螺旋霉素发酵培养基的改进

目前螺旋霉素发酵生产中培养基氮源多用鱼粉或黄豆饼粉。黄豆饼粉的优点是原材料质量稳定，染菌率低，但发酵效价相对较低。以鱼粉作氮源发酵效价相对较高，但鱼粉质量不稳定。本研究对培养基配方进行改进，在黄豆饼粉配方中加入动物蛋白ＮＹ，提高了发酵水平。后采用正交设计对黄豆饼粉、ＮＹ、葡萄糖、淀粉四个因素作三水平试验，最终得到最佳培养基配方：黄豆饼粉２％，ＮＹｏ．５％，淀粉７．０％，发酵效价为原配方效价的１４０．９２％，证实了新配方的可靠性。     

灵芝发酵产物与野生灵芝氨基酸含量比较

灵芝是一种优良的保健真菌，在进行灵芝液体发酵研究时，分别对红芝（赤芝）、紫芝，黑芝等进行筛选，发现赤芝508，经特定培养和发酵，最适宜进行液体发酵。其发酵产物中氨基酸含量较野生赤芝为高。现将其结果报导如下：1材料与方法1．1供试菌株赤芝508（Ganodermalucidum508）为浙江省农科院微生物所保藏菌株1．2培养基斜面培养基：常规真菌培养基摇瓶培养基，玉米粉2．5％，黄豆饼粉1．5％，砂糖1．5％，MgSO40．05％，K2HPO40．05％。pH6．7。发酵罐5号配方：玉米粉2．5％，黄豆饼粉2％，砂糖1．5％，麸皮适量，MgSO40．025％，K2…     

玉米粉水解物作为红霉素发酵培养基的研究

研究了摇瓶试验中玉米粉水解物替代葡萄糖发酵红霉素的最佳培养基组成。用均匀设计法得到发酵基础培养基的最佳配比(wB，％)：玉米粉3．6，黄豆饼粉2．0，玉米浆0．23，碳酸钙0．5，淀粉0．6；用正交试验得到了优化的补混合料配比(％)：玉米粉4．5，黄豆饼粉2．0，硫酸铵1．0，酵母粉2．0；并得到了玉米粉的最适水解条件。30t发酵罐放大实验结果表明，用玉米粉水解物替代葡萄糖作碳源发酵红霉素，发酵单位提高5．8％，综合生产成本降低26．0％。     

黄豆饼粉对螺旋霉素合成的影响

黄豆饼粉是许多抗生素发酵培养基中较好的氮源,而螺旋霉菌如采用黄豆饼粉为主要氮源与生产用的鱼粉为主要氮源的培养基比较,则螺旋霉素合成有很显著的差异。为要提供工业生产抗生素的有用资料,我们对此作了进一步研究。 材料和方法 (-)菌种:我国土壤中分离到的螺旋霉素产生菌 Streptomyces spiramyceticusA.SP编号为——799-1941. (二)培养基 1.孢子斜面培养基:麦敖6％,琼脂2％ 2.种子培养基:黄豆饼粉25％,淀粉4％,NaCl0.4％,CaCO_30.5％,自来水,自然pH,500毫升三角瓶装量100毫升。 3.发酵培养基:     

西索米星生产培养基优化

在西索米星发酵与生产过程中，培养基组份品质、培养基配比极大地影响菌体生产与产抗能力。我们对西索米星发酵主氮源黄豆饼粉加工方法进行考察．发现采用热榨黄豆饼粉的稳定性优于冷榨黄豆饼粉；应用均匀设计优化发酵培养基也取得好效果。     

洛伐他汀发酵培养基的改进

探讨改进洛伐他汀发酵培养基的方法。方法采用正交设计对A粉、蛋白胨、葡萄糖、麦精四个因素作三水平试验。对培养基配方进行改进,用产生泡沫小的A粉代替豆粕粉。结果与结论提高了发酵水平。确定了最佳发酵培养基配方。     

多杀菌素的发酵工艺研究

用均匀设计法优化了多杀菌素发酵培养基的配方，同时探讨了前体物质对发酵效价的影响。结果得到优化培养基组成（g／L）：葡萄糖37．8，糊精42．0，棉籽粉22．3，脱脂奶粉9．0，CaCO3 3．0。发酵30h后添加10mmol／L的正丁醇效果最佳，优化后多杀菌素的效价为394．1μg／ml，比优化前提高了56％。     

均匀设计法优化咪唑立宾发酵培养基配方

本文采用均匀设计试验方法对咪唑立宾的发酵培养基配方进行优化,考察淀粉、麸质粉、黄豆饼粉和葡萄糖对其发酵效价和菌体生长量的影响,得到了四个因素的优化配比(淀粉1.8%,麸质粉1.5%,黄豆饼粉2.5%,葡萄糖0.6%),发酵效价比对照培养基提高约21.3%。     

棉籽饼粉在青霉素发酵中的应用研究

分别采用产黄青霉菌药用培养基、棉籽饼粉、玉米桨、花生饼粉、黄豆饼粉作为产黄青霉Ｐｘａ－１菌种发酵培养基中的有机氮源进行青霉素遥瓶发酵试验及２２Ｌ模拟发酵罐发酵试验,结果表明采用药用培养基生产能力最高,棉籽饼粉次之,但是具有非常广阔的应用前景。     

吉他霉素发酵培养基的改进

对吉他霉素发酵培养基进行了改进 ,选用 A粉和 B粉代替原配方中的淀粉和豆饼粉。采用正交试验设计方法 ,确定了最佳发酵培养基配方 ,经 10吨发酵罐连续 10批验证 ,平均发酵效价有所提高 ,产品质量合格 ,原材料消耗成本可降低 2 0 %以上 ,具有较高的经济效益     

庆大霉素发酵工艺的研究

目的通过对庆大霉素发酵条件的优化,提高发酵生产的能力。方法以绛红色小单孢菌2-25为对象,通过单因素试验和四因素三水平(4×3)正交试验筛选出了菌株2-25的最佳培养基配方及培养条件。结果该菌种的最佳发酵条件:5.0%玉米淀粉,3.0%黄豆饼粉,0.6%蛋白胨,0.15%硝酸钾,在33℃、pH 7.8、接种量25%,培养84h,产品质量符合中国药典2005版(CP2005)、美国药典28(USP28)。结论优化发酵条件后菌株2-25发酵水平明显提高。     

壳二孢氯素产生菌的鉴定及发酵培养基优化

目的对壳二孢氯素产生菌F05Z0761进行菌种鉴定,并进行培养基优化,提高其发酵单位。方法首先通过形态学特征进行鉴定,然后通过发酵培养基筛选实验并采用Plackett-Burman实验、最陡爬坡实验、中心组合实验设计等方法提高发酵单位。结果 F05Z0761经形态学鉴定显示该菌株属于镰刀菌属（Fusarium）,并得到了优化后的发酵培养基配方即:淀粉1.8%、葡萄糖2.5%、棉籽粉1.9%、热榨黄豆饼粉0.8%和KH₂PO₄0.2%,发酵单位较对照提高了4.38倍。结论由镰刀菌属产生壳二孢氯素在国内还未见报道,并将响应面实验设计应用于该菌株的发酵培养基优化中。     

产利普斯他汀菌株Streptomyces toxytricini FIM-17-16发酵条件的优化

目的 Streptomyces toxytricini FIM-17-16菌株生物合成利普斯他汀发酵条件的优化。方法 采用单因素试验和正交设计实验相结合的方法,优化Streptomyces toxytricini FIM-17-16发酵培养基和发酵参数。结果 确定了适宜发酵培养基配方和发酵参数：葵花籽油7%,甘油2%,黄豆粉3.25%,麸皮1%,卵磷脂1%,硫酸锌0.01%,碳酸钙0.08%,初始pH自然,装料系数80mL/500mL,种龄20h,接种量15%,摇床转速230r/min,发酵温度28℃,发酵时间168h,产利普斯他汀的水平达到了9667μg/mL,提高了20.6%,发酵周期缩短24h。结论 经过优化发酵条件,S. toxytricini FIM-17-16生物合成利普斯他汀能力大幅提高,为该菌株的工业化生产奠定了基础。     

达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论 紫外、微波及LiCl复合诱变后经抗生素抗性筛选,结合发酵培养基优化,可有效提高菌株的达托霉素发酵产量。     

达托霉素高产菌株选育及发酵条件优化

目的 通过对达托霉素产生菌进行诱变选育,并对其发酵条件优化,以提高其达托霉素发酵水平,降低生产成本。方法 以玫瑰孢链霉菌(DT-9#F2)为出发菌株,分别采用紫外诱变、微波诱变、LiCl诱变及复合诱变并结合链霉素抗性筛选进行菌株选育,同时,对其发酵培养基中氮源、碳源及生长因子进行优化,以进一步提高其发酵产量。结果 得到一株达托霉素高产突变株DT-37,其摇瓶发酵产量达到12.2mg/L,较出发菌株提高20.79%;优化后的发酵培养基为：酵母粉(YP300)1.65%、FeSO4 0.043%、葡萄糖1.50%、玉米淀粉7.20%、糖蜜0.72%,VB12 1.50μg/mL、硫辛酸5.00μg/mL。其摇瓶发酵产量达到30.56mg/L,较初始培养基提高了297.92%。经100L发酵罐上放大验证,达托霉素的产量达到了2872mg/L,较优化前提高了14.88%。结论     

紫外诱变复合重金属离子抗性突变选育霉酚酸高产菌株

以霉酚酸产生菌1321#为出发菌株,采用紫外线诱变并复合重金属Cr6 、Cu2 抗性株筛选,获得一株遗传性状稳定且摇瓶发酵水平提高86.6%的164#高产菌株。经发酵配方优化,该菌株的摇瓶单位再度提升了5.5%,显示出了高产潜力。     

多杀菌素产生菌复合诱变选育及发酵培养基优化

目的 利用诱变结合抗性筛选方法选育多杀菌素高产菌株,并通过发酵培养基优化进一步提高多杀菌素产量。方法 分别确定链霉素、安普霉素和鼠李糖3种抗性的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentration, MIC),然后以S.s1-4为出发菌株,通过紫外(UV)结合链霉素、安普霉素、鼠李糖抗性因子诱变选育,在此基础上利用亚硝基胍(NTG)结合上述抗性因子诱变选育,并利用响应面实验设计对发酵培养基中葡萄糖、糊精、棉籽蛋白3种成分进行优化。结果 出发菌株经过紫外照射30s,涂布于抗性平板上,筛选得到S.s2-21,S.s2-21再用NTG处理30min,涂布于抗性平板上,最终获得1株遗传性状稳定的菌株S.s3-37,产量为78.26mg/L,提高了45.71%;发酵培养基优化后,其产量达83.00mg/L。结论 利用紫外和NTG结合抗性复合诱变选育获得多杀菌素高产菌株是有效的,通过发酵培养基优化,其产量较出发菌株提高了54.55%,获得良好的效果。     

产多杀菌素刺糖多孢菌的诱变选育

目的 采用甲基磺酸乙酯(EMS)、核糖体工程育种和常压室温等离子体(ARTP)方法处理产多杀菌素刺糖多孢菌 (Saccharopolyspora spinosa) SIIA-1802,采用含蛋氨酸培养基筛选得到高产菌株。方法 首轮采用EMS诱变;第二轮采用链霉 素抗性育种;第三轮采用ARTP诱变育种进一步巩固育种成效;采用对照和添加蛋氨酸的发酵培养基考察突变菌株的发酵水 平。结果 出发株刺糖多孢菌SIIA-1802经过EMS诱变、链霉素抗性筛选和ARTP诱变得到的突变株ESA-611,发酵水平提高了 671.8%,采用含有蛋氨酸的发酵培养基进行筛选,发酵水平进一步提高了57.6%。在ARTP诱变过程中,筛选到一株多杀菌素A 显著下降,但产生较高水平多杀菌素J的菌株ESA-598。结论 本方法简单经济,突变效率高,能够快速获得传代稳定的多杀菌 素高产突变株。另外,通过诱变拓宽了代谢产物谱,得到了具有更高潜在价值的组分。     

肺炎球菌无动物源性成分培养工艺及纯化新工艺探索

目的:比较无动物源性成分培养基和动物源性培养基培养肺炎球菌的差异;摸索不使用有机溶剂的肺炎球菌多糖纯化新工艺。方法:用无动物源性的原料替代肺炎发酵培养基中动物源性的成分,考察菌体密度和多糖收量的变化;采用柱层析纯化工艺收获肺炎球菌多糖,测定各阶段核酸、蛋白、多糖含量。结果:与疫苗生产所采用动物源性发酵培养基相比,无动物源性发酵培养基收获的1,7F,19A型菌体密度分别提高了1倍左右;发酵液中多糖含量分别提高了48%,50%和200%;多糖收量提高了30%～90%。纯化新工艺收获的17F,18C,19F精糖,核酸和蛋白的含量均远远低于企业的注册标准,HPLC检测多糖纯度分别为99.24%,98.92%和99.02%。结论:无动物源性成分发酵培养基适合于肺炎球菌生长,不仅增加了多糖产量,也提高疫苗的安全性;纯化新工艺能够收获合格的肺炎精制多糖。     

响应面法优化替考拉宁发酵培养基及其扩大培养

目的 通过响应面法,优化替考拉宁发酵培养基,并对发酵工艺参数进行优化,来提高其发酵产量。方法 以游动放线菌TC19-3p-103为试验菌株,采用单因素试验确定发酵培养基考察因素的参考范围;利用最陡爬坡试验确定响应面试验的中心区域;利用Box-Behnken响应面法,确定了发酵培养基中的有机氮源最佳浓度组合;并对起始搅拌转速与通气量这两个发酵工艺参数进行单因素考察;在发酵过程中,采用流加技术控制碳源浓度。结果 经优化的发酵培养基,其摇瓶产量提高了31.6%;50L罐发酵工艺参数优化后,发酵水平达到8558 mg/L。结论 优化后的发酵工艺,显著提高了替考拉宁的产量,为其工业化生产奠定了基础。