DNA疫苗免疫原性的研究策略

DNA疫苗既能诱导体液免疫又能诱导细胞免疫,是近年来疫苗研究的热点领域,被称为疫苗史上的第三次革命.但DNA疫苗诱导特异性免疫应答的水平不高,限制了它的广泛应用.本文对提高DNA疫苗免疫原性的几种策略进行综述.     

乙肝DNA疫苗

DNA疫苗可以诱导长期的体液及细胞免疫，打破免疫耐受，作为未来治疗病毒、胞内菌、寄生虫等病原体感染及肿瘤的工具已进行了大量研究。本文就慢性乙型肝炎DNA疫苗的研究进行了总结，主要描述了二十一世纪以后乙肝DNA疫苗的发展。     

006 DNA疫苗与抗肿瘤免疫

DNA疫苗是近年发展起来的新一代疫苗,能够诱导宿主体内细胞毒T细胞反应和抗体反应.大量实验研究证明,注射抗肿瘤DNA疫苗能获得肿瘤保护性免疫效应,在肿瘤免疫治疗中应用前景看好.本文对DNA疫苗抗肿瘤免疫的机制、影响因素及应用作一综述.     

DNA疫苗的分子佐剂研究进展及其在鱼用疫苗中应用

DNA疫苗是一种能诱生机体产生免疫应答的新型疫苗,近年来成为一种新的研究热点,但存在免疫效果低的缺点,为优化DNA疫苗的免疫效果,人们开始研究一类新型的DNA疫苗分子佐剂.本文简述了当前DNA疫苗中几种常用的分子佐剂如细胞因子、CpG-ODN及其在鱼用疫苗中的应用.     

壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米免疫原肌注BALB/c鼠所致树突状细胞分布与功能变化

壳聚糖是一种来源广泛、价格低廉、具有良好生物相容性及降解性、安全无毒的阳离子天然高分子聚合物,以纳米颗粒或微球形式与DNA结合后形成聚电解质复合体,后者可优化DNA疫苗的免疫效果.研究证实壳聚糖是一种有效介导DNA疫苗进行皮肤及黏膜免疫的载体物质.     

壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米免疫原肌注BALB/c鼠所致树突状细胞分布与功能变化

壳聚糖是一种来源广泛、价格低廉、具有良好生物相容性及降解性、安全无毒的阳离子天然高分子聚合物,以纳米颗粒或微球形式与DNA结合后形成聚电解质复合体,后者可优化DNA疫苗的免疫效果.研究证实壳聚糖是一种有效介导DNA疫苗进行皮肤及黏膜免疫的载体物质.     

壳聚糖-pJME/GM-CSF纳米免疫原肌注BALB/c鼠所致树突状细胞分布与功能变化

壳聚糖是一种来源广泛、价格低廉、具有良好生物相容性及降解性、安全无毒的阳离子天然高分子聚合物,以纳米颗粒或微球形式与DNA结合后形成聚电解质复合体,后者可优化DNA疫苗的免疫效果.研究证实壳聚糖是一种有效介导DNA疫苗进行皮肤及黏膜免疫的载体物质.     

含密码子优化的SIV gag基因的DNA疫苗与rAd5疫苗构建及免疫原性评价

目的 构建含有SIVgag基因的DNA疫苗和重组腺病毒疫苗,为后期在SIV感染的猴模型中进行多载体疫苗联合免疫策略的治疗效果评价奠定基础.方法 将SIV gag基因按照哺乳动物偏嗜密码子进行优化并构建至pVR载体,作为DNA疫苗.以Western Blot方法比较优化前后gag基因表达水平.将优化后的gag基因插入重组腺病毒载体,构建rAd5-SIVgag疫苗.在BALB/c小鼠中分别比较DNA疫苗及rAd5-SIV.gag疫苗单独及联合免疫的效果.结果 密码子优化的SIVgag基因的表达水平远高于野生型SIVgag基因.重组腺病毒疫苗免疫一次或两次诱导的细胞免疫反水平分别高于DNA疫苗免疫一次或两次.两种疫苗联合免疫的反应水平与腺病毒疫苗免疫两次的水平相当,高于DNA疫苗单独免疫及腺病毒疫苗单独免疫一次的结果.结论 成功优化了SIV gag基因,使其不依赖Rev高水平表达;成功构建了表达优化后SIV gag基因的DNA疫苗和rAd5疫苗,可以在小鼠体内诱导较强的gag基因特异性CTL应答.     

DNA疫苗及其优化策略

DNA疫苗既可以诱导细胞免疫又可以诱导体液免疫反应,是最有希望成功的新一代疫苗之一.但免疫原性相对较弱,限制了DNA疫苗的广泛应用,需要进一步优化.本文对DNA疫苗的历史,优缺点,免疫机制,尤其是优化策略进行了综述,并对DNA疫苗的应用前景进行了展望.     

埃博拉病毒新型疫苗研究进展

埃博拉病毒是一种烈性致死病原体,它能引起人类和灵长类动物高死亡率的出血热.随着人们对埃博拉病毒分子生物学及病理学特征研究的深入,各种新型疫苗的产生为埃博拉病毒的控制和治疗带来了希望.本文就三大类新型疫苗(DNA疫苗、病毒载体疫苗和病毒样颗粒疫苗)的研究现状和应用前景进行综述.     

抗旋毛虫病Ts87 DNA疫苗滴鼻初免—蛋白疫苗加强免疫策略增强免疫保护应答

为优化抗旋毛虫病核酸疫苗免疫策略,本文探讨了Ts87 DNA疫苗滴鼻初免与蛋白疫苗皮下注射加强免疫诱导产生的保护效果及免疫应答特征.分别在第0d以旋毛虫Ts87 DNA疫苗SL7207/pVAX1-Ts87滴鼻初免,第14/28 d以蛋白疫苗rTs87皮下注射加强免疫小鼠,在第35 d攻击感染旋毛虫肌幼虫,第84 d剖杀小鼠,计算减虫率观察免疫保护效果;进行小鼠血清中特异性IgG抗体效价、抗体亚型分析及肠道盥洗液sIgA水平分析,检测脾淋巴细胞增殖反应、脾及颈部淋巴结细胞分泌细胞因子水平.结果显示,DNA疫苗滴鼻初免—重组蛋白加强的联合免疫组的保护作用优于单独DNA疫苗滴鼻及单独重组蛋白免疫组,显著提高了减虫率(46.1％);DNA疫苗滴鼻初免和蛋白疫苗加强免疫方式不仅诱导小鼠产生了粘膜免疫应答,同时也诱导了有效的细胞和体液免疫应答,其免疫应答类型是以Th2型为主的混合型Th1/Th2免疫反应.该研究为新型抗旋毛虫病疫苗接种策略的优化提供了实验依据.     

DNA疫苗在病毒感染疾病中的应用进展

DNA疫苗属于继第一代减毒、灭活疫苗,第二代重组基因工程亚单位疫苗之后的第三代新型疫苗.DNA疫苗不仅能诱导体液免疫反应,而且还可以有效地激发细胞免疫.考虑到细胞免疫在病毒感染性疾病的机体免疫过程中发挥重要作用,且目前临床上对病毒感染性疾病的防治措施及其相对效果都不尽如人意,DNA疫苗在此方面更是被寄于厚望.本文对DNA疫苗的历史发展,针对病毒防治方面的部分疾病研究进展、问题及前景进行简要综述.     

085 树突状细胞与DNA疫苗

随着对DNA疫苗(DNA Vaccine)研究的深入,树突状细胞(DC)在DNA免疫中的独特作用逐渐被认识.本文综述了DC和DNA疫苗在免疫生物学领域的最新进展,并阐述了DC在DNA疫苗引起的免疫应答中的作用.     

轮状病毒脂质体DNA疫苗体内诱导免疫应答研究

目的:通过对轮状病毒脂质体DNA疫苗体内免疫应答研究,寻找轮状病毒DNA疫苗理想的免疫佐剂.方法:脂质体包被的轮状病毒基因疫苗pcDNA1/VP7及裸DNA经肌肉注射及鼻粘膜两种途径免疫BALB/c小鼠,利用ELISA方法对其诱导产生的体液免疫应答进行测定.结果:经裸DNA及脂质体包被的质粒DNA免疫小鼠后,滴鼻组和肌注组血清特异性IgG水平较对照组明显升高.值得注意的是,脂质体包被的质粒DNA经肌注接种后血清特异性IgA水平也较对照组明显升高,而其余各实验组均未能诱导血清特异性IgA水平的升高.结论:脂质体在DNA接种中不仅作为质粒DNA疫苗的载体,而且起到免疫佐剂的作用.经该脂质体包被的质粒DNA免疫小鼠后,肌注组血清IgA水平较对照组明显升高,提示该脂质体包被的DNA经肌肉注射途径接种可能对机体产生免疫保护.     

弓形虫多表位DNA疫苗的构建及其免疫保护作用

目的:构建弓形虫多表位DNA疫苗并研究其免疫保护效果.方法:将编码含弓形虫多个T、B细胞表位的6段弓形虫多肽基因,以5个甘氨酸编码基因相间隔相连接,克隆入真核表达质粒pcDNA3.1( )中,构建成多表位弓形虫DNA疫苗.免疫BALB/c小鼠,测定其诱导的特异性抗体水平及T淋巴细胞增殖状况,同时进行弓形虫攻击感染保护实验.结果:成功构建了包含多个弓形虫表位的真核表达质粒pcDNA3.1/T-ME,以其作为DNA疫苗免疫小鼠,可诱导机体产生弓形虫特异性的体液及细胞免疫应答,产生有效的抗弓形虫保护性免疫应答.结论:构建的弓形虫多表位DNA疫苗能诱导机体产生有效的保护性免疫应答,在控制弓形虫感染上具有可行性.     

基因佐剂在DNA 疫苗中的应用

基因佐剂可将编码某些具有佐剂作用成分的基因与DNA疫苗共免疫,在体内表达相应的蛋白,增强T、B细胞对疫苗成份的体液及细胞免疫应答.目前研究较多的基因佐剂有细胞因子基因佐剂如IL-12、IL-2、IFN-γ、GM-CSF等;共刺激分子基因佐剂如 B7-2、CD40L 等;免疫刺激DNA序列基因佐剂如CpG、ODN 等.基因佐剂在体内与疫苗基因共表达,改善抗原的周边微环境,提高疫苗的免疫效果.因此,基因佐剂是目前DNA疫苗研究中的热点问题之一.     

猪囊虫DNA疫苗pEP1的生物安全性研究

猪囊虫核酸疫苗pEP1能在猪体内产生较高滴度的保护性抗体,具有较高的免疫保护率,本研究就核酸疫苗pEP1的生物安全性问题进行了深入探讨.首先,将核酸疫苗pEP1以肌注方式免疫仔猪,分别于接种后1天、7天、4周、8周分离各组织,提取组织总DNA,利用PCR技术分析质粒DNA在各组织的分布.研究发现,在疫苗接种后第1天几乎所有组织都能检测到质粒DNA,随着时间的延续,仅在注射部位检测到质粒的存在,说明肌注DNA疫苗在注射部位以外组织中很快被清除.其次,对残存质粒的注射部位组织进行细胞基因组整合可能性分析,并未发现质粒DNA整合入宿主细胞基因组中.同时采集猪舍周围样品,PCR法分析DNA疫苗上的CMV启动子基因、抗性基因和抗原表位基因在环境中发生转移和扩散的可能性,结果显示疫苗质粒并没有转化整合环境细菌.因而我们认为该猪囊虫核酸疫苗对猪体和环境都是安全的,具有很好的应用前景.     

TCR DNA疫苗及其在自身免疫性疾病中应用的研究进展

TCR DNA疫苗是一种治疗性基因疫苗,在自身免疫性疾病、肿瘤和移植排斥反应的治疗中可以选择性抑制或杀伤致病性T细胞克隆,具有很好的应用前景.本文对近年来文献中关于TCR、TCR DNA疫苗的特点及其在自身免疫病治疗中的应用及相关研究进展进行了综述.     

DNA疫苗的作用机理以及抗肿瘤的临床应用进展

DNA疫苗诱发机体产生持久而强烈的免疫反应 ,随着分子生物技术的迅速发展 ,DNA疫苗的研究从理论的提出到技术的成熟 ,许多学者在DNA疫苗的作用机理、在抗肿瘤方面的应用以及DNA疫苗的安全性等方面做了大量卓有成效的探索 ,本文就此进行综述。     

DNA疫苗安全性的研究进展

DNA疫苗自问世以来就显示出传统疫苗无法比拟的优越性,在传染病、肿瘤等众多疾病的预防和治疗方面具有广阔的应用前景.目前制约DNA疫苗发展的因素主要来自两方面:一方面DNA疫苗在临床实验中有时不能有效激发全面的免疫应答,致使免疫效果不佳;另一方面则是DNA疫苗的安全性问题悬而未决.本文中主要从基因整合、生殖毒性、免疫耐受、自身免疫疾病和对环境的扩散等方面对DNA疫苗安全性进行探讨.