大鼠磨牙钻磨后HSP70在牙髓不同时间表达的免疫组化研究

目的：研究大鼠磨牙受到钻磨刺激后HSP70在牙髓组织中的表达特点,推测其在牙髓损伤修复中的生物学作用。方法：采用免疫组织化学方法观察大鼠磨牙钻磨损伤后4h-14d内诱导型HSP70在牙髓组织中的动态表达及定位情况。结果：HSP70的表达在损伤早期呈强阳性,随后表达逐渐减弱,至修复期为弱阳性表达;同一时期受损牙髓的不同区域存在强弱变化。结论：HSP70大鼠磨牙受到钻磨损伤后呈现由强到弱的动态变化及区域性变化,这可能与牙髓损伤的应激保护和修复过程中蛋白合成的需要有关。     

肌动蛋白在大鼠磨牙及其发育中的分布研究

目的：探讨肌动蛋白在大鼠磨牙及其发育中的时空分布及意义。方法：建立大鼠牙胚发育模型。用免疫组化方法检测肌动蛋白在成年和发育期磨牙中的表达。结果：肌动蛋白在钟状期外釉上皮细胞，分泌前期成釉细胞和成牙本质细胞及中间层细胞之间，硬组织形成期成釉细胞Tomes'突和成牙本质细胞胞浆呈阳性表达。结论：肌动蛋白在大鼠磨牙发育过程中的分布具有时空特异性。与细胞的分化程度和功能状态密切相关。     

大鼠磨牙被钻磨后牙髓中诱导型热休克蛋白70 mRNA的表达

目的：探讨热休克蛋白70（HSP70）下牙髓自我保护的关系,以及HSP70表达是否存在的阈值。方法：将SD大鼠分为浅磨组、深磨组和对照组,采用原位杂交方法观察大鼠磨牙受到钻磨刺激后4h,HSP70mRNA是否表达以及在大鼠牙髓中的杂交定位。结果：HSP70在浅磨组与正常对照组牙髓中呈阴性,在深磨组牙髓中呈阳性。分布于成牙本质细胞、牙髓成纤维细胞和血管平滑肌细胞及内皮细胞。结论：牙髓组织受外界刺激时,可诱导HSP70表达。诱导型HSP70的表达可能存在阈值。进一步研究制洞深度与HSP70表达的相关性,将对临床操作有重要指导意义。     

大鼠磨牙牙髓血运重建术后血管内皮生长因子的表达及意义

目的 分析大鼠磨牙牙髓血运重建术后血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法 牙科显微镜下对大鼠下颌第一磨牙进行牙髓血运重建术,术后3周对磨牙组织进行HE染色分析,应用实时荧光定量PCR和免疫组化技术检测磨牙组织中VEGF基因和蛋白的表达,评估VEGF表达在磨牙牙髓血运重建术后的表达意义。结果 牙髓血运重建术后,可见根管内有丰富的血管新生,未见明显炎症细胞浸润,在组织结构上更接近正常牙髓结构。VEGF在正常磨牙组织、根尖周炎磨牙组织和牙髓血运重建术后的磨牙组织中均有表达,牙髓血运重建术后VEGF mRNA表达明显高于正常组织和根尖周炎磨牙组织(P<0.01)。VEGF蛋白表达水平高于正常组织和根尖周炎磨牙组织。结论 牙髓血运重建术可显著促进大鼠磨牙中VEGF的表达,从而促进牙髓中血管的生成,促进牙髓组织的修复。     

咬合力丧失对大鼠磨牙牙周膜bFGF表达的影响

目的 研究咬合力丧失后大鼠磨牙牙周膜（ｐｅｒｉｏｄｏｎｔａｌ ｌｉｇａｍｅｎｔ,ＰＤＬ）内碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）表达的动态变化,结合其他实验结果初步探讨了ｂＦＧＦ与Ⅱ型胶原ｍＲＮＡ表达的关系。方法 采用拔牙法建立咬合力丧失的动物模型,应用免疫组织化学法研究其磨牙牙周膜内ｂＦＧＦ表达的动态变化。结果 在１天、２天、３天、１周与     

人第三恒磨牙在不同状态下的神经支配的免疫组化研究

以前研究龋病、牙髓炎和正常组织的神经支配关系时多采用动物模型 ,人牙的资料较少。有研究证实Ｓ - 1 0 0蛋白可以有效地显示牙髓组织的神经支配情况[1 ,2 ] 。本研究目的是更进一步地理解神经组织在牙髓组织功能调节中的作用。一、材料和方法Ｓ - 1 0 0蛋白多克隆抗体 ,工作浓度 1 :80 0 ,Ｄａｋａ(丹麦 )产品。ＡＢＣ试剂盒 ,Ｖｅｃｔｏｒ(美国 )公司。选取临床因阻生而拔除的第三恒磨牙 ,牙齿拔除后 ,立即穿通髓角 ,置 4 %多聚甲醛 - 0 .1ｍｏｌ/Ｌ磷酸缓冲液 (ｐＨ7.3) 4℃固定 2 4ｈ ,然后置 4ｍｏｌ/Ｌ甲酸钠混合液中 ,4℃脱钙1 0ｄ …     

Hsp27在大鼠磨牙及其发育中的分布研究

目的 探讨Hsp27在大鼠磨牙及其发育中的分布及意义。方法 建立大鼠牙胚发育模型，用免疫组化方法检测HsD27在磨牙发育不同时期的表达。结果 在成釉细胞形成过程中，Hsp27首先出现在前成釉细胞中，在成釉细胞分泌阶段和成熟阶段，Hsp27的阳性免疫反应逐步增强。正在分化和已分化的成牙本质细胞中，有Hsp27的阳性反应。21天时，冠部成牙本质细胞仍保持强烈的Hsp27免疫反应，而髓室底和牙根的成牙本质细胞为弱或无Hsp27反应。但是在以后牙根发育阶段，髓室底和牙根侧的成牙本质细胞对Hsp27反应增强。值的注意的是，不能形成牙釉质的无釉区细胞，在牙胚发育5～11天时，有显著的Hsp27表达。但在14天以后又伴随凋亡而减少。结论 Hsp27可以看作区别内釉上皮细胞和前成釉细胞的有用标志物，并与成牙本质细胞分化程度有关。Hsp27作为凋亡抑制剂与无釉区牙本质在牙冠尖端处轮廓的形成有关。     

大鼠磨牙牙髓组织在程度不同的机械性损伤刺激后HSP70的表达及意义的研究

目的 检测大鼠磨牙在程度不同的机械性钻磨损伤刺激(浅磨、深磨、穿髓)后热休克蛋白70(HSP70)的动态表达。方法 采用"二步法"免疫组化法观察HSP70在正常组、浅磨组、深磨24h组、穿髓24h组、穿髓3d组和穿髓7d组牙髓组织中的表达情况。结果 浅磨组和正常组HSP70在牙髓组织中有个别标本弱阳性着色,与后4组相比P<0.01;深磨24h组可见成牙本质细胞、成纤维细胞阳性表达,血管内皮细胞弱阳性表达;穿髓24h组和3d组表现为急性炎症反应,HSP70在成牙本质细胞、血管内皮细胞、中性粒细胞中均呈强阳性表达,成纤维细胞呈阳性表达;至穿髓7d时为弱阳性表达。结论 在程度不同的钻磨刺激下,HSP70在鼠牙髓组织中的表达有强弱不同的动态变化;HSP70在牙髓损伤修复过程中可能是主要介导牙齿矿化修复的细胞因子之一。     

环磷酰胺作用下釉原蛋白在大鼠牙髓及牙髓内新生硬组织中的表达

目的：探讨釉原蛋白对牙髓组织的生物学作用。方法：给大鼠一次性投与环磷酰胺，阻碍切牙牙本质的形成，对在投药后牙髓组织发生的各种变化与釉原蛋白的关系，进行组织学和免疫组织化学的研究。结果：在切牙唇侧牙髓的形成端见到广泛的细胞水肿样变，成牙本质细胞变性、坏死、消失；在牙髓侧随着时间的延长形成了骨样牙本质；在新生硬组织的周围及其基质中，观察到釉原蛋白免疫反应阳性物质的表达。结论：结果表明釉原蛋白具有诱导牙髓组织形成硬组织的作用，这对釉原蛋白硬组织诱导能研究提供了实验依据。     

不同培养条件下人牙髓细胞α-SMA表达的变化

目的：检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在正常及诱导分化的人牙髓细胞中的表达变化，探讨α-SMA与人牙髓细胞分化之间的关系。方法：体外连续人牙髓细胞，传代后分二组，一组常规培养，一组用条件培养液诱导其分化，采用免疫组化和ELISA方法检测两组细胞α-SMA的表达，分析其差异。结果：随体外常规连续培养，人牙髓细胞α-SMA表达逐渐增多；较之常规培养组，诱导分化组的细胞α-SMA表达减少。结论：人牙髓细胞在朝成牙本质细胞方向分化时，α-SMA表达逐渐减少；人牙髓细胞体外常规连续培养，细胞逐渐表现为均质成熟的成纤维样细胞。     

Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠切牙成牙本质细胞的分布

目的 探讨Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠下颌切牙成牙本质细胞中分布的相关性及其意义。方法 用免疫组化方法分别检测Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠下颌切牙成牙本质细胞中的表达并观察比较。结果 大鼠下颌切牙唇侧区域的冠方2／3成牙本质细胞Calbindin-D28k与肌动蛋白表达均为阳性，且都集中于成牙本质细胞突；根尖区和舌侧成牙本质细胞均为阴性。结论 Calbindin-D28k与肌动蛋白在大鼠下颌切牙成牙本质细胞中的分布具有一致性，与牙本质的形成密切相关。     

Identification of lymphocyte antigens in human dental pulps

The aim of the experiment was to study the immune reaction of cells in both healthy and inflamed human dental pulps. For this it was necessary to identify, in particular, populations of lymphocytes in the pulp, and also other cells involved in the immune reaction. By using monoclonal antibodies which specifically recognize subpopulations of the T lymphocytes, we were able: 1) to directly determine the phenotype of the cells of the pulp, 2) to examine the interactions of the different cell populations. The study was based on 30 permanent human dental pulps and the method was that of indirect immunofluorescence on frozen sections. The monoclonal antibodies used were the antibodies OKT and anti-Leu of types anti-Leu1, anti Leu3a, OKT4, OKT8 and OK1a. The results obtained were evaluated statistically. Two important points stand out from this study: 1) in the healthy samples there is preferential localization of lymphocytes at the periphery of the pulp and 2) there is a predominance of the OKT8+ cytotoxic suppressor subpopulation in both the healthy and the inflamed pulps.     

正常及炎性牙髓中T、B淋巴细胞的微波免疫组化研究

本研究旨在探讨T、B细胞与牙髓炎发生、发展及转归间的内在联系。采用微波免疫组化技术，对人正常及炎性牙髓中T、B细胞进行分类识别和定量分析、结果表明：正常牙髓中T细胞散在分布于基质中央区，CD细胞居多（CD／CD＝0．48），未检测出B细胞、炎性牙髓中T、B细胞增多，且主要集中在炎症中心。可复性牙髓炎时CD／CD＝0．58，出现B细胞（CD／CD＝11．38），不可复性牙髓炎时CD细胞占优势（CD／CD＝1．67），CD／CD　＝1．51，且有症状组中T、B细胞增加较无症状组多。提示T、B细胞介导的免疫反应在牙髓免疫病理改变中可能起重要作用。     

大鼠磨牙及牙周组织中神经纤维分布:神经丝蛋白免疫组织化学研究

目的：观察大鼠磨牙及牙周组织神经纤维分布特点。方法：大鼠磨牙及其牙槽骨脱钙后切征并行神经丝蛋白（ＮＦＰ）免疫,组织化学染色。结果：大鼠磨牙、牙周膜及牙龈中神经纤维丰富,神经丝蛋白阳性神经纤维在髓角处形成牙本质细胞下丛,其中一些神经纤维进入牙本质。在牙周膜,神经丝蛋白阳性神经纤维在牙根下段密集分布 。因牙周膜内存在两型神经来梢：游离神经来梢及Ｒｕｆｆｉｎｉ终末。前者在整个牙周膜内皆有分布。后者常成组     

Catalase activity in human healthy and inflamed dental pulps

AIM: To examine the catalase activity in clinically healthy and symptomatic human dental pulps to verify if an active defence system against oxidizing agents is present as a response to bacterial invasion. METHODOLOGY: Thirty-three systemically healthy patients, 18 females and 15 males (ages: 11.0-25.9 years; mean 18.8 +/- 3.6), were the source of the pulp tissue. The condition of the pulps was assessed using clinical and radiographic evaluations. The specimens were recovered by longitudinally grooving and splitting the teeth (if extracted) or during endodontic treatment, and were matched for age and sex between the healthy and inflamed specimen groups. Catalase activity was determined through spectrophotometric methods. RESULTS: Enzymatic activity was 1126 +/- 343 and 3074 +/- 698 mU mL(-1) x mg of total protein in the healthy and inflamed pulp tissue specimens, respectively. This difference was statistically significant (P<0.01). CONCLUSIONS: These results indicate a role for catalase during dental pulp inflammation in humans, and may represent an inherent biological defence system against reactive oxidants of this tissue.     

大鼠牙髓干细胞可塑性研究

目的:研究大鼠牙髓干细胞向脂肪、神经、肌肉三个方向的横向分化能力。方法:采用地塞米松、IBMX、牛胰岛素和indomethacin对大鼠牙髓干细胞进行程序诱导,RT-PCR和油红O染色方法进行检测;采用bFGF和RDPSCs对大鼠牙髓干细胞进行诱导,RT-PCR方法进行检测;采用5-azacytidine对大鼠牙髓干细胞进行诱导,免疫组织化学染色和RT-PCR的方法进行检测。结果:经脂肪细胞系诱导后,大鼠牙髓干细胞出现脂肪细胞特异性PPARg阳性表达,油红O染色出现阳性脂滴颗粒;经神经细胞系诱导后,大鼠牙髓干细胞未出现预期的神经细胞特异性nestin表达;经肌细胞系诱导后,大鼠牙髓干细胞未出现预期的肌细胞特异性MHC表达,免疫组织化学染色肌动蛋白表达阴性。结论:大鼠牙髓干细胞经过一定的诱导后,可以向脂肪细胞方向分化,具有一定的可塑性;在常规诱导条件下,大鼠牙髓干细胞不能向神经、肌肉方向分化。     

正常人、龋病和牙髓炎患者牙髓组织中一氧化氮含量的检测分析

目的：对正常人、龋病和牙髓炎患者牙髓组织中一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）含量进行检测，初步探讨ＮＯ在牙髓组织自身修复中的作用。方法：采用荧光分光光度法检测其中亚硝酸根（ＮＯ２－）含量，以间接确定ＮＯ含量。结果：正常牙髓组织中ＮＯ无性别差异（Ｐ＞０．０５），浅龋组与对照组ＮＯ无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而深龋伴慢性牙髓炎组ＮＯ含量则显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：牙髓组织中ＮＯ含量的变化与其炎症反应有一定的联系，ＮＯ可能在牙髓炎症和自身修复过程中起到一定的作用。