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目的 从粒细胞集落刺激因子(G-CSF)诱导的供者外周血中分离出CD1c+的髓细胞性DC(MDC)、CD304+类浆细胞样DC(PDC)两类DC亚群,并对其生物学特性进行分析和研究.方法 免疫磁珠法分离出MDC、PDC,分别用TNF-α、CpG2006OND诱导成熟,检测各DC亚群的表型、对同种异基因淋巴细胞的刺激反应.结果 分选的DC纯度均>95%,MDC表达HLA-DR、CD11c、CD33、CD4,PDC表达HLA-DR、CD4、CD45RA,诱导成熟的两类DC的CD40、CD80表达均明显增高;混合淋巴细胞反应(MLR)显示:MDC具有很强的刺激淋巴细胞增殖能力,PDC刺激能力很弱;各组上清液中IFN-r均增加,MDC、mMDC组增高最为明显;PDC、mPDC刺激组上清液中IL-10明显增高;MDC、mMDC刺激后,胞浆内表达IFN-r的CD4+T细胞均明显增高;PDC、mPDC有上调CIM+CD25high调节性T细胞(Treg)作用;Foxp3 mRNA的表达在各组间无明显的差异.结论 采集的供者外周血中两类DC亚群虽然HLA-DR高表达,但仍处于非成熟状态,在合适的条件下分化成熟;无论MDC成熟与否均表现出很强的刺激T细胞增殖能力,使T细胞分泌IFN-r增加,其分泌的增加可能是促进向TH1极化的结果.PDC可能并不像MDC一样有效地捕获、处理和负载抗原到MHC分子上,因此提呈抗原效率低,表现出对T细胞的弱刺激增殖特性;PDC虽然也可以促进T细胞分泌IFN-r,但似乎并非是通过TH1细胞;PDC并不能促进TH2类因子IL-4的分泌,对TH2的极化作用可能表现在IL-10的分泌上;PDC有诱导CD4+CD25highTreg的作用. 相似文献
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目的:探讨G-CSF动员的骨髓来源干细胞对急性心肌梗塞动物模型的治疗作用与对缺血濒死心肌的保护作用。方法:用异丙肾上腺素(ISO)复制急性心肌梗塞大鼠动物模型,于3h后用G-CSF动员骨髓干细胞释放和迁移至心肌梗塞部位,并分别于24h、48h和2周后杀死大鼠,取出心脏,检测心肌的病理变化情况。结果:用ISO后24h对照组可见散在心肌梗塞灶,坏死区周围有多量以中性粒细胞为主的炎症细胞浸润,而治疗组大鼠心肌坏死程度较对照组轻,浸润的细胞以单个核细胞为主;48h后对照组心肌梗塞灶进一步扩大,呈散在片状分布,而治疗组心肌梗塞灶扩大不明显,呈散在灶性分布,并可见成堆或散在分布的淋巴细胞样细胞;2周后,治疗组未见明显心肌梗塞后疤痕组织,可见新生的心肌细胞生长。结论:G-CSF对缺血濒死心肌有保护作用,用G-CSF动员骨髓来源的干细胞进行"自我移植",可用于急性心肌梗塞的治疗。 相似文献
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目的: 探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠缺血性脑梗死的治疗作用。方法:采用线栓法制作大鼠缺血性脑梗死模型,1 h后腹腔注射G-CSF 60 μg/kg 。TTC、HE染色及免疫组化检测脑梗死灶体积、病理改变及CD34阳性细胞浸润情况。结果:G-CSF治疗组大鼠脑梗死灶体积明显小于对照组(P<0.01);其病理损伤程度较对照组轻;脑梗死部位出现CD34阳性单个核细胞浸润,并有CD34阳性呈锥状并且带有突起的神经样细胞生长,对照组未发现CD34阳性细胞。结论: G-CSF可减轻大鼠缺血性脑梗死程度,减少脑梗死体积,其机理可能是G-CSF对缺血神经元具有保护作用,并动员自体骨髓干细胞,促进脑组织的再生与修复。 相似文献
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目的:研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF) 动员的外周血干细胞(PBSC)悬液中单个核细胞(MNC)冷冻保存后经不同诱导途径培养的树突状细胞(DC)的特性,探讨PBSC悬液冷冻保存后诱导培养DC的方法。 方法: 用两种保护液-80 ℃冷冻保存PBSC悬液,分析复苏MNC中CD34+细胞、CD14+细胞、CD14+PI+细胞,并分两种方法诱导培养复苏MNC: 贴壁细胞经粒细胞单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素4(IL-4)培养2周,培养结束前加入肿瘤坏死因子α(TNF-α)、布雷菲德菌素(BFA);非贴壁细胞经酪氨酸激酶3配体(FL)、干细胞因子(SCF)、GM-CSF、IL-4培养1周, 再按前1种方法继续培养2周。培养结束后, 流式细胞仪分析DC特性。 结果: 两组复苏MNC与新鲜MNC比较:CD34+细胞含量均无明显差异(P>0.05);而CD14+细胞少,CD14+PI+细胞百分率高(P<0.01);贴壁细胞少,贴壁细胞诱导培养DC效果不佳;非贴壁细胞扩增诱导均能获得大量成熟的激活的能够分泌IL-12(p40)的髓系DC。 结论: PBSC悬液冷冻保存后能用于培养髓系DC,但培养方法应以扩增诱导为主。 相似文献
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背景:使用粒细胞集落刺激因子动员外周血干细胞后导致急性肺损伤仅有零星报道,机制尚不清楚。
目的:探讨应用重组人粒细胞集落刺激因子动员外周血干细胞富集导致肺损伤的临床表现、机制。
方法:报告1例粒细胞集落刺激因子动员外周血干细胞时导致咯血和影像学肺部结节状、片状阴影,并复习相关文献。
结果与结论:粒细胞集落刺激因子可能会导致肺损伤,机制可能和中性粒细胞在肺部聚集、黏附、释放炎症递质有关。 相似文献
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粒细胞集落刺激因子促进大鼠梗死心肌修复 总被引:1,自引:0,他引:1
目的观察粒细胞集落刺激因子G(-CSF)对急性心肌梗死大鼠梗死区的修复和心功能的改善作用。方法29只大鼠随机分为细胞因子组(GAMI,n=9)、心肌梗死对照组(AMI,n=10)和假手术组(SO,n=10)。GAMI组和AMI组结扎左冠状动脉造成心肌梗死,SO组行相似的手术操作但不结扎冠状动脉。GAMI组给予rhG-CSF(50μg.kg-1.d-1),腹腔内注射,共7d。AMI组及SO组则每日腹腔内注射同等体积的生理盐水,共7d。心肌梗死后4周,通过心脏插管测量血流动力学参数,并在显微镜下观察梗死范围和梗死区、梗死周边区小血管数量的变化。结果AMI组大鼠有3只分别于术后第3、7、8天死亡,GAMI组与SO组大鼠至观察结束无一只死亡。与SO组相比较,AMI组LVSP(P<0.01)、dpd/tmax(P<0.01)、dpd/tmin(P<0.05)降低,LVEDP明显升高(P<0.01);GAMI组dpd/tmax(P<0.05)、LVEDP升高(P<0.01),LVSP、dpd/tmin无明显变化(P>0.05)。与AMI组相比较,GAMI组LVSP(P<0.01)、dpd/tmax(P<0.01)、dpd/tmin(P<0.05)升高,LVEDP降低(P<0.05)。与AMI组相比较,GAMI组梗死范围明显缩小(P<0.01),梗死区及梗死周边区小血管密度增加(P<0.05)。结论应用G-CSF可缩小心肌梗死大鼠梗死范围,提高梗死区及梗死周边区小血管密度并改善心功能。 相似文献
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目的: 探讨脐带血树突状细胞(DC)的免疫功能状况。 方法: 以CD34-Lin- HLA-DR+细胞群设门4色荧光分析方法检测20例脐带血和20例外周血DC前体细胞亚群pDC1/pDC2(CD11c+CD123-/CD11c-CD123+)比值;酶联免疫吸附法检测其血浆相关细胞因子IL-12p40、IL-10、IFN-γ、IL-4水平。 结果: 脐带血、成人外周血pDC1/pDC2比值无显著差异(P>0.05);脐带血血浆IL-12p40水平显著高于成人外周血(P<0.01),两者IL-10、IFN-γ、IL-4水平无显著差异(P>0.05)。 结论: 脐带血DC功能发育比较完善。 相似文献
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G-CSF对外周血树突状细胞亚群比例的影响 总被引:1,自引:2,他引:1
目的 :了解G CSF对小鼠外周血树突状细胞 (DC)亚群比例的影响。方法 :以不同剂量 (0、5 .0、10 .0或 15 .0 μg)的G CSF ,分别皮下注射于BALB/c小鼠 ,连续 6d ,每天 1次。第 6天分离外周血DC ,用流式细胞仪检测DC1(CD11c+ CD8a-)和DC2 (CD11c+ CD8a+ )的比例并计算其绝对值。结果 :经不同剂量的G CSF刺激后 ,外周血DC1的绝对值无显著变化 ,而DC2的绝对值增加 5倍 (9.6× 10 6/Lvs 5 5 .1× 10 6/L ,P <0 .0 1) ,DC1/DC2比值降低 (4.2vs 0 .7,P <0 .0 1)。结论 :G CSF在体内可提高外周血DC2的绝对数 ,对DC1的数无明显影响 ,从而使DC1/DC2的比例倒置 相似文献
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树突状细胞(DC)是功能最强的抗原递呈细胞(APC),在移植免疫中,DC启动免疫排斥还是维持免疫耐受取决它们的起源以及成熟状态,成熟DC启动免疫排斥及移植物抗宿主病(GVHD)反应,未成熟(iDC)及淋巴样DC诱导免疫耐受。造血干细胞移植(HSCT)中,可以通过调控不同来源、不同分化状态的DC来预防和治疗移植物抗宿主病(GVHD),促进造血干细胞的植入。 相似文献
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异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation,allo-HSCT)为恶性疾病提供了一种全新的治疗策略并广泛应用于恶性疾病的治疗.通过移植治疗,其移植物抗白血病(graft-versus-leukemia,GVL)效应对恶性疾病的治疗及防止移植后疾病复发发挥着关键作用,但是随之而发生的移植物抗宿主病(graft-versus-host disease,GVHD)又是影响移植后生存的重要因素之一.本文通过对GVHD和GVL发生机制的深入认识,从而探索并制定GVHD和GVL的分离策略,使GVHD作用最小化和GVL效应最大化,从而为临床移植工作者提高移植的临床应用价值而提供更多更好的思路和方法. 相似文献
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Shan Xu Kiyoshi Ariizumi Dale Edelbaum Paul R. Bergstresser Akira Takashima 《European journal of immunology》1995,25(4):1018-1024
We have recently established dendritic cell (DC) lines (XS series) from the epidermis of newborn mice by repeated feeding with granulocyte/macrophage-colony-stimulating factor (GM-CSF) and culture supernatants from skin-derived stromal cell lines (NS series). XS lines resemble resident Langerhans cell (LC), which are immature DC that reside in epidermis, by their surface phenotype and antigen-presenting profile. XS lines further resemble resident LC in that they express mRNA for interleukin-1β and macrophage inflammatory protein (MIP)-1α, and by the absence of mRNA for IL-6. Their growth is promoted by GM-CSF, colony-stimulating factor-1 (CSF-1), or NS culture supernatant, and inhibited by interferon-γ or tumor necrosis factor-α. The expression by the XS lines of la molecules is up-regulated by GM-CSF, and down-regulated by NS supernatant. These results suggest the existence of negative regulatory mechanisms in which the growth and/or maturation of DC is suppressed by selected cytokines. 相似文献
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In vivo engineering of mobilized stem cell grafts with the immunomodulatory drug FTY720 for allogeneic transplantation
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Tadepally Lakshmikanth Frank Heuts S. S. V. Jagadeeswara Rao Muvva Robert P. A. Wallin Anna‐Karin Persson Cyril Fauriat Steven E. Applequist Hans‐Gustaf Ljunggren Petter Höglund Klas Kärre Julius G. Juarez 《European journal of immunology》2016,46(7):1758-1769
The immunological attributes of stem cell grafts play an important role in the outcome of allogeneic stem cell transplants. Currently, ex vivo manipulation techniques such as bulk T‐cell depletion or positive selection of CD34+ cells are utilized to improve the immunological attributes of grafts and minimize the potential for graft‐versus‐host disease (GvHD). Here, we demonstrate a novel graft engineering technique, which utilizes the immunomodulatory drug FTY720 for in vivo depletion of naïve T (TN) cells from donor G‐CSF‐mobilized grafts without ex vivo manipulation. We show that treatment of donor mice with FTY720 during mobilization depletes grafts of TN cells and prevents lethal GvHD following transplantation in a major mismatch setting. Importantly, both stem cells and NK cells are retained in the FTY720‐treated grafts. FTY720 treatment does not negatively affect the engraftment potential of stem cells as demonstrated in our congenic transplants or the functionality of NK cells. In addition, potentially useful memory T cells may be retained in the graft. These findings suggest that FTY720 may be used to optimize the immunological attributes of G‐CSF‐mobilized grafts by removing potentially deleterious TN cells which can contribute to GvHD, and by retaining useful cells which can promote immunity in the recipient. 相似文献
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乳腺癌患者外周血树突状细胞亚群及其HLA-DR表达的变化 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨乳腺癌患者外周血树突状细胞(DC)亚群和其HLA-DR表达变化及血浆中DC相关细胞因子水平的变化。方法:4色荧光流式细胞术分析57例乳腺癌术前、术后1周、术后6个月的患者及正常对照的外周血DC前体细胞pDC1/pDC2(CD11c+CD123-/CD11c-CD123+)比值及其HLA-DR的表达;酶联免疫吸附法检测血浆细胞因子白细胞介素-12p40(IL-12p40)、白细胞介素-10(IL-10)、γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)水平。结果:57例乳腺癌患者中, 2例Ⅲ期、4例Ⅳ期外周血pDC缺乏,其余患者Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期外周血pDC1/pDC2比值分别为1.62±0.59、1.41±0.63、0.91±0.32、0.81±0.29,均显著低于对照组(1.94±0.44,P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期患者术后1周pDC1/pDC2比值为1.71±0.47、1.52±0.54、1.04±0.36,与术前比较均无显著差异(P>0.05),但显著低于对照组(P<0.05); 术后6个月pDC1/pDC2比值分别为1.92±0.72、1.63±0.65、1.28±0.34,与术前比较,均有显著提高(P<0.05),但与对照组比较,仅Ⅰ期患者恢复正常(P>0.05),Ⅱ、Ⅲ期患者仍然显著降低(P<0.05)。乳腺癌患者pDC亚群HLA-DR表达以及血浆中IL-12p40、 IL-10、IFN-γ、IL-4水平及IL-12p40/IL-10、IFN-γ/IL-4比值与对照组比较均无显著差异(P>0.05)。结论:Ⅰ-Ⅳ期乳腺癌患者外周血pDC1/pDC2比值降低,部分Ⅲ、Ⅳ期患者外周血pDC缺乏。pDC的HLA-DR表达及DC分泌相关细胞因子的能力没有同步变异。术后患者pDC亚群Ⅱ、Ⅲ期明显改善,Ⅰ期恢复正常。 相似文献
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目的: 研究从G-CSF动员的外周血细胞(PBC)悬液培养的成纤维细胞样(F-L)细胞的特性。 方法: 取PBC中贴壁细胞分4组培养:①RPMI-1640组;②L-DMEM组;③粒细胞集落刺激因子(G-CSF)组;④白细胞介素-3(IL-3)组。流式细胞仪分析各组培养的F-L细胞特性。 结果: 培养2-3周后,4组均能收获到F-L细胞,细胞贴壁生长,但不融合,不能连续传代培养,③④组细胞数量明显多于①②组,4组F-L细胞表型相似:CD33+、CD11c+、CD64+、CD14+、CD45+、HLA-DR+、CD86+、CD34-、CD38-、CD3-、CD19-、CD56-、CD29-、CD44-、CD105-;与单核细胞(PB-M)表型差异仅CD38表达不同而与间质干细胞(MSC)或树突状细胞(DC)表型明显不同。 结论: 从PBC培养的F-L细胞为巨噬细胞,不是MSC或DC;G-CSF、IL-3能提高F-L细胞培养数量,不改变PB-M向巨噬细胞分化的分化方向。 相似文献