荧光定量PCR检测289例乙型肝炎病毒DNA意义分析

目的荧光定量PCR检测血样中乙型肝炎病毒DNA拷贝数，探讨血清HBV—DNA检测结果与HBV抗原抗体(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)5项标志物(HBV—M)间的关系及临床意义。方法采用荧光定量PCR和ELISA法分别检测289例乙肝患者血样。结果122例HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率98．4％；89例HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率42．7％；27例HBsAg、HBcAb均阳性血样中，HBV—DNA阳性检出率29．6％；6例HBV—M全阴性血样中，1例HBV—DNA呈弱阳性。结论只有检测HBV—DNA才能确定HBV的真实感染和复制情况。荧光定量PCR检测HBV—DNA作为判断乙肝病毒感染、复制及传染性强、弱等的确定依据，在追踪患者预后及流行病学上有一定意义。     

HBV—DNA实时荧光定量检测与HBV免疫标志物结果相关性分析

目的通过对血清中乙型肝炎病毒核酸（HBV～DNA）的实时荧光定量PCR（real—timePCR）（荧光探针法）检测结果与乙肝免疫标志物相关性分析,从而探讨二者在临床诊断中的应用。方法采用real—timePCR法检测HBV—DNA．ELISA法检测血清HBV免疫标志物。结果121例乙型肝炎标本中,FIBsAg＋、HBeAg＋、FIBcAb＋阳性组患者有39例．血清HBV—DNA阳性率67％,平均浓度1．42x10’Iu／rnl;HBsAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋阳性组患者有64例,血清HBV—DNA阳性率45％,平均浓度4．29×10^5IU／ml;HBsAg＋,HBcAb阳性组患者有6例,血清HBV—DNA定量值均为〈500;HBsAg＋,HBeAg＋,HBeAb＋,HBcAb＋有2例,血清HBV-DNA阳性50％,平均浓度2．96×10^4IU／ml。结论血清中HBV—DNA定量检测结果与乙肝免疫标志物结合能更好地为临床提供准确可靠的诊断数据。     

荧光定量聚合酶链反应法检测学龄儿童血清乙型肝炎病毒

目的 用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法定量检测学龄儿童血清中的乙型肝炎病毒(HBV),以指导临床。方法 以完全闭管式实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法,检测248份学龄儿童血清标本,同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测其中HBV的免疫标志物。结果 208份患儿血清标本HBV DNA的阳性率为76.0％,其中HBsAg、HBeAg、HBcAb组88份,HBsAg、HBeAg组12份和HB-sAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb组8份的阳性率均为100％,HBV DNA的平均拷贝数分别为1.0×10~8、4.4×10~8和2.2×10~7,其余各组HBV DNA的阳性率与HBsAg、HBeAg、HBcAb组比较,结果均为P<0.01。40例健康儿童血清中的HBV DNA全部为阴性。结论 FQ-PCR可以检测学龄儿童HBV感染和复制的真实情况,对于儿童乙型肝炎的临床诊断、疗效观察和判断预后有较好的指导意义。     

乙型肝炎病毒感染者不同血清学标志物模式与HBV-DNA定量关系的研究

目的：探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染者不同血清学标志物模式与HBV DNA定量的关系，为乙型肝炎的诊断、治疗及预防提供诊据。方法：对814例血清标本采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HBV血清标志物，应用实时荧光定量聚合酶链反应（FQ－PCR）方法检测HBV DNA含量。结果：HBsAg( )、HBeAg( ),HBcAb( )模式HBV DNA阳性率为87．28％（302／346），HBV拷贝数≥10^8/ml占63．87％；在HBsAg阳性，HBcAb阳性模式中，有40例（48．78％），检测出HB－DNA，部分血清标本的BV－DNA拷贝数较高，此可能是HBV前核区基因突变，导致HBeAg不能表达，但病毒本身复制未受影响HBeAg(＋）模式的HBV DNA阳性率，拷贝数明显高于其它不同血清学标志物模式（P＜0．005）。结论：单凭血清学标志物模式难以准判断HBV的复制程度及传染性的强弱，定量检测HBV DNA真实反映HBV复制情况，对乙型肝炎的诊断及防治提供客观依据。     

血清HBV—DNA与HBV血清标志物的相关性研究

目的探讨血清HBV—DNA水平与HBV血清标志物的相关性。方法对339例临床血清标本采用荧光定量PCR法进行HBV—DNA检测,同时采用ELISA法进行乙肝免疫学对比检测。结果血清HBV—DNA水平与HBV血清标志物的表现模式有关,以HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)模式患者的HBV—DNA阳性检出率最高,为97.1%,DNA平均拷贝数为4.23×10~7,其次为HBsAg(+),HBeAb(+),HBcAb(+)模式,HBV—DNA阳性检出率为33.0%,DNA平均拷贝数为2.07×10~4,均显著高于其它模式的患者。结论HBeAg和HBV—DNA有明显的相关性,测定血清中HBV—DNA更能直接地反映病毒在体内的复制状况,为诊断、治疗提供科学的依据。     

乙肝病毒标志物与PCR-HBV定量水平的关系

目的：研究乙型肝炎病毒标志物定量检测结果与其HBV－DNA含量的临床关系。方法：采用时间分辨免疫定量和荧光定量－PCR技术，对HBV－M和HBV－DNA含量进行检测。结果：在HBsAg/HBeAg/HBcAb,HBsAg/HBeAb/HBcAb,HBeAg/IC及单纯HBcAb阳性的4个组中，HBV－DNA阳性率分别是97．17％，30．56％，100％和25％；在HBsAg，HBeAg，HBeAb、HBcAb定量检测高、低值两组HBV－DNA含量对比中，HBV－DNA阳性率分别为76．92％，58．14％；100％，97．26％；20．00％，11．42％；64．62％和27．63％。结论：HBV－DNA比HBV－M更能及时准确反映乙型肝炎病毒感染的病程情况。     

血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性

目的 探讨HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式之间的相关性.方法 将265例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的荧光定量PCR检测,按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行HBV DNA与乙肝病毒标志物的分析研究.结果 乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率98.3%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组阳性率77.8%,HBsAg、HBcAb阳性组阳性率83.3%;HBsAg阳性组阳性率60%;:HbeAb、HBcAb阳性组阳性率42.1%;HBsAb阳性组阳性率38.1%;全阴性组阳性率3.1%.结论 HBV DNA荧光定量PCR法检测在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大(3.1%～98.3%);乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV-DNA阳性率较高;HBsAg及其抗体阳性者也可检出HBV DNA,甚至乙肝模式全阴性者仍可检出HBV DNA.说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的.因此同时检测乙肝标志物和HBV DNA有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断.     

乙型肝炎表面抗原与乙型肝炎表面抗体共阳性和其他乙肝标志物存在模式与病毒增殖量间关系研究

目的对乙肝患者血清标志物HBsAg与HBsAb同时阳性患者中HBeAg、HBeAb、HBcAb检测结果及不同分布模式中HBV-DNA复制增殖结果分析,为临床抗病毒治疗提供参考依据。方法从3 886例HBsAg阳性患者中,用酶联免疫法(ELISA)检测乙肝标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,并对HBsAg与HBsAb同时阳性的临床标本实时PCR方法,进行HBV-DNA检测所含病毒拷贝数量。结果 26例患者同时出现HBsAg与HBsAb阳性,并与HBeAg、HBeAb、HBcAb标志物形成4种不同模式。模式HBsAg+、HBsAb+、HBeAg-、HBeAb+、HBcAb+最为常见,且DNA拷贝数10~3copies/ml;而模式HBsAg+、HBsAb+、HBeAg-、HBeAb-、HBcAb+与模式HBsAg+、HBsAb+、HBeAg+、HBeAb-、HBcAb+DNA拷贝数分别为10~3copies/ml~10~5copies/ml以及10~6copies/ml~10~7copies/ml。结论在HBsAg和HBsAb双阳性的情况下,其他乙肝标志物的出现情况预示乙肝病毒的复制延续与否,结合DNA增殖情况可为乙肝治疗方案提供较好依据。     

荧光定量检测HBV DNA与血清五项指标对比分析

目的血清乙肝病毒标志物(HBV-M)与血清HBV DNA含量的相关性。方法采用ELISA法测定HBV抗原、抗体,FQ-PCR测定HBV DNA。结果在1600例血清标本中,FQ-PCR273例阳性,阳性率17．1%；在五项指标组合模式中以HBsAg、HBeAg和HBeAb均阳性者FQ-PCR检出HBV-DNA阳性率最高为98．9%(180/182),HBV DNA平均拷贝数2．48×10~7；其次为257例HBsAg、抗-Hbe、抗HBc均阳性者,FQ-PCR186例阳性,阳性率72．3%,HBV DNA平均拷贝数3．92×10~5。结论两种方法具有很好的相关性,都是诊断乙肝病毒感染的重要方法。同时进行乙型肝炎血清标志物的检测及HBV DNA定量PCR的检测,更有利于临床对HBV感染的诊断,对治疗方案的选择及疗效判断。     

儿童乙型肝炎血清标志物与HBV-DNA定量检测的关系探讨

[目的]探讨儿童乙型肝炎病毒(HBV)血清标志物与HBV-DNA含量的关系. [方法]202例血清标本用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测乙型肝炎病毒标志物,同时用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测标本中HBV-DNA的含量. [结果]HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组中,HBV-DNA阳性率为98.9%(88/89);HBsAg、HBeAg阳性组的HBV-DNA阳性率为100%(6/6);HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组中,HBV-DNA阳性率为25%(9/36);HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性组的HBV-DNA阳性率为12.5%(2/16);HBsAg、HBcAb阳性组和HBeAb、HBcAb阳性组分别5例中各有1例检出HBV-DNA;33例HBsAb阳性中仅1例HBV-DNA阳性;12例HBV血清标志物全阴的标本未检出HBV-DNA.[结论]儿童乙肝患者的多种血清标志物模式中都存在HBV-DNA复制.以HBeAg阳性者HBV-DNA复制水平最高.血清标志物与HBV-DNA联合检测对乙型肝炎的早期诊断、治疗方案的制定,尤其对抗病毒药物治疗的疗效观察具有重要的临床意义.     

广西肝癌高发区人群血清HBV标志物与HBV-DNA水平的对比研究

目的 研究广西肝癌高发区肝癌高危人群中不同乙型肝炎病毒血清标志物模式与HBV-DNA 复制水平的关系.方法 在广西肝癌高发区采集肝癌高危对象静脉血标本2 800 份,用酶联免疫法检测乙肝病毒血清标志物,荧光定量PCR 法(FQ-PCR)检测HBV DNA 复制水平.结果 在2 800份血清标本中,大三阳(即HBsAg、HBeAg、抗HBc 均阳性)1 345 例,其中HBV-DNA 检出1 319 例,检出率为98.07%,平均拷贝数为8.78 × 107/ mL;小三阳(HBsAg、抗Hbe、抗HBc均阳性)756 例,HBV-DNA 检出455 例,检出率为60.19%,平均拷贝数为3.23×106/ mL;HBsAg、HBcAb 阳性419 例,HBV-DNA 检出161 例,检出率38.42%,平均拷贝数3.31×106/ mL.结论 在HBV 血清标志物模式中,以大三阳者的HBV 复制水平最高,应加强监测.     

1517例乙肝标志物和HBV-DNA定量相关性分析

目的探讨血清HBV-DNA水平与HBV血清标志物的相关性。方法采用实时荧光定量PCR对1517例HBV感染者血清标本中HBV-DNA含量进行检测,同时用ELISA法检测其HBV免疫标志物。结果HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组患者血清HBV-DNA检出率98.24%;HBsAg、HBeAg阳性组为100.00%;HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组为60.98%;HBsAg、HBcAb阳性组为37.71%;HBcAb阳性组为12.90%。结论患者血清HBV-DNA的阳性率与HBV血清标志物的存在状态相关,采用FQ PCR法检测HBV-DNA能更准确、直接地反映体内病毒复制情况。     

乙肝患者前S1蛋白、HBV DNA检测结果的评价

目的：探讨乙型肝炎前S1蛋白、HBV DNA检测的实际意义。方法：采用ELISA法检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBeAb、前S1蛋白，采用PCR法检测ItBVDNA。结果：乙型肝炎患者前S1蛋白对HBsAg、HBeAg、HBeAb和HBeAb阳性的检出率分别是24．1％，29．4％，14．4％和20．6％，而HBV DNA的检出率分别是56．7％，100％，12．4％和48．5％；HBsAg/HBeAg／HBeAb均阳性的高复制组中，前S1蛋白阳性占29．4％，HBV DNA阳性占100％；HBsAg／HBeAb／HBcAb均阳性的低复制组中，前S1蛋白阳性占19．2％，HBV DNA阳性占16．4％；HBsAb／HBeAb／HBcAb均阳性的康复组中，前S1蛋白和HBV DNA均为阴性。结论HBV DNA与乙型肝炎的复制状态极为密切，乙型肝炎患者前S1蛋白对乙型肝炎患者检出能力较低。     

血清中前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg检测结果及临床意义的分析

目的对比分析前S1抗原、HBV—DNA和HBeAg在乙型肝炎感染期主要临床意义。方法用酶联免疫吸附法（ELISA）分别检测前S1抗原和乙肝血清标志物“五项”，用荧光定量聚合酶反应（PCR）检测HBV—DNA，对619例乙肝病毒标志物进行检测，检测结果进行统计分析。结果619例中HBV-DNA阳性率78．4％[485／619]，前S1抗原的阳性率为69．34％[429／619]，其中HBeAg阳性／HBeAg阴性[HBeAb阳性]又分为两组，结果：前S1抗原阳性率在EBeAg阳性模式组中明显高于HBeAg阴性／抗HBeAb阳性模式组，前S1抗原与HBV—DNA和HBeAg检测有明显相关性和互补性。结论前S1抗原的检测可以较好的反映HBV存在和复制的情况，前S1抗原作为辅助或补充指标联合HBV血清标志物与HBV—DNA同步动态监测，为乙型肝炎的诊断、治疗和预后判断提供依据，具有重要临床价值。     

乙型肝炎患者血清前S1抗原检测的临床意义

目的探讨前S1抗原在乙型肝炎血清标志物模式中的价值及临床意义。方法对3017例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性患者血清标本同时进行乙型肝炎病毒(HBV)标志物、前S1抗原的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测和HBV DNA的实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测,并分前S1抗原阳性组与阴性组进行统计学分析。结果前S1抗原阳性的乙型肝炎血清标志物模式组中HBV DNA的检出率为77.09%,检出率较高的3种血清学模式是HBsAg与乙型肝炎e抗原(HBeAg)双阳(模式⑤,100.00%),HBsAg、HBeAg、乙型肝炎核心抗体(HBcAb)三阳(模式①,95.99%),HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb四阳(模式③,94.44%);前S1抗原阴性的乙型肝炎血清标志物模式组中HBV DNA的检出率是29.30%,检出率较高的3种血清学模式是模式⑤(100.00%)、模式③(66.67%)、模式①(64.04%)。前S1抗原阳性组检出HBV DNA的平均含量是(7.36±0.90)拷贝/mL,阴性组是(5.42±1.16)拷贝/mL。两组比较:HBV DNA的检出率(P<0.005)和HBV DNA的含量(P<0.05)差异都有显著性。结论前S1抗原作为一种新的反映HBV复制状态和传染性的指标,在乙型肝炎血清标志物模式中具有重要意义,其阳性血清标志物模式患者HBV复制活跃,HBV含量高。     

乙型肝炎病毒感染患者的联合检测临床意义

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染患者血清乙型肝炎五项标志物、乙型肝炎DNA(HBV-DNA)定量与乙型肝炎前S1抗原(PreS1Ag)联合检测的临床意义,以期能为临床诊断提供参考。方法 2012年1月-2013年7月对诊治的120例HBV感染患者空腹抽取静脉血检测乙型肝炎五项标志物、HBV-DNA定量与PreS1Ag,分析其结果,采用SPSS17.0软件进行统计分析。结果乙型肝炎五项标志物检测结果 HBsAg+HBsAb、HBsAg+HBeAg+HBcAb、HBsAg+HBeAb+HBcAb、HBsAg+HBeAg、HBsAg+HBeAb、HBsAg+HBcAb模式分别占2.50%、25.84%、45.00%、10.00%、5.83%、10.83%,PreS1Ag阳性率为60.83%,HBV-DNA阳性率为67.50%;HBV-DNA阳性患者中PreS1Ag阳性率74.04%高于HBeAg阳性率45.68%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乙型肝炎五项标志物、HBV-DNA、PreS1Ag联合检测更能准确判断HBV复制状况及传染性。     

引起HBVe系统双阳模式的另一种机制

目的:探讨HBV e系统双阳模式产生的一般性原因。方法:常规乙肝标志物免疫学检测筛选出61份e系统双阳模式血清样本,对每一份样本进行HBeAg RIA定量、前S1抗原检测以及HBV DNA荧光定量。结果:61份双阳模式血清的HBeAg RIA定量在1.5×105~2.1×105ng/ml区间内;前S1抗原检测54份阳性,阳性率88.5%;HBV DNA荧光定量全部阳性,平均拷贝数在107以上。结论:e系统双阳模式中的HBeAb为假阳性,双阳模式实为病毒高载量的表现,而不是血清转换。     

HBV核酸与HBV血清标志物的关系研究

〔目的〕探讨乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)与HBV血清标志物的关系。〔方法〕将血清样本用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测HBV-DNA和乙型肝炎病毒标志物。〔结果〕A组(HBsAg和HBeAg两项阳性)、B组(大三阳)、C组(HBsAg、HBcAb两项阳性)和D组(小三阳)的HBV-DNA阳性率分别为97.06%、88.24%、57.14%和43.33%,HBV-DNA量的对数均值分别为6.0267、5.5667、4.9639、5.1520、5.4574,各组间HBV-DNA阳性率和HBV-DNA量均存在显著性差异(P<0.05);178份HBV-DNA阳性标本中HBsAg100.00%阳性;HBsAg阳性、HBeAg阳性和HBsAg阳性,HBeAg阴性组中HBV-DNA阳性率分别为89.34%和44.52%,存在显著性差异(P<0.05)。〔结论〕HBsAg和HBeAg两个阳性组病毒复制最活跃,HBV-DNA阳性率和HBV-DNA量显著高于其它组别;HBeAg与HBV-DNA密切相关,但不能完全反映HBV在体内的复制情况,将FQ-PCR定量检测作为血清学方法的补充具有重要的临床意义。     

乙肝病毒DNA和血清标志物的相关性

目的研究HBV血清学标志物和HBV—DNA两者之间的相关性，为确定乙肝检测项目提供科学依据。方法对福州市整群抽样调查的健康人群用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测HBV血清学标志物，采用核酸扩增（PCR）荧光定量检测法检测HBV—DNA，并采用SPSS13．0软件进行统计分析。结果498例HBsAg阳性血清中，HBV—DNA阳性327例，阳性率为65．66％；乙肝大三阳HBV—DNA阳性率为90．35％，小三阳HBV—DNA阳性率为59．07％，两者差异有统计学意义（P〈0．01）；HBeAg阳性标本中HBV—DNA阳性率为90．00％，HBeAg阴性标本中HBV—DNA阳性率为57．94％，两者差异有统计学意义（P〈0．01）。结论HBV血清学标志物和HBV—DNA二者之间互有联系但又有所不同，不能只以HBeAg的检测结果作为判断HBV传染性和复制的指标，而应选择检测HBV—DNA作为补充。     

HBV-DNA含量及Pre-S1检测在诊断乙肝病毒复制中的临床意义

目的了解乙肝患者不同血清学标志物模式(HBV-M)与乙肝病毒DNA含量及乙肝病毒前S1蛋白的关系,为预测乙型肝炎病毒的传染程度、乙肝的预防、诊断及治疗提供实验室依据。方法采用美国ABBOTT公司生产的AXSYM全自动免疫分析仪和微粒子酶免检测试剂盒对456例携带不同血清学标志物的乙肝患者进行乙肝五项指标检测,并用聚合酶链反应定量检测血清HBV-DNA含量,同时,用ELISA法检测乙肝病毒前S1抗原。结果五种HBV免疫模式中HBsAg、HBeAg和HBcAb同时阳性,其HBV-DNA定量阳性和HBV-PreS1的检出率分别为94.1%和81.2%;HBsAg、HBeAb和HBcAb阳性组的检出率分别为53.4%和43.7%;其他不同血清学模式组也有不同的阳性率。结论Pre-S1可敏感反映乙型肝炎病毒的复制情况,尤其可反映HBeAg阴性的乙肝患者仍存在病毒复制。HBV-DNA、乙肝病毒五项标志和前S1蛋白联合检测,对更好地早期诊断HBV感染,了解病毒的复制情况,疗效观察和预后判断均具有重要意义。