三氧化二砷对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响及其作用机制探讨

目的:观察三氧化二砷(As2O3)对HL-60细胞增殖、分化和凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法:不同浓度As2O3处理HL-60细胞,应用MTS/PES方法检测细胞增殖,NBT实验测定细胞分化,流式细胞术检测细胞凋亡和分化相关抗原CD11b的表达,SYBR Green real-time RT-PCR方法检测C-FES、BCL-2、BAX、Survivin、P21和P27 mRNA水平变化。结果:As2O3能明显抑制HL-60细胞增殖,其效应呈剂量依赖和时间依赖性(r=-0.967;r=-0.954);低浓度(0.1、0.5和1.0μmol/L)As2O3能明显促进细胞分化,NBT阳性率和CD11b表达水平均有不同程度的增高;较高浓度As2O3(2.5和5.0μmol/L)能明显诱导细胞凋亡,抑制细胞分化。HL-60细胞经1.0和5.0μmol/L浓度As2O3处理后,C-FES mRNA表达均明显上调,但以1.0μmol/L组更为明显,证实C-FES mRNA表达水平与细胞分化程度成正比。此外,5.0μmol/L浓度As2O3显著下调了HL-60细胞BCL-2和Survivin的表达,相反明显上调了BAX、P21和P27的表达。结论:As2O3能明显抑制HL-60细胞增殖、促使细胞分化成熟及诱导细胞凋亡,其机制可能涉及C-FES以及细胞周期和凋亡相关基因的调控。     

三氧化二砷对白血病HL-60细胞株的凋亡作用

目的：探讨三氧化二砷对HL-60的诱导凋亡作用。方法：琼脂糖电泳检测DNA条带;Hoecst 33258染色后荧光显微镜观察细胞核的变化。用流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果：10μmol/L三氧化二砷处理HL-60细胞24~48 h可见到DNA出现梯形条带;处理24~48 h HL-60细胞核呈现细胞核浓缩和核碎裂现象。流式细胞仪测定12、24、和48 h的细胞凋亡率分别为（8.5±2.1）%、（12.8±3.4）%及（21.4±5.8）%,而培养48 h的HL-60细胞自然凋亡率仅为（1.5±0.5）%（P〈0.05）。结论：三氧化二砷可诱导HL-60细胞凋亡。     

熊果酸诱导人白血病HL-60细胞凋亡作用

熊果酸(Ursolic acid,UA),又名乌索酸,乌苏酸,是存在多种天然植物中的五环三萜类化合物,如白花蛇香草、山楂、女子贞、夏枯草等,熊果酸具有保护肝脏、降血脂、调节机体免疫、抗氧化和抗肿瘤等多种生物学活性[1,2],研究表明熊果酸可通过诱导细胞凋亡抑制多种肿瘤细胞的生长,如人乳腺癌、胃     

三氧化二砷对RAJI细胞的诱导凋亡作用及其作用机制

目的：探讨三氧化二砷对白血病RAJI细胞的诱导凋亡作用及其作用机制。方法：以不同浓度的三氧化二砷作用于体外培养的RAJI细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪及瑞氏染色法观察细胞凋亡，TRAP—PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果：三氧化二砷可显著地降低RAJI细胞端粒酶活性，抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡。并呈现出明显的量-效与时-效关系。结论：三氧化二砷能抑制RAJI细胞的生长并诱导细胞发生凋亡，降低细胞端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

黄芩苷对高致瘤HL-60细胞裸鼠移植瘤模型的体内抑瘤作用和机制探讨

本研究旨在探讨黄芩苷对高致瘤人白血病HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的体内抑瘤作用及其作用机制。制备高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型,将荷瘤裸鼠随机分为6组:阴性对照组(注射5%NaHCO3),黄芩苷25、50和100 mg/kg剂量组,联合用药组(黄芩苷50 mg/kg+VP16 2 mg/kg)和VP16 4 mg/kg阳性对照组,每组10只裸鼠。采用腹腔注射方式给药,14 d后每组处死5只裸鼠,对剥取的瘤块称重计算抑瘤率;通过电子显微镜观察瘤组织超微结构,病理组织学观察裸鼠各主要脏器结构改变,瘤块组织蛋白检测信号转导通路指标。观察裸鼠生存时间。结果表明,黄芩苷可抑制裸鼠HL-60细胞皮下移植瘤的生长,呈剂量依赖性。瘤组织病理组织学和透射电子显微镜检查结果显示,黄芩苷组和联合用药组的肿瘤坏死和细胞凋亡现象较阴性对照组多见。黄芩苷可能通过抑制Akt活性,下调p-Akt、mTOR和p-mTOR的表达来抑制裸鼠异种移植瘤的增长。联合用药组裸鼠中位生存时间明显长于阴性对照组(P<0.05)。结论:黄芩苷可抑制高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的生长,诱导瘤组织中HL-60细胞的凋亡,其机制之一可能与抑制Akt活性并下调PI3K/Akt/mTOR信号通路有关;黄芩苷与VP16联用可明显提高荷瘤裸鼠的中位生存期,具有协同抗高致瘤HL-60细胞裸鼠异种移植瘤的作用。     

维生素K3和三氧化二砷在诱导白血病细胞凋亡中的协同作用

维生素Ｋ类药物作为止血药在临床应用已有多年。近年来的研究表明 ,维生素Ｋ类药物尚具有一定的抑制肿瘤细胞增殖、诱导肿瘤细胞凋亡的作用[1] 。最近 ,我们观察了维生素Ｋ3(ＶＫ3)对ＨＬ 6 0细胞的凋亡诱导作用及其与三氧化二砷 (Ａｓ2 Ｏ3)的协同作用 ,现将结果报道如下。材料和方法1　主要试剂　Ａｓ2 Ｏ3 购于哈尔滨医科大学附属第一医院 ,ＶＫ3 为无锡第七制药厂产品 ,小牛血清购自杭州四季青生物制品公司 ,ＡｎｎｅｘｉｎＶ/ＰＩ试剂盒购自法国Ｉｍｍｕｎｏｔｅｃｈ公司。2　细胞培养　ＨＬ 6 0细胞系引自中国科学院上海细胞生物学研…     

鼠尾草酸联合三氧化二砷对HL-60细胞的影响

鼠尾草酸（Carnosic acid，CA）是迷迭香的天然药效成分。近年研究发现，2．5—10．0μmol／LCA显著提高1，25（OH）2D3和全反式维甲酸（ATRA）对白血病细胞HL-60和U937诱导分化能力，而CA本身诱导分化能力有限。CA增强1，25（OH）2D3诱导白血病细胞向单核系成熟分化的能力与促进1，25（OH）2D3受体的表达有关。     

三氧化二砷对HL-60细胞及NB4细胞端粒酶活性的调节

目的 了解三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）对ＨＬ－６０细胞及ＮＢ４细胞端粒酶活性的调节作用。方法 利用透射电镜、流式细胞仪、半定量端粒重复扩增、－银染色等手段,检测细胞的分化、凋亡,ｂｃｌ－２表达及端粒酶活性。结果 低浓度Ａｓ２Ｏ３对ＨＬ－６０及ＮＢ４细胞的诱导分化作用不及全反式维甲酸（ＡＴＲＡ）,但对其端粒酶活性的下调作用却比ＡＴＲＡ强烈和迅速。较高浓度Ａｓ２Ｏ３在有效诱导两种细胞凋亡过程中,伴随粒酶活     

三氧化二砷增强STI571诱导的慢性粒细胞白血病细胞凋亡

目的 探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide，AID)对STI571诱导慢性粒细胞白血病细胞系F210ber／abl( )K562细胞凋亡的影响及其作用机制。方法 以ATO和STI571不同浓度组合孵育细胞，观察细胞增殖活力、集落形成和细胞形态学；流式细胞仪(FCM)测定细胞凋亡率和细胞周期；RT-PCR半定量观察Bel-XL及ber／abl转录本的表达；并检测凋亡进程中胞浆细胞色素c(eyt c)、半胱氨酸蛋白酶3(easpase-3)蛋白的表达。结果 ATO和STI571均可诱导K562细胞凋亡，两药物联用时，ATO可增加STI571诱导细胞发生凋亡的比例；凋亡进程中，K562细胞胞浆部分eyt c蛋白增多，easpase-3活性增强；RT-PCR结果显示，STI571和AID于12h均可下调Bel-XL转录本的表达，联用时进行性下调作用明显；STI571于96h明显下调k／abl转录本表达，但AID对ber／abl转录本无影响，两药物联用时72h即可见明显下调作用。结论 AID可增强STI571对K562细胞的诱导凋亡作用，其机制与线粒体下游的CytC胞浆转位和Caspase-3激活的信号通路相关，同时两药物也通过调节Bel-XL及bet／abl基因以促进K562细胞凋亡。     

三氧化二砷诱导急性淋巴细胞性白血病细胞系凋亡

目的：了解三氧化二砷对急性淋巴细胞性白血病细胞系的可能作用。方法：以急性淋巴细胞性白血病细胞系ＭＯＬＴ－４为体外模型,在观察Ａｓ２Ｏ３对细胞生长,活力及形态学影响的基础上,应用流式细胞仪检测细胞ＤＮＡ含量分布,以评判细胞凋亡与否。     

去铁胺单独及联合三氧化二砷对裸鼠HL-60细胞移植瘤的抑制作用及其可能机制

目的 探讨去铁胺(DFO)单独及联合三氧化二砷(As2O3)对裸鼠HL-60白血病细胞移植瘤的抑制作用及机制,为临床采用铁螯合剂治疗或辅助治疗白血病提供实验依据.方法 用高致瘤性HL-60细胞建立裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为4组:50 mg/kg DFO单药组、3 mg/kg As2O3单药组、联合用药组(50 mg/...     

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡及其分子机制的初步研究

目的：了解氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）的细胞和分子机制。方法：以早幼粒细胞白血病细胞株ＮＢ４细胞等为研究对象，利用流式细胞仪，ＤＮＡ电泳，Ｎｏｒｔｈｅｒｎ、Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹，免疫组化等手段，观察Ａｓ２Ｏ３对ＡＰＬ的作用。结果：Ａｓ２Ｏ３能显著诱导ＮＢ４细胞凋亡，而不影响ＨＬ－６０和Ｕ９３７的生长和存活。氧化砷能有效降低ＮＢ４细胞中ｂｃｌ－２基因的表达，而对其它几种凋亡相关基因（包括ｐ５３、ｃ－ｍｙｃ、ｂａｘ和ｂｃｌ－ＸＬ）的ｍＲＮＡ水平无影响。结论：这可能是Ａｓ２Ｏ３诱导ＮＢ４细胞凋亡的分子机制之一。     

细胞周期素G1反义硫代脱氧寡核苷酸抑制HL-60细胞在裸鼠体内生长的实验研究

目的：探讨细胞周期素G1(cyclin G1)反义硫代脱氧寡核苷酸对HL-60细胞在裸鼠体内生长的抑制作用。方法：将裸鼠随机分成对照组、正义寡核苷酸(SON)组、反义寡核苷酸(ASON)组，其中SON组和ASON组接种转染的HL-60细胞(HL-60／S和HL-60／AS)前接受3Gy的^60Co照射；将各组HL-60细胞接种于裸鼠皮下连续观察裸鼠的出瘤时间、瘤体大小，计算抑瘤率；病理切片用苏木精．伊红染色，电镜观察移植瘤组织的结构和细胞形态变化；用流式细胞仪(FCM)和RT-PCR分别检测cyclin G1蛋白和mRNA水平的表达；电镜和FCM检测细胞凋亡。结果:①cyclin G1 ASON组与SON组和对照组比较，对HL-60细胞在裸鼠体内生长有明显抑制作用，抑瘤率为69．4％。成瘤率、瘤重、瘤体积明显小于SON组和对照组。②镜下见cyclin G1 ASON组的HL-60细胞部分细胞形态发生改变，核分裂象少见，细胞的异型性较小，并且有凋亡细胞出现。结论:cychn G1 ASON能明显抑制HL-60细胞在裸鼠体内的生长，并且促使部分细胞发生凋亡。     

Bortezomib或联合三尖杉酯碱、三氧化二砷对急性髓系白血病原代细胞增殖作用的影响

目的:探讨bortezomib单独或联合三尖杉酯碱(HT)、三氧化二砷(As2O3)对初发及难治/复发急性白血病原代细胞的增殖作用。方法:以初发及难治/复发急性髓系白血病原代细胞为研究对象,分别应用bortezomib、HT、As2O3单独或联合处理细胞后,使用MTT法观察细胞增殖活力。结果:10～500nmol/L bortezomib对初发及难治/复发性白血病患者原代细胞均有抑制作用,且呈明显剂量依赖关系,随浓度增大抑制效果逐渐增强。作用于初发白血病原代细胞时,Bortezomib与HT联合与各单药处理组相比,抑制率无明显提高,而联合As2O3时其抑制率优于单药处理组;作用于难治/复发白血病原代细胞时,bortezomib与HT或As2O3联合效果均呈现相加作用,其中与As2O3联合效果优于与HT联合者。结论:Bortezomib能够抑制初发及难治/复发急性白血病原代细胞增殖,与As2O3联合作用后抑制效果明显增强。     

三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞促凋亡作用的体外实验

目的 探讨三氧化二砷对人冠状动脉平滑肌细胞(HCSMC)的促凋亡作用机制及其对损伤动脉再狭窄防治的意义.方法 将人冠状动脉平滑肌细胞传代培养,将细胞分为正常对照组、三氧化二砷(浓度分别为1.0,2.0,3.0,4.0,5.0 μmol/L)组,通过原位细胞凋亡检测试剂盒(TUNEL),流式细胞仪检测细胞周期观察三氧化二砷促细胞凋亡作用,WESTERN印迹检测凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达变化,RT-PCR检测三氧化二砷对E2F-1的作用.结果 随三氧化二砷浓度的增加它能够抑制HCSMC的增殖并且该作用与时间及三氧化二砷浓度呈正相关(观察第7天、浓度为5.0 μmol/L时活细胞数为(4.41±0.10)×105/mL与正常对照组(30.11±0.93)×105/mL相比较差异具有统计学意义(P＜0.05),TUNEL可见凋亡细胞由16.0%±3.1%增至38.7%±2.7%(P＜0.05),流式细胞仪可见4.0 μmol/L三氧化二砷作用HCSMC 48 h后代表细胞凋亡的亚二倍体峰在48 h为最多,WESTERN印迹可见三氧化二砷上调凋亡促进基因Bax的表达而下调凋亡抑制基因Bcl-2表达.RT-PCR可见E2F-1 mRNA表达于48 h最少(P＜0.05).正常对照组均不见典型上述变化.结论 三氧化二砷可促进HCSMC的凋亡,降低HCASMC转录因子E2F-1 mRNA表达,从而抑制HCASMC的过度增殖、迁移和黏附.     

维甲酸、砷剂及柔红霉素对NB4细胞组织因子表达的影响

目的　探讨全反式维甲酸（ Ａ Ｔ Ｒ Ａ） 、三氧化二砷（ Ａｓ２ Ｏ３） 及柔红霉素（ Ｄ Ｎ Ｒ） 对急性早幼粒细胞白血病（ Ａ Ｐ Ｌ） 细胞株 Ｎ Ｂ４ 细胞组织因子（ Ｔ Ｆ） 表达的影响。方法　用复钙时间检测 Ｎ Ｂ４ 细胞的促凝活性（ Ｐ Ｃ Ａ） ;用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 方法检测其 Ｔ Ｆ 抗原;用逆转录聚合酶链反应（ Ｒ Ｔ Ｐ Ｃ Ｒ） 检测 Ｔ Ｆｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录水平。结果　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均呈时间依赖的方式下调 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ、 Ｔ Ｆ 抗原水平以及 Ｔ Ｆ ｍ Ｒ Ｎ Ａ的转录;而 Ｄ Ｎ Ｒ 处理 Ｎ Ｂ４ 细胞的 Ｐ Ｃ Ａ及 Ｔ Ｆ 抗原在早期上调,至２４ ～４８ 小时达到最大值。对 Ｐ Ｃ Ｒ 产物测序,发现 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ 第５ 个外显子缺失的转录本。结论　 Ａ Ｔ Ｒ Ａ 和 Ａｓ２ Ｏ３ 均可下调 Ａ Ｐ Ｌ 细胞 Ｔ Ｆ的表达并降低其 Ｐ Ｃ Ａ,改善 Ａ Ｐ Ｌ患者的弥散性血管内凝血（ Ｄ Ｉ Ｃ） 出血症状; Ａｓ２ Ｏ３ 和 Ｄ Ｎ Ｒ 对 Ａ Ｐ Ｌ凝血障碍不同效应的作用机制至少部分与药物对 Ａ Ｐ Ｌ细胞 Ｔ Ｆ 表达和 Ｐ Ｃ Ａ 的不同调节作用有关。     

重组人可溶性凋亡配体相关蛋白联合顺铂抑制肺癌裸鼠移植瘤的生长

目的:探讨重组人可溶性凋亡配体相关蛋白(rhTRAIL)和顺铂联用对抑制人肺腺癌细胞系A549裸鼠移植瘤的生长有无协同增效作用。方法:将24只荷人A549肺腺癌BALB/CA-nu裸鼠随机分成4组,(1)阴性对照组;(2)rhTRAIL组(1μg/mL,隔日1次×8次);(3)顺铂组(1.5mg/kg,每周2次×4次);(4)联合用药组(rhTRAIL1μg/mL,隔日1次×8次 顺铂1.5mg/kg,每周2次×4次)。分别测量瘤重、瘤体积,计算肿瘤生长指数和抑瘤率,并观察各组移植瘤组织的毒副作用和病理形态结构。结果:阴性对照组肿瘤生长指数为7.63±2.01,而rhTRAIL组和顺铂组分别为4.15±1.04和4.37±0.93,联合用药组则减低至1.69±0.37。rhTRAIL组、顺铂组的抑瘤率分别为36.8%和30.3%,联合用药组则增高达69.5%。rhTRAIL组、顺铂组和阴性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05);联合用药组和其他3组比较差异均有显著性(P<0.01)。各组裸鼠的毒副作用轻微,治疗前后体重无明显变化。结论:rhTRAIL、顺铂均可抑制A549裸鼠移植瘤的生长,rhTRAIL和顺铂联用具有协同增效作用。rhTRAIL有望成为一种重要的生物制剂应用于肺癌的多学科综合治疗。     

三氧化二砷和阿糖胞苷交替治疗急性早幼粒细胞性白血病的护理

目的 :总结三氧化二砷和阿糖胞苷交替治疗急性早幼粒细胞性白血病 (M3 )的护理经验。方法 :对 2 1例M3 患者进行三氧化二砷和阿糖胞苷交替治疗并采取有效的护理措施。结果 :2 1例M3 患者治疗总有效率95 2 4 % ,3年生存率 71 4 3% ,5年生存率 5 7 14 % ,生存质量明显提高。结论 :熟悉三氧化二砷和阿糖胞苷的药理作用、药物动力学特点及M3 病理生理特点 ,积极采取有针对性的护理措施有利于提高患者生存率和生存质量。     

三氧化二砷对低氧下人胃癌细胞SGC-7901生长活性及凋亡的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）在低氧条件下对体外培养的人胃癌细胞SGC-7901生长的抑制及凋亡影响。方法用氯化钴（CoC l2）制作低氧模型,设常氧组、低氧组、低氧加药物组,分别取0.5、1.0、2.0、5.0、10.0μmol/L五个不同浓度的As2O3作用于胃癌细胞,用细胞活力测定（MTT）法检测药物作用后的细胞活力,HOECHST33258染色试剂盒测细胞凋亡。结果①低氧加药物组As2O3对SGC-7901细胞生长有抑制作用,与常氧对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,并呈剂量-时间-效应关系。②低氧加药物组中,随着As2O3浓度的升高,胃癌细胞凋亡率也逐渐升高（P〈0.05）。结论低氧下As2O3对人胃癌细胞SGC-7901生长有抑制和诱导凋亡作用,这种作用可能是As2O3发挥抗肿瘤的生物学基础。