姜黄素及其类似物H8对糖尿病大鼠心肌损伤的改善

目的探讨姜黄素及其类似物H8改善糖尿病大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将50只健康8周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为5组,分别为对照组、糖尿病组和3、6 mg/kg H8组及姜黄素(6 mg/kg)组,每组10只。糖尿病组和3、6mg/kg H8组及姜黄素组建立2型糖尿病大鼠模型后,H8组和姜黄素组采用灌胃方式染毒,对照组及糖尿病组均给与等量的1%CMC-Na溶液,染毒容量为2.5 ml/kg,每日1次,连续4周。测定血清中脂蛋白A [lipoprotein A,LP(A)]、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白(high-density lipoprotein,HDL)、低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein,LDL)、血糖(glucose,GLU)的水平。采用HE和MASSON染色检测大鼠心肌组织的病理改变及纤维化情况。采用Real-time PCR法检测大鼠心肌组织中心钠肽(ANP)、脑钠肽(BNP)、Bax/Bcl-2、Caspase-3 mRNA的表达水平;采用Western Blot法检测Bax、Bcl-2、Caspase-3的蛋白表达水平。结果与对照组比较,糖尿病组大鼠血清中LP(A)、TC、TG、GLU水平较高,差异有统计学意义(P0.05);与糖尿病组比较,6 mg/kg H8组血清中TC水平降低,3、6 mg/kg H8组及姜黄素组血清中LP(A)、TG、GLU水平较低,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,糖尿病组心肌细胞排列紊乱,部分心肌细胞变性坏死,且肌间质胶原纤维分布及心肌增生纤维组织积分光密度增加,差异有统计学意义(P0.05);与糖尿病组比较,3、6 mg/kg H8组及姜黄素组大鼠病理情况及心肌细胞纤维化程度均得到了明显的改善,且心肌增生纤维组织积分光密度减少,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,糖尿病组大鼠心肌组织中ANP、BNP mRNA表达均升高,差异有统计学意义(P0.05);与糖尿病组比较,3、6 mg/kg H8组及姜黄素组大鼠心肌组织中ANP、BNP mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,糖尿病组大鼠心肌组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3的mRNA和蛋白表达水平及Bax/Bcl-2的比值均升高,差异均有统计学意义(P0.05);与糖尿病组比较,3、6 mg/kg H8组及姜黄素组大鼠心肌组织中Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达水平及Bax/Bcl-2的比值均降低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论姜黄素及其类似物H8可通过抑制凋亡因子基因和蛋白的表达,改善糖尿病大鼠心肌损伤。     

孕哺期及断乳后氯化镧暴露对大鼠大脑皮质神经细胞钙稳态及Bcl-2蛋白家族和caspase蛋白表达的影响

目的研究氯化镧对大鼠大脑皮质神经细胞钙稳态、Bcl-2和caspase蛋白表达的影响。方法 32只雌性成年Wistar大鼠随机分成对照和低、中、高剂量氯化镧组,与雄性成年Wistar大鼠按1∶1比例同笼交配。对照和低、中、高剂量氯化镧组雌性大鼠自受孕起分别饮用以蒸馏水配制的0、2.5、5和10 g/L氯化镧溶液,并哺育其子代大鼠。对照和低、中、高剂量氯化镧组子代大鼠断乳后分别饮用以蒸馏水配制的0、2.5、5和10 g/L氯化镧溶液1个月。采用Fura 2荧光探针法测定子代大鼠大脑皮质神经细胞内Ca~(2+)浓度,以流式细胞仪法测定子代大鼠大脑皮质细胞凋亡率,采用Western blotting法测定子代大鼠大脑皮质Bcl-2、Bax、caspase 3、caspase 8、caspase 9和caspase 12蛋白水平。结果各氯化镧组子代大鼠大脑皮质神经细胞内Ca~(2+)浓度和细胞凋亡率均显著高于对照组(P0.05),且随氯化镧染毒剂量增加而升高。低、中剂量氯化镧组子代大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白水平低于对照组(P0.05),而Bax、caspase 3、caspase 9和caspase 12蛋白水平高于对照组(P0.05);高剂量氯化镧组子代大鼠大脑皮质Bcl-2蛋白水平低于对照组和低、中剂量氯化镧组(P0.05),Bax、caspase 3、caspase 9和caspase 12蛋白水平高于对照组和低、中剂量氯化镧组(P0.05)。然而各氯化镧组caspase 8蛋白水平与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论氯化镧导致大鼠大脑皮质神经细胞过度凋亡可能与神经细胞钙稳态失衡、Bcl-2表达下降和Bax、caspase 3、caspase 9、caspase 12表达升高有关。     

前列地尔对糖尿病大鼠视网膜Bcl-2、Bax表达的影响

目的观察前列地尔对糖尿病大鼠视网膜组织细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响,探讨前列地尔防治糖尿病性视网膜病变的作用机制。方法选择健康成年SD大鼠40只,随机分成正常对照组、模型组、前列地尔低剂量(0.5μg/kg)组和高剂量(1μg/kg)组。腹腔内注射链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病。前列地尔治疗组给予前列地尔静脉注射4周,模型组和对照组灌服等体积生理盐水,随后进行视网膜组织取材,采用Real Time PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达,采用Western Blot法检测Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果 1)Bcl-2 mRNA和蛋白表达结果:模型组(0.42±0.05、0.33±0.03)均显著高于对照组(0.37±0.11、0.28±0.03)(P0.05);前列地尔低剂量组(0.56±0.06、0.46±0.04)、高剂量组(0.65±0.04、0.59±0.04)均显著高于模型组(0.42±0.05、0.33±0.03),且与剂量呈正相关(P0.05);2)Bax mRNA和蛋白表达结果:模型组(0.75±0.27、0.71±0.04)均显著高于对照组(0.33±0.05、0.22±0.03)(P0.05);前列地尔低剂量组(0.60±0.08、0.48±0.04)、高剂量组(0.44±0.07、0.31±0.02)均显著低于模型组(0.75±0.27、0.71±0.04),且与剂量呈负相关(P0.05)。结论前列地尔可通过调节糖尿病大鼠视网膜组织中Bax和Bcl-2的表达改善视网膜病变。     

miR-423-5p参与AMI大鼠心肌细胞凋亡的机制研究

目的探讨miR-423-5p对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法采用冠状动脉左前降支结扎法建立AMI大鼠模型,将其随机分为模型组、阴性组和干扰组,另设只开胸穿针不做冠状动脉结扎的假手术组,每组7只;采用Real-time PCR检测各组心肌组织中miR-423-5p的表达水平,心脏彩超检测各组大鼠的心脏功能,TCC法检测各组大鼠的心肌梗死面积,TUNEL法检测各组心肌细胞的凋亡指数,Western blot检测Cleaved caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白的表达水平。结果与假手术组相比,模型组和阴性组中miR-423-5p表达水平、左室收缩末期内径(LVDS)、左室舒张末期内径(LVDD)和Bcl-2蛋白表达水平均降低,而左室长轴缩短分数(FS)、左室射血分数(LVEF)、心肌细胞凋亡指数、心肌梗死面积和Cleaved caspase-3、Bax蛋白表达水平均明显升高(P0.05);与模型组和阴性组相比,干扰组中上述指标变化明显逆转(P0.05)。结论 miR-423-5p可通过下调Cleaved caspase-3、Bax和上调Bcl-2表达抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡,改善心脏功能,从而减轻AMI。     

不同有氧运动时间对小鼠心肌细胞凋亡的影响

目的比较不同有氧运动时间对小鼠心肌细胞凋亡的影响及作用机制。方法 80只2月龄雄性清洁级BALB/c小鼠随机分为短期静止组、长期静止组、短期运动组和长期运动组各20只。短期静止组和短期运动组小鼠饲养和有氧训练3个月,长期静止组和长期运动组小鼠饲养和有氧训练6个月。分别采用TUNE法、RTPCR法和蛋白印迹法测定心肌细胞凋亡情况以及Bcl-2、Bax的mRNA和蛋白表达。结果长期运动组小鼠心肌细胞凋亡指数较其他三组小鼠明显下降(P0.05),并且心肌Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平、Bcl-2/Bax比值较长期静止组及短期静止组小鼠显著上升(P0.05),而Bax mRNA及蛋白表达水平较长期静止组、短期静止组显著下降(P0.05)。与短期运动组比较,长期运动组Bcl-2/Bax mRNA比值及蛋白比值得到明显改善(P0.05)。短期运动组小鼠的心肌细胞凋亡指数以及心肌Bcl-2、Bax表达较短期静止组有所改善,但差异无统计学意义。结论 6个月有氧运动训练可有效阻止小鼠心肌细胞凋亡,改善心肌细胞Bcl-2、Bax表达和Bcl-2/Bax水平是其重要的作用途径。     

丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响研究

[目的]探讨丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响。[方法]选取50只Wistar大鼠,随机分为5组:假手术组、缺血再灌注组和丹参酮ⅡA高中低剂量组。采用结扎大鼠左冠状动脉前降支方法制备心肌缺血再灌注模型,在缺血前10min分别向5组大鼠注射生理盐水4ml、生理盐水4ml、丹参酮ⅡA(16mg/kg、8mg/kg、4mg/kg)加入生理盐水共4ml。观察大鼠缺血45min再灌注2h时心电图改变情况;采用免疫组化方法对心肌组织中Bcl-2和Bax蛋白的表达。[结果]①缺血再灌注组缺血再灌注T波变化幅度与假手术组相比明显升高(P﹤0.01);不同剂量组缺血再灌注T波变化幅度比缺血再灌注组有不同程度的降低(P﹤0.05)。②缺血再灌注组缺血再灌注2h心律失常发生率与假手术组相比明显升高(P﹤0.01);不同剂量组缺血再灌注2h时心律失常发生率比缺血再灌注组有不同程度的降低(P﹤0.05)。③缺血再灌注组Bcl-2OD值、Bcl-2/Bax与假手术组相比明显降低(P﹤0.01);不同剂量组Bcl-2OD值、Bcl-2/Bax比缺血再灌注组有不同程度的升高(P﹤0.05)。缺血再灌注组BsxOD值与假手术组相比明显升高(P﹤0.01);不同剂量组BsxOD值比缺血再灌注组有不同程度的降低(P﹤0.05)。[结论]丹参酮ⅡA对大鼠缺血再灌注心肌有显著保护作用,其保护机制可能与上调Bcl-2及下调Bax蛋白表达,从而抑制缺血再灌注心肌细胞凋亡有关系。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及其基因表达的影响

目的　观察 2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡率、凋亡调控基因Bax、Bcl-2的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法　8周龄SD大鼠高热量饮食一月后 ,腹腔注射小剂量链脲佐菌素 (STZ 3 0mg/kg) ,成模后分别于 12、2 4周宰杀动物 ,采用光镜、原位末端标记法、流式细胞术检测心肌细胞凋亡及心肌Bax、Bcl -2表达水平。结果　糖尿病大鼠心肌凋亡细胞数明显增多 ,Bax蛋白表达显著上调 ,Bax/Bcl-2比值增加 (P均 <0 0 1) ,Bcl -2蛋白表达有所下降 ,但无统计学意义。罗格列酮干预组凋亡率降低 (P <0 0 1) ,升高的Bax蛋白表达下调 ,降低的Bcl -2蛋白表达上调 ,但与糖尿病未治疗组均无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论　心肌细胞凋亡在糖尿病大鼠心肌病变进程中起一定作用 ,罗格列酮可抑制心肌细胞凋亡 ,但与Bax、Bcl -2的调控关系不大。     

叶酸与维生素B12对2型糖尿病大鼠心肌组织凋亡 相关蛋白表达的影响

摘要:目的　观察2型糖尿病大鼠心肌凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3的表达变化及叶酸、维生素B12的干预作用。方法　6周龄SD大鼠60只,糖尿病造模成功后,随机分为对照组（A组）、模型组（B组）、叶酸和维生素B12干预组（C组）。12周后取血检测各组同型半胱氨酸（Hcy）、叶酸、维生素B12的水平;取大鼠心肌组织,免疫组化法检测Bax,Bcl-2,Caspase-3的表达,并用计算机图像分析系统测平均灰密度值。结果　12周后B组Hcy明显增高,与A组和C组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）,C组叶酸、维生素B12与A组和B组比较,差异均有统计学意义（P＜0.01）;心肌组织中,B组Bax、Caspase-3的表达明显高于A组（P＜0.01）,Bcl-2的表达明显低于A组（P＜0.01）;C组Bax、Caspase-3的表达较B组明显下降（P＜0.01）,Bcl-2的表达明显高于B组（P＜0.01）;A组与C组Bax、Caspase-3、Bcl-2的表达差异无统计学意义（P＞0.05）。结论　2型糖尿病大鼠血液中Hcy的升高,可能在促进心肌细胞凋亡过程中发挥重要作用,而叶酸、维生素B12的干预可以有效缓解病变进程。     

miR-221在急性心肌梗死大鼠中表达及其作用

目的探讨miR-221在急性心肌梗死(AMI)大鼠中的表达及其作用。方法在45只SD清洁级雄性大鼠中随机抽取35只通过冠状动脉左前降支结扎大鼠建立AMI模型,将其中建模成功的30只大鼠随机分为AMI组、对照组及抑制组,每组各10只;另抽取未建模的10只大鼠设立假手术组,采用冠状动脉左前降支穿线不结扎。其中对照组用携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒空载体miR-221阴性对照以4×10~7病毒数量进行心肌组织局部注射转染,抑制组用携带miR-221 inhibitor慢病毒以4×10~7病毒数量进行心肌组织局部注射转染,AMI组和假手术组每天给予等量生理盐水,隔日1次连续2周;记录大鼠心脏功能。采用原位末端凋亡法(TUNEL)检测心肌凋亡指数(AI),RT-PCR法检测miR-221表达,Western blot法检测Bax、Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达。结果与假手术组大鼠miR-221表达量(0.18±0.02)比较,AMI组(1.16±0.12)和对照组(1.18±0.12)大鼠的miR-221表达量均升高(均P0.01),抑制组大鼠miR-221表达量(0.30±0.03)均低于AMI组和对照组大鼠的miR-221表达量(均P0.01);与假手术组大鼠Bax(0.13±0.01)、Bcl-2(0.53±0.05)、PI3K(0.45±0.04)和p-AKT(0.87±0.09)蛋白表达量比较,AMI组和对照组大鼠的Bax蛋白表达量均上调(均P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达量均下调(均P0.01);抑制组大鼠较AMI组和对照组大鼠Bax表达量均下调(P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达量均上调(P0.01)。结论 miR-221在AMI大鼠心肌组织中高表达,下调miR-221表达可通过激活PI3K/AKT信号通路调控下游蛋白Bax及Bcl-2的表达抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡。     

高压氧联合rh-EPO对窒息新生大鼠心肌细胞Bcl-2/Bax表达的影响

目的探讨高压氧联合rh-EPO对窒息新生大鼠心肌细胞Bcl-2/Bax表达的影响,为临床治疗新生儿窒息后心肌损害提供分子理论依据。方法选取新生3~7 d的Wistar大鼠40只为研究对象,随机分为对照组、窒息组、rh-EPO组、高压氧组、高压氧联合rh-EPO组各8只,分别给予相应的干预措施。病理学检查及半定量分析常规HE染色,光镜下观察心肌病理改变。对各组心肌细胞采用免疫组织化学染色法检测Bcl-2/Bax蛋白表达。结果新生大鼠心肌细胞病理学观察显示:高压氧联合rh-EPO组心肌细胞结构基本正常,细胞界限欠清晰,心肌纤维排列基本正常;Bcl-2/Bax蛋白表达阳性细胞胞浆呈棕黄色染色。窒息组阳性细胞最多,高压氧联合rh-EPO组阳性细胞较少。结论新生大鼠窒息后采用高压氧与rh-EPO治疗,两者产生协同作用,通过增加Bcl-2表达、减少Bax表达而发挥心肌保护作用,Bcl-2/Bax比值明显增加。     

茶多酚联合原花青素改善AD大鼠记忆作用及机制

目的探讨茶多酚联合原花青素对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠回避记忆能力影响及机制。方法将60只Wistar雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、茶多酚组、原花青素组、茶多酚+原花青素组及维生素E(VE)组,采用去卵巢合并腹腔注射D-半乳糖(100 mg/kg)制备AD大鼠模型。穿梭箱实验检测大鼠回避记忆能力,透射电镜观察细胞核及线粒体超微结构,Western blot检测海马组织中Bax、Bcl-2、Drp1及Opa1蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠回避潜伏时间延长,主动回避反应率和总回避反应率降低(P 0.05);与模型组比较,茶多酚组、原花青素组、茶多酚+原花青素组及VE组大鼠回避潜伏时间明显缩短,主动回避反应率和总回避反应率升高(P 0.05);与茶多酚组、原花青素组比较,茶多酚+原花青素组大鼠回避潜伏时间缩短,主动回避反应率升高(P 0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠海马组织中Bax、Drp1蛋白表达明显上调,Bcl-2、Opa1蛋白表达下调,Bcl-2/Bax降低(P 0.05);与模型组比较,茶多酚组、原花青素组、茶多酚+原花青素组及VE组大鼠海马组织中Bax、Drp1蛋白表达明显下调,Opa1蛋白表达上调,Bcl-2/Bax升高(P 0.05);与茶多酚组比较,茶多酚+原花青素组大鼠海马组织中Bax蛋白表达明显下调(P 0.05)。结论茶多酚和原花青素单独及联合干预均可通过调节线粒体分裂融合蛋白和线粒体凋亡途径而影响细胞凋亡,这可能是改善AD模型大鼠回避记忆的机制之一,联合干预效果更为显著。     

蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后线粒体膜电位和Bcl-2、Bax mRNA表达的影响

目的 观察蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血后线粒体膜电位和Bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达的影响,探讨蒺藜果皂苷对大鼠脑缺血的保护作用.方法 60只Wistar大鼠随机分成5组:空白对照组、模型对照组、阳性药物舒血宁组、蒺藜果皂苷低剂量组和蒺藜果皂苷高剂量组.线栓法阻断一侧大脑中动脉,缺血24 h制成脑缺血模型.流式细胞仪检测线粒体膜电位,实时荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax mRNA表达.结果 模型组的线粒体膜电位和Bcl-2 mRNA表达水平显著低于空白对照组(P<0.05),而阳性药物组和蒺藜果皂苷高、低剂量组的线粒体膜电位和Bcl-2 mRNA表达水平明显高于模型组(P<0.01);与模型组相比,阳性药物组、蒺藜果皂苷高、低剂量组和空白对照组的Bax mRNA表达水平则明显下降,统计学上差异具有显著性(P<0.05).结论 蒺藜果皂苷能够保持线粒体膜电位,增加Bcl-2 mRNA的表达而降低Bax mRNA的表达水平.     

法舒地尔对急性氧乐果染毒大鼠心肌细胞的影响

目的 采用氧乐果染毒的离体培养心肌细胞模型,观察法舒地尔对染毒心肌细胞的影响及其可能机制.方法 分离雄性SD大鼠心肌细胞,DMEM中常规培养.按培养基中氧乐果及法舒地尔剂量,分为不同剂量组培养,在3、6、12及24 h时,测定各组心肌细胞的存活率,根据各组心肌细胞的存活率,选取中剂量染毒组和中剂量治疗组进行心肌细胞收缩幅度测定,并检测培养基中的乳酸脱氢酶(LDH)活力及心肌细胞Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果 与正常对照组比较,各染毒组心肌细存活率均明显降低,且随染毒剂量增高,心肌细胞存活率呈降低趋势,差异均有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,中剂量染毒组和中剂量治疗组各时点心肌细胞的收缩幅度明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01),与中剂量染毒组比较,中剂量治疗组12h及24 h心肌细胞收缩幅度增大,差异有统计学意义(P＜0.01).中剂量染毒组和中剂量治疗组培养基中LDH活力[(224.9±14.7)、(156.0±6.8) U/L]明显高于正常对照组[(59.2±6.5) U/L],中剂量治疗组LDH活力明显低于中剂量染毒组,差异均有统计学意义(P＜0.01).与正常对照组比较,中剂量染毒组和中剂量治疗组Bcl-2蛋白表达明显降低,中剂量染毒组Bax蛋白表达明显增高,差异均有统计学意义(P＜0.01).与中剂量染毒组比较,中剂量治疗组Bcl-2蛋白表达明显增高,Bax蛋白表达明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 法舒地尔能抑制氧乐果诱导凋亡调节蛋白Bax、Bcl-2的异常表达,这可能是其减轻氧乐果对心肌细胞的损害的机制之一.     

硫化氢对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用及抗凋亡机制研究

目的探讨硫化氢(H2S)对糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用和抗凋亡机制。方法选择雄性SD大鼠40只作为研究对象,随机分为正常对照组、糖尿病对照组(STZ组)、糖尿病硫化氢钠(NaHS)治疗组(NaHS+STZ组)和NaHS对照组,每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ)45 mg/kg来构建糖尿病大鼠模型,NaHS+STZ组及NaHS对照组腹腔注射硫化氢(H2S)供体NaHS。8 w后处死大鼠并离体进行心脏灌流,测定左心室动力学指标,在电镜下观察心肌细胞超微结构改变情况,通过分光光度法观测心肌组织半胱天冬蛋白酶3(Caspase-3)的活性,RT-PCR法测定左心室心尖组织B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)和Bax mRNA的表达。结果 STZ组的左心室发展压(LVDP)为(4.35±1.58)kPa、左心室内压最大上升速率和下降速率(±dp/dt max)为(77.27±28.88)kPa/s、(158.91±33.14)kPa/s,均较正常组明显降低;左心室舒张末压(LVEDP)明显升高,差异均有统计学意义(均P0.05);NaHS+STZ组与STZ组比较,LVDP、±dp/dt max增加,LVEDP降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。电镜观察发现,正常组大鼠心肌细胞纤维排列规则,线粒体膜结构正常,体积无肿胀,嵴规则统一;STZ组心肌纤维断开,线粒体肿大,嵴断裂或消失;NaHS组与正常组无明显差异;NaHS+STZ组与STZ组相比,心肌纤维断裂较少,线粒体肿大较轻,嵴断裂极少。STZ组Caspase-3活性为(0.87±2.13),与正常组比较活性增加;NaHS+STZ组Caspase-3活性为(0.65±1.34),与STZ组比较活性降低,差异均有统计学意义(P0.05)。STZ组与正常组Bcl-2/Bax比较mRNA比值降低,NaHS+STZ组与STZ组比较Bcl-2/Bax mRNA比值升高,差异均有统计学意义(P0.05)。结论H2S能够保护糖尿病大鼠心肌,其机制可能是抗心肌细胞凋亡。     

低硒与心肌细胞氧化损伤机制及凋亡相关基因的表达

目的观察低硒对大鼠心肌组织脂质过氧化物、心肌细胞超微结构及细胞凋亡相关基因的影响。方法建立对照组、低硒组、补硒组3个组别大鼠模型,结合光镜及电镜下心肌组织及其超微结构病理变化,对其血清硒、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）、心肌组织匀浆丙二醛（MDA）水平及心肌细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53蛋白表达进行检测及对比分析。结果低硒组大鼠血清硒水平及血清GPx活性水平均显著低于正常对照组和低硒加硒组,低硒组大鼠心肌组织匀浆MDA水平显著高于正常对照组和低硒加硒组。低硒组大鼠心肌线粒体膜及细胞核膜上清晰可见高电子密度反应产物聚集。低硒组大鼠心肌Bcl-2、Bax、P53的基因表达（PI％）均显著高于正常对照组大鼠;低硒组大鼠Bcl-2基因表达（PI％）显著低于低硒加硒组大鼠;而Bax、P53的基因表达（PI％）均显著高于低硒加硒组。结论低硒可以引起线粒体膜、细胞核膜磷脂过氧化损伤,进而造成心肌细胞线粒体损伤,同时可引起大鼠心肌细胞抑制凋亡基因Bcl-2和促进凋亡基因Bax、P53的基因表达相应增强,但BcF2／Bax比值相对下降,促进凋亡的发生。补硒可以诱导抑制凋亡基因Bcl-2基因表达的上调,使其基因表达增强,同时相对抑制促凋亡基因Bax和P53的表达。     

丙泊酚对Wistar大鼠肝癌模型中Bax与Bcl-2表达的影响

目的：探讨不同浓度丙泊酚对Wistar大鼠肝癌模型中凋亡促进基因Bax和凋亡抑制基因Bcl-2表达的影响。方法：将50只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为五组,每组10只,分别为正常对照组（A组）,肝癌模型组（B组）,低剂量丙泊酚（3 mg/kg）组（C1组）,中等剂量丙泊酚（6 mg/kg）组（C2组）,高剂量丙泊酚（12 mg/kg）组（C3组）。给药结束后24 h处死大鼠,取肝脏标本观察肝脏特征,并做组织切片行苏木精-伊红（HE）染色及S-P免疫组化检测Bcl-2及Bax的表达,TUNEL法检测肝细胞凋亡指数（AI）。结果：（1）大体标本检查及H E染色：与A组比较,B组大鼠肝脏表面粗糙,部分肝叶表面出现黄色斑点,肝细胞脂肪变性,点状坏死及炎细胞浸润,少量胶原纤维增生;与B组比较,C1、C2、C3组肝细胞变性坏死以及胶原纤维增生程度有所减轻;（2）TUNEL检测结果：随丙泊酚剂量增加,肝癌细胞中凋亡细胞逐渐增多,AI逐渐递增,具有显著差异性（P〈0.05）;（3）与A组比较,B组肝脏细胞Bcl-2表达上调,Bax表达下降,差异均有统计学意义（P〈0.05）;与B组比较,C组（C1、C2、C3）肝脏细胞Bcl-2表达均下降,且随着丙泊酚剂量的增加而呈递减趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）;Bax表达均上调,且随着丙泊酚剂量的增加而呈递增趋势,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：丙泊酚可导致Wistar大鼠肝癌细胞中Bcl-2/Bax表达比例降低,促进肝癌细胞的凋亡,进而抑制肝癌细胞的增殖能力。     

川陈皮素对糖尿病认知功能障碍大鼠神经细胞损伤改善的实验研究

目的探讨川陈皮素对糖尿病大鼠认知功能的改善及作用机制。方法选取12周龄SD大鼠40只,随机分为正常对照组,糖尿病模型组,α-硫辛酸组,高、中、低剂量川陈皮素组,每组至少6只动物,采用腹腔注射1%链脲佐菌素(STZ)溶液建立糖尿病大鼠模型,其中低剂量组、中剂量组和高剂量组分别按照10、20和30 mg/kg给予川陈皮素,α-硫辛酸组给予60 mg/kgα-硫辛酸,每日1次,连续8周,于大鼠22周龄时行Morris水迷宫试验,采用电子显微镜观察海马组织,western blot检测海马组织Nrf2、HO-1蛋白表达。结果高剂量组逃避潜伏期分别为(16.62±1.99)s,明显低于糖尿病模型组、低剂量组和中剂量组(P0.05),与α-硫辛酸组比较差异无统计学意义(P0.05),但仍高于正常对照组(P0.05);高剂量组穿越目标区次数分别为(7.11±1.12)次,明显高于糖尿病模型组、低剂量组和中剂量组(P0.05),与α-硫辛酸组比较差异无统计学意义(P0.05),但仍低于正常对照组(P0.05);低剂量组、中剂量组、高剂量组和-硫辛酸组大鼠海马神经元细胞结构较糖尿病模型组有所改善,其中高剂量组和α-硫辛酸组形态结构接近正常对照组;高剂量组海马组织Nrf2和HO-1蛋白相对表达量分别为(0.812±0.113)和(0.877±0.117),明显高于糖尿病模型组、低剂量组和中剂量组(P0.05),与α-硫辛酸组比较差异无统计学意义(P0.05),仍低于正常对照组(P0.05)。结论川陈皮素能有效改善糖尿病大鼠认知功能以及海马组织神经元结构,上调Nrf2和HO-1表达。     

麦角甾醇对S180荷瘤小鼠肿瘤血管生成和Bax、Bcl-2表达的影响

目的探讨麦角甾醇对S180荷瘤小鼠肿瘤血管和Bax、Bcl-2蛋白的影响。方法建立S180荷瘤小鼠模型,将50只荷瘤小鼠随机等量分为模型对照组、环磷酰胺组(CTX),麦角甾醇高、中、低剂量组,雌雄各半,连续给药21d天后颈椎脱臼处死。计算胸腺指数、脾脏指数和抑瘤率;硝酸还原酶法测定肝脏中一氧化氮(NO)含量;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肿瘤组织中小鼠血管内皮生长因子A(VEGF-A)含量;免疫组织化学法检测肿瘤组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达。结果与模型对照组相比,环磷酰胺组、高、中、低剂量组抑瘤率分别是53.96%、41.64%、29.90%、19.52%,均有显著性差异(P0.05),高、中、低剂量组胸腺指数、脾脏指数均明显增大(P0.05);与模型对照组相比,实验组(高、中、低剂量组)中NO含量和小鼠血管内皮生长因子A(VEGF-A)表达水平明显降低(P0.05),且均能明显下调Bcl-2表达水平(P0.05),明显上调Bax表达水平(P0.05),Bax/Bcl-2比例明显增大(P0.05)。与环磷酰胺组相比,实验组NO含量和VEGF-A水平、Bcl-2、Bax表达水平均有统计学差异(P0.05)。结论香菇提取物麦角甾醇具有抑瘤作用,且与剂量有关,其可能抗肿瘤机制是抑制肿瘤血管生成和调控Bax、Bcl-2蛋白表达水平。     

原花青素对硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的观察原花青素对硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞凋亡相关基因Caspase-3、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,探讨原花青素在拮抗镍诱导肝细胞凋亡中发挥的作用及可能的调控机制。方法选择健康Wistar雄性大鼠40只,每组8只,硫酸镍模型组给予硫酸镍2.50mg/kg腹腔注射染毒及生理盐水灌胃处理,原花青素干预组在用硫酸镍2.50mg/kg腹腔注射染毒的同时,给予原花青素水溶液1.25、2.50、5.00mg/kg等容积灌胃处理,1次/d,连续30d。采用Western Blot技术检测各组大鼠肝脏细胞中Caspase-3、Bcl-2及Bax的蛋白表达水平。结果原花青素可拮抗硫酸镍染毒大鼠肝脏细胞中Caspase-3的活化,并引起Bcl-2蛋白表达量的增强及Bax蛋白表达量的减弱,且Bax/Bcl-2比值随着原花青素干预剂量的增加呈下降趋势,其中原花青素1.25mg/kg剂量组Pro-Caspase-3活性、5.00mg/kg剂量组Cleaved-Caspase-3活性与硫酸镍模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05);原花青素1.25mg/kg剂量组Bcl-2蛋白表达量、1.25和5.00mg/kg剂量组Bax/Bcl-2比值与硫酸镍模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论原花青素可拮抗硫酸镍诱导的大鼠肝脏细胞凋亡,其机制可能与拮抗Caspase-3蛋白活化、并抑制Bcl-2蛋白表达的下调和Bax蛋白表达上调有关。     

祛风除湿中药独活对痴呆大鼠脑内凋亡蛋白Bcl-2/Bax的影响

目的 探讨祛风除湿中药独活对β淀粉样蛋白(amyloid β protein,Aβ)脑内注射所致大鼠痴呆模型的保护作用.方法 24只雄性Wistar大鼠行颅内Aβ海马CA1区内注射术后,随机分为4组,独活组、吲哚美辛组、假手术组和模型组,每组6只,分别给予中药独活、吲哚美辛及生理盐水灌胃.进行水迷宫实验检测逃避潜伏期,在实验4周末处死大鼠,检测凋亡蛋白Bcl-2/Bax在大鼠脑中表达的情况.结果 除假手术组外,其他3组逃避潜伏期均有不同程度延长(P＜0.05);与模型组比较,其他3组Bcl-2/Bax大鼠脑中的表达有所不同,独活组可提高Bcl-2/Bax的比值(P＜0.05).结论 独活可以改善痴呆模型大鼠的学习记忆能力,并能上调Bcl-2表达,抑制Bax表达,提高Bcl-2/Bax的比值,对痴呆大鼠神经细胞的凋亡有抑制作用.