肾络通对系膜增生性肾炎大鼠肾小球Col-Ⅳ、FN表达的影响

目的 观察化瘀通络中药肾络通对系膜增生性肾炎(MsPGN)大鼠肾小球系膜基质中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)表达的影响.方法 40只健康雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、苯那普利组、肾络通组.按文献报道方法复制MsPGN大鼠模型,采用免疫组织化学方法对Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)进行检测.结果 模型组与空白组比较,Col-Ⅳ和FN表达明显增强(P＜0.01);肾络通组、苯那普利组与空白组比较,Col-Ⅳ和FN表达明显降低(P＜0.01;P＜0.05).两治疗组相比,Col-Ⅳ的表达肾络通组低于苯那普利组(P＜0.05,P＜0.01),FN的表达苯那普利组低于肾络通组(P＜0.05).结论 化瘀通络中药肾络通能抑制Col-Ⅳ、FN的表达,延缓肾小球硬化的进一步发展.     

单侧输尿管梗阻肾间质纤维化大鼠肾组织PHB1和 PHB2的表达及意义

目的：观察单侧输尿管梗阻（ UUO）肾间质纤维化（ RIF）大鼠肾组织PHB1和PHB2的表达,并探讨其意义。方法80只雄性6周龄Wistar大鼠随机分为模型组和假手术组各40只。模型组大鼠分离左侧输尿管后行双重结扎,假手术组只探查到肾包膜。于造模后第2周末和第4周末,每组各处死20只大鼠,取左侧肾组织进行肾脏病理学检查,并计算RIF指数;应用实时荧光定量PCR检测大鼠肾组织PHB1、PHB2、TGF-β1 mRNA;Western blot检测肾组织PHB1、PHB2、TGF-β1、Ⅳ型胶原（ Col-Ⅳ）和纤维连接蛋白（ FN）。结果与假手术组比较,模型组大鼠各时间点RIF指数增高,梗阻时间越长RIF指数越高,P均＜0．01;肾组织PHB1、PHB2 mRNA及蛋白表达均降低,梗阻时间越长表达水平越低,P均＜0．01;TGF-β1 mRNA及蛋白、Col-Ⅳ和FN蛋白表达均增高,P均＜0．01。肾组织PHB1蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN呈负相关（ r分别为－0．86、－0．87、－0．70、－0．73,P均＜0．05）;PHB2蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN呈负相关（r分别为－0．73、－0．81、－0．91、－0．84, P均＜0．05）;PHB1蛋白表达与PHB2蛋白表达呈正相关（ r＝0．78,P＜0．05）。结论在UUO所致RIF大鼠肾组织中,PHB1和PHB2表达显著降低,参与RIF的发生发展。     

糖尿病大鼠肾组织中AKT的表达及意义

目的 观察Akt1和Akt2在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其是否参与糖尿病肾病(DN)发病过程.方法 链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠糖尿病(DM),分为2、4、8、12、16w和24w组,每一时点均设相应的正常对照组.测定各组血糖、24h尿蛋白、血肌酐(Scr)、肾脏指数.HE和PAS染色光镜观察肾脏病理改变.免疫组化方法检测肾皮质Akt1、Akt2、TGF-β1、α-SMA和FN的表达,Western印迹和RT-PCR法检测Akt1、Akt2蛋白及mRNA表达水平.结果 DM各组大鼠的血糖、24h尿蛋白、血肌酐、肾脏指数均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),免疫组化显示DM各组TGF-β1、α-SMA和FN阳性染色较正常组明显增多(P＜0.01),以12 w增多最为明显,分别为19.67±2.73、9.50±3.45、22.17±2.79,免疫组化、Western印迹及RT-PCR显示DM各组Akt1及Akt2蛋白和mRNA表达较正常组明显增多(P＜0.01).免疫组化显示Akt1与TGF-β1、FN蛋白表达水平呈显著正相关(r＝0.694,r =0.532,P＜0.01),Akt2与rGF-β1、FN蛋白表达水平呈显著正相关(r=0.789,r=0.743,P＜0.01).结论 Akt1、Akt2蛋白在DM大鼠肾组织过度表达,提示PI3 K/Akt信号通路可能参与了DN的发病机制.     

钠-葡萄糖协同转运蛋白2抑制剂对糖尿病肾脏疾病大鼠降糖作用及肾脏保护机制的研究

目的探讨钠-葡萄糖协同转运蛋白2(SGLT-2)抑制剂药物卡格列净对DKD大鼠的肾脏保护作用和可能机制。方法 DKD大鼠随机分为模型组(Mod)、格列美脲组(Glim)、吡格列酮组(Pio)和卡格列净组(Can),每组10只,给药4周。正常大鼠10只为空白对照组(NC)。行OGTT检测FBG,以及尿蛋白总量(UTP)、尿尿素(UUN)、尿肌酐(Ucr)、BUN和Scr含量,计算Ccr。HE染色检测大鼠肾脏组织病理,免疫组织化学法(SP)、Western blot和RT-PCR测定大鼠肾脏中Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、金属基质蛋白酶9(MMP-9)、组织基质金属蛋白酶抑制剂1 (TIMP-1)和转化生长因子β(TGF-β)表达。结果 1～4周不同时间点比较,Glim、Pio和Can组血糖水平降低(P0.05)。给药1次,与Mod组比较,Glim、Pio和Can组血糖在0.5、1、2和4h降低(P0.01)。OGTT显示,各药物治疗组较Mod组血糖及曲线下面积(AUC)均降低(P0.01);Can组AUC低于Glim组和Pio组(P0.05)。与Mod组比较,Glim、Pio和Can组UTP、UUN、BUN和Ccr均不同程度降低(P0.05),Can组UTP、Scr和Ccr降低(P0.05)。Mod组肾小球系膜基质增多,Glim、Pio和Can组无明显改变。与NC组比较,DKD各组Col-Ⅳ、MMP-9、TIMP-1和TGF-β蛋白及mRNA的表达均较高(P0.05),Mod组Col-Ⅳ和TIMP-1蛋白及mRNA呈高表达(P0.05),MMP-9蛋白及mRNA的表达较低(P0.05);Glim组、Pio组Col-Ⅳ、MMP-9、TIMP-1和TGF-β蛋白及mRNA的表达与Mod组比较,差异无统计学意义(P0.05);而Can组MMP-9蛋白及mRNA的表达高于Mod组(P0.05),TIMP-1、TGF-β和Col-Ⅳ蛋白及mRNA的表达低于Mod组(P0.05),Can组Col-Ⅳ、TGF-β和TIMP-1蛋白及mRNA的表达均低于Glim组和Pio组(P0.05)。结论卡格列净能改善DKD大鼠的血糖水平,降低肾脏病理评分,其肾脏保护作用机制可能与下调TIMP-1、TGF-β和Col-Ⅳ的表达、上调MMP-9的表达相关。     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2及Col-Ⅳ的影响

目的研究罗格列酮早期干预对STZ诱导的糖尿病大鼠肾皮质TGF-β1、MMP-2及Col-Ⅳ表达影响。方法40只雄性SD大鼠随机分为正常对照组(C组)、糖尿病组(DM组,链脲佐菌素60mg/kg腹腔注射)、糖尿病罗格列酮治疗组(DR组,4mg·kg-1·d-1罗格列酮无菌水混悬液灌胃),10w后观察大鼠HbA1c,肾功能、肾指数、尿微量白蛋白及肾病理学变化,透射电镜观察肾超微结构改变,免疫组化法观察肾皮质TGF-β1、MMP-2及Col-Ⅳ表达变化。结果DM组尿素氮、肾指数、尿微量白蛋白及肾皮质TGF-β1、Col-Ⅳ表达显著高于C组(P<0·01),DR组较DM组明显减低(P<0·01);同时观察到DM组、DR组MMP-2较C组减低(P<0·01),而DR组较DM组显著升高(P<0·01);透射电镜观察DM组肾小球基底膜增厚、肾小球系膜细胞增生,经罗格列酮治疗后的DR组上述改变明显减轻。结论罗格列酮对糖尿病大鼠具有肾脏保护作用,其部分机制是通过下调肾皮质中TGF-β1、Col-Ⅳ蛋白表达,上调MMP-2表达。     

雷公藤对糖尿病大鼠肾皮质GLUT-1 mRNA表达的影响及其意义

目的 探讨雷公藤对糖尿病(DM)大鼠肾脏GLUT-1 mRNA 表达的影响及其意义.方法 采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射法建立DM动物模型.将46只3月龄160～190 g大鼠(雌雄各半)随机分为正常对照组,DM模型组,雷公藤组(6.7mg·kg-1·d-1) .第4、8、12周末各组处死4只大鼠并收集标本,记录体重、右肾重、检测血糖、血尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白定量.用RT-PCR方法检测肾皮质GLUT-1 mRNA表达水平.肾组织行HE、PAS染色.结果 ①与正常对照组相比,DM模型组大鼠造模成功后血糖明显增高(P＜0.01),但24 h尿蛋白排泄量无明显增高(P＞0.05);4 w时体重、肾重指数、尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白排泄量、肾皮质GLUT-1 mRNA表达均明显增加(P均＜0.01),12 w时增加更加显著.与DM模型组相比,雷公藤组8 w时血糖、尿素氮、肌酐降低(P均＜0.05),24 h尿蛋白排泄量和肾皮质GLUT-1 mRNA表达量均明显下降(P均＜0.01);12 w时体重增加(P＜0.05),肾重指数才明显下降(P＜0.01).②肾组织HE、PAS染色病理学观察:DM模型组光镜下肾小球肥大,系膜细胞增生,系膜基质弥漫性或结节性增多,肾小球、肾小管基底膜增厚,而雷公藤组这些病理改变明显减轻.结论 雷公藤能明显减少DM大鼠尿蛋白排泄量,抑制肾脏肥大、减轻肾脏的纤维化硬化程度.其机制可能是下调GLUT-1 mRNA的表达量及功能活性,最终延缓DN的发展.     

糖尿病肾病大鼠肾脏纤维化逆转可能性的研究

目的 动态观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)在糖尿病(DM)大鼠肾组织中的表达,探讨糖尿病肾病(DN)大鼠肾脏纤维化逆转的可能性.方法 选择SD大鼠随机分为正常对照组、DM组和胰岛素治疗组,链脲佐菌素(STZ)诱发大鼠DM.正常对照组和DM组按病程分为2、4、8、12、16、20和24 w组,胰岛素治疗组从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平,分为16、20和24 w组.检测各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐(Scr)和肾脏指数(RI);PAS染色光镜观察肾脏病理改变;免疫组化检测肾皮质α-SMA和纤连蛋白(FN)的表达;Western印迹检测肾皮质α-SMA和E-cadherin蛋白表达量;RT-PCR检测肾皮质α-SMA和FN mRNA水平.结果 DM组大鼠血糖、24 h尿蛋白、Scr、RI均较正常对照组明显升高(P＜0.05,P＜0.01),胰岛素治疗组上述指标均较DM组显著降低(P＜0.05,P＜0.01).正常大鼠α-SMA只在血管壁表达,DM组2 w开始有少量间质细胞胞浆内有阳性染色,随病程进展间质细胞阳性染色增多;8 w时肾小球系膜细胞胞浆内见阳性表达;从16 w开始在DM大鼠肾小管上皮细胞可见α-SMA蛋白阳性表达,胰岛素治疗组未见表达;DM组肾皮质α-SMA和FN蛋白与mRNA表达水平较正常对照组显著增多(P＜0.01),胰岛素治疗组则显著低于DM组(P＜0.01);DM组E-cadherin蛋白的表达水平较正常对照组显著降低(P＜0.01),而胰岛素治疗组显著高于DM组(P＜0.01).结论 控制血糖可使DN大鼠肾脏一定程度的纤维化逆转,其机制可能与肾脏固有细胞表型转变被抑制或反转有关.     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾小管间质TGF-β1和α-SMA的影响

目的 研究血管紧张素ⅡⅠ型受体拮抗剂(AT1RA)--氯沙坦对链脲佐菌素(STZ)大鼠肾小管间质转化生长因子-β1(TGF-β1)和平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的影响.方法 用Wistar大鼠建立STZ诱导的糖尿病(DM)大鼠模型,设正常对照组(A),糖尿病组(B)和糖尿病+氯沙坦治疗组(C).用免疫组化方法检测肾小管间质TGF-β1和α-SMA蛋白的表达,RT-PCR检测TGF-β1mRNA.结果 TGF-β1和α-SMA在DM大鼠肾小管间质的表达较正常对照组显著升高(P＜0.05),C组与同期B组相比明显降低(P＜0.05).结论 氯沙坦能降低糖尿病大鼠肾小管间质TGF-β1和α-SMA的表达,缓解肾小管间质病理损害.     

姜黄素对腺嘌呤诱发的肾间质纤维化大鼠血及尿FN、TGF-β1、Col-Ⅳ水平的影响

目的 观察姜黄素对腺嘌呤诱发肾间质纤维化大鼠血、尿纤维连接蛋白（FN）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、胶原蛋白-Ⅳ（Col-Ⅳ）水平的影响.方法 选择雄性Wistar大鼠84只,其中72只采用腺嘌呤混悬液连续灌胃制作腺嘌呤诱发RIF大鼠模型,将其中60只模型制作成功的大鼠随机分为5个组,分别为模型组、尿毒清组、姜黄素低剂量组、姜黄素中剂量组和姜黄素高剂量组各12只,另12只正常大鼠作为空白对照组.造模后24d姜黄素低、中、高剂量组大鼠分别给予125、250、500 mg/（kg·d）姜黄素灌胃;尿毒清组大鼠给予尿毒清颗粒3.75 g/（kg·d）灌胃;模型组与空白对照组大鼠给予等量蒸馏水灌胃,共处理60 d.采用双抗体夹心ELISA法检测大鼠血液及尿液中FN、TGF-β1、Col-Ⅳ水平.结果 模型组大鼠血、尿FN、TGF-β1、Col-Ⅳ高于空白对照组（P均＜0.05）,姜黄素各剂量组各指标有所下降,以高剂量组效果最佳,尿毒清组各指标也有所下降,但高于姜黄素高剂量组.结论 姜黄素可能通过下调肾间质纤维化大鼠血、尿FN、TGF-β1、Col-Ⅳ水平干预肾间质纤维化,效果优于尿毒清.     

缬沙坦联合丹参对糖尿病大鼠肾脏病理结构及TGF-β1表达的影响

目的 应用缬沙坦联合丹参对糖尿病肾病(DN)大鼠模型进行干预,观察其对肾小球平均体积、肾毛细血管基底膜平均厚度及肾组织中转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响,探讨两药联用的肾保护作用及可能的机制.方法 应用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病(DM)大鼠模型,随机分为4组正常对照组、模型组、缬沙坦组、缬沙坦与丹参联合治疗组(联合组).8 w后观察各组血糖、糖化血红蛋白(HbAlc)、内生肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAE)、尿β2微球蛋白排泄率(β2-MG)等变化.光镜观察肾组织病理变化并测定肾小球的平均体积、电镜观察并测定肾小球毛细血管基底膜平均厚度.免疫组化法检测肾组织TGF-β1蛋白的表达.结果 与对照组相比,模型组及各给药组大鼠血糖、HbAlc、Ccr、UAE、β2-MG均显著上升(P＜0.01);肾小球平均体积、毛细血管基底膜平均厚度均显著扩大(P＜0.01);肾组织中TGF-β1的蛋白质表达显著上调(P＜0.01).缬沙坦和(或)丹参干预后,上述上调指标除血糖、HbAlc外均被显著抑制(P＜0.05或0.01),联合组优于缬沙坦组(P＜0.05).结论 缬沙坦联合丹参对DM大鼠具有改善肾脏病理结构的肾保护作用.其机制可能与其下调肾组织中TGF-β1的表达有关.     

归芪方对糖尿病大鼠早期肾脏病变保护作用的研究

[目的]研究归芪方对糖尿病(DM)大鼠早期肾脏病变的保护作用及其机制.[方法]Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素建立DM模型,随机分为DM模型组(B组)、苯那普利治疗组(C组)、归芪方治疗组(D组),另设正常对照组(A组).实验第8周时,观察各组血糖、血脂、肾重/体重及蛋白尿的改变,放射免疫法测定血浆及肾组织血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),半定量RT-PCR法检测肾脏转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA的表达.[结果]归芪方可以降低高血糖、高血脂,并且在改善肾脏肥大及抑制肾脏TGF-β1mRNA表达方面优于苯那普利(P＜0.01,＜0.05),归芪方还能降低肾内和血浆AngⅡ水平(P ＜0.01).[结论]归芪方可调节糖、脂代谢紊乱,降低AngⅡ水平,抑制肾脏TGF-β1mRNA的表达,改善肾功能,延缓DM的进展.     

雷帕霉素对早期糖尿病大鼠肾脏TGF-β1、FN表达的影响

目的利用小剂量雷帕霉素治疗糖尿病肾病(DN)大鼠,观察雷帕霉素对DN的保护作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)建立糖尿病大鼠模型。24只SD大鼠随机分为:对照组、DN组、雷帕霉素干预组。第5周起雷帕霉素干预组予雷帕霉素1 mg·kg-1·d-1干预8 w。12 w末观察各组大鼠血糖、内生肌酐清除率(Ccr)、24 h尿微量白蛋白(24 h Ualb)、肾重/体重等的变化。光镜观察肾组织病理变化并测定肾小球平均体积及系膜基质扩张指数。RT-PCR及免疫组化法检测肾皮质转化生长因子-β1(TGF-β1)、纤维连接蛋白(FN)mRNA及蛋白表达。结果与对照组相比,DN组及雷帕霉素干预组大鼠血糖、Ccr、24 h Ualb均显著上升,大鼠肾脏明显肥大,肾小球平均体积、系膜基质扩张指数、毛细血管基底膜厚度均显著增加;肾皮质TGF-β1、FN mRNA及蛋白表达显著上调。雷帕霉素干预后,上述指标除血糖外均部分被抑制。结论小剂量雷帕霉素能够减轻肾脏肥大,抑制系膜外基质聚集,下调TGF-β1、FN的表达,延缓DN的进展。     

雷公藤甲素对2型糖尿病大鼠肾组织足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达的影响及机制

目的 观察雷公藤甲素对2型糖尿病(T2DM)大鼠肾组织足细胞Nephrin、Podocin蛋白表达的影响及其机制探讨.方法 SPF级雄性8周龄Wistar大鼠50只,体重(200±20)g,按随机数字表法分为2组:对照组10只、模型组40只.模型组高脂高糖喂养8周联合小剂量链脲佐菌素(STZ)30mg/kg建立T2DM模型鼠,正常组大鼠喂养常规饲料.将造模成功的T2DM大鼠(28只)随机分成2组:糖尿病组(14只)和雷公藤甲素治疗组(14只),雷公藤甲素治疗8周后,检测大鼠生化指标、肾重/体重和尿白蛋白.利用光镜、电镜观察肾脏病理改变.采用实时定量PCR、免疫组化及Western blot法检测肾组织Nephrin及Podocin蛋白、骨桥蛋白、转化生长因子-β1(TGF-β1)及单核/巨噬细胞表面特异性标志抗原(ED-1)的mRNA和蛋白表达分布.采用单因素方差分析法进行统计学分析.结果 糖尿病大鼠尿白蛋白明显高于对照组(F=181.51,P＜0.01),治疗组尿白蛋白明显低于DM组(F=181.51,P＜0.01).与对照组比较,糖尿病大鼠肾组织Nephrin(F=36.82,P＜0.05)和Podocin(F=32.57,P＜0.05)蛋白表达下调,Nephrin(F=88.45,P＜0.01)、Podocin(F=55.43,P＜0.01)mRNA表达下调;雷公藤甲素组干预8周后Nephrin[(1.82±0.06)和(1.63±0.06),P＜0.05]和Podocin[(1.80±0.06)和(1.60±0.06),P＜0.05]蛋白质表达上调,肾脏组织Nephrin[(0.73±0.12)和(0.19±0.08),P＜0.01]和Podocin[(0.60±0.12)和(0.26±0.07),P＜0.01]mRNA表达上调.与对照组比较,T2DM大鼠肾组织骨桥蛋白(F=40.06,P＜0.05)和TGF-β1的(F=28.84,P＜0.05)蛋白质表达上调,肾组织骨桥蛋白(F=177.46,P＜0.01)和TGF-β1(F=161.27,P＜0.01)mRNA表达上调,雷公藤甲素治疗后肾组织骨桥蛋白[(1.27±0.03)和(1.39±0.05),P＜0.05]和TGF-β1[(1.23±0.03)和(1.44±0.02),P＜0.05]的蛋白表达下调,肾组织骨桥蛋白[(2.05±0.16)和(3.26±0.26),P＜0.01]和TGF-β1[(4.0±0.70)和(6.5±0.71),P＜0.01]mRNA表达下调.结论 雷公藤甲素对T2DM大鼠足细胞有保护作用,其机制可能与其?     

脂联素对糖尿病大鼠肾功能的影响

目的 探讨脂联素在早期糖尿病肾病中的作用及其可能的作用机制.方法 建立链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病动物模型,随机分为正常对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、吡格列酮治疗组[15mg/( kg·d),PT组].每周测量体重,每两周测定血糖,于实验第8周末处死大鼠后测定血清脂联素水平、相关生化指标及肾功能指标,同时留取肾皮质液氮冻存与福尔马林固定,应用实时定量逆转录(RT)-PCR方法检测肾皮质脂联素受体、转化生长因子(TGF)-β1的mRNA水平,免疫组织化学法测定TGF-β1蛋白的表达情况.结果 与NC组相比,DM组大鼠血糖、血尿素氮、24h尿量及尿微量白蛋白、肾肥大指数明显升高(P＜0.01),血肌酐含量和血清脂联素水平明显下降(P＜0.01).与DM组比较,PT组仅在实验前期出现短暂的血糖降低,后期血糖水平差异无统计学意义,但PT组血清脂联素水平升高(P＜0.05),血尿素氮、24 h尿量及尿微量白蛋白、肾肥大指数等指标明显下降(P＜0.01).实时RT-PCR结果显示,与NC 组比较,DM组的脂联素mRNA表达量下降,而TGF-β1mRNA表达明显升高;与DM组相比,PT组脂联素mRNA水平升高(P＜0.05),而TGF-β1 mRNA表达明显受抑制(P＜0.01).结论 脂联素对糖尿病肾病具有重要作用,吡格列酮可以通过增加脂联素在肾脏的表达来抑制TGF-β1mRNA及蛋白的表达,从而对肾脏发挥独立的保护作用.     

中剂量双重阻断肾素血管紧张素系统对糖尿病肾病大鼠肾小管间质转化生长因子-β1、结缔组织生长因子表达的影响

目的 观察中剂量双重阻断肾素血管紧张素系统对糖尿病肾病(DN)大鼠肾小管间质转化生长因子(TGF)-β1、结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.结果 将链脲佐菌素(STZ)诱导的DN大鼠模型随机分为对照组(A组)、贝那普利组(B组)、贝那普利联合氯沙坦组(C组),B组给予贝那普利10 mg·kg-1·d-1灌胃,C组给予贝那普利5 mg·kg-1·d-1、氯沙坦10 mg·kg-1·d-1灌胃,8 w后免疫组化观察各组肾小管间质TGF-β1、CTGF表达,RT-PCR测定TGF-β1、CTGF mRNA表达.结果 B组、C组大鼠小管间质TGF-β1、CTGF表达及mRNA表达较A组均明显下调(P＜0.01),同时C组与B组比较其表达表达也显著下调(P＜0.05).结论 中剂量贝那普利与氯沙坦联合阻断肾素血管紧张素系统,比单用贝那普利能更有效下调DN大鼠肾小管间质TGF-β1、CTGF的表达.     

鹿茸方对糖尿病肾病大鼠转化生长因子β1基因表达的影响

目的 观察鹿茸方对糖尿病肾病大鼠肾皮质转化生长因子-β1(TGF- β1)基因表达的影响,在基因水平探讨鹿茸方疗效的分子机制.方法 应用雄性Wistar大鼠腹腔注射链脲霉素诱导糖尿病肾病动物模型,造模成功后分为模型组、鹿茸方小剂量治疗组、鹿茸方中剂量治疗组、水飞蓟宾治疗组及正常对照组.干预治疗8周后,测定各组大鼠24 h尿微量白蛋白排泄量(UAER)、用酶联免疫吸附法测定各组大鼠肾皮质TGF-β1;用RT-PCR法测定各组大鼠TGF-β1 mRNA的表达.结果 模型组大鼠UAER、肾皮质TGF- β1 mRNA及蛋白表达显著增高,均较正常大鼠显著上调(P＜0.05);鹿茸方中、小剂量组显著降低模型UAER、肾皮质TGF- β1含量,显著下调肾皮质TGF- β1 mRNA的表达(P＜0.05).结论 鹿茸方及对照药物水飞蓟宾均对糖尿病肾病有一定治疗作用,其作用机制与下调肾皮质TGF-β1mRNA的表达有关.     

吡非尼酮逆转博来霉素诱导大鼠PIF的疗效及对TGF-β1、caspase-3的影响

目的探讨吡非尼酮治疗博来霉素诱导大鼠肺纤维化(PIF)的效果及对大鼠肺组织中转化生长因子β1(TGF-β1)、凋亡相关蛋白caspase-3的影响。方法选取SPF级成年SD大鼠72只,采用随机数字表法分为空白组(等量生理盐水处理)、模型组(等量生理盐水处理)、阳性对照组(强的松0.6 mg/100 g/d)、实验组(500 mg/kg/d)各18只,连续干预4周,检测各组大鼠血清中肺纤维化相关指标,采用免疫组化染色检测并肺组织中TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白的表达程度,采用RT-PCR方法检测TGF-β1 mRNA表达程度。结果模型组大鼠的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、肺泡灌洗液中IL-6、IL-8水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的血清HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C、肺泡灌洗液中IL-6、IL-8水平显著的低于模型组(P0.05);模型组大鼠的肺组织中SOD、GSH-px显著的高于空白组(P0.05),MDA、iNOS显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织中SOD、GSH-px显著的高于模型组(P0.05),MDA、iNOS显著的低于模型组(P0.05);模型组大鼠的TGF-β1 mRNA表达水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织TGF-β1 mRNA表达水平低于模型组(P0.05);模型组大鼠的TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白表达水平显著的高于空白组(P0.05);阳性对照组和实验组的肺组织TGF-β1蛋白、caspase-3蛋白表达水平低于模型组(P0.05)。结论吡非尼酮治疗博来霉素诱导的大鼠PIF具有一定的效果,主要与增强抗氧化能力,降低血清中纤维化指标、炎症反应程度、TGF-β1和caspase-3表达有关。     

贝那普利下调TGF-β1及Bax表达对糖尿病大鼠心肌的保护作用

目的 探讨贝那普利(BZ)对糖尿病(DM)大鼠心肌转化生长因子β1(TGF-β1)和Bax的表达及心肌肥厚指标的影响.方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备DM模型.实验分为正常对照组(CON)、DM组和BZ治疗组(BZ).治疗组每日灌胃给予贝那普利(10 mg·kg-1·d-1).8 w后测定心脏质量指数(HMI)、左心室质量指数(LVMI),并取左心室心肌免疫组化法检测TGF-β1和 Bax在心肌组织中的表达,透射电镜观察心肌组织超微结构变化.结果 与CON组相比,DM组大鼠HMI、LVMI明显升高;心肌TGF-β1和 Bax蛋白表达显著增强(P＜0.05,P＜0.01);电镜发现DM心肌细胞肿胀、肌丝稀疏,线粒体变性肿胀,间质胶原增生及微血管基底膜增厚.与DM组相比,BZ干预后,HMI、LVMI明显降低(P＜0.01);心肌TGF-β1和 Bax蛋白表达减弱(P＜0.01);心肌超微结构改变减轻.结论 TGF-β1 可能通过刺激促凋亡因子Bax表达诱导心肌细胞凋亡,促进DM心肌肥厚.BZ能在一定程度上抑制TGF-β1和Bax的表达从而延缓DM心肌病理进程.     

氯沙坦对肾间质纤维化大鼠肾组织ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达的影响

目的研究氯沙坦对肾间质纤维化大鼠肾组织ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达的影响。方法复制腺嘌呤致肾间质纤维化大鼠模型,随机分成氯沙坦组和模型对照组,氯沙坦治疗组大鼠予氯沙坦(10 mg·kg-1.d-1)混悬液灌胃30 d,模型组予等量蒸馏水灌胃,另设正常对照组予等量蒸馏水灌胃。在实验结束时留取血、尿、肾组织标本,检测Scr、BUN、24 h MTP等生化指标,采用Real Time PCR测定肾组织ACE2 mRNA、TGF-β1 mRNA表达水平。结果氯沙坦组较模型组Scr、BUN、24 h MTP均显著下降(P<0.01)。Real Time PCR结果显示模型组较正常组ACE2 mRNA表达水平下降(P<0.01),而TGF-β1 mRNA的表达水平反而增加(P<0.01);经治疗后氯沙坦组较模型组ACE2 mRNA表达水平明显增加(P<0.01),TGF-β1 mRNA的表达水平明显减少(P<0.01)。结论氯沙坦具有肾功能保护作用,其作用机制除了拮抗AT1R外,还可能与上调ACE2 mRNA表达水平,抑制TGF-β1 mRNA的表达水平而发挥抗肾间质纤维化作用有关。     

人参皂甙Rg1对TGF-β_1诱导的肾小管上皮细胞增殖及细胞外基质的影响

目的为人参皂甙Rg1（G-Rg1）治疗肾纤维化提供依据。方法取对数生长期NRK52E细胞分为五组。对照组仅加入含血清的DMEM培养基;TGF-β1组及G-Rg1低、中、高剂量组均加入TGF-β1使终质量浓度为5ng/ml;G-Rg1低、中、高剂量组再分别加入G-Rg1使终质量浓度分别为10、20、40ng/ml。干预1、3、5天时MTT法测定各组细胞增殖率;干预5天时ELISA法测定细胞培养上清液中Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平。结果与对照组比较,细胞培养上清液Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平明显升高（P〈0.05）;细胞增殖率明显降低（P〈0.05）;与TGF-β1组比较,各G-Rg1干预组Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平均明显降低（P〈0.05）;细胞增殖率明显升高（P〈0.05）。结论 G-Rg1可抑制TGF-β1诱导肾小管上皮细胞增殖能力降低的作用,从而促进肾小管上皮细胞增殖,其机制可能与抑制Col-Ⅰ、Col-Ⅲ和FN水平有关;G-Rg1可用于肾纤维化的治疗。