FAVN与RFFIT在动物和人狂犬病中和抗体检测中的比较

目的比较荧光抗体病毒中和试验(FAVN)和快速荧光灶抑制试验(RFFIT)两项技术用于动物和人血清狂犬病中和抗体检测的差异。方法以FAVN和RFFIT两种方法分别对60份动物及人血清进行狂犬病中和抗体的平行定量检测,应用配对定量资料的t检验对所得数据进行统计学分析。结果以0.5IU/mL的国际推荐标准,对同一样品经FAVN和RFFIT两种方法测定的中和抗体效价进行定性判定,二者对全部60份样品的检测符合率为96.67%(58/60)。统计学分析显示,两种检测方法对总体样品及不同动物样品的定量检测结果差异均无统计学意义(P0.05)。结论 FAVN和RFFIT可通用于动物和人血清的狂犬病中和抗体检测。     

微量细胞中和试验和空斑减少中和试验在HFRSV中和抗体测定中的比较

为了满足肾综合征出血热(HFRS)血清流行病学、病毒分型和疫苗研究的需要,国内外已相继建立了多种 HFRS 病毒(HFRSV)中和抗体的测定方法,其中应用较多的是空斑减少中和试验(PRNT)、微量细胞中和试验。从测定的灵敏度和准确性考虑,PRNT无疑具有更多的优点,但是鉴于目前国内的实验条件,HFRSV 的 PRNT 尚不能普遍开展,微量细胞中和试     

狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的效果评价

目的应用快速荧光灶抑制试验(RFFIT)对狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒的检测效果进行评价。方法用RFFIT和狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒分别对135份人血清和164份动物血清进行狂犬病病毒中和抗体(RVNA)效价检测,应用SPSS22.0分析两种检测方法所得结果的相关性和一致性。结果两种方法所得结果的阳性检出符合率为99.33%(297/299);两种方法对动物血清和人血清的检测结果之间有较好的直线相关关系,相关系数分别为0.897和0.941;同一份标本的重复性检验显示,试剂盒检测方法具有较好的稳定性。结论狂犬病病毒中和抗体检测试剂盒可以用于人和动物血清狂犬病病毒中和抗体的检测。     

自制乙型肝炎病毒表面抗原中和抗体的临床应用

目的 通过自制乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)中和抗体,评价其在临床检验中的应用.方法 选取HBsAg经微粒子酶免疫分析技术(MEIA)初筛标本速率值/临界值(S/CO)在0.80~10.0之间的血清标本149例,使用自制HBsAg中和抗体进行验证.结果 149例标本经自制HBsAg中和抗体验证后,112例(75.2%)结果确认为阳性,5例(3.3%)为阴性,26例(17.5%)为假阳性,6例(4.0%)为不确定.自制HBsAg中和抗体与罗氏确证试剂对30例标本进行比对验证,总符合率96.7%(29/30).结论 自制HBsAg中和抗体验证试验可提高HBsAg检测准确性,处于灰区水平的检测结果应采用更灵敏的方法进行验证.     

化学发光免疫定量检测狂犬病毒抗体方法的建立

目的建立化学发光免疫法检测人血清中狂犬病毒抗体。方法以纯化抗原包被固相,配以碱性磷酸酶标记抗原及金刚烷胺作为发光底物,采用双抗原夹心法检测血清中抗体。结果该方法的敏感性为0.2 IU/m l,线性范围为0~200 IU/m l,变异系数<10%,回收率在90%~110%之间。结论化学发光法定量测定人血清中狂犬病毒抗体是一种灵敏、准确、重复性好,操作简单的方法,适用于临床检测。     

山西和河南省部分地区人群流行性乙型脑炎病毒中和抗体水平调查

目的调查山西和河南省部分地区健康人群血清中流行性乙型脑炎(乙脑)病毒中和抗体水平。方法对采集的血清标本按1:10,1:20,1:40,1:80四个稀释度稀释后进行乙脑病毒中和试验,结果判定采用细胞病变观察方法并结合ELISA测定结果进行综合判定。结果调查结果显示,所测标本中乙脑病毒中和抗体保护率以临猗县最高(87.6%),其次是栾川县(58.2%)和万荣县(51.4%)。经χ2检验,临猗县与万荣县中和抗体保护率差异有统计学意义(χ2=42.812,P=0.000),临猗县的中和抗体保护率高于万荣县,栾川县与万荣县的中和抗体保护率差异无统计学意义(χ2=1.466,P=0.226)。两个年龄组(≤40岁和40岁)中和抗体保护率比较显示,临猗县差异无统计学意义(χ2=0.057,P=0.811),万荣县差异有统计学意义(χ2=5.505,P=0.019),栾川县差异无统计学意义(χ2=2.129,P=0.145)。结论三个县健康人群乙脑病毒中和抗体保护率不同,这可能与当地乙脑的流行状况以及疫苗的接种情况有关。     

人巨细胞病毒中和抗体快速微量检测方法的建立及应用

目的建立具有较好试验重复性的人巨细胞病毒中和抗体快速微量检测方法。方法建立快速微量中和试验方法,用于健康人血浆及IVIG中的CMV中和抗体效价检测。结果用该方法检测336份健康人血浆,其中CMV中和抗体效价≥1∶128的比例为28.1%;检测27批"蓉生静丙"和9批国内其它厂家IVIG的CMV中和抗体效价,其CMV中和抗体效价的GMTs分别为1∶498和1∶485。结论建立了快速、简便、检测通量高、重复性较好的快速微量中和试验方法,为CMV-IVIG的研制提供了可供选择的血浆筛选方法。     

间接荧光抗体试验诊断肠螨病初探

目的探讨间接荧光抗体试验在肠螨病诊断中的应用价值。方法采集48例肠螨病患者血清,以粉尘螨(成螨)体组织切片为抗原,建立间接荧光抗体试验检测血清螨特异性抗体IgG。结果肠螨病患者血清抗体反应滴度为1：4～1：512,若以抗体滴度≥1：16为阳性,阳性检出率达91．67％(44／48)。结论问接荧光抗体试验诊断肠螨病具有一定的灵敏性,以血清抗体滴度≥1：16为阳性标准较合适。     

抗核抗体荧光免疫检测质量控制方法的建立和应用

目的　研究荧光强度分析法检测抗核抗体 (ANA)的质量控制方法和质量控制标准及 ,并探讨其应用价值。方法　平行检测质控品 36次 ,分析其荧光强度值 ( x± 2s)和变异系数 (CV % ) ;以质控品荧光强度值在 x± 2s范围内为质量控制标准 ,在 3种荧光显微镜条件 (激发光和采图曝光时间不同 )下检测 1 0 0 0份ANA阳性血清的荧光强度 ,并进行对比分析。同一质控标准下分别用血清稀释法和荧光强度分析法检测 30 0 0份ANA阳性病人血清 ,比较两种方法的符合率 ,评估该质控方法的可靠性。结果　质控品的荧光强度值和CV分别为 1 0 6 6± 9 7和 4 6 %。在此质控标准下 ,1 0 0 0份ANA阳性血清在 3种荧光显微镜情况下的荧光强度值的差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;30 0 0份ANA阳性标本 ,用两种方法检测的总符合率为 99 4 % ,其中均质斑点型为 99 8% (998/ 1 0 0 0 )、均质型为 99 5 % (995 / 1 0 0 0 )、斑点型为 99 0 % (990 / 1 0 0 0 )。结论　用定值的质控品控制各个实验室的ANA检测结果 ,可以排除因荧光显微镜等实验条件的差异所导致的误差 ,使实验室间ANA结果准确可靠 ,具有可比性 ,因而可整体提高ANA检测质量     

核抗体荧光免疫检测质量控制方法的建立和应用研究

目的研究核抗体荧光免疫检测质量控制的方法及临床应用。方法质控品标准的确定,同批号质控品在常规抗核抗体检测时,与待检患者的血清标本分别平行检测9次,计算出各质控品的荧光强度值和变异系数,根据结果作为质控品标准进行分析。质控分析标准的确定,在3种不同荧光强度下,模拟实验室条件调整荧光图像的采集时间,分别测定A组300份待检测血清的荧光强度结果进行比较。针对检测方法在实施质量分析过程中,主要是通过血清稀释法以及荧光强度法完成B组(300份)抗核抗体阳性血清标本的具体检测。其中荧光强度分析法主要指的是对荧光强度进行有效控制,使其有效确保在患者血清平行检测质控品需要控制的荧光强度的具体范围之内,检测血清标本中抗核抗体的滴度。血清稀释法,抗核抗体阳性的血清标本按照100、1 000、10 000稀释判断荧光可见的最高稀释滴度。结果质控品标准:同一批号的质控品各9次检测荧光强度的平均值为106.7±10.2,变异系数的平均值为4.5%。在质控有效控制的范围之内,常规组、强光组以及弱光组三种情况下测定的荧光强度值差异无统计学意义(P0.05)。同时采用荧光检测法和血清稀释法检测B组的300份血清标本,其中荧光强度分析法用质控品标准范围内的荧光强度106.7±10.2,两种方法测定抗核抗体的滴度符合率较高,均在99%以上。结论荧光强度分析法在对血清标本进行检测的过程中表现了非常高的重复性,并且最终的结果也能有效完成测定。     

狂犬病疫苗接种者抗狂犬病病毒中和抗体影响因素分析

目的探讨狂犬病疫苗接种后体内抗狂犬病病毒中和抗体产生的影响因素。方法采集2018年1-8月山东、江苏、河南、河北、湖南和安徽6省疑似狂犬病Ⅱ/Ⅲ级暴露后接种狂犬病疫苗的暴露者血清标本,快速荧光灶抑制实验(RFFIT)检测抗狂犬病病毒中和抗体(RVNA)水平,采用SPSS 19.0软件进行数据统计分析。结果全程接种狂犬病疫苗的血清样本为498份,RFFIT检测结果显示,RVNA几何平均滴度(GMT)为4.94 IU/ml,血清阳性率为96.18%(479/498)。不同组别抗体阳性率分析结果显示,免疫时间各组阳性率之间差异有统计学意义(χ^2=7.888,P=0.039),30~90 d组抗体阳性率高于91~180 d组,其他各组比较差异均无统计学意义。多因素分析结果显示年龄、免疫时间是RVNA水平的重要影响因素,其中年龄与RVNA水平呈正相关,免疫时间与RVNA水平呈负相关。免疫时间对RVNA水平的影响最大,影响重要性为0.62。结论接种狂犬病疫苗后能产生可靠的免疫效果,年龄、免疫时间等因素对抗体阳性率及RVNA水平有一定影响。暴露后在及时进行规范完整的暴露后处置外,应对经常暴露于狂犬病的高危人群、免疫力低下者或患有免疫抑制性疾病的人群定期检测血清抗体,对于RVNA滴度小于0.5 IU/ml的接种者应及时进行加强免疫,补接种疫苗,从而有效预防狂犬病。     

柯萨奇B组病毒IgM抗体检测方法的建立及在产科中的应用

应用间接免疫荧光法检测孕产妇血清中柯萨奇Ｂ组病毒ＩｇＭ抗体（ＣＢＶ－ＩｇＭ）并与ＥＬＩＳＡ法作比较，两法结果无显著性差异（ｘ＾２＝０．５，Ｐ〉０．５），１３７０名早，中，晚期孕产妇血清ＣＢＶ－ＩｇＭ抗体检出率均高于非孕组（Ｐ〈０．０５）。     

Comparison of the classical immunofluorescent antibody tests for Epstein-Barr virus with commercially available test kits

Twenty reference sera with previously reported titers plus 10 normal seropositive and 10 seronegative sera were used to determine which assay for the detection of antibodies to Epstein-Barr virus should be utilized in our laboratory. By three commercially available test systems and by slides prepared in our laboratory, all techniques detected the same number of samples positive for IgG antibodies to viral capsid antigen (VCA) and Epstein-Barr virus-determined nuclear antigen (EBNA), but the geometric mean titers (GMTs) varied. Major discrepancies arose in the sensitivity of detection of early antigen-diffuse (EA-D) and -diffuse and restricted (EA-DR). Slides prepared in our laboratory gave the best results, detecting 12 of 12 (100%). Slides prepared according to Gull and Hillcrest detected 11 of 12 (92%), and those prepared according to Zeus detected 9 of 12 (75%). From these data, we conclude that all of these methods for detection of VCA and EBNA are adequate. However, in determining antibody levels to EA-D and EA-DR, great care should be taken as to the source of the slide and specificity and sensitivity.     

建立微量空斑减少方法测定人血清H7N9禽流感病毒中和抗体水平

目的 建立微量空斑减少的方法测定人血清中H7N9禽流感病毒中和抗体水平。方法 确定H7N9禽流感病毒感染MDCK细胞后形成空斑数目,进行病毒定量,系列稀释待测抗体,加入已定量病毒,计算病毒被抗体中和后空斑减少数目,确定中和抗体的滴度。实验中以H7N9病例血清测定该方法的灵敏度,以其他亚型流感病毒抗体阳性人群血清评估微量空斑减少方法的特异性,同时将该方法与微量中和实验进行比较分析。结果 微量空斑减少方法不仅能够检测H7N9禽流感病例中和抗体水平,而且该方法检测季节性流感病毒抗体、H5N1和H9N2禽流感病毒抗体与H7N9禽流感病毒抗体之间均无交叉反应,与微量中和实验检测结果相一致。结论 建立的微量空斑减少方法具有较好的灵敏度和特异性,能够用于人血清H7N9禽流感病毒中和抗体的检测。     

三种方法检测抗双链DNA抗体的比较及临床意义

目的利用绿蝇短膜虫间接免疫荧光法（CL-IIF）、欧蒙酶免疫斑点法、胶体金快速斑点法3种方法单独及不同组合联合检测抗双链DNA（ds-DNA）抗体的比较,了解3种方法联合检测在系统性红斑狼疮（SLE）中的诊断及临床应用价值。方法120例SLE患者分为疾病活动组和疾病稳定组,另选择121例疾病对照（干燥综合征35例、混合性结缔组织病30例、类风湿关节炎38例、系统性硬化症18例患者血清）、40例健康患者血清对照,利用3种方法检测其血清中抗ds-DNA抗体,了解检测的敏感性和特异性,并寻找对临床有价值的联合检测方法。结果CL-IIF法、欧蒙酶免疫斑点法、胶体金快速斑点法在SLE中的敏感性分别为45.8%、42.5%、47.5%,均明显高于疾病对照组及健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.01）;在检测SLE疾病活动组抗ds-DNA抗体中,3种方法敏感性分别为65.2%、58.3%、61.1%,而在疾病稳定组中敏感性分别为16.6%、18.7%、27.0%,差异有统计学意义（P〈0.01）;3种方法的联合检测可以明显提高抗ds-DNA抗体在SLE中的检出率,而特异性仍然很高。结论3种方法检测SLE中的抗ds-DNA抗体均具有很高特异性,但敏感性略低,尤其在疾病稳定期中,而3种方法间的联合检测则可以弥补敏感性低的不足,尤其是CL-IIF法和胶体金快速斑点法的组合更适合临床应用。     

抗弓形虫IgM抗体时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步应用

目的采用时间分辨荧光免疫分析法（TRFIA）建立高灵敏的抗弓形虫（TOX）IgM抗体的检测方法。方法采用二抗间接法建立抗TOX IgM抗体的TRFIA。结果方法的批内和批间变异系数（CV）分别为1.9%和3.8%,敏感性为0.4 U/mL,可测范围为0.4-200 U/mL,20%、50%和80%的有效剂量（ED20、ED50和ED80）分别为36.3、88.2和147.8 U/mL。检测健康体检人员的血清,标本的测定值为（5.3±2.3）U/mL,建议阳性阈值为10 U/mL。结论抗TOX IgM抗体的TRFIA敏感性高、稳定性好,在优生优育及器官移植上具有很好的应用前景。     

抗弓形虫IgM抗体时间分辨荧光免疫分析法的建立及初步应用

目的采用时间分辨荧光免疫分析法(TRFIA)建立高灵敏的抗弓形虫(TOX)IgM抗体的检测方法。方法采用二抗间接法建立抗TOX IgM抗体的TRFIA。结果方法的批内和批间变异系数(CV)分别为1.9%和3.8%,敏感性为0.4 U/mL,可测范围为0.4~200 U/mL,20%、50%和80%的有效剂量(ED20、ED50和ED80)分别为36.3、88.2和147.8 U/mL。检测健康体检人员的血清,标本的测定值为(5.3±2.3)U/mL,建议阳性阈值为10 U/mL。结论抗TOX IgM抗体的TRFIA敏感性高、稳定性好,在优生优育及器官移植上具有很好的应用前景。     

HBV 5项血清标志物自动审核模块的建立与应用

目的建立HBV 5项血清标志物(HBVM)自动审核规则,通过实验室信息管理系统(LIS)与自动化分析仪的接口软件实现HBVM检测结果的自动审核。方法根据临床要求、HBVM指标的临床意义、检验结果间的逻辑关系及结果的回顾性验证等要求,形成嵌入LIS的HBVM的结果自动筛查模块,比较使用前后的工作效率。结果 (1)共设定报警提示、HBsAg阳性提示、少见模式判断提示、历史审核提示4大类共13条审核规则。(2)对12 874份血清标本的测试结果自动筛查,自动筛查通过率为70.9%。(3)由一名资深技师对100份临床标本进行检测,应用筛查模块前后,每份报告从标本上机到报告发送,平均耗时由2.1 h下降至1.4 h。结论 HBVM自动审核模块功能的应用,提示LIS可实现自动化检验项目结果的自动筛查,有效地改善工作流程,提高工作效率,避免因人为疏忽造成遗漏复查。