温石棉与其3种天然代用纤维矿物粉尘体外细胞毒性的对比研究

目的比较温石棉与3种天然代用矿物纤维粉尘的体外细胞毒性,评价3种粉尘安全性。方法首先比较温石棉及代用纤维的化学组分、在悬液中的性质,其次进行巨噬细胞培养,以细胞死亡率、乳酸脱氢酶及超氧化物歧化酶活力及丙二醛含量变化来观察温石棉与代用纤维的毒性。结果温石棉与纤维水镁石因含较高的OH-表现出较强的细胞毒性,纤维坡缕石含较低的OH-表现出较低的细胞毒性,斜发沸石未含有OH-而未表现出细胞毒性。结论在温石棉的3种代用纤维中,斜发沸石对肺泡巨噬细胞是安全的。     

纤维水镁石与经铝剂处理的温石棉对巨噬细胞毒性比较

应用体外试验，比较了水镁石与经氯化铝处理后的两种温石棉（新康温石棉和四川温石棉）对豚鼠肺泡巨噬细胞的毒性作用。结果显示，经氯化铝处理后的温石棉所引起巨噬细胞产生的Ｏ２＾－、细胞膜脂流动性增加及细胞钾外漏等毒性指标变化，明显低于相同剂量的水镁石组（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）；引起肺泡巨噬细胞释放乳酸脱氢酶、酸性磷酸酶及致细胞死亡率等指标变化与水镁石组相近似。表明氯化铝拮抗温石棉的致病生物学活性有实     

纳米级水镁石纤维粉尘的体外细胞毒性研究

目的研究纳米级水镁石纤维粉尘的体外细胞毒性。方法收集大鼠肺巨噬细胞,培养后分别加入纳米级水镁石纤维粉尘、普通水镁石纤维粉尘、石英粉尘及生理盐水,测定肺巨噬细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活力。结果纳米级水镁石纤维粉尘的细胞存活率与对照组、普通水镁石纤维粉尘组比较明显降低,差异均有显著性(P<0.05或P<0.01),而与石英组比较明显升高,差异有显著性(P<0.01);LDH实验结果的变化与细胞存活率类似。结论纳米级水镁石纤维粉尘具有明显的细胞毒性,其细胞毒作用较普通水镁石纤维粉尘强,较石英粉尘弱。     

温石棉与岩棉及硅灰石纤维体外细胞毒性的比较

目的 研究温石棉(CA)与岩棉(RW)和硅灰石(WS)纤维的细胞毒性.方法 将V79细胞分为CA组、RW组及WS组3个实验及1个阴性对照组(200 μl PBS),CA、RW及WS粉尘终质量浓度为100 mg/L,噻唑蓝(MTT)法观察V79细胞存活率,用动力学法测乳酸脱氢酶(LDH)活力,用扫描电子显微镜观察粉尘对V79细胞形态的影响.结果 SiO2均为3种纤维的主要成分,WS中的SiO2含量最高,为50.83%.CA组、RW组、WS的细胞存活率分别为54.5%、64.8%、65.7%,RW组和WS 组的存活率明[显高于CA组,差异有统计学意义(P＜0.01),RW组和WS组的LDH活力[分别为(15.7±0.9)、(12.3±3.7)U/L]明显低于CA组[(20.2±0.9)U/L].差异有统计学意义(P＜0.05).CA组的V79细胞两端堆积大量颗粒状残余体,RW组和WS组V79细胞形态基本正常.结论 RW和WS对V79细胞的毒性低于CA.

Abstract：

Objective To study the cytotoxicity induced by chrysotile asbestos (CA), rock wool (RW)and wollastonite (WS). Methods V79 cells were divided into 4 groups. i.e. CA group, WS group, RW group and control group (200 μ1 PBS). The exposure concentration of dusts was 100 mg/L, The cell viability was detected by MTT and lactate dehydrogenate (LDH) activity assays. The technique of scanning electron microscopy was used to examine the change of V79 cells. Results SiO2 was main constituent for 3 kinds of dusts. In MTT assay, the cell viability of RW and WS groups was 64.8% and 65.7%, respectively, which were significantly higher than that (54.5%) of CA group (P＜0.01). In LDH assay, the LDH activity of RW and WS groups [(15.7±50.9),( 12.3±3.7)U/L, respectively] was significantly lower than that[( 20.2±0.9) U/L]of CA group (P＜0.05). In scanning electron microscopy examination, it was found that the two ends of V79 cells in CA group contained a great deal of fibers remaining bodies, but the V79 cell appearance in RW and WS groups was normal. Conclusion The cytotoxicity induced by RW and WS is significantly lower than that induced by CA for V79 cell.     

纤维矿物粉尘体外细胞毒性研究

许多矿物粉尘有潜在的生物化学作用 ,矿物粉尘若与生物体细胞产生较强的生物化学作用 ,即表现出生物活性。我们的前期研究结果认为 :矿物粉尘的生物活性与其表面的活性基团ＯＨ-呈正相关关系 ,本研究采用有机酸对纤维矿物粉尘进行减毒处理 ,为寻找矿物粉尘的表面安全改造剂 ,减少由该类矿物粉尘所造成的尘肺、肺纤维化等职业病及环境污染提供理论依据。1.材料 :4种纤维状矿物粉尘分别采自全国 4个不同矿区 ,经超声粉碎制成超细粉尘 ,各粉尘分散度均为 <15 μｍ纤维在 90 %以上 ,由西南科技大学中心实验室采用电化学方法测其ＯＨ-电导率的方…     

温石棉与纤维性石棉替代品离体细胞毒性对比研究

目的 研究温石棉与其4种人工代用纤维的细胞毒性,评价其安全性.方法 首先比较5种纤维的化学组分,其次进行中国仓鼠肺细胞(V79细胞)培养,观察细胞存活率、培养液pH值、乳酸脱氢酶(LDH)活力、葡萄糖(GLU)、钙(Ca)、镁(Mg)、硅(Si)、铁(Fe)的水平.结果 纳米二氧化硅(SiO2)细胞存活率最低,岩棉细胞存活率最高,与对照组相比,温石棉及4种代用纤维在pH、LDH活力、GLU、Ca、Mg、Si、Fe的永平上差异有不同程度的统计学意义,以纳米SiO2毒性最高,岩棉最低.结论 本次研究提示,从细胞毒性角度,岩棉有望作为温石棉人工替代品.     

不同产地的温石棉对V79细胞的毒性对比研究

[目的]评价我国青海茫崖、甘肃阿克塞、陕西陕南和四川新康的温石棉对V79细胞的毒性。[方法]采集我国四大矿区的4种温石棉,红外光谱分析其表面主要活性基团,X光荧光衍射分析仪分析主要化学成分。4种粉尘与V79细胞相互作用,比较4种石棉细胞存活率,测定培养液乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力、葡萄糖浓度及钙（Ca）、镁（Mg）、铁（Fe）、铝（Al）、硅（Si）元素含量。[结果]除四川新康温石棉无外羟基,其余3种温石棉的表面主要活性基团基本一致,化学组成主要是二氧化硅（SiO2）及氧化镁（MgO）,但含量不同。细胞存活率以陕南温石棉最高,茫崖温石棉最低,4种温石棉的LDH、葡萄糖及Mg含量比较,差异有统计学意义（P〈0.05,P〈0.01）,仅茫崖与阿克塞矿区温石棉Si含量差异有统计学意义（P〈0.01）;4种温石棉Ca、Mg、Fe、Al含量差异均无统计学意义。[结论]不同矿床所产的温石棉,因生成条件不尽相同,表现活性基团不同,则细胞的毒性亦不同。     

黄根抗石棉尘肺泡巨噬细胞毒性的研究

应用体外培养和扫描电镜技术探讨黄根抗石棉粉尘的细胞毒作用及主要作用方式。结果表明:黄根对兔肺泡巨噬细胞(PAM)未显示明显毒性;经黄根孵育过的PAM再与石棉粉尘作用时,(?)程度明显减轻,培养液中LDH活性仅是直接与石棉尘作用组的51.68％。提示黄根能在一定程度上增强PAM抗石棉尘毒性的能力,进而减轻了PAM自身的损伤。本实验为石棉肺的预防性给药提供了参考。     

温石棉与4种主要代用纤维在有机酸溶解特性与体外细胞毒性的机理研究

目的观察温石棉及4种主要代用纤维的有机酸溶解特性和V79细胞毒性,推测温石棉及代用纤维的致病机理。方法培养中国仓鼠肺细胞(V79细胞),MTT法检测细胞存活率;瑞姬氏染色检测细胞形态学;选择有机酸模拟人体弱酸性环境,溶解纤维粉尘24h,检测粉尘在有机酸溶解特性(pH值、电导率和溶蚀量)。结果温石棉及4种代用纤维对V79细胞具有细胞毒性,在不同有机酸中各粉尘组溶液的pH值、电导率和溶解量均不同,其变化趋势与其体外细胞毒性大小相关。结论温石棉及其代用品的不同有机酸溶解特性可能是其致细胞毒性的机理之一。     

纳米水镁石纤维的细胞毒性与致纤维化作用

目的　研究纳米水镁石纤维的细胞毒性与致纤维化作用。方法　收集Wistar大鼠肺泡巨噬细胞, 培养后分别加入纳米水镁石纤维、普通水镁石纤维、石英粉尘及生理盐水, 测定肺泡巨噬细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活力和酸性磷酸酶(ACP)活力。对大鼠经气管内一次注入上述各组粉尘悬液(每鼠1 ml,含粉尘50 mg), 分别于染尘后2, 4, 6个月处死大鼠, 测定大鼠肺湿重、肺干重、肺体积、肺胶原蛋白含量等指标, 并观察肺组织的病理改变。结果　纳米水镁石纤维组的细胞存活率为(62 40±8 48)%, 明显低于阴性对照组和普通水镁石纤维组(P<0 01), 而明显高于石英组(P<0 01); 纳米水镁石纤维2, 4, 6 月组的肺胶原蛋白含量分别为(48 78±10 69), (69 53±15 36), (80 65±13 95)mg, 与阴性对照组和普通水镁石纤维组相比, 差异无显著性(P>0 05), 而明显低于石英组(P<0 01)。结论　纳米水镁石纤维具有明显的细胞毒性, 其细胞毒作用较普通水镁石纤维强, 但明显要弱于石英粉尘; 致纤维化能力较弱, 与普通水镁石纤维无明显差异, 也明显弱于石英粉尘。     

温石棉与吸烟对肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的影响

为探讨石棉与吸烟对人体健康影响的机制，用Ｇｒｅｉｓｓ法测定了温石棉及香烟烟雾溶液分别与共同作用下肺泡巨噬细胞（ＡＭ）产生的ＮＯ终产物ＮＯ－２。结果显示：温石棉可使ＡＭ产生的ＮＯ－２明显增加，且有剂量－效应关系，但烟溶液不能使ＡＭ产生的ＮＯ－２增加或减少，在两者共同作用时，烟溶液反而抑制温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ－２。当测定ＡＭ的吞噬功能时，发现烟溶液可明显抑制ＡＭ的吞噬功能。提示：烟溶液对温石棉诱导ＡＭ产生ＮＯ具有抑制作用，这种作用主要是由于其抑制了ＡＭ吞噬温石棉的能力造成的     

Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的缓解作用

目的 探讨Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞氧化损伤的影响。方法 应用支气管灌洗的方法获得大鼠肺泡巨噬细胞(AM),纯化后与终浓度50μg／ml的温石棉分别孵育2h和4h,在孵育的同时加入不同浓度的Oncolyn,检测AM中DNA损伤状况以及抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性。结果 肺泡巨噬细胞与温石棉共同培养2h后,DNA损伤和SOD、GSH—Px活性增加,表现出彗星出现率和DNA迁移长度增加;当培养4h后,彗星出现率比培养2h更高,DNA迁移长度不再增加,而SOD、GSH-Px活性均下降。在AM与温石棉作用的同时加入不同浓度的Oncolyn后,DNA损伤减轻,抗氧化酶SOD、GSH—Px的活性上升。结论 Oncolyn对温石棉所致肺泡巨噬细胞的氧化损伤有一定的缓解作用。     

桦木尘和柞木尘对大鼠肺泡巨噬细胞分泌细胞因子的影响

为研究体外桦木尘（ＢＤ）和柞木尘（ＯＤ）对大鼠肺泡巨噬细胞（ＡＭ）分泌细胞因子的影响，从支气管肺泡灌洗液中分离３０只Ｗｉｓｔａｒ大鼠的ＡＭ，进行体外培养，分别以不同剂量的ＢＤ或ＯＤ（１００、１５０、２００、２５０μｇ／ｍｌ）诱导ＡＭ，于不同时间（４、２４、４８、７２小时），检测ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα的活性。结果显示：ＢＤ和ＯＤ诱导ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα，其活性均高于或明显高于对照组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），而ＢＤ组与ＯＤ组相比，也有不同或明显不同（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。在２００μｇ／ｍｌ的时间曲线中也显示ＢＤ组高于或明显高于ＯＤ组（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。提示：ＢＤ和ＯＤ均能刺激ＡＭ分泌ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－６和ＴＮＦα的活性增加，而ＢＤ较ＯＤ更为明显。     

In vitro effects of incinerator fly ash on pulmonary macrophages and epithelial cells

Fly ash from a municipal waste incinerator was used as a model for atmospheric particles in order to identify parameters relevant for the induction of adverse health effects. The aim of this study was to compare the biological effects of the total incinerator fly ash (IFA), the soluble and the insoluble fraction with the effects of quartz by in vitro toxicity studies. The previously sized fly ash (< 20 microns) was characterized by elemental composition and particle size distribution. The particles were administered to rat alveolar macrophages (NR8383) and human bronchial epithelial cells (BEAS-2B) at different amounts via the medium. The total IFA and its insoluble fraction were shown to induce cytotoxicity and cytokine release in a dose-dependent manner. The soluble fraction was nearly unable to induce cytotoxicity and TNF-alpha release but showed potent induction of IL-8 release in BEAS-2B cells at increasing concentrations. Quartz caused similar effects compared to IFA in NR8383 but was less effective in BEAS-2B.     

番茄红素对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞影响

目的观察番茄红素对急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响。方法以0．5，1．0，3．0mg／（kg·bw）的番茄红素连续给雄性Wistar大鼠灌胃30d，用脂多糖制造大鼠急性肺损伤模型，分别在1，4，6h后支气管肺泡灌洗，检测肺泡巨噬细胞吞噬功能、细胞计数以及肺相对重等指标。结果在各剂量番茄红素作用下，肺泡巨噬细胞吞噬功能明显增强，与模型组相比，注射脂多糖1h后，喂饲番茄红素组吞噬功能增强，增强率分别为11．2％，27．9％，38．1％；4h后，增强率分别为5．9％，4．4％，17．0％；6h后，增强率分别为16．6％，15．2％和21．9％。番茄红素3个剂量组之间呈剂量-反应关系（P〈0．05）。结论番茄红素在0．5，1．0，3．0mg／（kg·bw）剂量下能增强肺泡巨噬细胞的吞噬功能。     

温石棉和石英引起肺组织细胞因子表达的比较研究

目的研究温石棉和石英对肺组织细胞因子表达的影响。方法用免疫组织化学法观察了温石棉和石英染尘后两个月内大鼠肺组织ＰＤＧＦ－Ｂ、ＴＧＦ－β１、ＴＮＦ－α表达水平的变化。结果石棉和石英均可引起这三种细胞因子的表达增加，但石棉诱导的细胞因子表达比石英更强、更持久。结论细胞因子，尤其是ＴＧＦ－β１的过度表达可能在石棉的致肿瘤过程中起一定作用。