙｃ基因异常表达率均显著高于相应的阴性病例。本文随访病例中，术后肿瘤复发组Ｐ５３与Ｃ－ｍｙｃ基因表达的阳性率极明显地高于未复发尚生存组。文中还讨论了Ｐ５３和Ｃ－ｍｙｃ基因产物的表达在肝细胞癌发生中的可能作用     

c—myc基因在乳腺癌,膀胱癌和肾癌组织中的扩增研究

目的研究乳腺癌、膀胱癌和肾癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因扩增情况。方法采用聚合酶链式反应（ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃ－ｔｉｏｎ,ＰＣＲ）,对４８例恶性肿瘤ｃ－ｍｙｃ基因扩增进行研究,通过激光密度扫描仪对琼脂糖凝胶ＥＢ染色底片进行积分光密度分析。结果正常组织无ｃ－ｍｙｃ扩增,ｃ－ｍｙｃ与ｎ－ｍｙｃ＋１－ｍｙｃ比值９５％可信区间为０．０８６９－０．６２５７,乳腺癌组织ｃ－ｍｙｃ基因扩增阳性率为     

食管癌分子生物学研究

食管癌的发生是多基因、多步骤的过程，其中ｃ－ｅｒｂＢ－２、ｍｙｃ以及抑癌基因的改变较为多见提示食管癌具有独特的发病机制。Ｐ５３、ＥＧＦＲ、ｃ０ｅｒｂＢ、ｉｎｔ０２、ｂｓｔ－１等分子生物学标志对于食管癌的早期诊断、预后判断和治疗选择具有重要的辅助价值。     

多重癌基因改变在良,恶性卵巢等妇科肿瘤的比较研究

应用Ｓｏｔｈｅｒｎ印迹杂交技术，在１８例良，恶性卵巢疾病患者的瘤组织和同源正常组织中，比较研究了Ｃ－ｍｙｃ，Ｃ－Ｈａ－ｒａｓＩ和Ｃ－ｅｒｂＢ－２癌基因的改变。在１１例卵巢癌患者中４例出现Ｃ－ｍｙｃ基因的扩增，重排或等位基因缺失，这些患者的肿瘤均已有浸润与转移，在有Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因印迹杂交资料的６例卵巢癌患者中，２例晚期患者出现重排，其中１例伴有扩增，这是首次在人卵巢癌报告Ｃ－ｅｒｂＢ－２基因的     

人乙型肝炎病毒与黄曲霉毒素B1诱发树肝癌过程中肝组织p21表达与肝癌发生的关系

人乙型肝炎病毒与黄曲霉毒素Ｂ１诱发树肝癌过程中肝组织ｐ２１表达与肝癌发生的关系班克臣苏建家杨春黄国华覃柳亮李瑗罗小玲段小娴严瑞琪我们通过动态观察人乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）和（或）黄曲霉毒素Ｂ１（ＡＦＢ１）诱发树原发性肝癌（ＰＨＣ）过程中肝组织ｒａｓ...     

逆转录病毒介导人细胞色素p450IA＿2cDNA在V79细胞中稳定表达及其代谢活化黄曲霉毒素B＿1

逆转录病毒介导人细胞色素ｐ４５０ＩＡ＿２ｃＤＮＡ在Ｖ７９细胞中稳定表达及其代谢活化黄曲霉毒素Ｂ＿１袁宝珠，孙宗棠目前认为黄曲霉毒素Ｂ１（ＡｆｌａｔｏｘｉｎＢ１，ＡＦＢ１）是肝细胞致癌剂，它经肝细胞内微粒体细胞色素ｐ４５０代谢活化成最终致癌剂。为了加强...     

胃粘膜病变中某些相关癌基因结构与表达异常的研究

胃癌的发生是多基因变化、多阶段的过程，近年来与胃癌相关的活化癌基因不断被揭示。本文综述了胃癌及胃良性病变中ｒａｓ，ｃ－ｍｅｔ，ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｅｒｂＢ－２，Ｈｓｔ－１／Ｉｍｔ－２，ｐ５３基因结构与功能的改变及其转化细胞的机制。探讨胃癌前病变基因异常，可提高早期胃癌分子病理学诊断水平，对估计胃癌前病变转归，指导治疗具有实际意义。     

细胞凋亡过程中c—fos,p53和c—myc基因的表达

目的：本文主要研究细胞凋亡研究中ｃ－ｆｏｓ，ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ等基因的表达，方法：经８－Ｂｒ－ｃＡＭＰ诱导人食管癌Ｅｃａ－１０９细胞凋亡，应用原位杂交技术对ｃ－ｆｏｓｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因的表达进行检测，结果：经过诱导的试验组和不经诱导的对照组ｃ－ｆｏｓｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因的表达差异有显著性（Ｐ〈０．００１）。结论：提示这些基因在细胞凋亡的发生发展过程中起着重要的作用。     

人乳腺癌c—myc基因扩增与年龄和转移能力相关性探讨

用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ分析法检测了２５例乳腺癌组织中ｃ－ｍｙｃ基因的拷贝数及多态性，发现其中１２例（４８％）有ｃ－ｍｙｃ基因的扩增，长度分别为１３ｋｂ和２３ｋｂ。高龄患者中（≥４５岁），ｃ－ｍｙｃ扩增的阳性率（１１／１６，６８％）高于成年患者（＜４５岁）（１／９，１０％，Ｐ＜０．０５），同时证实，腋窝淋巴结转移出现ｃ－ｍｙｃ扩增的比例（１２／１７，７０％）明显高于无腋窝淋巴结转移者（１／８，１２％，Ｐ＜０．０５）。结果表明，ｃ－ｍｙｃ基因扩增与乳腺癌腋窝淋巴结转移及高龄状态发病有密切关系。我们认为，ｃ－ｍｙｃ经扩增方式激活在更年期女性乳腺癌发生过程中可能起着重要的作用。     

p53和c—myc异常表达与膀胱癌多药耐药性

为探讨ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ基因异常表达与膀胱癌多药耐药性（ＭＤＲ）的关系，应用ＡＢＣ免疫组织化学方法检测６７例膀胱癌癌细胞中ｐ５３和ｃ－ｍｙｃ的表达产物及多药耐药基因（ｍｄｒ－１）产物Ｐ－ｇｐ。结果显示ｐ５３突变蛋白蓄积的膀胱癌中Ｐ－ｇｐ阳性表达率９２．３％；ｐ５３阴性者Ｐ－ｇｐ阳性率为３６．６％。Ｐ－ｇｐ表达与ｐ５３突变蛋白蓄积呈显著正相关（ｒ＝０．６４，Ｐ＜０．０５）；而ｃ－ｍｙｃ和ｍｄｒ－１的表达无明显相关。提示：ｐ５３异常表达可增加ｍｄｒ－１基因的表达，使膀胱癌细胞获得ＭＤＲ表型     

以人类成纤维细胞体外转化体系为模型研究环境致癌多步骤机制

实验使用的人成纤维细胞谱系ＭＳＵ－１包括由ｖ－ｍｙｃ转染正常二倍体人成纤维细胞及随后自发遗传改变而形成的有不同程度生长优势的３个连续细胞株，这些衍生细菌株可能代表着由正常细胞向恶性细胞多步骤进展过程中不同的癌前阶段。使用致癌物诱发恶性转化以鉴别其不同类型细胞的反应，从而建立人类成纤维细胞肿瘤进展的体外模型。结果ＭＳＵ－１．１细胞 接触ＢＰＤＥ和１ＣＲ－１９１后形成转化灶，ＭＳＵ－１．２细胞经＾６０     

转化生长因子β1正反义基因对人肺巨细胞癌细胞体内外增殖的影响

探讨人转化生长因子β１（ＴＧＦβ１）正反义基因对人肺巨细胞癌细胞（ＰＬＡ－８０１Ｄ）增殖的影响及调控。方法通过基因转染方法,将ＴＧＦβ１正、反义基因分别导入ＰＬＡ－８０１Ｄ细胞,观察转染和未转染细胞体内外增殖变化、ｎｍ２３基因和ｃ－ｍｙｃ基因表达以及细胞凋亡特征。结果与未转染细胞比较,正义ＴＧＦβ１基因转染细胞培养上清中ＴＧＦβ１活性增加,体外生长速度减慢,软琼脂细胞培养集落形成能力降低,裸鼠体内成瘤率下降约４７％,肿瘤的转移受到抑制。其机制可能与正义ＴＧＦβ１基因转染细胞ｎｍ２３基因表达增加,ｃ－ｍｙｃ基因表达减少以及诱发细胞凋亡有关。而反义ＴＧＦβ１基因转染细胞则出现相反结果。结论ＴＧＦβ１对ＰＬＡ－８０１Ｄ细胞的体内外生长具有负调控作用