慢性粒细胞白血病的不同病期PTEN表达及其相关性研究

目的探讨抑癌基因PTEN在慢性粒细胞白血病（CML）病情进展及预后中的意义。方法应用半定量RT-PCR和免疫组化技术分别检测55例CML患者和16例慢性再生障碍性贫血（CAA）及10例正常对照者（正常对照组）骨髓单个核细胞（BMMNC）中PTEN的表达情况。CML患者中慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）29例（慢性期组）,慢性粒细胞白血病加速期（CML-AP）9例（加速期组）,慢性粒细胞白血病急变期（CML-BC）17例（急变期组）。分析PTEN与外周血白细胞数及Bcr/bal融合基因的关系,追踪疾病的转归。结果 PTEN基因阳性表达在对照组CAA 82.33%与正常人90%,两者比较差异无统计学意义（P〉0.05）。55例CML患者PTEN阳性表达57.41%明显低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）。PTEN表达在慢性期组、加速期组、急变期组均明显低于正常对照组（P〈0.05）。加速期及急变期的表达低于慢性期（P〈0.05）,在加速期和急变期的表达虽降低,但两者的差异无统计学意义（P〉0.05）。各期PTEN表达与Bcr/bal融合基因无相关性,与患者外周血白细胞数呈正相关性（r≈0.50）。结论 PTEN参与了CML的发生、发展,且与CML的急变有一定相关性,PTEN基因可以作为CML病情进展及判断预后的有价值的分子标志物。     

慢性髓性白血病cyclin E基因蛋白表达及临床意义

目的 探讨CML患者Cyclin E基因蛋白表达特点。方法 利用免疫组织化学实验方法检测34例CML患者Cyclin基因蛋白。结果 CML患者Cyclin基因蛋白表达明显高于对照组，有极显著性差异(P＜0．001)。CML患者治疗前与治疗后Cyclin E阳性表达率也存在着明显差异(P＜0．05)，同时还观察了急变期/加速期、慢性期、缓解期Cyclin E基因蛋白表达，在急变期/加速期、慢性期时呈高表达状态与缓解期比较有显著性差异(P＜0．05)。结论 Cyclin E基因蛋白表达与CML患者病情进展程度密切相关，该研究工作揭示CML的分子发病机制，同时对CML的诊断和疗效监测具有十分重要的临床应用价值。     

PTTG、c-myc基因在慢性粒细胞白血病中的表达

目的:检测垂体瘤转化基因(PTTG)在慢性粒细胞白血病(CML)患者中不同临床阶段的基因表达,为阐明CML演变的可能机制提供依据。方法:采用RT-PCR方法检测34例CML患者(慢性期16例,加速期11例,急变期7例)及10例对照者骨髓单个核细胞(BMMNC)中PTTG和c-myc基因的表达。结果:10例对照者中未检测到PTTG和c-myc基因的表达,34例CML患者中PTTG和c-myc基因在慢性期、加速期、急性变期的表达明显高于对照者(P<0.05),PTTG在加速期和急变期的表达升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。c-myc基因在急变期的表达明显升高(P<0.05)。结论:PTTG和c-myc基因的过度表达可能和CML的发生发展有关。     

GFI-1在慢性髓细胞白血病患者中的表达及意义*

目的：研究慢性髓细胞白血病(CML)患者中GFI-1的表达情况及其与BCR-ABL定量之间的关系,以探讨GFI-1在CML中的意义。方法：收集82例CML患者的骨髓标本,其中初诊慢性期50例,急变期6例,加速期6例,经伊马替尼治疗后细胞遗传学缓解期20例。以20例正常人的外周血或骨髓标本作为正常对照。应用实时定量PCR、Western blot等方法检测CML患者GFI-1、BCR-ABL的表达情况,分析两者基因表达量之间的关系。结果：（1）CML慢性期、急变期/加速期GFI-1的表达均明显高于正常对照组（P<0.05）;慢性期与急变期/加速期患者GFI-1的表达差异无统计学意义（P>0.05）;慢性期患者的GFI-1较缓解期表达高,差异有统计学意义（P<0.05）。（2）GFI-1与BCR-ABL定量之间成正相关（r2=0.7647,P<0.01）。结论：CML患者GFI-1表达水平异常,可能参与CML的发生发展。     

X连锁凋亡抑制蛋白及其相关因子1在慢性粒细胞白血病中的表达研究

目的 观察X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及XIAP相关因子1(XAF1)在慢性粒细胞白血病(CML)中的表达情况,评估其在CML诊断及预后分析中的应用价值.方法 选取CML患者42例,其中慢性期24例(CML慢性期组),进展期18例(CML进展期组,其中加速期7例,急变期11例).应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测患者骨髓细胞XIAP及XAF1 mRNA表达水平.对照组为非恶性血液病患者21例(非恶性血液病组)及急性白血病(AL)患者28例(AL组).结果 CML进展期组患者骨髓中XIAP mRNA表达水平高于CML慢性期组(P＜0.01)和非恶性血液病组(P＜0.01);而CML进展期患者骨髓中XAF1 mRNA表达水平低于CML慢性期(P＜0.05)和非恶性血液病组(P＜0.01);化疗后获得骨髓缓解的CML患者骨髓中XIAP mRNA的表达水平显著低于化疗前,而XAF1 mRNA的表达水平显著高于化疗前;XIAP mRNA及XAF1 mRNA表达水平之间呈负相关.结论 CML患者进展期XIAP及XAF1的联合检测及动态观察可作为CML临床辅助诊断、分期及预后判断的指标之一.     

FLT3基因在各种血液肿瘤患者中的表达及其临床意义

目的 为进一步研究各种类型血液肿瘤患者FLT3基因的表达情况。方法 采用多聚酶链反应（PCR）方法检测103例初治AML、76例急性淋巴细胞白血病（ALL）、53例慢性粒细胞白血病（CML）慢性期、31例CML急变期、11例慢性淋巴细胞白血病（CLL）、36骨髓增生异常综合征（MDS）患者、9例多发性骨髓瘤（MM）及13例伴有骨髓侵犯非霍奇金淋巴瘤（NHL）患者FLT3基因表达情况。结果 FLT3基因在各种血液肿瘤表达为AML患者90．3％（93／103）、ALL患者60．5％（46／76）、CML慢性期患者5．7％（3／53）、CML急变期患者61．3％（19／31）、CLL患者9．1％（1／11）、MDS患者25．0％（9／36）。9例MM和7例伴有骨髓浸润NHL患者均未发现FLT3基因表达。AML患者FLT3基因检测阳性率显著高于其他类型白血病患者，CML急变期患者FLT3基因检测阳性率显著高于慢性期患者，ALL患者FLT3基因检测阳性率显著高于CLL患者。结论 各种类型白血病均可出现FLT3基因的表达，但表达率不同，以AML最高，而CLL和CML慢性期最低，FLT3基因在急性髓系白血病恶性克隆的增殖和维持中起重要作用。     

慢性粒细胞白血病患者血浆nm23-H1蛋白水平的检测

目的探讨分化抑制因子nm23-H1蛋白在慢性粒细胞白血病（CML）患者中的表达和临床意义。方法采用酶联免疫法检测72例慢性粒细胞白血病（CML）患者和36例健康对照组血浆中nm23-H1蛋白的含量。结果CML慢性期（CML-CP）血浆nm23-H1蛋白水平与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;加速期（CML-AP）和急变期（CML-BP）明显高于对照组（P〈0.01）,CML-BP明显高于CML-AP组（P〈0.01）。结论提示在CML中,血浆nm23-H1蛋白表达水平的检测可能有助于CML的病情进展、临床分期及预后判断。     

慢性髓系白血病粘附相关分子整合素β1及局部粘附激酶的研究

目的研究整合素β1及局部粘附激酶(FAK)在慢性髓系白血病(CML)进展过程中的变化及干扰素治疗对FAK的可能作用。方法(1)应用流式细胞仪检测正常对照组、CML慢性期组及CML急变组骨髓CD34 细胞的胞膜表面CD29及胞质FAK表达量;(2)将正常对照及CML慢性期骨髓单个核细胞分为IFN处理组及非处理组培养48 h后提取总蛋白,应用Western blotting检测FAK含量变化。结果(1)CML慢性期骨髓CD34 细胞表面CD29的表达与对照组无显著差异,而胞内FAK含量则下降;(2)CML急变期骨髓CD34 细胞表面CD29的表达较慢性期明显升高而胞内FAK含量则较慢性期进一步下降;(3)IFN处理前后正常骨髓单个核细胞FAK的含量无明显差异;(4)IFN处理后CML骨髓单个核细胞FAK含量较未处理组明显上升。结论整合素β1及FAK表达变化可能是CML进展恶化的原因之一,而IFN-α可能通过恢复FAK含量来改善β1受体介导的粘附信号通路的缺陷。     

凋亡促进分子TFAR19在成人慢性髓性白血病骨髓细胞的异常表达

目的:研究成人慢性髓性白血病(chronic myeloid leukemia ,CML)骨髓细胞凋亡促进分子--TFAR19的表达,以探讨TFAR19在CML发病及疾病进展中的作用.方法:利用15种不同荧光标记的单克隆抗体标记骨髓细胞,通过流式细胞术检测未治CML慢性期病人、CML加速/急变期病人、及正常人骨髓不同细胞群细胞内TFAR19的表达.结果:20例未治CML慢性期及13例加速/急变期病人骨髓总的有核细胞内TFAR19平均荧光强度明显低于10例正常人组骨髓总的有核细胞,分别为5 793±1 536,7 260±781,P＜0.01及4 293±1 082,7 260±781,P＜0.01,其中未治CML慢性期及加速/急变期病人骨髓粒细胞内TFAR19平均荧光强度低于正常人组骨髓粒细胞,分别为6 240±1 734,8 317±726,P＜0.01,及5 759±1 487,8 317±726,P＜0.01;未治CML慢性期及加速/急变期病人骨髓淋巴细胞内TFAR19平均荧光强度低于正常人组骨髓淋巴细胞,分别为1 292±639,2 271±820,P＜0.01,及1 231±281,2 271±820,P＜0.01.CML加速/急变期病人总的有核细胞与未治CML慢性期病人相比,TFAR19表达进一步降低,分别为4 293±1 082,5 793±1 536,P＜0.01.结论:未治CML慢性期病人、CML加速/急变期病人骨髓总的有核细胞与正常人相比TFAR19表达降低,未治CML慢性期病人、加速/急变期病人骨髓粒细胞及淋巴细胞TFAR19表达均低于正常人组骨髓,CML加速/急变期病人总的有核细胞与未治CML慢性期病人相比,TFAR19表达进一步降低.TFAR19的异常表达可能在CML疾病进展中起一定作用.     

慢性髓系白血病粘附相关分子整合素β1及局部粘附激酶的研究

目的 研究整合素β1及局部粘附激酶(FAK)在慢性髓系白血病(CML)进展过程中的变化及干扰素治疗对FAK的可能作用。方法 (1)应用流式细胞仪检测正常对照组、CML慢性期组及CML急变组骨髓CD34^ 细胞的胞膜表面CD29及胞质FAK表达量；(2)将正常对照及CML慢性期骨髓单个核细胞分为IFN处理组及非处理组培养48h后提取总蛋白，应用Western blotting检测FAK含量变化。结果 (1)CML慢性期骨髓CD34^ 细胞表面CD29的表达与对照组无显著差异，而胞内FAK含量则下降；(2)CML急变期骨髓CD34^ 细胞表面CD29的表达较慢性期明显升高而胞内FAK含量则较慢性期进一步下降；(3)IFN处理前后正常骨髓单个核细胞FAK的含量无明显差异；(4)IFN处理后CML骨髓单个核细胞FAK含量较未处理组明显上升。结论 整合素β1及FAK表达变化可能是CML进展恶化的原因之一，而IFN-α可能通过恢复FAK含量来改善β1受体介导的粘附信号通路的缺陷。     

慢性髓性白血病cyclin E基因蛋白表达及临床意义

目的探讨CML患者Cyclin E基因蛋白表达特点。方法利用免疫组织化学实验方法检测34例CML患者Cyclin E基因蛋白。结果 CML患者Cyclin E基因蛋白表达明显高于对照组,有极显著性差异(P<0.001)。CML患者治疗前与治疗后Cyclin E阳性表达率也存在着明显差异(P<0.05),同时还观察了急变期/加速期、慢性期、缓解期Cyclin E基因蛋白表达,在急变期/加速期、慢性期时呈高表达状态与缓解期比较有显著性差异(P<0.05)。结论 Cyclin E基因蛋白表达与CML患者病情进展程度密切相关,该研究工作揭示CML的分子发病机制,同时对CML的诊断和疗效监测具有十分重要的临床应用价值。     

慢性髓性白血病临床各期诊断标准(英文)

本文采用积分法将155例慢性粒细胞白血病(慢粒)分为慢性期(72例),加速期(78例)和急变期(25例),并对各期的主要的临床表现、血象和骨髓象特征以及嗜酸细胞、嗜碱细胞等进行了统计学的分析比较。     

PCR检测降钙素基因高甲基化在监测慢性髓细胞白血病恶化中的价值

目的观察慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）病情恶化与降钙素（ＣＴ）基因高甲基化程度之间的关系。方法用内切酶酶切和ＰＣＲ技术研究４５例ＣＭＬ患者（其中慢性期３３例，加速期２例，急变期１０例）的ＣＴ基因高甲基化程度。ＣＴ基因未高甲基化，则能被相应内切酶切断，无法扩增出特异ＤＮＡ片断，否则，能扩增出特异ＤＮＡ片断，据此推断ＤＮＡ的甲基化程度。结果３例慢性期，２例加速期及８例急变期患者呈现降钙素基因高甲基化；急变期组（包括加速期）甲基化率明显高于慢性期组，两组有显著性差别（Ｐ＜０．０１）；１例在慢性期呈现ＣＴ基因高甲基化者于１０个月后发生急粒变。结论该方法有助于监测ＣＭＬ的恶化     

实时定量PCR监测慢性粒细胞白血病患者BCR——ABL融合基因转录本水平

目的 探讨实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)在监测慢性粒细胞白血病(CML)患者微小残留病变、考核疗效以及预测疾病预后方面的应用.方法 应用实时RQ-PCR对84例不同病期患者之间的BCR-ABL转录本水平进行比较,并对5例慢粒患者治疗前后BCR-ABL转录本水平的变化进行监测.结果 加速期和急变期患者的转录本水平明显高于慢性期患者.对于慢性期患者,造血干细胞移植后其BCR-ABL转录本水平明显下降,甚至检测不到,格列卫治疗可获得类似结果.结论 RQ-PCR方法准确可靠,对于监测慢粒患者的微小残留病变、考核疗效以及预测慢粒急变具有重要的临床应用价值.     

Evi1基因表达在慢性粒细胞白血病急性变中的意义

目的　探讨Evi1基因表达在慢性粒细胞白血病 (慢粒 )急性变中的意义。方法　应用半定量RT -PCR方法检测了HEL白血病细胞系、87例慢粒患者 (慢性期 5 8例 ,加速期 4例 ,急性变期 2 5例 )及 10名正常对照的Evi1基因的表达。结果　 10名正常对照骨髓单个核细胞中未测到Evi1mRNA ;HEL细胞系Evi1阳性 ;87例慢粒中 ,慢性期组、加速期组、急性变组、急性髓性变组Evi1基因表达的阳性率分别为 3 .5 % (2 5 8)、5 0 .0 % (2 4)、48 0 % (12 2 5 )、66.7% (12 18) ) ;但加速期及急性变组的Evi1基因表达率高于慢性期组 (P <0 .0 1) ,而加速期组和急性变组的阳性率无显著性差异 (P =1.0 0 ) ,急性髓性变组的阳性率高于急淋变组 ,差异显著 (P <0 .0 1) ;慢性期组的阳性率较正常对照相比差异无显著性 (P =1.0 0 ) ;Evi1基因阳性表达与慢粒临床分期、急性变分型及预后相关 ,而急性变期Evi1阳性表达与年龄、性别、外周血象、bcr abl融合基因无关。结论　Evi1基因是预测慢粒患者发生急性变的一个有用的基因标志 ,可看做是一个由慢性期向急性期转化的信号 ,并对慢粒急性髓性变或急淋变有鉴别诊断意义     

PTEN?VEGF?FLT1基因在髓系白血病中的表达及其相关性研究

目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN及血管内皮生长因子(VEGF)及其受体FLT1(VEGFR1)在白血病中的表达及其相关性。方法:应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测50例初治急性髓系白血病(AML),10例缓解期AML,10例慢性粒细胞白血病慢性期(CML-CP)、10例CML急变期(CML-BC)患者和10例正常人骨髓单个核细胞(MMNCs)中PTEN、VEGF、FLT1 mRNA的表达。结果:初治AML患者PTEN mRNA表达水平明显低于缓解组AML和正常对照组,CML-BC患者PTEN mRNA表达水平低于CML-CP患者,在AML初治白血病中PTEN mRNA与VEGF和FLT1 mRNA表达负相关,PTEN低表达、VEGF和FLT1高表达与AML缓解率及髓外浸润相关。结论:髓系白血病患者中低表达PTEN基因,高表达VEGF及FLT1基因,并与白血病预后不良及髓外浸润密切相关,三者相互作用共同参与了白血病的发病。     

慢性粒细胞性白血病P-gp和Bcl-2表达及与病情进展的关系

目的 对多药耐药基因mdr-1基因产物P-糖蛋白(P-gp)和抑凋亡基因Bel-2产物Bel-2蛋白及与慢性粒细胞性白血病(CML)病情之间的关系进行分析。方法 用流式细胞仪检测慢粒白血病患者Pogp和Bel-2蛋白的表达，并分析其与CML病情的关系。结果 CML加速期／急变期Bel-2阳性率(77．78％)明显高于慢性期(41．17％)，有显著性差异(P＜0．05)；在加速期／急变期P-gp阳性率(44．44％)高于慢性期(29．14％)，但无显著差异(P＞0．05)。结论 Bel-2参与CML急变过程，高表达的Bc1-2可作为预示CML急变的实验依据。     

急性白血病患者P~(170)糖蛋白过度表达的临床意义

为探讨多药耐药基因的表达产物P170 糖蛋白在急性白血病异常表达的临床意义 ,用免疫细胞化学间接免疫荧光法 (APAAP法 )检测 30例急性白血病 (AL)患者。结果 :P170 糖蛋白在 30例急性白血病患者中有 9例表达 ,其中15例难治复发性白血病患者有 10例表达 ,其阳性表达率明显增高 ,化疗缓解率较阴性者明显减低 (P <0 0 5 )。表明P170 糖蛋白异常表达与肿瘤生物学行为关系密切 ,已成为提示急性白血病患者预后的有用指标之一。     

ABCA3在急性髓系白血病中的表达及其临床意义

目的 检测三磷酸腺苷结合盒转运体A3（ABCA3）基因在急性髓系白血病（AML）细胞中的表达,探讨ABCA3在AML耐药方面的作用及临床意义。 方法 ①应用半定量RT PCR检测33例初治、13例复发/难治成人AML患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞ABCA3 mRNA的表达水平,并分析其在不同组间的表达规律;②将初治AML患者按化疗效果分为完全缓解组和未完全缓解组,比较两组间ABCA3的表达水平;③分析ABCA3与AML患者初诊白细胞数、免疫表型、FAB分型等临床特征之间的相关性。结果 ABCA3的表达水平：初治及复发/难治AML组均明显高于正常对照组（P均＜0.01）;复发/难治AML组高于初治组（P＜0.05）;完全缓解组低于未完全缓解组（P＜0.05）;慢性粒细胞白血病急变患者高于其他AML亚型（除M3外,P均＜0.05）。ABCA3的表达水平与AML患者初诊白细胞数、骨髓原始细胞百分数、免疫表型、性别及年龄无明显相关性。结论 ABCA3与AML患者的多药耐药及治疗、预后密切相关。