人类假性胆碱酯酶的生物学特性及其临床意义

除了维持胆碱能神经突触正常传导的乙酰胆碱酯酶(AChE、EC3.1.1.7)外,人血浆及大部分组织中还有另一类胆碱酯酶。它不像AChE那样以乙酰胆碱为天然底物,而是以丁酰胆碱为天然底物,因而被归类为假性胆碱酯酶(PChE、EC3.1.1.8)。到目前,这类胆碱酯酶的生理功能还不十分明确。某些研究结果表明:(1)PChE在慢神经传导中起了必不可少的作用;(2)它参与正常的脂质代谢及清除酰     

具胆碱酯酶活性的抗人血清丁酰胆碱酯酶单克隆抗体3A5

目的研究具抗原酶活性的抗人血清丁酰胆碱酯酶单抗3A5的催化特性及活性位点。方法利用酶促反应动力学方法测定3A5的Km及Kcat/Km;根据胆碱酯酶抑制剂对其催化活性的影响情况分析其活性位点。结果3A5催化丁酰胆碱酯酶特异性底物的水解符合米.曼氏方程规律,但Kcat/Km明显小于抗原酶;丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF明显抑制其胆碱酯酶活性,胆碱酯酶活性中心催化位点抑制剂吡啶斯的明及活性中心阴离子位点抑制剂四甲基铵则分别对其产生竞争性及非竞争性可逆抑制。结论3A5具有与抗原酶相似但较弱的催化活性,具有与天然胆碱酯酶相似的活性中心催化位点及阴离子位点。     

胆碱能神经及其递质

<正> 胆碱能神经是指兴奋时末梢释放乙酰胆碱(ACh)的神经而言。它在完成神经冲动的化学传递过程中,有赖于ACh、递质水解酶——胆碱酯酶(ChE)及乙酰胆碱受体(AChR)三者紧密配合。本文谨就此三者的研究历史及现状做一文献复习。一、胆碱能神经递质——ACh     

接触甲基对硫磷工人的细胞遗传学研究

甲基对硫磷(0,0-二甲基-0-对硝基硫代磷酸酯)是一种广泛使用的有机磷农药。它能经胃、肠、皮肤及呼吸道吸收,其主要代谢产物是甲基对氧磷。甲基对硫磷及其代谢产物甲基对氧磷对乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶有轻度的抑制作用。本次研究的对象为巴西圣保罗城的一个     

国产蛇毒激活血浆蛋白C的研究

目的:从9种国产蛇毒中筛选具有激活血浆蛋白C作用的蛇毒。方法:运用活化部分凝血活酶时间(APTT)和发色底物实验分别观察抗凝活性和酰胺酶活性,综合抗凝活性和酰胺酶活性确定蛋白C蛇毒激活作用。结果:在9种国产蛇毒中烙铁头蛇毒及蝮蛇毒在1.5mg/L浓度下即使人血浆纯蛋白C产生酰胺酶活性,并使APTT显著延长。结论:9种国产蛇毒中烙铁头蛇毒及蝮蛇毒具有激活人体血浆蛋白C成为活化蛋白C(APC)的作用。     

大鼠肠肌丛胆碱酯酶和亮氨酸脑啡肽双染法研究

应用酶组织化学和免疫组织化学双染法,对大鼠肠肌丛内胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元进行了研究.在同一张标本上同时显示胆碱酯酶阳性和亮氨酸脑啡肽神经元,后者用二盐酸联苯胺作显色剂.结果观察到三种不同染色的神经元:(1)胆碱酯酶阳性神经元;(2)亮氨酸脑啡肽单染神经元;(3)胆碱酯酶-亮氨酸脑啡肽双染神经元.并同时统计了30个肌间神经节,发现平均每个肌间神经节含这三种神经元的数目依次为8.33,0.07和2.40.以上结果提示亮氨酸脑啡肽可以与乙酰胆碱共存于经典的胆碱能神经元.本文还对大鼠肠肌丛内.胆碱能神经元的类型及其与脑啡肽神经元之间的关系进行了讨论.     

胆碱酯酶及乙酰胆碱的组化显示法

<正> 胆碱酯酶(Cholinesterase ChE)大致分成两类:一类为假胆碱酯酶(或丁酰胆碱酯酶BuChE);另一类为乙酰胆碱酯酶(Acetylcholinesterase AChE)。二者存在部位不完全相同,BuChE在哺乳动物含量甚微,主要分布於非神经组织、血浆等处,AChE主要位于胆碱能神经的胞体、轴突、神经末梢、骨骼肌、红细胞等处,通常可用AChE染色显示胆碱能神经。AChE染色分光镜和电镜两种,现分述如下:     

82例急性有机磷农药中毒的阶段性护理体会

有机磷农药中毒在基层社区医院比较常见，有机磷农药进入人体内后，抑制体内胆碱酯酶活性，使胆碱酯酶失去分解乙酰胆碱作用，使乙酰胆碱在体内蓄积过多而产生一系列中毒症状。我院自2004年至2006年共收治急性有机磷农药中毒病人82例，在临床医生积极治疗的基础上采用阶段性护理取得理想的效果，现报告如下。     

扬子鳄消化管壁内粘膜下神经丛的形态学观察

消化管神经丛的分布及其生理活动的研究甚多,但对低等脊椎动物的研究报道较少.扬子鳄是我国特有的世界珍稀动物,本文用Karnovsky-Roots乙酰胆碱酯酸(AChE)组化法研究扬子鳄消化管粘膜下神经丛的分布,为肠神经丛的比较解剖学研究提供一些形态学资料.1 材料和方法 扬子鳄2条(雌雄各1),2%戊巴比妥钠10～15ml腔内注射麻醉,打开胸腹腔,从左心室灌注生理盐水,继而灌流4%多聚甲醛固定,取食管下段、胃体、十二指肠、空肠、回肠和大肠,置4%多聚甲醛固定6h,继入合20%蔗糖的0.1mol·L~(-1)PB液中,4℃过夜.制备厚25μm的冷冻切片.以亚铁氰化铜法显示AChE,孵育液内加四异丙基焦磷酰胺(iso-OMPA)非特异性胆碱酯酶抑制剂和免去底物为对照.     

蝎毒和蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的作用研究

目的　对比观察蝎毒、蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的影响 .方法　健康昆明种小鼠 70只 ,随机分为 5组 :①空白对照组 ;②蝎毒低剂量组 ;③蝎毒高剂量组 ;④蛇毒低剂量组 ;⑤蛇毒高剂量组 .小鼠腹腔注射 ,每天 1次 ,连续给药 5d .每组分别在 2 4h、8d、15d取 4只小鼠股骨骨髓进行骨髓象检查分析及骨髓有核细胞计数 .结果　高剂量蛇毒后 ,骨髓有核细胞数明显增多 (p <0 .0 1) ,蝎毒高剂量组比蛇毒高剂量组增多更显著 (p <0 .0 1) ;两低剂量组有核细胞数明显增多 (p <0 .0 5 ) .注射蝎毒和蛇毒后均可使小鼠骨髓有核细胞中单个核细胞比例先增高后下降 ,而分叶核细胞比例随之升高 ,但蝎毒的作用更明显 .结论　蝎毒、蛇毒均具有促进骨髓细胞增殖、分化和成熟的作用 ,蝎毒的促进作用更明显     

电针对人体血液有形成分的胆碱酯酶及乳酸脱氢酶活性的影响

血液是维持机体内环境相对稳定的重要体液,环流周身,调节物质代谢,具有营养和防卫等功能。血液有形成分内占绝大多数的是红细胞。上海脏象专题研究组曾以人的红细胞内的乳酸产量作为测定血细胞中糖酵解的代谢强度,也作为全身能量代谢变化的一个指标。关于对动物进行针刺或电针后,血内血糖及乳酸等产量增加已有报道乳酸的含量与乳酸脱氢酶活性有关,究竟电针后人血内有形成分的乳酸脱氢酶活性有无改变?此外,关于电针可引起动物全血内胆碱酯酶活性增高或减低皆有报道。已知血液内胆碱酯酶有两种即特异性(红细胞内)和非特异性(血浆内),两者均能分解乙酰胆碱。电针能否引起血内红细胞的胆     

抗药性与敏感性德国小蠊乙酰胆碱酶的活性比较

目的研究德国小蠊抗药性与乙酰胆碱酯酶活性的关系。方法采用化学比色方法对敏感品系和抗性品系的德国小蠊分别测试乙酰胆碱酯酶,对比两者的测定值,分析抗性品系和敏感品系德国小蠊乙酰胆碱酯酶的差异。结果敏感品系和抗性品系德国小蠊的乙酰胆碱酯酶活性分别是2.863和5.609,抗性品系德国小蠊酶活性显著高于敏感品系,两者酶活性比值为1.96。结论乙酰胆碱酯酶活性与德国小蠊抗药性有关。     

乙酰胆碱酯酶抗独特型抗体的研制

目的：研制乙酰胆碱酯酶（Acetylcholinesterase，AchE）抗独特型抗体并测定酶活性。方法：AchE单克隆抗体是一种IgG1抗体，先用木瓜蛋白酶酶切，然后采用AchE-Sepharose-4B和SPA亲和层析柱进行提取纯化，获得纯化的单克隆抗体Fab段。以Fab作为抗原，免疫小鼠，制备抗Fab独特型抗体，采用酶催化ELISA法研究该单克隆抗体的乙酰胆碱酯酶活性。结果：制备出高效价抗乙酰胆碱酯酶抗体Fab段的独特型抗体，该抗体具有乙酰胆碱酯酶活性。结论：AchE单克隆抗体的独特型抗体具有AchE活性。     

组织及培养鸡胚脑细胞中乙酰胆碱合成能力的显示

用检测胆碱乙酰转移酶的方法来反映胆碱能神经的情况,比只测乙酰胆碱酯酶要特异些,但作定量测定时需要用[~(14)C)乙酰辅酶A,由于当前我国还不生产此种标记化合物,所以工作开展不多。 我们用国内较易获得的[3H]胆碱(Ch),显示各种组织中乙酰胆碱(Ach)的合成能力。底物[3H]Ch与酶促反应生成物     

异三尖杉酯碱的晶体结构测定

异三尖杉酯碱(C_(28)H_(37)NO_9、H_2O)是从三尖杉树皮中提出的抗癌有效成份之一,同时被提取的还有三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱,它们的晶体结构已被测定。本文报导了异三尖杉酯碱的晶体结构将有助于了解它们之间结构和功能的关系。结构的结晶学参数是:空间群p21 21 21:     

蝎毒和蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的作用研究

目的对比观察蝎毒、蛇毒对小鼠骨髓细胞增殖的影响.方法健康昆明种小鼠70只,随机分为5组:①空白对照组;②蝎毒低剂量组;③蝎毒高剂量组;④蛇毒低剂量组;⑤蛇毒高剂量组.小鼠腹腔注射,每天1次,连续给药5d.每组分别在24h、8d、15d取4只小鼠股骨骨髓进行骨髓象检查分析及骨髓有核细胞计数.结果高剂量蛇毒后,骨髓有核细胞数明显增多(p<0.01),蝎毒高剂量组比蛇毒高剂量组增多更显著(p<0.01);两低剂量组有核细胞数明显增多(p<0.05).注射蝎毒和蛇毒后均可使小鼠骨髓有核细胞中单个核细胞比例先增高后下降,而分叶核细胞比例随之升高,但蝎毒的作用更明显.结论蝎毒、蛇毒均具有促进骨髓细胞增殖、分化和成熟的作用,蝎毒的促进作用更明显.     

多奈哌齐（胆碱酯酶抑制剂）治疗阿尔茨海默病新进展

阿尔茨海默病(Ａｌｚｈｅｉｍｅｒｄｉｓｅａｓｅ,ＡＤ)是一种以组织选择性损害和特征性病理改变为基础的进行性痴呆,其特点是记忆力损害(学习新知识或回忆过去学过的知识的能力受损)和至少有一种其他认知障碍(失语、失用、失认和行为功能障碍)。ＡＤ的神经病理学基础还不十分明确[1],但目前认为是由于大脑半球基底团及其皮层纤维突触前胆碱能神经元变性,使乙酰胆碱缺乏所致[2]。基于这种学说开发胆碱酯酶抑制剂是目前改善本病胆碱能缺陷与症状的最成功的方法,这类药物抑制乙酰胆碱的分解,使其在突触间隙中贮存的时间更长,以维持脑内乙酰胆…     

C_3d抗血清研制与临床初步应用

C_3是补体两条活化途径的汇合点。在C_3转换酶或其它蛋白水解酶作用下,天然C_3分子(以下简称C_3)可裂解为C_(3a)、C_(3b)。C_(3b)再裂解为C_(3c)、C_(3d)、C_(3e)、C_(3g)。C_3裂解产物(C_3SP)的测定,可直接反映体内补体的活化,较少受到C_3合成的影响,故而成为研究补体代谢的重要手段。检测C_3SP需研制相应的抗血清。C_3分子上具有多种抗原决定基,C_(3b)有C、d两     

蛇毒F_(6.3.2)激活蛋白C的可能机制初探

本实验研究蛇毒蛋白C激活组份F6.3.2对蛋白C的激活作用。以BaCl2吸附血浆和纯化蛋白C为作用底物,采用发色底物法测定蛇毒组份F6.3.2对蛋白C的特异性激活作用,同时采用SDS-PAGE.测定该组份对蛋白C的激活机制。结果发现F6.3.2没有直接作用发色底物使之生色的能力。它对BaCl2吸附血浆不表现生色反应能力(与对照组相比P>0.05),而对纯化蛋白C则表现出很强的生色反应能力(与对照组Ⅰ、对照组Ⅱ相比P<0.01).SDS-PAGE结果表明,F6.3.2与纯化蛋白C作用后的混合物,由两条链组成,一条链分子量为19KDa,与纯化蛋白C的轻链相同,另一条链分子量为59.5 KDa。为纯化蛋白C重链与F6.3.2的分子量之和,表明F6.3.2已结合到纯化蛋白C的重链上。因此.我们认为蛇毒蛋白C激活组份F6.3.2对蛋白C有特异性激活作用,它激活蛋白C的可能机制是通过结合于蛋白C的重链,形成F6.3.2-蛋白C复合物,引起蛋白C变构,从而将蛋白C激活为活化蛋白C。     

大鼠肠神经系统乙酰胆碱酯酶和抗氟化物酸性磷酸酶双染法研究

用抗氟化物酸性磷酸酶(FRAP)作为感觉神经元的化学标志物,同时结合乙酰胆碱酯酶组织化学方法,对大鼠小肠壁神经结构进行了组织化学观察.结果发现了三种不同染色的神经元:(1)乙酰胆碱酯酶阳性神经元;(2)抗氟化物酸性磷酸酶单染神经元;(3)乙酰胆碱酯酶一抗氟化物酸性磷酸酶双染神经元.这提示大鼠肠神经系统内不仅存在有感觉神经元,而且,部分感觉神经元可能是胆碱能性质的.