乳腺癌中吲哚胺2,3-双加氧酶和调节性T细胞的表达

[目的]通过研究在乳腺癌和引流淋巴结中吲哚胺2,3-双加氧酶(indoleamine-2,3-dioxygenase,IDO)和调节性T细胞(Treg cells)的表达,探讨两者之间的关系.[方法]采用半定量RT-PCR法和免疫组织化学检测IDO mRNA和蛋白及Foxp3蛋白在乳腺癌、淋巴结和乳腺良性病变中表达情况.[结果]乳腺癌引流淋巴结中IDO的mRNA水平高于乳腺癌组织(P＜0.05),乳腺癌组织中IDO的mRNA水平高于乳腺良性病变组织(P＜0.05).免疫组化结果显示示乳腺癌引流淋巴结内IDO表达水平高于原发癌(P＜0.05),乳腺癌组织中IDO表达水平高于乳腺良性病变组织(P＜0.05).乳腺癌中IDO的表达与病理类型和临床分期相关(P＜0.05).乳腺癌中Treg细胞Foxp3+比例高于乳腺良性病变,乳腺癌引流淋巴结中Treg细胞Foxp3+比例高于乳腺原发癌(P＜0.05).乳腺癌组织中IDO与Treg细胞间呈正性相关(r2=0.409,P＜0.05),与引流淋巴结中Treg细胞正性相关(r2=0.528,P＜ 0.05).[结论]IDO和Treg细胞有可能在乳腺癌免疫逃逸机制中发挥重要作用.     

人非小细胞肺癌组织中环氧化酶-2 mRNA的表达及临床意义

目的 检测环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)mRNA在人非小细胞肺癌、癌旁及正常肺组织中的表达情况,探讨COX-2 mRNA的表达在非小细胞肺癌发生、发展中的意义.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测20例非小细胞肺癌、癌旁及正常肺组织中COX-2mRNA表达水平.结果 COX-2 mRNA在非小细胞肺癌组织中的表达水平为(1.412±0.375),高于其在癌旁组织中的(0.595±0.296)和正常肺组织中的(0.477±0.105),差异具有显著性(P＜0.01);COX-2 mRNA表达与患者性别、年龄及肿瘤大小、生长部位均无显著性相关(P＞0.05),而与肿瘤组织学分型、分化程度、临床分期及是否淋巴结转移密切相关(P＜0.01或P＜0.05).结论 COX-2mRNA表达水平在人非小细胞肺癌组织中增高,并与非小细胞肺癌淋巴结转移、远处转移、临床分期等临床病理特征密切相关,COX-2 mRNA表达在非小细胞肺癌发生、发展、转移过程中发挥重要作用.     

肺间质纤维化中去整合素金属蛋白酶17的表达及作用机制

目的 观察去整合素金属蛋白酶17(ADAM17)在肺结节病、肺结核、非小细胞肺癌等肺间质纤维化疾病中差异表达情况,并探讨其作用机制.方法 实时RT-PCR分别检测肺结节病、肺结核、肺癌和正常人的肺组织中ADAM17基因表达,采用Western blot方法检测相互作用因子-Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的蛋白表达.结果 肺组织中ADAM17 mRNA、Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的蛋白在肺结节病组、肺结核组、非小细胞肺癌中的表达水平均明显高于正常对照组(P＜0.05);肺癌组中以上指标的表达水平与正常对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01),与肺结节病组、肺结核组比较差异亦有统计学意义(P＜0.05).结论 肺纤维化疾病的机制可能与ADAM17导致细胞外基质成员Ⅲ型胶原蛋白、整合素6的高表达有关.     

Cx43在非小细胞肺癌中的表达及意义

目的 探讨非小细胞肺癌组织及癌旁正常肺组织中Cx43蛋白及mRNA的表达及意义.方法 应用免疫组织化学、Western blot和原位分子杂交观察48例非小细胞肺癌（NSCLC）及22例癌旁正常肺组织中Cx43蛋白及mRNA的表达.结果 ①癌旁正常肺组织和NSCLC组织中Cx43蛋白阳性表达率分别为90.91%和47.92%;Cx43mRNA的阳性表达率分另别为95.45%和60.42%.NSCLC组织中Cx43蛋白及mRNA阳性表达率均低于正常肺组织（P均＜0.05）.②有淋巴结转移组Cx43蛋白及mRNA阳性表达率分别为16.00%和20.00%;无淋巴结转移组两者的阳性表达率分别为69.57%和78.26%.两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）.③Western blot显示NSCLC组织中Cx43的蛋白表达水平低于正常肺组织,有转移组中Cx43的蛋白表达水平低于无转移组,各组比较差异均有统计学意义,P均＜0.05.结论 Cx43蛋白和mRNA低表达与非小细胞肺癌发生和转移有关.     

吸烟、赖氨酰氧化酶与非小细胞肺癌发生发展的相关性

目的：研究赖氨酰氧化酶（LOX）在吸烟与非吸烟患者非小细胞肺癌组织、癌旁组织、正常肺组织中的表达,探讨 LOX 与非小细胞肺癌发生发展的关系,吸烟与 LOX 的关系,吸烟与非小细胞肺癌的关系。方法实时荧光逆转录聚合酶链式反应（RT － PCR）检测44例非小细胞肺癌组织,癌旁组织,正常肺组织中 LOX mRNA 含量;Western Blot 检测44非小细胞肺癌组织,癌旁组织,正常肺组织中 LOX 蛋白表达水平。并进行统计学分析。结果所检测组织标本中 LOX mRNA 及 LOX 蛋白的表达率均呈阶梯式表现,即非小细胞肺癌组织＞癌旁组织＞正常肺组织,表达差异有统计学意义（P＜0．05）。吸烟组 LOX mRNA和 LOX 蛋白的表达率低于非吸烟组,差异有统计学意义（P ＜0．05）。结论44例非小细胞肺癌组织中LOX 均呈过度表达状态,LOX 可能与非小细胞肺癌的发生发展有关。而吸烟的非小细胞肺癌组织中LOX 表达低于非吸烟非小细胞肺癌组织。吸烟可能通过抑制 LOX 的表达从而影响非小细胞肺癌的发生与发展。     

P53和 nM23基因在人非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的:探讨 P53和 nM23基因表达在人非小细胞肺癌中的意义.方法:收集本院 47 例非小细胞肺癌根治标本的石蜡包埋组织.微波修复抗原、SP免疫组织化学方法染色,光镜观察.结果:47 例中,低分化癌组 P53蛋白阳性率 88.88%,高分化癌组 P53 蛋白阳性率 44%,差异有高度显著性 (P＜0.01).有肺门纵隔淋巴结转移组的P53 蛋白阳性率 82.60%,无淋巴结转移组的 P53 蛋白阳性率 25.00%.差异有显著性(P＜0.05).P53 蛋白在肺腺癌与肺鳞癌中的表达差异无显著性(P＞0.05).47 例中,肺鳞癌有肺门纵隔淋巴结转移组 nM23 阳性率 21.42%;无淋巴结转移组 nM23 阳性率 62.50%,差异有高度显著性(P＜0.01).nM23 在肺鳞癌与肺腺癌,在肺腺癌中有无淋巴结转移组表达及在非小细胞肺癌高、中、低 3 种不同分化组表达差异均无显著性(P＞0.05).结论:P53 蛋白表达程度与非小细胞肺癌的分化程度及淋巴结转移有关,而 nM23 能抑制肺鳞癌的转移.     

非小细胞肺癌组织中MMP-2和MMP-9的表达和意义

目的 探讨非小细胞肺癌组织中MMP-2和MMP-9的表达和意义.方法 选取非小细胞肺癌组织140例,肺良性疾病组织40例作对照.用聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫组化方法检测其MMP-2和MMP-9的表达.结果 肺癌组织中MMP-2阳性率为67.9％,MMP-9表达阳性率为75.0％,显著高于对照组肺组织16.7％和20.0％(P ＜0.05);MMP-2及MMP-9蛋白与年龄,性别,不同病理类型的阳性率表达差异无显著性(P＞0.05);与是否发生淋巴结转移及肺癌TNM分期差异具有显著性(P＜0.05).结论 MMP-2和MMP-9在非小细胞肺癌中表达阳性率较高,在癌症细胞侵润和转移阶段有促进作用,对恶性肺癌的诊断具有重要意义.     

FGF-2和TRX在非小细胞肺癌中的表达及临床病理学意义

目的 探讨成纤维细胞生长因子-2(FGF-2)和硫氧还蛋白(TRX)在非小细胞肺癌(NSCL)组织中的表达及其相关性.方法 应用免疫组织化学SP法分析76例非小细胞肺癌组织、15例非肺癌肺组织中FGF-2和TRX蛋白的表达水平.采用Westem印迹、RT-PCR方法 检测外源性FGF-2对人肺腺癌细胞株A549中TRX蛋白及mRNA表达水平的影响.结果 非小细胞肺癌组织中FGF-2和TRX阳性率分别为65.8%(50/76)和72.3%(55/76),显著高于非肺癌肺组织(P＜0.01),FGF-2和TRX阳性表达与淋巴结转移、临床分期密切相关(P＜0.01),与年龄、性别及病理分型无关(P＞0.05).两者表达在NSCLC中呈正相关(P＜0.01).FGF-2可以上调A549细胞中TRX蛋白和mRNA的表达.结论 FGF-2和TRX在非小细胞肺癌发生与发展中具有重要作用,FGF-2可能通过TRX促进肺癌的发生与发展.     

非小细胞肺癌中基质金属蛋白酶-10的表达

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)中基质金属蛋白酶-10(matrix metalloproteinase-10,MMP-10)的表达及其与临床参数间的关系.方法:使用RT-PCR法及免疫组化法,检测32对NSCLC癌组织及癌旁正常组织中MMP-10的表达水平,并分析其与性别、年龄、分期、分级、肿瘤大小、淋巴结转移及病理类型之间的相关性.结果:MMP-10 的表达在mRNA水平与蛋白质水平表达有差异:MMP-10 mRNA在NSCLC癌组织中的表达要显著低于癌旁正常肺组织(P＜0.05),MMP-10蛋白在肺癌癌组织中的表达要显著高于癌旁正常肺组织(P＜0.01);在NSCLC癌组织中MMP-10 mRNA 的表达与MMP-10蛋白的表达呈正相关(r=0.4672, P＜0.05),而在癌旁正常肺组织中,两者表达相关性无显著统计学差异(r=-0.003022,P＞0.05).结论:MMP-10 mRNA在肺癌癌组织中表达要低于正常组织,MMP-10蛋白在肺癌癌组织中表达要高于正常组织.     

非小细胞肺癌组织中αVβ3的表达情况及敲低αVβ3对肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响

目的:研究非小细胞肺癌组织中αVβ3的表达情况及敲低αVβ3对肺癌细胞株A549恶性生物学行为的影响.方法:收集100例非小细胞肺癌患者的肺癌组织和癌旁正常组织,检测αVβ3的表达情况;培养肺癌细胞株A549,采用siRNA转染的方式敲低αVβ3的表达,而后检测促增殖和抗凋亡基因、侵入和血管新生基因的表达情况.结果:(1)肺癌组织中αVβ3的mRNA和蛋白含量均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);(2)促增殖和抗凋亡基因:处理组细胞Bcl 2、Notch1、Cyclin E的mRNA和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)侵入和血管新生基因:处理组细胞VEGF、ICAM-1、VCAM-1的mRNA和蛋白含量均低于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:非小细胞肺癌组织中αVβ3表达量升高;siRNA敲低αVβ3表达后,可以抑制肺癌细胞株A549中促增殖和抗凋亡基因、侵入和血管新生基因的表达.     

实时荧光定量 PCR检测野生型p53介导蛋白磷酸酶mRNA 在非小细胞肺癌中的表达

 【目的】 荧光染料Ⅰ(SYBR GreenⅠ)是一种较为常用的非探针类定量PCR的方法,其结果具有一定特异性&#65377;本研究的目的是建立检测野生型p53介导蛋白磷酸酶(Wip1)mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR的方法,了解肺癌组织及其远癌正常肺组织中Wip1的表达水平,研究肺癌组织中Wip1的表达水平与各种临床病理特征之间的关系&#65377; 【方法】 利用相对定量的方法检测44例肺癌及相应远癌正常肺组织中Wip1 mRNA相对于β-actin mRNA的表达量,进行相对定量分析&#65377; 【结果】 44例非小细胞肺癌(NSCLC)及相应远癌正常肺组织均有Wip1 mRNA的表达,其中17例非小细胞肺癌中Wip1 mRNA高表达,占38.6%,两者表达差异有统计学意义 (Ratio = 2.1644 ± 1.394,P < 0.05);分化程度低的肺癌组织中Wip1 mRNA表达量显著高于分化程度高者(F = 5.08,P = 0.013)&#65377; 【结论】 SYBR GreenⅠ实时定量PCR方法可以成功地检测Wip1基因的表达量&#65377;初步检测结果显示Wip1可能是一种肺癌发生发展过程中的致癌因素&#65377;     

非小细胞肺癌中端粒酶催化基团mRNA表达的临床意义

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)与正常肺组织穿刺标本中端粒酶催化基团(hTRT)mRNA表达与肿瘤分期与分级关系,探讨其在非小细胞肺癌早期诊断中的临床意义.方法 采用原位杂交技术检测非小细胞肺癌与正常肺组织中端粒酶催化基团mRNA表达.结果 30例非小细胞肺癌中25例端粒酶催化基团mRNA表达阳性,阳性率83.3%;对照组20例中无端粒酶催化基团mRNA阳性表达,阳性率0%.结论 端粒酶催化基团mRNA在非小细胞肺癌中有异常阳性表达,表达与肿瘤分期与分级有关.与肿瘤病理分型无关.     

表皮生长因子及其受体mRNA在肺癌组织中的表达

目的:探讨肺癌组织中表皮生长因子(EGF)及其受体(EGFR)mRNA的表达水平和临床意义.方法:采用半定量RT-PCR技术检测30例肺良性疾病、55例原发性肺癌及癌旁肺组织中EGF、EFGR mRNA的表达水平.结果:非小细胞肺癌(NSCLC)组织EGF mRNA表达阳性率为72.92%,EGFR阳性率为77.08%;肺良性病变肺组织EGF阳性率为6.67%,EGFR阳性率为13.33%;7例小细胞肺癌(SCLC)均无EGF、EGFR mRNA阳性表达.在NSCLC中,距癌组织3 cm以内癌旁肺组织EGF阳性率为77.08%,EGFR阳性率为79.17%;6 cm以远正常肺组织为10.42%.NSCLC组织、癌旁肺组织mRNA含量明显高于良性肺疾病、远癌正常肺组织(P＜0.01).结论:肺癌组织EGF、EGFR mRNA表达水平显著高于良性疾病肺组织,检测EGF、EGFR mRNA有助于肺部良恶性疾病的鉴别诊断.     

p15 mRNA在肺癌组织中的表达及其意义

目的 研究抑癌基因p15 mRNA在肺癌组织中的表达，揭过p15基因的失活与肺癌的发生和其组织类型的相关性。方法 对病理确诊的93（非小细胞肺癌65，小细胞肺癌28）例肺癌病理组织切片，采用p15 cDNA探针以原位杂交组织化学方法检测p15 mRNA在肺癌组织中的表达水平。结果 p15 mRNA阳性表达于肺癌组织细胞质或细胞核中，在细胞质中可到较多的棕黄色颗粒，而细胞核内棕黄色颗粒相对少见。p15 mRNA的阳性表达率：非小细胞肺癌为46％（30／65），其中鳞癌46％（23／50），腺癌47％（7／15）。小细胞肺癌20％（5／25）。非小细胞肺癌p15 mRNA阳性表达率高于小细胞肺癌；高分化的鳞、腺癌阳性表达率高于同组中的低分化的鳞、腺癌（P＜0．05）。结论 p15基因的失活与肺癌的发生密切相关，而且其失活程度与肺癌组织类型的恶性程度呈负相关。     

非小细胞肺癌中FHIT基因mRNA表达的研究

目的:检测FHIT基因mRNA在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法对53例NSCLC患者的肺癌进行FHITmRNA表达的检测.结果:53例肺癌标本中FHIT基因mRNA的失表达或异常表达率为64·2%(34/53);非肺癌患者肺组织FHIT基因失表达或异常表达率为0.FHIT基因mRNA的失表达或异常表达率与患者性别、年龄、分期、原发肿瘤大小及有无淋巴结转移均无明显关系(P>0·05),在鳞癌中的失表达或异常表达率为91·3%,在腺癌中的是43·3%,差异有显著性(P<0·05).结论:非小细胞肺癌中存在FHIT基因失表达和转录表达异常,在肺鳞癌中发生率高,FHIT基因的缺失可能是肺癌发生的早期分子事件.     

人乳头瘤病毒与NSCLC相关性探讨

目的 探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染与非小细胞肺癌(NSCLC)发病相关性;分析HPV感染与NSCLC临床病理特征和多种基因突变之间的关系.方法 收集NSCLC 264例原发灶和65例转移灶的石蜡包埋组织标本.选择264例原发灶邻近的上皮组织(癌旁对照组)和12例肺良性组织分别作为对照.采用免疫组化EnVision二步法检测HPV L1蛋白.选择109例NSCLC标本采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测HPV16/18 L1基因序列;90例肺腺癌组织同时行EGFR、ALK、KRAS、BRAF基因状态RT-PCR法检测.结果 NSCLC原发灶与转移灶HPV L1蛋白检测阳性率相近.NSCLC原发灶HPV L1蛋白阳性率显著高于癌旁对照组和肺良性对照组.不同组织类型原发灶中HPV L1蛋白检测阳性率存在明显差别,肺腺癌HPV L1蛋白检测阳性率显著高于肺鳞癌.109例NSCLC标本HPV16/18 L1基因序列11例阳性.HPV L1蛋白阳性肺腺癌患者KRAS基因突变率显著高于阴性,而EGFR、ALK、BRAF基因状态与HPV L1蛋白阳性无明显相关.结论 HPV感染与NSCLC发生可能有密切关系,尤其以肺腺癌关系更为密切;KRAS突变可能是HPV相关肺腺癌发病的驱动基因类型,为开展肺癌精准治疗指明方向.     

Paxillin基因在肺癌组织中的表达研究

目的:研究桩蛋白(Paxillin)基因在人肺癌组织中表达,探讨它与肺癌患者病理特征、临床分期、淋巴结转移、预后的关系。方法:应用免疫组织化学S-P方法检测120例肺癌、80例癌旁无癌浸润的肺组织、53例正常肺组织的桩蛋白的基因表达。结果:肺癌、癌旁无癌浸润肺组织、正常肺组织桩蛋白的阳性表达率分别为39.1％(47/120),81.3％(65/80),83.3％(44/53),三者的阳性表达差异有高度显著性(P<0.05)。桩蛋白表达低下与肺癌P-TNM分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05),小细胞肺癌(SCLC)中桩蛋白的阳性表达率6.251％(1/16),显著低于非小细胞肺癌(NSCLC)桩蛋白的阳性表达率44.2％(46/104)(x~2=8.40,P<0.05)。结论:肺癌组织中Paxillin基因的表达低下与肺癌侵袭转移有关,可作为评价肺癌浸润转移的生物学标志之一。     

非小细胞肺癌中E-cadherin基因的表达及意义

目的 探讨E-cadherin基因在人非小细胞肺癌组织(NSCLC)中的表达及其意义.方法 采用实时荧光定量PCR(Q-PCR)方法检测41例NSCLC组织、9例癌旁组织、9例良性病变肺组织中E-cadherin mRNA表达的相对水平,分析其表达与临床、组织病理学特征的关系.结果 E-cadherin mRNA在NSCLC组织表达水平为(9.97±4.25),低于癌旁组织的(11.77±1.91)及良性疾病组织的(23.11±3.52),差异有统计学意义(P＜0.01).在NSCLC组织中E-cadherin mRNA的表达与淋巴结转移有关(P＜0.01),与患者年龄、性别、吸烟史、病理类型、分化程度及临床分期无关(P＞0.05).结论 E-cadherin mRNA表达下调与非小细胞肺癌的浸润和转移可能呈负相关,是评价NSCLC进展的一个潜在指标.     

非小细胞肺癌患者外周血CK19和LUNX mRNA的检测及意义

目的:检测非小细胞肺癌(NSCLC)患者CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达情况,探讨其作为微转移检测分子标志物的可行性。方法:选择初治的NSCLC患者62例,以肺部良性疾病10例和健康对照10例作为对照组,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR),检测患者外周血的CK19 mRNA和LUNX mRNA的表达。结果:62例NSCLC患者中外周血CK19 mRNA表达阳性率33.9%(21/62),明显高于非肿瘤组的5%(1/20)(P=0.012);NSCLC组外周血LUNX mRNA表达阳性率29.0%(18/62),明显高于非肿瘤组的0%(0/20)(P=0.007);外周血CK19mRNA和LUNX mRNA表达阳性率与病理分期、病理类型、肿瘤分化程度未见明显相关;外周血CK19 mRNA和LUNX mRNA表达未见明显相关(P=0.376)。结论:CK19 mRNA和LUNX mRNA可作为检测非小细胞肺癌患者微转移特异、敏感的分子标志物,可能有助于早期诊断肺癌转移,从而指导临床分期和治疗。     

非小细胞肺癌中血管内皮生长因子C表达与淋巴结转移关系的研究

目的 探讨血管内皮生长因子C(VEGF-C)与非小细胞肺癌(NSCLC)淋巴管生成和淋巴结转移的关系.方法 52例NSCLC患者分为淋巴结转移阳性组(25例)和淋巴结转移阴性组(27例),采用半定量反转录PCR及免疫组织化学方法 检测2组患者手术切除癌组织及196枚淋巴结组织(2组各98枚,淋巴结转移阳性组98枚中病理阳性淋巴结72枚,阴性26枚)中VEGF-C mRNA及蛋白的表达.结果 淋巴结转移阳性组患者癌组织VEGF-C mRNA表达水平(0.273±0.179)明显高于淋巴结转移阴性组(0.089±0.087,P<0.01);阳性淋巴结组织VEGF.C mRNA表达水平(0.207±0.174)明显高于淋巴结转移阴性组的淋巴结组织(0.114±0.107,P<0.01).在淋巴结转移阳性组中,阳性与阴性淋巴结组织VEGF-C mRNA表达水平分别为0.207±0.174、0.196±0.186,差异无统计学意义(P>0.05).淋巴结转移阳性组15例患者中14例(93.3%)肺癌组织VEGF-C蛋白表达阳性,46枚阳性淋巴结组织中37枚(80.4%)VEGF-c蛋白表达阳性;而淋巴结转移阴性组15例患者中仅1例(6.7%)肺癌组织VEGF-C蛋白表达阳性,52枚淋巴结组织VEGF-C蛋白表达均为阴性,组间差异均有统计学意义(均P<0.01).结论 VEGF-C mRNA与蛋白的表达水平与NSCLC淋巴结转移关系密切,在淋巴结转移的早期诊断中有潜在的应用价值.