神经肽P物质促进增生性瘢痕中肥大细胞组胺释放的定量检测

目的:神经肽P物质可以促进人增生性瘢痕中肥大细胞组胺的释放,定量分析在此过程中神经肽P物质浓度因素的作用,探讨增生性瘢痕中神经肽P物质与肥大细胞的相互作用及作用条件。方法:实验于2005-01/10在解放军第三军医大学西南医院中心实验室进行。将取自于西南医院整形美容外科烧伤患者的增生性瘢痕活体组织块切下后立即处理(患者或监护人同意),修剪成0.5mm×0.5mm×0.5mm～1mm×1mm×1mm大小,将组织块放入0.5mL含10-6,5×10-6,10-5,5×10-5,10-4mol/L神经肽P物质的DMEM液中,以0mol/L神经肽P物质为对照组。组织块作用30min后提取上清液,为样品组胺;提取上清液后的组织块分别加入去离子水0.5mL,加热煮沸(破坏细胞,释出组胺)20min,摇匀后离心(1500g,10min),吸出上清液,为剩余组胺。荧光法测定作用后上清液中肥大细胞的组胺释放率[组胺释放率=样品组胺/(样品组胺 剩余组胺)×100%]。结果:神经肽P物质10-6,5×10-6,10-5,5×10-5,10-4mol/L组组胺释放率显著高于对照组[(49.78±3.56)%,(54.56±1.90)%,(57.12±1.49)%,(60.49±1.41)%,(63.16±2.61)%,(43.96±3.18)%,P<0.01],且神经肽P物质浓度越高,组胺释放率越高(P<0.01或0.05)。结论:在增生性瘢痕中,神经肽P物质以剂量依赖方式刺激肥大细胞组胺的释放,当神经肽P物质达到10-6mol/L时即有肥大细胞组胺的显著释放,随神经肽P物质浓度提高,组胺释放率升高。     

异搏定对人皮肤成纤维细胞增殖的影响

目的：探讨钙离子通道阻滞剂异搏定对人皮肤正常成纤维细胞增殖的作用，为钙离子通道阻滞剂治疗瘢痕过度增生提供依据。方法：实验皮肤标本来源于2002—07／2003—07北京大学第三医院整形外科5例美容手术或植皮手术患者，取冗余全层皮肤组织，患者知情同意。体外培养3～8代的人皮肤正常成纤维细胞，实验分为异搏定组：包括1&;#215;10^-3, 1&;#215;10^-4, 1&;#215;10^-5, 1&;#215;10^-6, 1&;#215;10^-7, 1&;#215;10^-8,1&;#215;10^-9,1&;#215;10^-10mol／L组，分别在细胞培养孔中加入2mL相应浓度异搏定的培养液；氢化可的松组：在细胞培养孔中加入2mL浓度为1&;#215;10^-7mol／L氢化可的松的培养液；对照组：在细胞培养孔中加入2mL体积分数为0．005的新生牛血清的Dulbecco＇s改良的Eade＇s培养基。检测细胞活力采用锥虫蓝染色；细胞增殖状况测定应用^3氚标记的胸腺嘧啶掺入法；观察细胞增殖抑制率[抑制率（1％）=（阴性对照组每分钟脉冲数值-实验组每分钟脉冲数值）／阴性对照每分钟脉冲数值]，取各例样本的平均值。结果：①人皮肤正常成纤维细胞的增殖动力学结果：对照组人皮肤正常成纤维细胞在接种12h开始增殖，24h达到高峰，48h又逐渐降低。②异搏定对人皮肤正常成纤维细胞增殖抑制的浓度效应：各浓度的异搏定对人皮肤成纤维细胞的增殖均有抑制作用，其中1&;#215;10^-6mol／L异搏定与1&;#215;10^-7mol／L氢化可的松对成纤维细胞增殖的抑制率无显著性差异（t=0．135,P=0．896〉0．05）。③浓度为1&;#215;10^-6mol/异搏定对人皮肤正常成纤维细胞增殖抑制的时间效应：氢化可的松在24h时对人皮肤正常成纤维细胞的增殖抑制作用显著高于6，12,48h时[（60．67&;#177;18．94）％比（-19．69&;#177;21．26）％，（10．89&;#177;11．61）％，（37．03&;#177;12．17）％，q=10．867．6．732，3．197；P〈0．051；异搏定在24h时对人皮肤正常成纤维细胞的增殖抑制作用显著高于6，12，48h时[（51．42&;#177;15．30）％比（-16．83&;#177;16．90）％．（1．09&;#177;11．62）％，（17．41&;#177;13．41）％，q=10．566，7．791，5．265，〈0．051；在药物作用48时异搏定对人皮肤正常成纤维细胞的抑制作用低于氢化可的松（t=2．423,P=0．042〈0．05）。结论：不同浓度的异搏定对体外培养人正常皮肤成纤维细胞增殖有抑制作用，异搏定可能通过抑制成纤维细胞的增殖达到治疗瘢痕过度增生的作用。     

端粒酶催化亚单位在病理性瘢痕组织中的表达及意义

目的：观察反映端粒酶的活性的端粒酶催化亚单位在病理性瘢痕组织中的表达情况。方法：实验于2005—05／07在长海医院中心实验室进行。取增生性瘢痕标本和瘢痕疙瘩标本各18例，来源于2004—06／2005—05解放军第二军医大学长海医院整形外科手术患者；正常皮肤标本18例，取自瘢痕邻近的正常皮肤。采用SP免疫组化法，对3组皮肤标本中成纤维细胞端粒酶催化亚单位蛋白表达进行检测，观察其阳性颗粒的平均吸光度A值和阳性面积率。结果：①端粒酶催化亚单位阳性颗粒的平均吸光度：瘢痕疙瘩组高于正常皮肤和增生性瘢痕组（5．940&;#177;0．675，0．456&;#177;0．078，1．352&;#177;0．193，P〈0．01）．增生性瘢痕组高于正常皮肤（P〈0．05）。②端粒酶催化亚单位的阳性面积率：瘢痕疙瘩组高于正常皮肤和增生性瘢痕组[（0．203&;#177;0．025）％，（0．038&;#177;0．010）％，（0．067&;#177;0．011）％，P〈0．01]，增生性瘢痕组高于正常皮肤（P〈0．05）。结论：端粒酶在病理性瘢痕中表达增高，与病理性瘢痕发生、发展及其演变过程密切相关。设想减少端粒酶催化亚单位在病理性瘢痕成纤维细胞的过度表达从而抑制端粒酶活性或许是抑制瘢痕增生的新途径。     

睾酮浓度与人脐静脉组织因子途径抑制物的表达

目的：观察生理及超生理浓度睾酮对人脐静脉内皮细胞合成、分泌组织因子途径抑制物的影响。方法：实验于2005-01／06在汕头大学医学院药理实验室完成。将人原代脐静脉内皮细胞复苏后于37℃，体积分数为0．05的CO2培养箱中静置培养，所用细胞为两三代。将消化好的细胞移人96孔板，接种密度为1&;#215;10^8每孔100μL。24h后分为不同浓度睾酮组（3&;#215;10^-9, 3&;#215;10^4, 3&;#215;10^-9, 3&;#215;10^-5 mol/L）及单纯培养液对照组，继续孵育48h，吸取上清，酶联免疫吸附法测定各组组织因子途径抑制物蛋白含量。反转录-聚合酶链反应法观察各组组织因子途径抑制物基因表达水平。结果：①人血管内皮细胞组织因子途径抑制物含量：对照组，3&;#215;10^-9, 3&;#215;10^-8, 3&;#215;10^-6. 3&;#215;10^-5 mol/L睾酮组组织因子途径抑制物含量分别为（6．43&;#177;0．61），（9．8&;#177;1．18），（9．8&;#177;1．05），（6．43&;#177;1．19），（5．43&;#177;0．66）μg／L生理浓度睾酮可明显增加内皮细胞上清液中组织因子途径抑制物含量。而3&;#215;10^-5mol／L组的组织因子途径抑制物含量明显低于对照组（P〈0,05）。②不同浓度睾酮组组织因子途径抑制物mRNA水平：3&;#215;10^-9，3&;#215;10^-8mol／L组组织因子途径抑制物mRNA水平明显高于对照组（P〈0．05）。而3&;#215;10^-5mol／L组组织因子途径抑制物mRNA水平又显著降低（P〈0．05）。结论：生理浓度睾酮通过雄激素受体促进组织因子途径抑制物合成、分泌，增强抗凝系统活性，有利于预防男性冠心病及心肌梗死等血栓性疾病的发生。     

红色发光二极管照射对C2C12细胞增殖的光生物调节作用

目的：采用小鼠成肌细胞C2C12作为模型，观察光生物调节作用对他汀类药物引起的肌病的作用。 方法：实验于2004-09／2005-01在华南师范大学激光运动医学实验室完成。C2C12细胞用浓度分别为2.0&;#215;10^-5, 2.0&;#215;10^-6, 2.0&;#215;10^-7 ，2．0&;#215;10^-8 mol／L的辛伐他汀培养，然后用强度分别为0，0．229，0．506，0．848，1．401，1．670mW／cm^2的红色发光二极管[波长（640&;#177;15）nm]照射2d，15min／d。用甲基噻唑基四唑比色法评价细胞增殖。 结果：浓度为2.0&;#215;10^-6, 2.0&;#215;10^-7 and 2.0&;#215;10^-8的辛伐他汀对C2C12的增殖没有影响，无光生物调节作用；浓度为2．0&;#215;10^-5 mol／L的辛伐他汀抑制C2C12的增殖，发光二极管强度为0，0．229，0．506，0．848，1．401，1．670mW／cm^2时C2C12细胞增殖吸光度百分率分别降为（37．2&;#177;84）％，（58．4&;#177;94．9）％，（37．0&;#177;8．6）％，（63．0&;#177;8．8）％，（59．2&;#177;12．6）％，（28．9&;#177;90．3）％。强度为0．848mW／cm^2的红色发光二极管照射2d，15min／d可促进被抑制的C2C12增殖效应。 结论：红色发光二极管可以促进被辛伐他汀抑制的C2C12细胞的增殖作用，对服用他汀类药物引起的肌病可能有光生物调节作用。     

血小板源性生长因子及其受全体在增生性瘢痕中表达特征

目的 观察血小板源性生长因子（PDGF）两亚基（A，B）和α和β两种受体在增生性瘢痕形成机制中的作用。方法 用免疫组化方法和常规病理技术检测这四种蛋白在8例增生性瘢痕和8例正常皮肤中的表达变化规律。结果 PDGF－A在正常皮肤与增生性瘢痕中的阳性细胞率分别为（22．4&;#177;7．4）％和（25．5&;#177;6．5）％。从正常皮肤到增生性瘢痕，两亚基含量虽有升高趋势，但差异不明显（P＞0．05）。PDGFR－α在正常皮肤与增生性瘢痕中的阳性率分别（36．7&;#177;4．3）％和（44．2&;#177;5．8）％，而PDGFR－β则分别为（15．3&;#177;4．8）％和（22．9&;#177;5．2）％，两种蛋白在瘢痕中的表达阳性率都显著高于正常皮肤（P＜0．05）。结论 增生性瘢痕形成可能与PDGFR－α和PDGFR－β蛋白高表达有关，而PDGF在增生性瘢痕发生中的作用，还需进一步探讨。     

人增生性瘢痕瘙痒症状与局部5-羟色胺的含量

目的：测定不同程度瘙痒的瘢痕组织和正常皮肤中5-羟色胺水平。评价5-羟色胺在增生性瘢痕瘙痒症状中的作用。方法：实验于2002-09／2004-12在中山大学附属第一医院烧伤科和外科实验室完成。取瘢痕和正常皮肤标本89例（每例患者均有1处瘢痕）。男48例，女41例。其中增生性瘢痕68例，非增生性瘢痕21例。两组病例中各取8例正常皮肤组织作为对照。应用荧光法测定不同程度瘙痒的瘢痕组织和正常皮肤中5-羟色胺水平，并分析其与瘢痕瘙痒程度（分级：0级：无瘙痒感；1级：瘙痒很轻，轻抓可缓解；2级：瘙痒令人烦恼，需较强烈的搔抓方可缓解，可以耐受；3级：瘙痒影响工作或不能耐受，需长时间不断搔抓，无语言表达能力的儿童表现为吵闹不安）的关系。结果：①5-羟色胺含量：增生性瘢痕明显高于非增生性瘢痕和正常皮肤[（467．82&;#177;38．92）。（382．79&;#177;34．36）。（378．65&;#177;29．98）ng／g，P〈0．01]。②不同瘙痒级别的瘢痕组织中5-羟色胺含量：3级和2级显著高于10级和0级[（479．32&;#177;40．16），（470．33&;#177;39．12），（393．37&;#177;37．56），（381．25&;#177;32．09）ng／g，P〈0．01]。③瘢痕部位瘙痒程度与局部5-羟色胺含量的关系呈正相关（r=0．918，P〈0．01）。结论：瘢痕中、重度瘙痒组织中5-羟色胺含量显著高于轻度瘙痒和无瘙痒组织；增生性瘢痕组织中的5-羟色胺含量显著高于非增生性瘢痕和正常皮肤。提示5-羟色胺在瘢痕的中、重度瘙痒症状中起重要作用。     

葛根素体外影响小鼠胚胎长骨雌激素受体β表达的作用

目的：以体外培养小鼠胚胎长骨为靶器官，观察葛根素对骺板雌激素受体亚型雌激素受体β分布及含量的影响，并与内源雌激素比较，分析葛根素对骨可能的作用机制。方法：实验于2003-05／2004-05在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以小鼠胚胎长骨为靶器官，以雌二醇1&;#215;10^-6mol／L处理为阳性对照组，同时设空白对照组、葛根素干预组分为1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-4mol／L 3个浓度组。①小鼠怀孕16d时取出胚胎，剔除雌性胎鼠前肢肌肉和软组织，剥离出尺骨，做为实验靶器官置于BGJb培养基中，葛根素和雌二醇作用48h后，测量长骨总长和骨干长。每组培养长骨8根，重复3次。②长骨固定、脱钙后作石蜡切片，进行免疫组织化学染色，光镜下观察阳性细胞定位，图像分析系统下测定免疫反应阳性细胞数和阳性细胞面积。结果：雌性胎鼠长骨全部进入结果分析，无脱失。①长骨经葛根素和经雌二醇处理48h后，葛根素1&;#215;10^-4，1&;#215;10^-5mol／L组及阳性对照组骨总长及骨干长与空白对照组相比，差异有非常显著性意义[（3．97&;#177;0．12），（1．51&;#177;0．07）；（3．79&;#177;0．06），（1．40&;#177;0．03）；（4．05&;#177;0．1），（1．62&;#177;0．05）；（3．43&;#177;0．05，1．2&;#177;0．04）mm；P〈0．01]，葛根素10^-6mol／L组仅骨总长与空白对照组相比差异有显著性意义[（3．56&;#177;0．06）mm，P〈0．05]；葛根素1&;#215;10^-6mol／L的作用与阳性对照组差异无统计学意义（P〉0．05），1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-6moL／L组作用弱于阳性对照组（P〈0．01）。②空白对照组骺板静止区和肥大区雌激素受体β蛋白几乎不表达，仅增殖区有较弱表达。经葛根素和1&;#215;10^-6mol／L雌二醇作用后，增殖区表达明显增强，肥大区和静止区软骨细胞也都出现雌激素受体β蛋白的阳性表达。葛根素1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-5，1&;#215;10^-4mol／L组阳性细胞数和阳性细胞面积均小于阳性对照组[29．8&;#177;2．9，43．5&;#177;5．1，63．3&;#177;5．8．833&;#177;6．9，（819．78&;#177;164．53）．（1175．76&;#177;188．73），（1585．15&;#177;198．93），（2036．12&;#177;384．23）μm^2，P〈0．01～0．05]，作用明显弱于雌二醇，并表现出剂量依赖的趋势。结论：葛根素在体外可促进软骨内成骨。同雌激素一样，葛根素也能够上调骺板雌激素受体β的表达。提示葛根素对软骨内成骨的促进作用可能与其上调雌激素受体β在骺板的表达有关。     

人瘢痕组织中组胺含量与瘙痒症状的正相关性：组胺在增生与非增生性瘢痕组织中没有差异

目的：测定不同瘙痒程度的增生与非增生性瘢痕组织和正常皮肤中组胺水平的差异,评价组胺在人瘢痕瘙痒发生中的意义.方法：瘢痕和正常皮肤标本取自于中山大学附属第一医院烧伤科2002-09/2004-12收治的住院或门诊需手术切除瘢痕的89例患者.瘢痕瘙痒的程度可分为：0级：无瘙痒感;1级：瘙痒很轻,轻抓可缓解;2级：瘙痒令人烦恼,需较强烈的搔抓方可缓解,可以耐受;3级：瘙痒影响工作或不能耐受,需长时间不断搔抓,无语言表达能力的儿童表现为吵闹不安.用荧光法测定不同程度瘙痒的瘢痕组织和正常皮肤中组胺水平并分析其与瘢痕瘙痒的关系.结果：①增生性瘢痕和非增生性瘢痕组织中组胺的含量明显高于正常皮肤[（236.32&;#177;26.79）,（225.68&;#177;25.53）,（162.31&;#177;18.97）ng/g,P＜0.01],但在增生性瘢痕和非增生性瘢痕组织中却无明显差异（P＞0.05）.②2和3级瘙痒瘢痕组织中组胺含量高于0级[0级：（173.57&;#177;19.85）ng/g,2级：（235.32&;#177;22.67）ng/g,3级：（246.73&;#177;27.98）ng/g,P＜0.01],1级瘙痒瘢痕组织中组胺含量与0级无显著性差异[1级：（182.38&;#177;20.23）ng/g,P＞0.05],3级瘙痒瘢痕组织中组胺含量与2级无显著性差异（P＞0.05）.③瘢痕的瘙痒程度与组胺的含量呈正相关（r=0.912,P＜0.01）.结论：①增生和非增生性瘢痕组织中组胺水平无明显差异.②瘢痕局部组织中组胺含量的升高与瘙痒有关,组胺含量升高瘙痒程度加重.     

蛇床子素对成骨样细胞UMR106增殖和分化的影响

目的：以在某种程度上可反映成骨细胞增殖的成骨样细胞UMR106为靶细胞，考察蛇床子素对其细胞形态、增殖率和分化程度的影响。方法：实验于2003-03／2004—03，在中国人民武装警察部队医学院药物化学教研室药物活性筛选室进行。以大鼠成骨肉瘤细胞系UMR106为靶细胞，以雌二醇1&;#215;10^-8mol／L为阳性对照，同时设空白对照组，蛇床子素干预组分为1&;#215;10^-8mol／L，1&;#215;10^-7mol／L，1&;#215;10^-6mol／L3个浓度组。①调整细胞浓度为4&;#215;10^-7L^-1，接种于12孔培养板上。48h后，倒置显微镜下观察细胞形态变化。②调整细胞浓度为2&;#215;10^7L^-1，接种于96孔培养板，采用四唑盐法测定各孔的吸光度，计算平均增殖率。③调整细胞浓度为2&;#215;10^7L^-1，接种于24孔培养板，磷酸对硝基苯基质动力学法测定细胞内外碱性磷酸酶括性。上述实验每组均设8个复孔。结果：①培养基中加入蛇床子素培养48h后，与对照组相比UMR106细胞数量明显增多，核分裂期多见，1&;#215;10^-6mol／L，1&;#215;10^-7mol／L组可见细胞重叠生长，分泌基质堆积明显。②UMRl06细胞经蛇床子素处理48h后，相对于对照组，1&;#215;10^-6mol／L组增殖率为52％，1&;#215;10^-7mol／L组为37％，1&;#215;10^-8mol／L组为16％。3个给药组与对照组相比差异均有显著性（t=37．36，14．94，6．81，P〈0．01）。③UMR106细胞经蛇床子素1&;#215;10^-6mol／L和经雌二醇1&;#215;10^-8mol／L处理24h和48h后。细胞内碱性磷酸酶活性均显著高于对照组[（825．17&;#177;1234），（775．16&;#177;8．67），（715．14&;#177;14．17）μkat／g；（2415．48&;#177;15．84），（2355．47&;#177;5．67），（2285．49&;#177;7．67）μkat／g；t=16．56，10．22；20．89，34．90，P〈0．01]。④UMR106细胞在浓度为1&;#215;10^-6，1&;#215;10^-7mol／L的蛇床子素及雌二醇10^-8mol／L培养24h后，细胞外碱性磷酸酶活性显著高于对照组[（781．66&;#177;50），（733．15&;#177;15．34），（728．81&;#177;9．84），（652．80&;#177;11．34）μkat／g；t=22．56，11．9，14.32,P〈0．01]。结论：蛇床子素可剂量依赖地促进UMR106细胞的增殖，刺激UMR106细胞的碱性磷酸酶活性，提示其可能具有直接促进成骨细胞增殖、分化的作用。     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。     

星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察

失眠症又称不寐，指入睡困难，或维持睡眠障碍（易醒、早醒和再入睡困难）导致睡眠时间减少或睡眠质量下降，不能满足身体生理需要，明显影响日间社会功能和生活质量。现将星状神经节阻滞治疗失眠疗效观察总结如下。