离体人肠道菌群对柚皮苷的代谢动力学分析

目的:研究人肠道菌群对柚皮苷的代谢程度与速度,为该成分的新药开发提供参考。方法:采集健康志愿者新鲜粪便制备肠道菌群混悬液,与柚皮苷在厌氧环境下孵育,运用HPLC监测柚皮苷浓度变化,HPLC-MS鉴定代谢产物结构。柚皮苷HPLC色谱条件为检测波长288 nm,流动相甲醇-0.1%磷酸溶液梯度洗脱。结果:柚皮苷与人肠道菌群共同孵育15 min后,柚皮苷色谱峰后面可见1个代谢产物;孵育至120 min时,柚皮苷代谢率100%。经HPLC-MS鉴定代谢产物为柚皮素。柚皮苷代谢过程符合非线性动力学过程。HPLC监测发现柚皮素可被进一步代谢,导致柚皮素峰面积降低。结论:柚皮苷可被人肠道菌群代谢,代谢速度快,代谢产物主要为柚皮素,可能存在柚皮苷的二级代谢产物。     

大鼠灌胃毛橘红醇提物血浆中柚皮苷、柚皮素及其代谢产物液质分析

目的:分析大鼠灌胃毛橘红醇提物后血浆中柚皮苷、柚皮素及其代谢产物。方法:健康雄性SD大鼠按50 g.kg-1剂量经口给予毛橘红醇提物,1.0 h后采集眼眶静脉血液制备血浆,采用UPLC-Q-TOF的MSE功能与M etabolynxTM软件联合的方法分析。结果:在大鼠血浆中检测到柚皮苷(M1)、柚皮素(M2)、柚皮苷5-O-葡萄糖醛酸苷(M3)、柚皮苷4′-O-葡萄糖醛酸苷(M4)、柚皮素葡萄糖醛酸苷(M5)、柚皮苷4′-O-硫酸酯(M6)、羟基化柚皮素甲醚(M7)、柚皮素葡萄糖醛酸基和硫酸酯基共价结合物(M8)、羟基化柚皮素葡萄糖醛酸苷(M9)。其中M3,M4,M6为首次报道的柚皮苷代谢物,M7,M9为首次报道的柚皮素代谢物。结论:柚皮苷、柚皮素在大鼠体内以葡萄糖醛酸化、硫酸化的形式被代谢,柚皮素还以氧甲基化、羟化葡萄糖醛酸化的形式被代谢。     

柚皮中柚皮苷的乙醇提取工艺研究

目的 探讨柚皮中柚皮苷的乙醇提取最佳工艺条件。方法 运用正交试验法考察乙醇浓度，提取温度，提取时间和乙醇用量对提取率的影响，采用两步结晶法对提取物中的柚皮苷进行精制。结果 柚皮中柚皮苷的乙醇提取最佳工艺条件为25倍原料重的70%乙醇，60℃条件下保温浸提1h；两步结晶法所得柚皮苷精制品的纯度为90.01%。结论 采用本实验所确定的提取及精制方法可使柚皮中柚皮苷得到有效提取和分离。     

UPLC测定肝微粒体中柚皮苷和柚皮素含量

目的:建立UPLC测定大鼠肝微粒体中柚皮苷和柚皮素含量的方法,并初步考察二者于不同时间点的代谢情况.方法:采用UPLC色谱系统,ACQUITY BEH C18色谱柱(3.0 mm×100mm,1.7 μm),流动相甲醇-0.1％乙酸水溶液梯度洗脱,流速0.5 mL·min-1,柱温30℃,检测波长283,289 nm,内标为槲皮素,进样量3 μL.结果:柚皮苷及柚皮素均与槲皮素分离良好且无内源性干扰.生物样品中柚皮苷和柚皮素的线性范围分别为3.814 ～ 38.143(r=0.9992),3.586 ～ 35.857mg·L-1(r＝0.9996);柚皮苷的方法回收率95.43％ ～97.95％,绝对回收率97.33％ ～ 98.18％;柚皮素的方法回收率95.27％～99.31％,绝对回收率97.71％ ～99.73％;柚皮素在体外肝微粒体中的Ⅰ相代谢较柚皮苷显著.结论:该方法快速、灵敏、准确,可用于大鼠肝微粒中柚皮苷和柚皮素的含量测定.     

化州柚不同栽培品种总黄酮及柚皮苷含量的比较研究

目的通过对化州柚不同栽培品种总黄酮和柚皮苷的含量考察,分析比较不同品种间的质量差异,为进一步筛选优良品种,实现该药材资源的合理应用和规范化种植奠定坚实基础。方法以柚皮苷为对照品,利用紫外分光光度法测定总黄酮含量,HPLC法测定柚皮苷含量。结果大茶岭和凤尾中总黄酮分别为19.24%,18.06%;柚皮苷的含量分别为11.72%,12.38%,均明显高于其他栽培品种。结论不同栽培品种的化州柚中总黄酮和柚皮苷的含量均不相同,大茶岭和凤尾这两个品种的品质可能较其他品种好。     

D 101型大孔吸附树脂对柚皮中柚皮苷的富集研究

目的:建立D 101型大孔吸附树脂富集纯化柚皮中柚皮苷的工艺.方法:以柚皮苷作为考察指标,对溶液的pH值、盐离子浓度、吸附时间、动态吸附因素进行研究.结果:D 101型大孔吸附树脂对柚皮苷最佳纯化工艺为溶液pH4,吸附时间1h,流速2BV·h-1,90%乙醇7BV洗脱.结论:该方法简单、可行,能够用来富集纯化柚皮中柚皮苷.     

枳壳中柚皮苷提取工艺的研究

目的:研究枳壳中柚皮苷的提取工艺。方法:采用高效液相色谱法测定柚皮苷的含量,以柚皮苷含量为评价指标,以正交实验设计优选枳最佳提取工艺。结果:枳壳中柚皮苷的最佳提取条件为:用10倍量的90%乙醇提取3次,每次1 h。结论:该方法简单,数据可靠,可作为枳壳中柚皮苷提取的最佳工艺。     

柚皮苷脂质体制备工艺研究

柚皮苷是芸香科植物枳实(Aurantii Fructus Immaturus)的主要活性成分之一。柚皮苷具有对抗自由基的抗氧化作用,抗炎、抗过敏、调节血糖,降低血脂,预防血栓形成等作用,药理作用极其广泛。本课题首先建立了柚皮苷的分析方法,采用HPLC法对枳实中黄酮类成分柚皮苷进行含量测定,经方法学考察,建立了柚皮苷含量测定方法,并研究以卵磷脂等为载体材料制备柚皮苷脂质体,探索出一种较稳定的、包封率较高的柚皮苷脂质体的制备方法。     

从化州柚中提取的柚皮苷的杂质研究(英文)

目的:研究从化州柚中提取的柚皮苷中的杂质。方法:采用HPLC-PDA/ESI-MS/MS法,通过波谱分析鉴定化合物结构。采用加校正因子的主成分自身对照法对主要杂质进行含量测定。结果:柚皮苷样品中主要杂质为野漆树苷和新北美圣草苷,二者与柚皮苷的校正因子分别为1.82和1.02。对6批样品进行测定,野漆树苷的含量为0.742%～0.926%,新北美圣草苷的含量为0.335%～0.464%,总杂质含量小于1.5%。结论:该检测方法快速、准确,柚皮苷中杂质种类和含量稳定,为柚皮苷应用的安全性提供理论基础。     

化州柚幼果生长过程中柚皮苷含量的动态变化研究

目的:研究不同直径大小的化州柚幼果中活性成分柚皮苷含量的变化。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为Welch Materials Column XB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),柱温30℃;以甲醇-醋酸-水(35∶4∶61)为流动相,流速1.0 mL/min;检测波长为283 nm。结果:随着化州柚幼果直径的增大,其柚皮苷百分含量呈下降趋势。结论:本研究为化州柚的合理采收和用药提供了依据。     

新橙皮苷对柚皮苷增溶作用及其机制的初步考察

目的 初步考察新橙皮苷增溶柚皮苷的作用机制.方法 基于柚皮苷在单一成分下(结晶粉末和水煎物)及新橙皮苷存在下溶解性的差异,对上述不同状态下的柚皮苷红外光谱及其微观外貌进行对比考察,探讨新橙皮苷对柚皮苷的增溶机制.结果 新橙皮苷存在下,柚皮苷在水中的溶解度远高于柚皮苷单一成分(结晶粉末和水煎物),其红外光谱和微观外貌相对...     

柚皮苷及其磷脂复合物促进成骨细胞活性和小肠段吸收比较

目的:考察柚皮苷与磷脂形成复合物后与柚皮苷在成骨细胞活性和小肠段吸收的差异。方法:采用体外培养法从乳鼠中分离出成骨细胞,然后用不同浓度的柚皮苷、柚皮苷磷脂复合物作用于成骨细胞,使用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色分析、ALP含量测定来观察其对成骨细胞增殖和分化功能的影响;通过大鼠在体肠回流实验测定了磷脂复合物和柚皮苷的吸收量变化。结果:柚皮苷、柚皮苷磷脂复合物均能促进成骨细胞增殖和分化,具有较好的抗骨质疏松活性。大鼠在体肠回流实验可见柚皮苷制备成磷脂复合物后,能显著促进柚皮苷在肠段的吸收。结论:磷脂的加入可有效提高柚皮苷的亲脂性,改善机体对其吸收,从而提高其成骨细胞活性。     

柚皮苷乳膏制备工艺研究

目的:筛选制备柚皮苷乳膏的处方,并制备得到柚皮苷乳膏。方法:用正交试验优化乳膏处方,采用乳化法制备乳膏,并采用HPLC法测定制剂含量。结果:优化后的乳膏处方是柚皮苷5 g、硬脂酸15 g、液体石蜡15 g、羊毛脂2 g、三乙醇胺4 g、甘油5 g,蒸馏水加至100 g,柚皮苷乳膏的稳定性良好。结论:该工艺简单、可行,柚皮苷乳膏质量稳定可控。     

超声波提取法与索氏提取法提取化橘红柚皮苷的比较研究

目的确定化橘红中柚皮苷的适宜提取方法。方法分别以索氏提取法与超声波提取法提取化橘红柚皮苷后，采用RP—HPLC法测定其含量。结果超声法提取不用年份化橘红中柚皮苷含量平均值为13．53％；索氏提取法提取不用年份化橘红中柚皮苷含量平均值为11．98％，两法提取柚皮苷的测定值差异有统计学意义。结论两种提取化橘红中柚皮苷方法的比较结果显示，超声波提取法提取的柚皮苷百分含量略高于药典收载的索氏提取法，并具有操作简便、省时的优点，可考虑应用于化橘红中柚皮苷的提取。     

化州柚入药部位的探讨

目的:对化州柚外果皮、中果皮、果瓤进行研究,探讨其入药部位,为化州柚资源充分利用奠定基础。方法:采用紫外分光光度法测定化州柚外果皮、中果皮、果瓤的总黄酮含量,采用HPLC测定柚皮苷含量和色谱指纹图谱相似度,结合药效学研究,探讨化州柚的入药部位。结果:化州柚果实各部位总黄酮、柚皮苷含量大致相仿,色谱指纹图谱相似度较高;外果皮、中果皮、果瓤与全果均能延长小鼠咳嗽潜伏期和减少小鼠的咳嗽次数,组间比较无统计学差异。结论:化州柚以全果入药存在一定科学性与合理性。     

柚皮苷-羟丙基-β-环糊精包合物酶解制备柚皮素工艺的研究

目的:确定羟丙基-β-环糊精包合柚皮苷后酶解制备柚皮素的主要因素,并优选出高转化效率、稳定、适合工业化生产的工艺条件。方法:采用逐步滴加法制备柚皮苷-羟丙基-β-环糊精包合物,并利用蜗牛酶将其水解制备柚皮素,以转化率为指标,通过单因素考察pH、温度、反应时间、酶用量及底物浓度对转化率的影响,并通过正交试验优化其制备工艺;采用差示扫描量热法验证柚皮苷是否被羟丙基-β-环糊精包合,采用1H-NMR,13C-NMR鉴定水解产物。结果:柚皮苷-羟丙基-β-环糊精包合物在最佳酶解条件下(温度37℃、pH 5.0、底物质量浓度30 g.L-1,酶与底物比3∶5,反应时间12 h)的转化率为98.4%,远大于未包合柚皮苷的转化效率;反应产物相对分子质量为272.25,核磁共振谱证实产物为柚皮素。结论:柚皮苷经羟丙基-β-环糊精包合后酶解制备柚皮素,可以缩短反应时间、提高底物浓度、减少酶用量,从而显著提高转化效率。该工艺稳定,适合工业化生产。     

化州柚花不同花期黄酮类成分含量的动态变化研究

目的掌握化州柚不同花期黄酮类成分含量的动态变化规律。方法采用UV法测定花的总黄酮含量;HPLC法测定花中柚皮苷、野漆树苷含量。结果谢花期、幼果期、盛花期、现蕾期花中总黄酮含量分别为306.90mg.g-1、277.93mg.g-1、215.55mg.g-1、162.74mg.g-1,柚皮苷含量分别为246.31mg.g-1、213.93mg.g-1、175.94mg.g-1、130.90mg.g-1;野漆树苷含量在4个花期中基本一致。结论化州柚花期总黄酮和柚皮苷含量以谢花期为最高。     

柚皮苷对亚硝酸钠致记忆障碍模型小鼠的改善作用

目的研究柚皮苷对亚硝酸钠诱导的记忆巩固障碍模型小鼠的改善作用,从雌激素受体(ER)表达及海马体神经元Aβ代谢的途径探讨柚皮苷的作用机制。方法 8月龄昆明小鼠随机分为空白组、模型组、阳性药对照组、柚皮苷组和ER阻断剂组。观察小鼠的记忆及判断能力,HE染色观察海马体区病理改变及ER的表达,Western Blot方法检测海马体ERβ、P-P38/P38、Aβ代谢相关指标(APP,BACE1)的表达。结果模型动物出现学习记忆能力明显下降,海马体ERβ及ERα的表达降低,P-P38/P38、APP、BACE1增加,海马体神经元出现损伤,突触膜结构不清晰。柚皮苷能够恢复模型小鼠的行为学表现,改善小鼠海马体神经元细胞形态,增加海马体ERβ的表达,降低P-P38/P38、BACE1、APP的表达(P 0.01)。柚皮苷对痴呆模型的恢复作用和神经元保护作用被ER阻断剂拮抗。结论柚皮苷对记忆巩固障碍模型小鼠的改善主要通过ER-P38信号通路的调节,抑制Aβ生成,减少Aβ异常沉积,并具有明显的ER依赖性。     

不同釆收时期柚果中柚皮苷的含量研究

目的:对不同釆收时期柚果中柚皮苷的含量进行研究。方法:釆用HPLC法测定不同采收时期柚果中柚皮苷的含量。色谱柱为Agilent ZORBAXB SB-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-醋酸-水(35∶4∶61),体积流量为1mL/min,检测波长为283nm。结果:柚皮苷在21.06μg/mL²10.60μg/mL范围内线性关系良好(r=0.99996),平均回收率为100.01%,精密度、重现性和分离效果均较好。结论:柚果在不同的釆收时期柚皮苷的动态含量存在明显的差异。研究结果对柚果药材质量评价及柚果的有效开发利用具有重要的参考价值。     

柚皮苷亲水凝胶骨架片制备及体外释放的研究

目的:制备柚皮苷亲水凝胶骨架片,并对其释药影响因素及释放模型进行探讨。方法:采取羟丙甲基纤维素(HPMC)为骨架材料,以湿法制粒压片法制备了柚皮苷亲水凝胶骨架片。考察了辅料(PEG类型、乳糖、蔗糖、甘露醇),HPMC分子量及含量对药物释放的影响,并采取零级、一级、Higuchi及Ritger-pappas模型,对药物的释放进行了拟合。结果:辅料对骨架片中药物释放的影响为:PEG4000PEG400PEG10000;填充剂为甘露醇的骨架片释放速度要快于含乳糖和蔗糖的骨架片;HPMC分子量及含量越大,药物释放越慢;药物的释放符合零级释放,药物的释放以溶蚀为主。结论:制备的柚皮苷亲水凝胶骨架片能持续缓慢地释放药物。