肝细胞生长因子对四氯化碳损伤原代培养大鼠肝细胞的保护作用

采用大鼠离体肝细胞原代培养２４ｈ，并利用ＣＣｌ４造成急性肝细胞损伤模型，检定肝细胞生长因子（ＨＧＦ）对肝细胞损伤的影响．结果表明：ＨＧＦ可显著降低中毒肝细胞及细胞膜脂质过氧化物水平，抑制肝细胞脂质过氧化，并降低谷丙转氨酶和谷草转氨酶水平，稳定质膜；显著促进中毒肝细胞ＲＮＡ和ＤＮＡ的合成；超微病理证实ＨＧＦ能减轻ＣＣｌ４对肝细胞质膜，染色质，线粒体，内质网及核蛋白体的损害     

四氯化碳致大鼠肝损伤早期血清总胆汁酸、α-谷胱甘肽S转移酶、嘌呤核苷磷酸化酶和鸟氨酸氨基甲酰转移酶的变化

目的 探讨血清总胆汁酸、α-谷胱甘肽S转移酶(α-GST)、嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)和鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)对肝损伤早期诊断的应用价值。方法 Wistar大鼠分别ig给予CCl₄ 0.02,0.05和0.08 ml·kg^-1,每天1次,连续10 d。于给CCl₄后第1天和第3天采集血清,采用全自动生化仪测定血清谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、碱性磷酸酶、总胆红素以及总胆汁酸的水平,采用ELISA测定血清α-GST, PNP和OCT的水平; 于给CCl₄后第10天,测定血清GPT、 GOT、碱性磷酸酶及总胆红素,计算大鼠的肝指数,观察肝组织病理学变化。通过Logistic回归建立回归模型,分别用ROC曲线分析给CCl₄后第1和第3天总胆汁酸、α-GST、PNP和OCT以及GPT和GOT对CCl₄致大鼠肝损伤早期诊断的意义。结果 与正常对照组同时间点相比,给CCl₄第1天,CCl₄ 0.02,0.05和0.08 ml·kg^-1组PNP均升高(P<0.05, P<0.01),CCl₄ 0.08 ml·kg^-1组GPT和总胆汁酸升高(P<0.05, P<0.01); 给CCl₄第3天,CCl₄ 0.05和0.08 ml·kg^-1组GOT, α-GST和OCT升高(P<0.05, P<0.01); 给CCl₄第10天,CCl₄ 0.02,0.05和0.08 ml·kg^-1组大鼠肝指数均显著升高(P<0.01),肝出现严重的肝细胞脂肪变性(P<0.01)。大鼠血清中GPT、GOT、总胆汁酸、α-GST、PNP和OCT的ROC曲线下面积分别为0.786, 0.728, 0.878, 0.629, 0.850和0.571。GPT和GOT联合检测的ROC曲线下面积为0.871;总胆汁酸、α-GST、PNP和OCT以及总胆汁酸、PNP和OCT联合检测的ROC曲线下面积为0.939,且均高于各指标单项检测。结论 总胆汁酸、α-GST、PNP和OCT可作为CCl₄致肝损伤早期的生物标志物,且总胆汁酸、PNP和OCT联合检测在CCl₄致肝损伤早期具有较高的诊断价值。     

狗肝菜多糖P2B对CCl4致L-02肝细胞损伤的保护作用

摘 要 目的：探讨狗肝菜多糖（P2B）对四氯化碳(CCl₄)诱导的肝L 02细胞损伤的保护作用。方法: 培养人肝L-02细胞,建立CCl₄肝细胞损伤模型,分组实验：正常对照组、CCl₄损伤组和不同浓度的P2B(0.125、0.25和0.5 mg·ml^-1)样品组。采用MTT法检测生化分析培养液中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）以及细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果: 与CCl₄损伤组相比,各P2B样品组细胞活力明显增强,上清液中ALT、AST活性明显降低;细胞内SOD明显升高、MDA含量降低。结论:P2B对CCl₄诱导的体外L 02肝细胞损伤均具有保护作用,随着浓度的增加,作用也随着增强,其机制可能与其抗氧化作用有关。     

一枝蒿有效部位对四氯化碳致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的 筛选四氯化碳(CCl₄)致小鼠急性肝损伤最佳模型,并研究一枝蒿有效部位(AR)对CCl₄所致小鼠急性肝损伤的保护作用. 方法采用不同浓度的CCl₄花生油溶液予小鼠腹腔注射,测定小鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的含量. 一枝蒿有效部位予小鼠连续灌胃5 d,用最佳CCl₄模型造成小鼠急性肝损伤,测定小鼠血清中ALT和AST的含量,观察光镜下小鼠肝组织的病理变化. 结果 0.11% CCl₄ 模型组为最佳模型. AR低、中、高剂量组均能抑制CCl₄引起的急性肝损伤所致的ALT、AST升高. 结论 AR对CCl₄所致急性肝损伤的小鼠有保护作用.     

Toll样受体4及肝细胞生长因子水平与急性肾损伤病变程度的关系

目的 观察血清及肾组织中Toll样受体4（TLR4）、肝细胞生长因子（HGF）水平与急性肾损伤病变程度的关系。方法 上海市松江区中心医院肾内科2015年5月至2017年5月收治的90例急性肾损伤患者根据疾病分期不同，分为A组33例（急性肾损伤Ⅰ期）、B组29例（急性肾损伤Ⅱ期）、C组28例（急性肾损伤Ⅲ期）。分别取患者静脉血及穿刺活检肾组织，检测血清及肾组织中TLR4、HGF的表达情况，并以急性生理与慢性健康状况评分系统Ⅲ（APACHE Ⅲ）分析其与急性肾损伤病变程度的相关性。结果 C组血清TLR4、HGF水平高于B组、A组，B组TLR4、HGF水平高于A组，差异均有统计学意义（P<0.05）。3组肾组织中TLR4、HGF阳性表达率差异有统计学意义（P<0.05）；B组、C组TLR4、HGF阳性表达率高于A组，C组TLR4、HGF阳性表达率高于B组，差异均有统计学意义（P<0.017）。TLR4、HGF水平随肾损伤病变程度的加重而升高，TLR4与APACHE Ⅲ评分呈正相关（r=0.942，P<0.05），HGF与APACHE Ⅲ评分呈正相关（r=0.926，P<0.05）。结论 不同分期急性肾损伤患者血清及肾组织中TLR4、HGF水平存在差异。TLR4、HGF与急性肾损伤病变程度呈正相关。     

依布硒啉对四氯化碳及内毒素+D-氨基半乳糖致肝损伤的保护作用

目的：考察依布硒啉(ebselen)对肝损伤的保护作用。方法：以0.2%四氯化碳(5 ml.kg^-1)和内毒素（1μg.kg^-1)+D-氨基半乳糖（800 mg.kg^-1)分别ip ICR小鼠形成肝损伤,观察病理改变及血清谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)和总胆汁酸(TBA)活性。培养大鼠肝细胞以CCl₄和LPS＋D-GalN诱发损伤。测定了乳酸脱氢酶活性和细胞TBARS含量。结果：依伯硒啉可改善CCl₄和LPS＋D-GalN诱发的小鼠肝损伤变化,减小相关损伤指标的改变;并可拮抗培养肝细胞的LDH释放和TBARS含量上升。结论：依布硒啉能保护肝损伤,可能与抗自由基的脂质过氧化有关。     

叶下珠对肝细胞损伤的保护作用

实验证实叶下珠能明显降低ＣＣｌ_４引起的小鼠血清丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）的升高；抑制肝脏脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）的生成。叶下珠体外与大鼠肝细胞共同孵育，能抑制ＣＣｌ_４所致的肝细胞膜流动性降低，降低肝细胞内钙离子浓度。结果提示，叶下珠的保护肝脏损伤作用可能与其抗脂质过氧化和膜保护作用有关。     

血清肝细胞生长因子检测及分析

目的　探讨肝脏病患者血清肝细胞生长因子 (HGF)的变化并分析其临床意义。方法　采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肝细胞癌(HCC)70例、肝硬化(HC)85例、重症肝炎 (SH)53例、慢性肝炎 (CH) 72例患者血清中的HGF水平, 并与 68名健康献血员进行对照;同时测定血清中转氨酶(ALT、AST)、胆红素 (TBil)。结果　HGF分别为:HCC组为 145. 4ng/L;HC组为 758. 8ng/L;CHH组为 2158. 2ng/L;CH组为 328. 5ng/L;正常对照组为12. 8ng/L。肝脏疾病患者与正常组相比,HGF有显著性差异 (P<0. 01 )。肝脏病患者组之间也存在显著性差异(P<0. 01)。结论　血清HGF的变化对肝脏疾病的诊断,了解肝脏损伤的程度及预后有一定意义。     

丹酚酸A对大鼠脑突触体和线粒体氧应激损伤的体外保护作用

利用蔗糖梯度法分离大鼠脑突触体和线粒体，以Fe^2＋-半胱氨酸（Cys）为氧自由基生成系统造成大鼠脑突触体和线粒体氧应激损伤模型. 在体外Fe^2＋-Cys与脑突触体和线粒体共同温孵可使丙二醛(MDA)生成量显著增加，线粒体ATP酶活性下降. 预先加入丹酚酸 A(Sal A)可显著抑制MDA生成，恢复线粒体 ATP酶活性，防止线粒体肿胀和膜流动性的降低. 通过电镜照片可看到Fe^2＋-Cys引起的线粒体和突触体结构病理性改变，预先加入Sal A可减轻Fe^2＋-Cys造成的这一损伤. 此外，Sal A可阻抑H₂O₂引起的脑突触体GSH含量的降低. 由此可见，Sal A体外对氧应激引起的大鼠脑突触体和线粒体脂质过氧化损伤有明显的保护作用.     

黄芪甲苷衍生物HHQ16上调α1酸性糖蛋白改善肝细胞脂质沉积

目的 研究黄芪甲苷衍生物HHQ 16对肝细胞脂质沉积的作用及机制。方法 在AML12肝细胞上用游离脂肪酸构建脂质沉积模型,检测细胞的甘油三酯和油红染色等反映肝细胞脂质沉积情况。通过实时定量PCR和蛋白免疫印迹法检测α1酸性糖蛋白（ORM）及其上游相关调控因子表达。通过siRNA技术对ORM1的表达进行干扰,确定ORM1是否介导HHQ16的作用。结果 HHQ16显著改善FFA导致的肝脂质沉积,同时HHQ16升高ORM表达,干扰主要亚型ORM1表达后HHQ16改善肝细胞脂质沉积作用被逆转。结论 HHQ16通过升高ORM改善肝细胞脂质沉积。     

光学活性黄皮酰胺类化合物体外对黄曲霉毒素B_1损伤大鼠肝细胞非程序性DNA合成的保护作用

目的研究9种光学活性黄皮酰胺类化合物体外对黄曲霉毒素B1(AFB1)引起大鼠肝细胞非程序性DNA合成(UDS)损伤和谷丙转氨酶(GPT)释放的保护作用有无差异。方法用胶原酶灌流法分离大鼠肝细胞。将分离的大鼠肝细胞与羟基脲(终浓度10 mmol.L-1)和所试化合物于37℃5%CO2培养1 h,再加入AFB1(终浓度0.1μmol.L-1)和[3H]TdR,测定UDS合成和GPT释放的量。结果所试9种光学活性黄皮酰胺类化合物在0.1 mol.L-1浓度时,右旋(+)黄皮酰胺、左旋(-)新黄皮酰胺、消旋(±)新黄皮酰胺、(-)表新黄皮酰胺和(±)表新黄皮酰胺对AFB1引起的大鼠肝细胞UDS损伤有显著的阻抑作用;而(-)黄皮酰胺、(+)新黄皮酰胺和(±)新黄皮酰胺、(-)表新黄皮酰胺和(±)表新黄皮酰胺则能显著抑制AFB1引起的大鼠肝细胞GPT的释放。(±)黄皮酰胺和右旋表新黄皮酰胺二者则对UDS损伤和GPT释放均无影响。结论黄皮酰胺类化合物对上述的AFB1引起大鼠肝细胞非程序性UDS合成的损伤和GPT释放的不同作用与其立体结构的不同有关系,5S6R构型有利于保护AFB1引起的大鼠肝细胞UDS损伤,而5R6S构型则利于保护AFB1引起的大鼠肝细胞GPT的释放。     

肝细胞生长因子预处理对过氧化氢诱导大鼠神经干细胞凋亡的保护作用

目的研究肝细胞生长因子(HGF)对神经干细胞(NSC)凋亡的保护作用及其作用机制,为HGF用于NSC移植提供实验基础。方法分离培养大鼠NSC。细胞分为正常对照、模型(H2O2100μmo.lL-1)、HGF+H2O2(HGF15,30及60μg.L-1预处理24h后,再加入H2O2100μmol.L-1处理4h),LY294002(PI3K/Akt通路抑制剂)+HGF+H2O2(先加入LY29400220μmol.L-1处理30min,再加入HGF60μg.L-1处理24h,最后再加入100μmo.lL-1H2O2培养4h)组。MTT法检测细胞存活率;TUNEL法检测细胞凋亡率;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性;Western印迹分析Bcl-2,Bax蛋白表达。结果MTT检测发现,随着HGF浓度的增加,NSC细胞的存活率也增加。与模型组〔(63.5±2.4)%〕比较,HGF15,30及60μg.L-1预处理组细胞存活率明显升高〔(79.1±7.5)%,(83.8±6.1)%和(86.6±8.2)%;n=3,P<0.05〕。TUNEL法检测发现,HGF预处理组凋亡细胞明显减少,模型组的凋亡率为(43.5±6.2)%,HGF预处理组则分别为(34.2±8.6)%,(21.7±3.8)%及(19.4±4.0)%。Caspase-3活性检测表明,与模型组相比,HGF预处理组细胞caspase-3活性降低。Western印迹分析结果显示,与模型组比较,HGF预处理使细胞的Bcl-2蛋白表达升高,但Bax蛋白表达不受影响;HGF的抗凋亡效应可被PI3K/Akt通道阻滞剂LY294002阻断。结论HGF可减轻H2O2所诱导的大鼠NSC凋亡,且呈一定的浓度依赖关系,其作用机制可能与NSC的PI3K/Akt通路激活和Bcl-2表达增强有关。     

黄芪总提物对肝细胞凋亡的抑制作用

为研究黄芪总提物 (TEA)对肝细胞凋亡的保护作用及其机理 ,分别用D 氨基半乳糖 (D GalN ,70 0mg·kg- 1,ip) +脂多糖 (LPS ,1μg·kg- 1,ip)诱导小鼠在体肝细胞凋亡和H2 O2 (0 .1mmol·L- 1,1h)诱导原代培养大鼠肝细胞凋亡 ,采用形态学观察 ,DNA凝胶电泳和流式细胞术等方法检测细胞凋亡 .结果表明 :①TEA (40mg·kg- 1,ig× 2 ,5h)使D GalN +LPS升高的小鼠血中肿瘤坏死因子 (TNF)水平和肝脏丙二醛 (MDA)含量降低 ,以及使降低的肝线粒体锰 超氧化物歧化酶 (Mn SOD)活性升高 ;TEA可明显抑制D GalN +LPS引起的小鼠肝细胞皱缩变小 ,核染色质凝聚和DNA片段化 .②TEA (2 0mg·L- 1)可恢复或减轻由H2 O2 所致肝细胞增殖受抑和肝细胞MDA含量升高 ;TEA (40mg·L- 1)可使H2 O2 致DNA较强的AO荧光染色变淡 ,TEA(2 0mg·L- 1)对H2 O2 所致的DNA片段化有抑制作用 ,使H2 O2 升高的大鼠肝细胞DNA亚G1峰 (即凋亡峰 )明显降低 ,经DNA软件分析 ,TEA可使H2 O2 升高的细胞凋亡率从 6 3.7%降至 4 .2 % .提示 ,TEA对体内外肝细胞凋亡均有保护作用 ,其抗肝损伤作用可能与其抗凋亡和抗氧化作用有关     

硝普钠抑制脂多糖诱导的大鼠原代培养肝细胞表面细胞间粘附分子-1的表达

目的　评价模拟肝脏急性炎症期一氧化氮与细胞间粘附分子 1(ICAM 1)表达的关系。方法　用免疫细胞化学技术检测加入不同浓度NO供体硝普钠 (SNP)和 (或 )细菌内毒素 (LPS)后 ,原代培养大鼠肝细胞ICAM 1的表达情况。结果　当培养时间达4h ,各组肝细胞均未见ICAM 1显著表达 ;但当培养至 8,2 4h ,LPS组的肝细胞ICAM 1表达强度明显升高 (P <0 .0 5 ) ,SNP则可呈浓度依赖性地抑制LPS诱导的大鼠肝细胞ICAM 1的表达。结论　SNP可显著抑制LPS诱导的原代培养大鼠肝细胞ICAM 1表达。     

杨梅叶总黄酮对培养大鼠皮质神经元缺糖缺氧损伤的影响

目的探讨杨梅叶总黄酮对原代培养大鼠皮质神经元缺糖缺氧损伤的影响。方法采用原代培养的大鼠皮质神经元,随机分为正常组、神经元缺糖缺氧(oxygen-glucose deprivation,OGD)模型组和杨梅叶总黄酮高、中、低质量浓度(100、10、1 mg.L-1)给药组,MTT法观察神经元的存活率,比色法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放量、过氧化氢(hydrogen perox-ide,H2O2)含量,并检测细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)含量。结果杨梅叶总黄酮可显著提高受损伤神经元的存活率和皮质神经元细胞内SOD活性,降低神经元细胞LDH的释放、细胞内MDA含量和细胞培养液中H2O2含量。结论杨梅叶总黄酮对缺糖缺氧所致皮质神经元损伤具有明显的保护作用。     

左卡尼汀对过氧化氢诱导的心肌细胞凋亡的抑制作用(英文)

目的探讨左旋尼汀对心肌细胞凋亡的抑制作用及其可能的作用机制。方法采用培养的新生乳大鼠心肌细胞制备H2O2200μmol.L-1氧化损伤模型。实验分为正常对照组、H2O2200μmol.L-1模型组、左卡尼汀(0.3,0.6及1.2 mmol.L-1)组、左卡尼汀1.2 mmol.L-1+H2O2200μmol.L-1组。左卡尼汀0.3,0.6和1.2 mmol.L-1作用1 h后加入H2O2200μmol.L-1培养12 h,MTT法测定心肌细胞存活率,流式细胞仪测定心肌细胞的凋亡率,Western印迹法测定胱天蛋白酶3表达;用试剂盒方法检测过氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平。左卡尼汀1.2 mmol.L-1作用5 min后加入H2O2200μmol.L-1,采用Till阳离子测定系统监测5 min的心肌细胞[Ca2+]i瞬间变化。结果 H2O2200μmol.L-1作用于心肌细胞12 h能引起心肌细胞凋亡。左卡尼汀0.3,0.6和1.2 mmol.L-1能够不同程度的逆转由H2O2所致的损伤,使SOD活性明显增加,MDA水平明显降低(P<0.01)。左卡尼汀1.2 mmol.L-1作用最强,能够明显降低心肌细胞胱天蛋白酶3表达(P<0.01),明显降低H2O2引起的[Ca2+]i瞬间变化升高(P<0.01),但对于H2O2引起无钙血清培养的心肌细胞静息钙升高无影响。结论左卡尼汀能够抑制由H2O2引起的心肌细胞凋亡,该抑制作用可能与其保护细胞膜和减轻钙通道的损害、纠正[Ca2+]i瞬变失调及其抗氧化作用有关。     

尿苷和表告依春在大鼠体内的药物动力学

目的建立同时测定大鼠血清中尿苷和表告依春浓度的LC-MS/MS法;以尿苷和表告依春为板蓝根颗粒的指标成分,利用建立的LC-MS/MS法研究大鼠服用板蓝根颗粒后的药物动力学特征。方法色谱柱为Agela C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为5∶95),利用沉淀蛋白法,以多反应监测(multiple reaction monitoring,MRM)扫描方式检测大鼠给予板蓝根颗粒后血清中尿苷和表告依春的血清浓度。结果血清中尿苷和表告依春质量浓度分别在40.0¹0 000.0μg·L-1和4.010 000.0μg·L-1和4.0¹ 000.0μg·L-1内呈良好的线性关系;日内与日间精密度均小于15%,回收率和基质效应均在85%1 000.0μg·L-1内呈良好的线性关系;日内与日间精密度均小于15%,回收率和基质效应均在85%¹15%之间。大鼠灌胃给予板蓝根颗粒后,尿苷的ρmax增至本底水平的2倍左右,表告依春的ρmax、tmax和t1/2分别为(0.61±0.08)mg·L-1、(2.25±0.61)h和(3.64±1.47)h。结论该方法适用于大鼠血清中尿苷和表告依春的测定及药物动力学研究。     

RP-HPLC法测定大鼠血浆中DHX-11的浓度

目的建立测定大鼠血浆中10-O-[4-(1-乙酰基-5-苯基-4,5-二氢吡唑-3-基)苯基]-(10S)-二氢青蒿素(10-O-[4-[1-acetyl-5-phenyl-4,5-dihydropyrazol-3-yl]phenyl]-(10S)-dihydroartemisinin,DHX-11)的高效液相色谱方法,并应用于DHX-11的药物动力学研究。方法采用反相色谱柱(200mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(体积比为90∶10),流速为1 mL.min-1,检测波长为294nm,内标为大黄酚,以液液萃取法处理血浆。结果 DHX-11血浆浓度在0.022～1.120 mg.L-1内线性关系良好(r>0.996 0),定量下限为0.022 mg.L-1,日内、日间精密度(以相对标准偏差表示)不大于13.3%,低、中、高质量浓度(0.0448、0.224、0.896 mg.L-1)质控样品回收率分别为92.7%、91.1%、85.7%。大鼠灌胃给药血药浓度-时间数据经DAS2.0药动学软件处理,主要药动学参数为:t1/2:(1.922±0.632)h;CL/F:(104.673±31.629)L.h-.1kg-1;AUC0-t:(3 778.6±1 031.4)μg.h.L-1;AUC0-∞:(3 879.3±1 010.7)μg.h.L-1。结论该方法可作为大鼠血浆中DHX-11浓度的测定方法,为探讨DHX-11的药动学行为提供了方法依据。     

L-精氨酸对溶血性磷脂酰胆碱损伤离体大鼠心肌的保护作用

在离体大鼠心脏观察了L-精氨酸对溶血性磷脂酰胆碱 (LPC) 损伤心肌作用的影响. LPC(5 μmol·L^-1) 引起心率减慢, 冠脉流量减少, 心脏功能降低 (LVP和LV dp/dt_ma下降) 及肌酸激酶 (CPK) 释放增加. 30 μmol·L^-1 L-精氨酸能促进心率恢?复, 增加冠脉流量和改善心脏功能, 但仅LV dP/dt_max恢复显?示统计学差异; 300 μmol·L^-1 L-精氨酸能显著改善心脏功能, 促进心率和冠脉流量的恢复, 减少CPK释放. 结果提示: L-精氨酸对LPC所致心肌损伤具有一定的保护作用.     

一氧化氮抑制常氧和低氧培养的肺动脉内皮细胞增殖

探讨一氧化氮(NO)在常氧和无氧(0% O₂)条件下对肺动脉内皮细胞(PAEC)增殖的影响. 结果表明，无氧和NO合酶抑制剂L-硝基精氨酸(L-NA 2.5 mmol·L^-1)培养24 h对PAEC形态无明显影响，NO供体SIN-1(0.1-1.0 mmol·L^-1)使常氧与无氧条件下培养的PAEC贴壁细胞明显减少；与常氧组相比，无氧培养24 h使PAEC的［³H］TdR参入降低53%；L-NA对PAEC的［³H］TdR参入无明显影响，SIN-1则浓度依赖性地抑制PAEC的［³H］TdR参入. 流式细胞分析表明，无氧使进入S期和G₂/M期的细胞分别增加22%和144%，而进入G₀/G₁期的细胞降低49%(P<0.01)；SIN-1(0.5 mmol·L^-1)具有与低氧相似的作用，使进入S期和G₂/M期的细胞分别增加42%和104%，而进入G₀/G₁期的细胞减少41%(P<0.01). 无氧加入SIN-1后使S期细胞增加更为显著. 结果说明低氧和外源性NO均抑制PAEC的增殖，其抑制作用环节可能是阻止G₂/M期细胞向G₀/G₁期过渡.