梭曼水解酶及活性肽片

梭曼水解酶及活性肽片刘昌玲，姜厚理，孙曼霁军事医学科学院毒物药物研究所（北京１００８５０）梭曼水解酶广泛存在动植物组织和微生物中，本文阐明了几种来源不同组织和细菌中提取的梭曼水解酶及水解梭曼的活性肽片。牛肝和微球菌中提取了梭曼水解酶，它们水解梭曼的米...     

缺氧条件下梭曼中毒对 PC12 细胞游离钙的影响

缺氧条件下梭曼中毒对ＰＣ１２细胞游离钙的影响吴强董兆君魏相德（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）梭曼是一种强有力的胆碱酯酶抑制剂，一般认为抑制胆碱酯酶，造成乙酰胆碱大量堆积，作用于胆碱能受体而引发一系列效应是其中毒的主要机理．Ｃａ２＋作为细...     

梭曼引起大鼠膈肌终板区持续性去极化

在大鼠离休不均匀牵张膈肌标本（ＩＮＳＭＰ）上,选择接近正常电生理学状态的神经肌肉接头,研究了梭曼引起的串终板电位（ＴＥＰＰ）变化,观察到．梭曼浓度在５．５ｎｍｏｌ·Ｌ１到５５μｍｏｌ。Ｌ１范围内,间接串刺激时除在少数标本上出现ＴＥＰＰ幅度降低的第一种反应外,在大多数标本上出现持续性去极化（ＳＤ）．ＳＤ过程中,终板电位（ＥＰＰ）完全消失,ＳＤ－旦出现,持续时间相对稳定,具有“全或无”性质,梭曼浓度在５５ｎｍｏｌ·Ｌ到５５μｍｏｌ·Ｌ范围内,反应以ＳＤ为主（＞８０％）大鼠一个致死量梭曼中毒（０,１ｍｇ·ｋｇ１ｉｍ）后制备ＩＮＳＭＰ,间接串刺激时也产生这两种反应,仍以ＳＤ为主（９１％）冲洗掉残余梭曼,对ＳＤ各参数无影响,再加入高浓度梭曼（５５μｍｏｌ·Ｌ１）时,４５％标本上ＳＤ转化为第一种反应,另５５％标本上ＳＤ的７０％时程缩短至４２％,再冲洗梭曼后１００％标本上ＳＤ恢复。结果表明,ＳＤ与第一种反应有质的区别．ＳＤ是梭曼抑酶作用的结果,高浓度梭曼可能对神经肌肉接头有直接作用,但不是梭曼中毒的主要因素,ＳＤ是梭曼中毒后,间接串刺激时ＴＥＰＰ的主要变化,是在突触电位水平上梭曼等胆碱酯酶抑制剂中毒致神经肌肉传递阻断的?     

急性低压缺氧复合梭曼中毒对大鼠肺微血管损伤作用

应用伊文思蓝标记白蛋白法，微量滴定法和紫外法观察了急性低压缺氧复合梭曼中毒肺组织伊文思蓝含量，磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）活力以及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中ＰＬＡ２活力，血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）活性和蛋白含量的变化。结果表明，低压缺氧（模拟海拔４０００ｍ）６ｈ后，给大鼠梭曼７２μｇ·ｋｇ－１ｓｃ，继续减压可引起肺组织伊文思蓝含量增加，ＢＡＬＦ中ＡＣＥ活性和蛋白含量升高，同时伴有肺组织和ＢＡＬＦ中ＰＬＡ２活性明显升高，提示急性低压缺氧复合梭曼中毒导致的肺损伤可表现为肺微血管通透性（ＰＭＶＰ）增高，微血管内皮细胞损伤和ＰＬＡ２的作用是引起ＰＭＶＰ增高的主要原因。     

二乙酰单肟和硝苯地平对梭曼中毒小鼠的保护

羟酸酯酶（ｃａｒｂｏｘｙｌｅｓｔｅｒａｓｅ,ＣａＥ）,是一组能催化水解羟酸酯生成羟酸和乙醇的同工酶,在体内主要分布于肝、肺、血浆、小肠等组织器官。研究表明,梭曼中毒时不仅抑制乙酰胆碱酯酶（ＡＣｈＥ）,而且还可逆性结合并抑制ＣａＥ。ＣａＥ与梭曼结合可使体内游离梭曼浓度降低,从而减轻梭曼对靶部位ＡＣｈＥ的抑制。因此ＣａＥ作为内源性毒剂清除剂已引起了人们的广泛重视。那么,通过加速梭曼抑制的ＣａＥ的重活化,或扩张外周血管增加血浆ＣａＥ与梭曼的结合,充分调动ＣａＥ在体内解毒潜力,可能对提高梭曼的防治水平有…     

急性梭曼中毒对犬血气参数的影响

急性梭曼中毒对犬血气参数的影响刘勇，欧阳子倩，赵吉青，魏相德，王仕丽（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）犬急性梭曼中毒（５０ｕｇ·ｋｇ￣（－１），ｉｍ）后０．５，１，２及２４ｈ采集血样，用全自动血气分析仪（ＲａｄｉｏｍｅｔｅｒⅢ型，丹麦）作...     

催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶

催化神经毒剂梭曼水解的抗体酶赵毅民荣康泰徐勤惠（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）梭曼是难防难治的有机磷毒剂．为了寻找新的解毒途径，本研究设计并合成了全新化合物１－羟基－１－对胺基苯基甲膦酸单频哪基醇酯．此化合物可竞争性地抑制梭曼水解酶...     

梭曼中毒对大鼠心功能的影响

梭曼中毒对大鼠心功能的影响刘勇王仕丽魏相德（第三军医大学毒理学教研室，重庆６３００３８）本研究采用大鼠离体灌流工作心脏为模型，观察梭曼对心脏的直接作用．初步结果表明，急性梭曼中毒后，大鼠心功能在早期出现暂时兴奋后转入进行性抑制，表现为反映大鼠心脏整体...     

梭曼中毒动物脑损伤机制

梭曼（Ｓｏｍａｎ）是一强胆碱酯酶抑制剂，可导致ＡＣｈ在动物体内大量积累，引发一系列的中毒症状，严重时可出现惊厥和死亡。中毒动物脑组织中可见广泛的神经损伤，以梨形皮质、杏仁核、海马和尾状核的损伤最重［１］。对于梭曼所致脑损伤机理的研究主要集中在三个方面...     

梭曼对大鼠周围消化功能的影响

梭曼对大鼠周围消化功能的影响于桂华王玉琛何湘平刘传缋（军事医学科学院毒物药物研究所，北京１００８５０）动物实验中发现，肌注梭曼可明显抑制大鼠摄食活动，且持续时间较长［１］．为探讨梭曼抑制摄食与其对周围胃肠道作用的关系，本实验从运动，分泌和吸收三个方面...     

梭曼异构体气相分析及兔血中的消除动力学

建立梭曼手性异构体气相色谱分析方法以研究兔静脉染毒后血中游离梭曼的消除过程 .采用大进样量气相色谱仪及手性毛细管柱实现梭曼 4个异构体的分离 ;用二异丙基氟磷酸酯作内标 ,测定兔静脉染毒后血中游离C(± )P(- )梭曼 .结果可见梭曼 4个异构体在确定的气相色谱条件下得到了较好地分离 ;给兔iv梭曼 4 3.2 μg·kg- 1后 ,血中仅测到一对C(± )P(- )梭曼 ,其消除过程符合二室开放模型 ,Vd=2 .1L·kg- 1,t1/2α=4 .5s ,t1/2 β=72s ,AUC(15～ 3 0 0s) =2 .0 8mg·s·L- 1,CL(S) =2 1mL·kg- 1·s- 1,血中C(± )P(- )梭曼在血中消除过程反映了机体对梭曼毒性异构体的解毒过程 .结果说明 ,大进样量气相色谱分析方法测定兔静脉染毒血中C(± )P(- )梭曼消除的动力学过程 ,方法灵敏 ,可靠 ,重复性好 .     

可乐定对梭曼中毒的预防作用(英文)

研究了可乐定对梭曼中毒的预防作用 .结果显示试管内可乐定仅在高浓度 ( 1 - 1 0 mmol· L-1)时对 Ch E产生抑制 ,在小鼠体内 1 mg·kg-1,ip时对脑 Ch E也只产生轻微的抑制 .给小鼠先 ip可乐定对梭曼中毒小鼠脑和全血 Ch E活性无明显影响 ,却使中毒小鼠惊厥发生率及死亡率显著下降 .育亨宾可以明显对抗可乐定对梭曼中毒的预防作用 .说明 α2 肾上腺素受体可能介导了可乐定对梭曼中毒的预防作用 .     

补硒与锌对梭曼中毒大鼠乙酰胆碱酯酶活力和抗氧化力的影响

目的　探讨抗氧化剂硒 (Se)和锌 (Zn)预防梭曼中毒的可能性。方法　雄性大鼠 4 0只 ,按体重随机分为正常对照组、染毒组、硒治疗组、锌治疗组。正常对照组和染毒组每日 5mL·kg- 1的生理盐水(NS)ig ;硒治疗组每日 1mg·kg- 1Na2 Se0 3的NS液ig和锌治疗组每日 4mg·kg- 1Zn(C6 H11O7) 2 的NS液ig ,共ig 9d。d 10除正常对照组外其余各组大鼠均sc 0 .9LD50 梭曼 ,2h后断头处死并取样 ,测定大鼠全血乙酰胆碱酯酶 (AChE)活性及血清、大脑、肝脏的超氧化物歧化酶 (SOD)活性、总抗氧化力 (T AOC)和一氧化氮合酶 (NOS)活性。结果　梭曼中毒大鼠后 ,染毒组大鼠全血AChE活性被明显抑制 ,血清、大脑、肝脏的SOD活性、T AOC显著下降 ,NOS含量明显升高 ,而硒和锌预防组大鼠对梭曼引起的AChE、SOD、NOS活性和T AOC变化明显减轻。结论　提示硒和锌对梭曼中毒有较好的预防作用     

维生素A和维生素E对梭曼染毒大鼠自由基损伤的预防作用

目的　探讨梭曼染毒自由基损伤及维生素A(VA)和维生素E(VE)对该损伤的保护作用。方法　实验设对照组 ,梭曼染毒模型组及VA 和VE 实验组。在梭曼染毒前 ,对照组和梭曼染毒模型组ig处理过的菜子油 (1mL·kg- 1·d- 1) ,VA 及VE 实验组分别按VA2mg·kg- 1和VE2 .5mg·kg- 1的剂量ig ,共 9d。d 10除对照组外 ,其余大鼠均用梭曼腹部sc(6 3μg·kg- 1) ,中毒 2h后宰杀取血和肝脏组织 ,观察大鼠血清和肝组织中相关指标的变化。结果　结果显示 ,染毒模型组AChE严重下降 ,血清和肝组织中MDA含量明显升高 ,血清和肝组织中SOD活性下降 ,全血和肝组织中GSH Px活性呈显著下降趋势。VA 和VE 实验组血清MDA含量下降 ,在血清和肝组织中SOD及全血和肝组织中GSH Px活性均上升。结论　梭曼染毒引起AChE活性严重下降 ,同时伴有严重的自由基损伤 ,染毒前大鼠用VA 和VEig处理 ,能够保护AChE活性 ,同时作为抗氧化剂的VA和VE 能保护梭曼染毒所致的自由基损伤     

不同种属动物血浆及红细胞与[~3H]梭曼结合的差异

目的　研究不同种属动物梭曼毒性差异是否与血浆及红细胞与梭曼结合差异有关。方法　 [3 H]梭曼结合饱和方法求出不同种属动物血浆及红细胞的Bmax值。结果　血浆及 1∶3(V/V)红细胞对 [3 H]梭曼的结合具有饱和性 ,血浆与 [3 H]梭曼结合的Bmax值大小依小鼠、大鼠、人及狗顺序递减 ,分别为16 6、36 .1、2 1.9和 10 .7nmol·L- 1。 1∶3(V/V)红细胞悬液与 [3 H]梭曼结合的Bmax值大小依大鼠、小鼠、狗及人顺序递减 ,分别为 73.3、4 8.8、35 .7和 35 .4nmol·L- 1。结论　不同种属动物血浆和红细胞与[3 H]梭曼结合的Bmax值的大小在一定程度上反映了梭曼毒性的种属差异。     

山莨菪碱对大鼠体内梭曼解毒的影响

通过测定大鼠血液中梭曼残留浓度及组织中羧酸酯酶(CaE)活性,评价了山莨菪碱对大鼠血液中梭曼消除的影响. 结果表明,415 μg·kg^-1梭曼(5 LD₅₀)iv后15 s时,山莨菪碱即显著加速了梭曼在大鼠血液中的消除,使血中梭曼浓度由(434±70)μg·L^-1下降到(342±47)μg·L^-1;CaE活性测定结果表明,山莨菪碱有加强梭曼抑制肠道及血浆中CaE的作用,提示山莨菪碱加速了梭曼在大鼠血液中的消除,可能与该药的改善外周微循环作用有关,使更多的梭曼向外周组织中分布,并增加了梭曼与外周组织中解毒酶特别是肠道CaE的结合所致.     

Interaction of Soman with {beta}-Cyclodextrin

Interaction of Soman with ß-CycIodextrin. DESIRE,B., AND SAINT-ANDRE, S. (1986). Fun-dam. Appl. Toxicol. 7, 646-657.Of the following neurotoxic agents, pinacolyl methylphospho-nofluoridate(soman), isopropyl methylphosphonofluoridate (sarin) and ethylN, N-dimethyl-phosphoramidocyanidate (tabun), only soman wasinactivated appreciably at pH 7.40 by ß-cyclodextrin.The interaction of soman, a mixture of four stereoisomers designatedas C(+)P(–), C(–)P(–), C(+)P(+), and C(–)P(+),with cyclodextrins was revealed by methods based on (i) theirreversible inhibition of acetylcholinesterase (AChE) thatis phosphonylated chiefly by P(–)-isomers of racemic somanand (ii) continuous titration of fluoride ions released by somanusing a fluoride-specific electrode. Soman and ß-cyclodextrinform a 1:1 complex. At pH 7.40 and 25°C the dissociationconstant Kd of this complex and the rate constant k2 of cleavageof soman by ß-cyclodextrin are (0.53 ± 0.05)mM and (5.9 ± 0.6) x 10² min¹, respectively. The rateconstant k₂^max for the cleavage of soman by monoionized ß-cyclodextrinhas a value of 2.8 x 103 min¹ and the second order rate constantk₂^max/K_d 5.3 x 106 M^–1 min^–1. Consequently, somanis hydrolyzed about 2500 times faster by the monoanion of ß-cyclodextrin,than by the hydroxide ion. The cleavage of P(–)-somanby ß-cyclodextrin as estimated by AChE inhibitionproceeds apparently at the same rate for the C(–)P(–)-and C(+)P(–)-isomers. However, the release of fluorideions indicated a stereospecific rate of reaction, the P(-Hsomersreacting faster than the P(+)-isomers. At pH 7.40, the inactivationrate of soman by ß-cyclodextrin was as fast in humanplasma in vitro as in Tris buffer. This interaction betweensoman and ß-cyclodextrin, and other data from theliterature, suggests that the introduction of catalytic or noncatalyticgroups on ß-cyclodextrin might possibly make it abetter catalyst for soman inactivation through improvement inthe catalytic or in the binding process.     

人血清对氧磷酶的部分纯化及解毒效应

目的　寻求对氧磷酶 (paraoxonase ,EC 3.1.8.1)作为外源性抗毒剂对抗G类有机磷毒剂的可能性。方法　采用亲和凝胶柱层析进行了人血清对氧磷酶的部分纯化 ,测定了其对于不同底物的米氏常数 (Km)以及钙离子对于酶活性的影响 ,比较了不同种属的对氧磷酶活性 ,采用体外解毒 ,体内染毒的方法检测了对氧磷酶对于不同的底物的作用。结果部分纯化的对氧磷酶对于梭曼和对氧磷均有较好的催化水解作用。以对氧磷为底物时 ,Km 值为 0 .2 2mmol·L- 1,比活性为 375 μmol·min- 1·g- 1蛋白 ;以梭曼为底物时 ,Km 值为 0 .6 0mmol·L- 1,比活性为 4 34μmol·min- 1·g- 1蛋白。不同种属来源的血清对氧磷酶的活性差异较大 ,是造成不同种属动物对有机磷毒剂中毒敏感性差别的原因之一。部分纯化的对氧磷酶在含 1mmol·L- 1CaCl2 的缓冲液中活性良好 ,加入乙二胺四乙酸 (EDTA)后 ,无论以对氧磷或梭曼为底物 ,酶活性均受到明显抑制 ,表明人血清对氧磷酶是钙离子依赖性酶。EDTA的pI50 约为 1.8mmol·L- 1。人血清对氧磷酶能有效地水解对氧磷、梭曼、沙林、塔崩及敌敌畏 ,但对VX及乐果无效 ,表明其对P F、P CN及P O键有选择性 ,对P S键无作用。结论　对氧磷酶可作为G类毒剂的抗毒剂     

Variable Effects of Soman on Macromolecular Secretion by Ferret Trachea

The purpose of this study was to examine the effect of the anticholinesteraseagent, soman, on macromolecular secretion by ferret trachea,in vitro We mounted pieces of ferret trachea in Ussing-typechambers. Secreted sulfated macro-molecules were radiolabeledby adding 500 µCi of ³³SO₄ to the submucosal medium andincubating for 17 hr. Soman added to the submucosal side produceda concentration-dependent increase in radiolabeled macromolecularrelease with a maximal secretory response (mean ± SD)of 202 ± 125% (n = 8) relative to the basal secretionrate at a concentration of 10^–7 m. The addition of either10^–6 M pralidoxime (acetyicholinesterase reactivator)or 10^–7 M atropine blocked the response to 10^–7m soman. At soman concentrations greater than 10^–7 M,secretion rate decreased and was not significantly differentfrom basal secretion. Additional experiments utilizing acetylcholineand the acetyicholinesterase inhibitor, physostigmine, suggestthat inhibition of secretion by high concentrations of somanmay be due to a secondary antagonistic effect of soman on muscannicreceptors.