眼镜蛇蛇毒与全身照射在非协调性异种心脏移植排斥中作用的研究

供体豚鼠和受体SD大鼠各 32只随机分成空白对照、单用中华眼镜蛇蛇毒CCV (0 4mg/kg )、单用全身照射WBI (5Gy)、CCV与WBI合用 4组进行异位心脏移植 ,结果表明 :(1)存活时间CCV +WBI组 (12 36± 4 5 3h ) >CCV组 (7 0 6± 3 3h ) >WBI组 (0 42± 0 0 7h )和空白对照组 (0 36± 0 16h ) ,差别显著 ;WBI组与空白对照组无明显差别 (P >0 0 5 ) ;(2 )供心停跳后与移植前比较 :空白对照组血清IgG升高、IgM下降 ,而其余 3组IgG和IgM均下降 ;(3)病理检查空白对照组与WBI组呈超急性排斥 (HAR )改变 ;CCV组和CCV +WBI组呈延迟性异种排斥 (DXR )改变。结论 :在本模型中 ,CCV能延缓超急性排斥反应的发生 ,WBI能降低天然抗体水平 ,但不能延缓DXR的发生。WBI与CCV合用有协同作用 ,可能涉及抗体的减少。其中IgM与HAR有关 ,IgG与DXR有关。     

人类线粒体肌酸激酶的固定化及酶学性质研究

目的人源肌酸激酶u Mt CK具有良好的催化肌酸生成磷酸肌酸的活性,开发固定化u Mt CK酶法生成磷酸肌酸,实现其工业化应用价值。方法将异源表达的u Mt CK固定在纳米磁性材料Fe_3O_4@Histidine-Ni上,制备固定化酶Fe_3O_4@HistidineNi/uMtCK,并进行催化反应。与游离酶u MtCK比对酶学性质和动力学参数,测定固定化酶Fe_3O_4@Histidine-Ni/u Mt CK的重复使用次数。结果与游离酶u Mt CK相比,固定化酶Fe_3O_4@HistidineNi/u Mt CK的最适反应温度提高5℃,最适p H降低0.5个单位,在50℃、pH 7.5下孵育2 h,残余酶活为51%,而游离酶仅为27%;u Mt CK的KmCr为10.7mmol/L,为Fe_3O_4@Histidine-Ni/uMtCK的1.1倍; Fe_3O_4@HistidineNi/u Mt CK的kcat/KmCr值是5.3 L/(mmol·s),是u Mt CK的1.3倍;Fe_3O_4@Histidine-Ni/uMtCK在经历9次循环使用后,活力还能保持50%以上,显示了良好的稳定性和重复使用性。结论与u Mt CK相比,Fe_3O_4@Histidine-Ni/uMtCK具有良好的热稳定性和重复使用性,具有一定的工业化价值。     

眼镜蛇伤大鼠多项指标动态变化与抗蛇毒血清的时效关系

目的: 观察蛇伤后大鼠生化血气分析及病理等动态变化,探讨其与抗蛇毒血清使用时效性的关系,为优化眼镜蛇伤的临床治疗方案提供实验依据。方法: SD大鼠注入2-4 LD₅₀舟山眼镜蛇毒造模,于注毒后不同时段(20-140 min)分别进行血液生化、血气分析、肌组织病理等检测及注入抗眼镜蛇毒血清(40-120 min,血清/蛇毒:125 kU/g)对上述指标的影响。结果: 大鼠注入4 LD₅₀蛇毒20 min后二氧化碳总量(TCO₂)、剩余碱(BE)及酸碱度(pH)逐渐下降;而心酶、肝酶及胆红素明显上升,于60及120 min各出现1个峰值,与0 min相比有显著差异(P<0.05);心肌、骨骼肌于40 min时点出现广泛浊肿变性、凝固性坏死及炎症细胞浸润。注入2 LD₅₀蛇毒动物的心酶、肝酶及胆红素指标变化趋势与4 LD₅₀剂量组相似,但其峰值出现时间相对延迟且峰值较低。在心酶出现第1个峰值前施予抗血清,蛇伤大鼠的保护率可达60%以上;但第2个峰值后施予抗血清的疗效不显著。结论: 眼镜蛇伤后的心酶、肝酶等相关指标呈双峰变化规律,第2个峰值前为使用抗血清的有效时段。     

耐高温微生物β淀粉酶的制备及其酶学性质的研究

目的筛选高产微生物β淀粉酶的优良菌株,通过微生物发酵法制备微生物β淀粉酶。方法从南宁明阳生化淀粉厂附近的土壤分离出枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）原始菌株,取10g土样制成稀释10-2～10-4的倍,平面涂布,单菌落平面纯培养后,纯化选得产β淀粉酶原始菌株,鉴定为枯草芽孢杆菌（命名为NKJ-00）,采用NTG诱变法对枯草芽孢杆菌诱变得突变株,过滤、离心得β淀粉酶粗酶液,采用硫酸铵沉淀法纯化;用蒸馏水代替酶液作为对照组。测定β淀粉酶的酶活力,且对其最适温度、热稳定性、pH的稳定性和金属离子对其的影响等酶学性质进行了测定;最后对β淀粉酶转化可溶性淀粉溶液制备麦芽糖的能力进行了测定。结果枯草芽孢杆菌原始菌株产酶能力为220～230U/ml,得到的4株突变株产酶活力远高于原始菌株,其中NJK-05产酶能力及稳定性最佳,传6代后发酵产酶能力稳定在1500U/ml以上。用NKJ-05菌株发酵制得耐高温微生物β淀粉酶,酶最适温度60～65℃,酶活力为2.2万U/ml,50～65℃是稳定的,pH5～8时相对稳定。pH〉8相对酶活下降较明显,pH〈5时,相对酶活迅速下降;金属离子对β淀粉酶活性有一定的抑制。提取纯化后的β淀粉酶作用于22%～25%的可溶性淀粉溶液得到60%～70%的麦芽糖浆。结论β淀粉酶可通过微生物发酵法生产,微生物β淀粉酶的稳定性、耐高温等指标均超过植物β淀粉酶,纯度基本上达到工业生产的要求。     

大鼠鼻咽上皮组织酶学和发育酶学研究Ⅱ.已糖激酶,需NADP±与NAD±的异柠檬酸脱氢酶和5′-核苷酸酶

本文研究了5个年龄组100只健康大鼠三型鼻咽上皮的HK、T-IDH、D-IDH和5′-Nase的组化特征,根据半定量资料绘制了各种酶的发育线图,并用电镜细胞化学方法观察了5′-Nase的亚细胞分布规律。结果表明在生后发育过程中,HK和T-IDH活性存在两个加强时期,而D-IDH活性呈波浪式变化。从新生到15天龄,纤柱上皮的5′-Nase活性迅速加强达到成年大鼠水平,5′-Nase可分布于细胞膜和内质网膜外表面、核膜内侧面。讨论了这些酶活性变化的生物学作用和5′-Nase的各种亚细胞分布的代谢意义。     

抗人IgG单克隆抗体的研究——Ⅱ.鉴定和理化性质

利用免疫电泳、琼脂双扩散试验、PHA和 PHA抑制试验、ELISA和 ELISA抑制试验以及抗体结合力测定等证明,我们以前建立的3株杂交瘤细胞株所分泌的抗体均为IgG_4无反应性抗人 IgG McAb。 实验证明,含这类McAb的小鼠腹水,在理化性质上与多克隆抗体有所不同。将冻干或加叠氮钠4℃保存或直接放-30℃可维持效价至少达5月之久。本文所得有关该 McAb 的理化特性可为今后使用和生产这类 McAb 提供理论指导,文中还讨论这类 McAb 的应用价值。     

双生子智力活动的研究Ⅱ.遗传与环境

本文的任务是研究基因型和环境对7～16岁的儿童群体的智力活动某些方面的变异性所起的相对作用问题。为此目的,用WISC法调查了118对双生子,其中57对同卵双生,61对异卵双生。对双生子资料既进行了总括的分析(对全部7～16岁受检儿童),也对不同年龄组进行了个别分析。     

低聚合度医用级聚乙烯醇毒理学研究——Ⅱ.聚乙烯醇的毒性及安全性评价

医用级聚乙烯醇系分子量为20.000—30.000的合成聚合物,它可吸收入血,在本研究报告中其LD_(50)值为11.833mg/kg或13.428mg/kg(小鼠,腹腔给药)。蓄积系数k>5,属于低毒类化学物质,但若所给剂量超过2.5g/kg/天× 7或5g/kg×3,那么动物表现为肝脏和肾脏的变性和坏死。因此可以认为PVA的毒性和安全性是与所给的剂量相关的。     

生物可吸收性涂层补片的细胞毒性和遗传毒性研究

生物可吸收性涂层补片在应用于临床前必须进行一系列生物学评价以保证其安全性,细胞毒性和遗传毒性研究是其体外筛选部分。细胞毒性研究以补片浸提液接触受试细胞,观察细胞的毒性反应。生物可吸收性涂层补片浸提液1.5 cm2/ml时,细胞毒性反应1级;生物可吸收性涂层补片浸提液3 cm2/ml时,细胞毒性反应2级。遗传毒性研究包括两个试验,细菌回复突变试验结果表明生物可吸收性涂层补片的浸提液对鼠伤寒沙门氏菌受试株无致突变性;体外哺乳动物细胞染色体畸变试验中,任一处理组的细胞生长率均与阴性对照处于同一水平,表明没有诱导哺乳动物体细胞产生染色体畸变。     

核糖核酸酶Ⅲ对脊髓灰质炎病毒Ⅰ.Ⅱ.Ⅲ型RNA的限制性切割

本文作者进行了大肠杆菌的核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)切割脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型基因组核糖核酸(RNA)的研究。结果表明三种脊灰病毒基因组RNA能被RNaseⅢ切割成独特的片段。作者以不同的NH_4Cl浓度条件下,及恒定量的     

晶体蛋白质的研究——Ⅱ.钙离子对水溶性晶体蛋白质某些性质的影响

在研究白内障形成机理的过程中,发现白内障患者晶体中钙离子浓度高于正常人,伴有水溶性晶体蛋白减少而水不溶性晶体蛋白质增加的现象。故有人提出高浓度钙离子使水溶性晶体蛋白质转化为高分子水不溶性     

豚鼠胃肠壁内神经丛酶组织化学研究:Ⅱ.关于磷酸酯、脂类和神经递质代谢酶的研究

应用光镜组织化学半定量方法,观察了40只正常成年豚鼠胃肠各段壁内神经丛神经元AlP、AcP、5′-Nase (5′-核苷酸酶)、TPPase(硫胺素焦磷酸酶)、MAO (单胺氧化酶)、AP (氨基肽酶)、NsE(非特异性酯酶)、ChAT (胆碱乙酰转移酶) 和AChE (乙酰胆碱酯酶) 反应,并用显微分光光度计对MAO、     

产毒性大肠杆菌毒力表达环境调控 的机理研究

目的 探讨产毒性大肠杆菌（ETEC）毒力受环境因素调控的机理。方法 采用ELISA及DNA－RNA杂交法观察在不同培养条件下,ETEC毒力因子及毒力基因mRNA的表达;并且比较加入或不加入DNA解旋酶抑制剂novobiocin和coumermycinA1对ETEC毒力因子及其基因mRNA表达的影响。结果 ETEC肠毒素（LT和ST）及定居因子（CFA）表达均与mRNA毒力因子及其基因mRNA呈剂量反应关系;novobiocin和coumermycinA1对ETEC生长的影响也受细菌培养环境的影响;在正常培养条件下,novobiocin或coumermycinA1对ETEC的生长有轻微抑制作用,毒力的表达也相对较低,但在培养环境改变时,如：在novobiocin 20μg/ml或coumermycinA1 2μg/ml的作用下,LT、ST和CFA的表达均明显增加,mRNA的表达也明显增高。结论 环境刺激可能通过影响ETEC染色体DNA毒力调控基因的超螺旋结构而调控ETEC毒力的表达。     

高催化活性Pt纳米颗粒的生物毒性研究

目的探究一种具有高催化活性的新型金属铂(Pt)纳米颗粒的生物毒性作用。方法选择C57BL/6雄性小鼠(SPF级)52只,鼠龄6~8周,体质量22~24 g。采用"一锅合成法"合成六面体状金属Pt纳米颗粒。将中国仓鼠卵巢(CHO)细胞与质量浓度0、0.4、1.2、3.7、11.0、33.0、100.0、300.0μg/mL Pt纳米颗粒溶液共培养,采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率、细胞毒性、细胞活性氧簇(ROS)变化。将小鼠分3批次(每批次为20、16、16只),按体质量随机分为正常对照组和实验组,测量小鼠30 d体质量变化、骨髓DNA和骨髓有核细胞(BMNC)数量、小鼠肝脏超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平、Pt元素在小鼠体内的生物分布、血常规和生物化学指标及对主要脏器的病理分析,分析Pt纳米颗粒对小鼠的生物毒性作用。结果 Pt纳米颗粒尺寸为(8.58±1.23) nm,晶格间隙为0.227 nm,呈面心立方晶格。体外研究结果表明,质量浓度300.0μg/mL Pt纳米颗粒溶液作用24、48 h,CHO细胞存活率85%、90%。质量浓度50.0μg/mL Pt纳米颗粒溶液可抑制细胞内ROS的产生。动物研究结果表明,质量浓度5 mg/mL Pt纳米颗粒溶液可使正常C57BL/6小鼠出现短暂的体质量下降(给药后15 d左右可恢复正常);作用30 d后,大部分聚集于肝脏及脾脏,与正常小鼠相比,实验小鼠只在肝脏组织中发现轻微炎症。实验小鼠血常规、生物化学指标未发现明显差异性变化;DNA和BMNC数量均出现轻微减少;Pt纳米颗粒溶液体内作用7 d后,肝脏组织的MDA水平出现轻微降低现象,而SOD活性未出现明显改变。结论质量浓度300.0μg/mL以下的Pt纳米颗粒溶液对CHO细胞无明显细胞毒作用,而质量浓度5 mg/mL Pt纳米颗粒溶液对小鼠虽然具有急性氧化应激毒理作用,但其毒理效应可在30 d内由生物体自行调节而恢复。     

霍乱弧菌单克隆抗体诊断应用的研究——Ⅱ.酶标霍乱弧菌单克隆抗体快速检测霍乱弧菌的实验研究

本文就所获得的12株霍乱弧菌单克隆抗体中有种特异性的三株(2B_1H_1C_6,2B_1H_1F_6及2B_1H_1F_3)单克隆抗体及抗霍乱弧菌多克隆抗体,作酶标抗体直接法和间接法,对霍乱弧菌模拟标本进行快速检测,探究在临床诊断应用中的价值。结果表明,酶标McAb较酶标多克隆抗体敏感,前者在10~4/ml菌时可以检出,后者要在10~4～10~6/ml菌时才能检出;同时表明酶标间接法比直法敏感,特异性实验结果显示酶标单克隆抗体对10株霍乱弧菌有很高的     

大鼠鼻咽上皮组织酶学和发育酶学研究 (Ⅰ) 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶产生的NADPH第Ⅰ和第Ⅱ途径

本文用MPV-2型显微分光光度计,对100只五个年龄组健康大鼠的鼻咽上皮的G6PDH产生的NADPH在第Ⅰ和Ⅱ途径代谢进行了原位定量组织化学研究,绘制了此二途径的发育线图。并用电镜细胞化学方法在13只成年大鼠观察了G6DH的亚细胞分布规律。文中对第Ⅰ和Ⅱ途径的代谢特点和功能意义进行了讨论。     

Ⅱ型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性的关联

目的探讨Ⅱ型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性是否有关联.方法采用聚合酶链式反应和限制性片段长度多态性方法,对Ⅱ型糖尿病患者和正常人脂蛋白脂酶基因内含子6PvuⅡ多态性及其对血脂及载脂蛋白(apo)水平的影响进行研究.结果表明Ⅱ型糖尿病与脂蛋白脂酶基因PvuⅡ多态性有一定关联.     

临床分离产头孢菌素酶阴沟肠杆菌的耐药性研究

目的：研究我院产头孢菌素酶（AmpC酶）阴沟肠杆菌的检出率、耐药情况厦ampC基因型。方法：收集临床分离的耐药阴沟肠杆菌15株;三维试验检测AmpC酶;NCCLS方法检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）;琼脂二倍稀释法测定MIC值;PCR扩增检测ampC基因及序列测定。结果：15株菌中8株菌（53,3％）产AmpC酶,3株菌（20．0％）产ESBLs。产AmpC酶的菌株除对亚胺培南全敏感外,对其它抗菌药不同程度耐药。5株菌的ampC基因与阴沟肠杆菌ECLC074的ampC基因100％同源,3株菌与之99％同源．2株菌的AmpC酶发生了1个氨基酸残基的改变。结论：产AmpC酶是阴沟肠杆菌对口．内酰胺类抗生素耐药的主要机制之一。阴沟肠杆菌ECLC074 ampC基因是我院主要的阴沟肠杆菌ampC基因型。产AmpC酶的阴沟肠杆菌常呈多重耐药,亚胺培南是治疗此类菌所致感染的最有效药物。     

鸭血清脂蛋白的研究 Ⅱ.鸭血清高密度脂蛋白的分离、提纯和鉴定及其性质

近年来发现动脉粥样硬化的发生率与血清HDL水平之间呈负相关。因此对HDL及其中载脂蛋白的结构,功能和代谢的研究兴趣大为增加。进行以上研究需要较大量的纯净样品。以往分离血清HDL多采用多次分步超速离心上浮或以密度梯度在水平头中