雌二醇促进正常宫颈上皮永生化细胞系End1/E6E7增殖的研究

[目的 ]研究在 17- β -E2 作用下正常宫颈上皮永生化细胞End1/E6E7的生长增殖和HPV16 /E6E7基因、ERβ表达的变化 ,探讨雌激素及HPV与ERβ在宫颈上皮病变发展过程中的作用。[方法 ]选取ERα(- ) /ERβ( )的正常宫颈上皮永生化细胞系End1/E6E7细胞 ,应用MTT比色实验及流式细胞术研究 17- β -E2 对其生长与增殖的调控作用 ;应用RT -PCR方法半定量研究 17- β -E2 对该细胞中HPV16 /E6E7基因及ERβ基因表达的影响。 [结果 ]随 17- β -E2 浓度增加 ,倍增时间缩短 ,MTT吸光度值增高 (P =0 .0 4 5 ) ,细胞周期G0 、G1期比例下降 ,G2 、M及S期比例上升 (P =0 .0 0 2 ) ;HPV16 /E6E7mRNA表达增强 (P =0 .0 19) ;ERβmRNA表达无明显改变 (P =1.0 0 )。 [结论 ]雌激素可能通过ERβ以外的途径促进HPV16 /E6E7基因的表达 ,进而促进永生化宫颈上皮的增殖生长。     

不同高危型HPV感染与宫颈癌及宫颈高级别病变的相关性

目的 比较7种常见高危型HPV亚型感染与宫颈癌及高级别病变的相关性。方法 收集2014年1月至2016年10月在宁波市妇女儿童医院妇科接受宫颈组织学检查的1195例患者HPV16、18、31、33、35、52、58感染情况。采用Logistic回归方法分析上述各种高危型HPV亚型感染与宫颈癌及宫颈高级别病变的相关性。结果 在7种HPV亚型感染病例中,宫颈癌的检出率排序从高到低为： HPV18(5.78%)、HPV16(5.39%)、HPV58(1.71%)、HPV31(1.35%)、HPV52(0.39%)、HPV33(0%)、HPV35(0%),宫颈高级别病变的检出率排序从高到低分别为： HPV33(48.04%)、HPV16(47.86%)、HPV58(29.56%)、HPV31(24.65%)、HPV18(23.31%)、HPV35(22.58%)、HPV52(21.26%)。HPV16型感染时患宫颈癌的风险最大(OR=3.831,P＜0.05),HPV18型次之(OR=2.586,P＜0.05);HPV16型感染时患宫颈高级别病变的风险也最大(OR=2.880,P＜0.05),HPV33型次之(OR=2.531,P＜0.05)。结论 不同亚型的高危型HPV感染与宫颈癌及高级别病变的相关性不同;HPV16、18型感染与宫颈癌的相关性较大,HPV16、33型感染与宫颈高级别病变的相关性较大。     

FQ PCR方法检测延边地区高危型人乳头瘤病毒基因型

[目的]检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)的13种基因型,为早期诊断HPV感染和预防宫颈癌的发生提供依据.[方法]采用FQ PCR方法检测67例HPV感染患者高危型HPV基因型.[结果]67例患者中HPV基因型单一感染型者为14例(20.9%),多种HPV基因型混合感染型者为12例(17.9%),高危型HPV基因型在各种宫颈病变中的阳性率为38.8%,其在CINⅠ中的阳性率为5.1%(2/39),CINⅡ为66.7%(8/12),CINⅢ和宫颈癌中表达阳性率均为100.0%(10/10,6/6).[结论]HPV亚型检测可用于宫颈病变的筛查和病情判断,多重HPV感染及类别与宫颈病变级别相关.     

肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌的表达及其与HPV感染的关系

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中的蛋白表达以及人乳头瘤病毒(HPV)16E6、E7和HPV18E6/E7感染对其表达的影响。方法采用免疫组化SP法检测70例浸润性宫颈癌、15例原位癌、20例正常宫颈组织中KAI1蛋白的表达,采用PCR扩增-琼脂糖凝胶电泳法检测浸润性宫颈癌组织中HPV16E6、E7和HPV18E6/E7的DNA状况。结果宫颈浸润癌及原位癌组织中的KAI1蛋白表达与正常宫颈上皮中的表达相比明显下调(P<0.05),原位癌与浸润癌中的表达差异无统计学意义;HPV16E6、E7和HPV18E6/E7在浸润性宫颈癌中的阳性率分别为67.1%、54.3%和12.9%,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染与宫颈癌中的KAI1蛋白表达无相关性。结论肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中呈下调表达,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染不影响其表达。     

CD47的表达与宫颈病变程度的相关性分析

目的 探讨CD47的表达与宫颈病变的相关性。方法 基于TCGA,TCGA Target GTEx数据库中宫颈组织mRNA序列分析CD47在宫颈癌组织及正常宫颈组织的表达，绘制预后生存曲线。GEO数据库宫颈组织mRNA序列分析比较无HPV感染与HPV 16/18感染宫颈组织中CD47表达，进一步比较HPV 16/18感染后不同病变程度宫颈组织中CD47表达。收集320例宫颈癌筛查(HPV分型检测、E6/E7 mRNA检测)患者的阴道镜宫颈活检组织病理切片，免疫组化SP检测CD47的表达水平，分析HPV 16/18、病理等级与CD47的相关性。结果 生物信息分析及免疫组化提示与正常宫颈组织相比，CD47在HSIL及宫颈癌组织呈高表达，高表达的CD47与宫颈癌的预后相关。HPV 16/18感染后CD47的表达水平升高(t=2.494,P<0.05),且随着宫颈病变程度增高，CD47的表达水平随之增高(F=4.351,P<0.05;r_s=0.278,P<0.001)。HPV 16/18感染后E6/E7 mRNA(+)组CD47的表达水平高于E6/E7 m...     

HPV16E6与吲哚胺2，3-二氧化酶在宫颈病变组织中的表达

  目的   检测高危HPV感染的正常宫颈组织、宫颈癌前病变组织、宫颈癌组织HPV16E6和IDO的表达,分析二者在宫颈病变组织恶化过程中的关系,探讨其作为宫颈癌肿瘤标志物的可能性。   方法   把经第二代杂交捕获（HC-2）法行HPV DNA检测为高危型HPV感染的宫颈病变者120例为实验对象,正常宫颈组织、宫颈癌前病变组织、宫颈癌组织各40例。免疫组化染色法检测各组织中HPV16E6和IDO的表达情况。   结果   40例正常宫颈组织中HPV16E6和IDO阳性表达率分别为7.5%、0%;40例宫颈癌前病变组织中HPV16E6和IDO阳性表达率分别为37.5%、22.5%。40例宫颈癌组织中HPV16E6和IDO阳性表达率分别为90%、80%。在宫颈病变组织恶化过程中HPV16E6和IDO的阳性表达呈正相关（r_s = 0.710,P = 0.000）。   结论   HPV16E6和IDO的表达随宫颈病变的进展而呈现出阳性程度逐渐递增趋势,HPV16E6和IDO可考虑成为预测宫颈病变组织恶化的肿瘤标志物。      

自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中的表达及其与HPV感染的关系

目的 探讨自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中的蛋白表达以及对人乳头状瘤病毒(HPV)16 E6、E7感染的影响.方法 采用免疫组化SP法检测81例宫颈鳞癌、20例宫颈上皮内瘤样病变(CIN)Ⅱ-Ⅲ级和20例正常宫颈组织中自噬基因Beclin 1的表达,采用PCR扩增法检测宫颈鳞癌组织中HPV16E6、E7的DNA状况.结果 宫颈鳞癌组织中Beclin 1阴性、弱阳性、强阳性表达率依次是43.2%(35/81),34.6%(28/81),22.2%(18/81),分别与正常宫颈组15.0%(3/20)、30.0%(6/20)、55.0%(11/20)和宫颈上皮内瘤样病变组20.0%(4/20)、30.0%(6/20)、50.0%(10/20)相比,Beclin 1在宫颈鳞癌中的表达存在显著下调(P=0.009,P=0.033).HPV16E6、E7在宫颈鳞癌中的阳性率分别为66.7%和58.0%,HPV16 E6、E7感染与宫颈鳞癌中Beclin 1蛋白的表达无相关性(r=-0.126,P=0.262;r=-0.125,P=0.270).结论 自噬基因Beclin 1在宫颈鳞癌中表达下调,其表达对HPV16E6、E7感染无明显影响.     

HPV-16、HSV-2、EBV感染及PCNA表达与宫颈癌关系研究

[目的 ]探讨HPV - 16、HSV - 2、EBV感染及增殖细胞核抗原表达与宫颈癌的关系。[方法 ]采用免疫组化SP法分别检测 5 4例宫颈癌和 2 0例正常宫颈的HPV - 16、HSV - 2、EBV蛋白及PCNA表达情况。 [结果 ]HPV - 16、HSV - 2、EBV蛋白在宫颈癌组织和正常宫颈表达率分别为 5 7.4 %、38.9%、5 5 .6 %和 5 %、5 %、10 % (P <0 .0 5 ) ;PCNA在宫颈癌和正常宫颈表达率为81.5 %和 15 % (P <0 .0 5 ) ,而且随着宫颈癌病理分级的增高 ,其表达的阳性率也增高 ,强度增强 ;HPV - 16阳性组的PCNA表达高于阴性组 (P <0 .0 5 ) ,HSV - 2、EBV阳性组和阴性组的PCNA表达无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;3种病毒混合感染者的PCNA表达均为阳性。 [结论 ]HPV - 16、HSV - 2、EBV感染会促进宫颈癌的发生     

人乳头瘤病毒感染与宫颈癌前病变和宫颈癌关系的研究

目的 :探讨HPV感染与宫颈癌前病变及宫颈癌的关系。方法 :以聚合酶链反应 (PCR)和多重PCR法检测 75例宫颈癌、4 5例宫颈癌前病变、4 0例正常宫颈组织中HPV感染及型别分布状况。结果 :HPV总阳性率为 5 2 . 5 % ,HPV阳性率随宫颈病变的逐渐加重呈趋势性增加 (χ2 趋势 =5 9 811,P <0 . 0 1)。HPV感染率在不同临床分期及不同病理分级宫颈癌组织间无显著性差异 (P >0 . 0 5 )。宫颈癌组HPV16阳性率为 6. 1 3% ,宫颈癌前病变组为 2 6 . ,与宫颈癌前病变组相比 ,无显著性差异 (P >0 . 0 5 )。结论 :HPV感染是宫颈癌的主要致病因素 ,HPV16和宫颈癌密切相关 ,HPV感染对宫颈癌的进展及组织分化影响不大。     

TGF-β_1的表达、HPV16 E7基因多态性与宫颈癌的相关性

目的:探讨宫颈病变中TGF-β1的表达、HPV16E7型内变异与宫颈癌的关系。方法:对宫颈组织标本[39例宫颈鳞癌,34例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅱ-Ⅲ级与64例CINⅠ级宫颈组织]进行免疫组化法观察TGF-β1蛋白表达,同时多重HPV16E7引物进行巢式PCR扩增,并选择阳性扩增的基因片段DNA进行纯化、测序,检测基因变异。结果:TGF-β1的阳性率在CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组、浸润癌组中分别为:14.06%,41.18%,82.05%,其表达与宫颈病变的进展程度呈正相关(P<0.001,r=0.556)。在宫颈鳞癌临床分期各组别中,TGF-β1的阳性率在Ⅰa、Ⅰb、Ⅱa、Ⅱb组中依次增高(P=0.024)。检测到HPV16E7阳性样本共55例(CINⅠ组9例、CINⅡ-Ⅲ组14例和浸润癌组32例),其中原型15例。HPV16E7基因突变株最常见的为T846C变异株,该变异株在CINⅠ、CINⅡ-Ⅲ和鳞癌组中突变频率分别为66.67%、78.57%、81.25%,总检出率为78.18%。TGF-β1的表达在HPV16E7原型组和在HPV16E7A647G突变株组中无统计学差异(P=0.456)。结论:TGF-β1的表达与宫颈鳞癌的发生发展呈正相关,TGF-β1可能成为宫颈癌早期防治检测指标之一。HPV16E7A647G突变株较原型未通过改变TGF-β1介导的信号途径影响其致瘤性。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

醋柳黄酮缓释片的药动学初步研究

目的:研究醋柳黄酮缓释片在家犬体内的药动学过程,测定其药动学参数,计算缓释片相对于普通片的生物利用度。方法:将实验动物分为两组,分别用醋柳黄酮缓释片和普通片进行口服给药,用高效液相色谱法测定血浆药物浓度,应用3P97软件求算药动学参数。结果:醋柳黄酮缓释片及普通片的tm ax分别为4.87 h和2.87 h,Cm ax分别为每小时0.46μg.L-1和每小时0.56μg.L-1,缓释片的相对生物利用度为111.7%。结论:醋柳黄酮缓释片与普通片均符合一室模型,缓释片与普通片具有生物等效性,且醋柳黄酮缓释片有明显的缓释效果。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

主动脉窦瘤破裂的外科治疗

报告２０例主动脉窦瘤破裂修复术的结果。１７例男性，３例女性。年龄７～５６岁。痊愈１９例，另一例因急性肾功能衰竭一周后死亡。作者就发病机理，诊断和合并畸形的处理进行了讨论。     

正常增殖期子宫内膜细胞增生状态的定量观察

以＾３氢－胸腺嘧啶核苷放射自显影法及ＨＥ染色，观察并分别测定了１８例正常子宫内膜增殖中期，１５例增殖晚期的腺上皮细胞或间质细胞的标记指数、分裂指数。结果显示：子宫内膜增殖晚期腺上皮细胞或间质细胞之ＬＩ均明显高于增殖中期。同时，增殖晚间质细胞之ＭＩ也明显高于增殖中期，即此两种细胞在增殖晚期中增生明显，其增生状态初步获得了定位定量测定的正常值。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

腰椎间盘突出症再次手术的原因分析

目的解决腰椎间盘突出症手术中神经压迫。方法对1980～1998年再手术资料进行统计分析,讨论分析再手术原因,再次手术前影像学检查,观察病理变化以确定再手术方法。结果对11例随访6个月～1年,优7例(68．4％),良3例(36．8％),差1例(2．8％)。结论初次手术前详细查体和分析X线片,术中用导尿管和神经剥离探查,尽量避免髓核遗留,手术范围不宜太大,尽量减少对软组织和脊柱结构的破坏,避免形成硬膜囊与神经根粘连而致单纯形疤痕。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。