氯化甲基汞对不同发育阶段大鼠脑组织c—Jun表达的影响

目的：探讨氯化甲基汞（ＭＭＣ）对发育脑组织损伤的机理。方法：将Ｗｉｓｔａｒ系妊娠大鼠于妊娠７￣１０ｄ连续灌胃给予ＭＭＣ ４ｍｇ／ｋｇ,取Ｐ１（ｐｏｓｔｎａｔａｌ ｄａｙ １）,３,５,７,１０,１５仔鼠脑组织制备常规组织切片,采用免疫组织化学法检测ｃ－Ｊｕｎ表达。结果：对照组发育阶段仔鼠大、小脑有ｃ－Ｊｕｎ表达。随着出生后时间延长,大,小脑ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞数下降,并且ｃ－Ｊｕｎ阳性细胞上有典型凋     

宫内接触甲基汞对发育阶段大鼠脑神经细胞凋亡和细胞周 …

目的：探讨宫内接触甲基汞所致脑发育神经细胞损伤的机理。方法：对妊娠７￣１０ｄ的大鼠每天灌胃给予４ｍｇ／ｋｇ氯化甲基汞。对２０ｄ胎鼠和出生１￣７ｄ幼鼠的脑组织行流式细胞术定量分析。结果：（１）宫内接触甲基汞可诱导初生期大鼠脑神经细胞凋亡。（２）宫内接触甲基汞对脑神经细胞周期有一定的影响。结论：宫内接触低剂量甲基汞是以诱导凋亡的方式致脑神经细胞损伤。     

氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响

目的 :探讨氯化甲基汞 ( MMC)对发育大鼠小脑组织转录因子 CREB DNA结合活性的影响。方法 :将妊娠大鼠于妊娠 7～ 1 0 d连续 4d每日灌胃给予氯化甲基汞 4mg· kg-1,取生后 1、3、7、1 4d大鼠小脑组织提取核蛋白。采用凝胶移位法观察 MMC对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响。结果 :对照组和实验组各发育阶段小脑组织 CREB在凝胶移位电泳中均呈现两条迟滞带 ;对照组和实验组 P1 - 7大鼠幼仔小脑 CREB DNA结合活性随生后发育时间延长呈下降趋势 ;实验组大鼠幼仔小脑 CREB DNA结合活性均高于相应对照组。结论 :CREB参与大鼠脑发育的调节 ;甲基汞所致发育脑组织损伤可能与其引起 CREB DNA结合活性升高有关。     

氯化甲基汞对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响

目的:探讨氯化甲基汞(MMC)对发育大鼠小脑组织转录因子CREB DNA结合活性的影响.方法:将妊娠大鼠于妊娠7～10 d连续4 d每日灌胃给予氯化甲基汞4 mg*kg-1,取生后1、3、7、14 d大鼠小脑组织提取核蛋白.采用凝胶移位法观察MMC对发育阶段大鼠小脑转录因子CREB DNA结合活性的影响.结果:对照组和实验组各发育阶段小脑组织CREB在凝胶移位电泳中均呈现两条迟滞带;对照组和实验组P1-7大鼠幼仔小脑CREB DNA结合活性随生后发育时间延长呈下降趋势;实验组大鼠幼仔小脑CREB DNA结合活性均高于相应对照组.结论:CREB参与大鼠脑发育的调节;甲基汞所致发育脑组织损伤可能与其引起CREB DNA结合活性升高有关.     

氯化甲基汞对不同发育阶段小鼠脑组织神经元c-fos基因表达的影响

目的:探讨氯化甲基汞(Methylmercury chloride,MMC)对不同发育阶段小鼠大、小脑组织神经元c-fos表达的影响.方法:选用1、4、8、16、28天龄和成年(P1、P4、P8、P16、P28、AD)雄性昆明系小鼠,实验组腹腔注射10 mg*kg-1 MMC,对照组腹腔注射同体积的生理盐水,染毒后各天龄组小鼠按下述时间点在麻醉状态下取脑组织, P8组小鼠在30、45、60、120和180 min时间点及其余各组在45 min时间点迅速取脑组织,常规石蜡包埋,采用原位杂交法观察MMC对大、小脑神经元c-fos基因表达的影响.结果:P8小鼠大脑和小脑c-fos mRNA阳性细胞率在第30分钟时开始增加,45 min时间点最高,随着时间的延长逐渐减少;P8实验组45 min阳性表达率小脑高于大脑(P<0.05);45 min时间点实验组大脑和小脑c-fos mRNA阳性细胞率随小鼠天龄的增加而减少;P1、P4、P8天龄组大脑阳性细胞率高于对照组高(P<0.05);P1、P4、P8、P16、P28天龄组小脑阳性细胞率高于对照组 (P<0.05).结论: MMC可诱导小鼠大、小脑神经元c-fos基因表达,这可能是MMC神经损伤的机理之一.     

氯化甲基汞对小鼠脑组织神经元 c-fos 表达的影响

目的     

氯化甲基汞对大鼠发育不同阶段脑染色质结构的影响

本文用Hewish和Burgoyne法分离纯化大鼠脑细胞核,采用脑细胞核缺口翻译分析法,探讨孕鼠于妊娠器官发生期,经腹腔连续给予5天氯化甲基汞(2mg/kg体重)后,对大鼠发育不同阶段脑染色质结构的影响。实验结果表明,接触氯化甲基汞组大鼠脑细胞核,分别经DNase 1和EcoR 1核酸内切酶消解后,进行核缺口翻译测定,生后3天大鼠脑细胞核,分别经两种酶处理后,其~3H—dAMP掺入量均明显低于相应未接触氯化甲基汞对照组。氯化甲基汞对大鼠发育过程中脑染色质结构的影响,可能与胎、幼鼠对甲基汞神经毒性的易感有密切关系。     

长期接触氯化甲基汞对大鼠不同发育阶段仔鼠海马NMDA受体2A亚单位表达的影响

目的：探讨氯化甲基汞(MMC)对不同发育阶段大鼠幼仔海马组织N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2A亚基(NR2A)表达的影响。方法：体重为(120±20)g雌性大鼠随机分为对照组和实验组,连续90 d每天分别进食含不同剂量MMC(0.75、1.50和3.0 mg•kg^-1)的饲料后,取其生后7、14、21和28 d的仔鼠海马组织提取NR2A蛋白,采用Western blotting法观察MMC对不同发育阶段大鼠幼仔海马组织NR2A表达的影响。 结果：对照组和实验组各发育阶段仔鼠海马组织都有NR2A的表达,生后14 d达到高峰。实验组大鼠幼仔在生后7、14、21和28 d海马组织NR2A表达与对照组相比均有不同程度的减少。结论：NMDA受体参与中枢神经系统发育的调节;甲基汞所致发育阶段脑损伤可能与其引起NMDA受体表达降低有关。     

宫内接触甲基汞对发育阶段大鼠脑神经细胞凋亡和细胞周期影响的研究

目的 :探讨宫内接触甲基汞所致脑发育神经细胞损伤的机理。方法 :对妊娠 7～ 1 0 d的大鼠每天灌胃给予 4mg/ kg氯化甲基汞。对 2 0 d胎鼠和出生 1～ 7d幼鼠的脑组织行流式细胞术定量分析。结果 :1宫内接触甲基汞可诱导初生期大鼠脑神经细胞凋亡。 2宫内接触甲基汞对脑神经细胞周期有一定的影响。结论 :宫内接触低剂量甲基汞是以诱导凋亡的方式致脑神经细胞损伤。     

Effect of c-Jun NH2-terminal kinase-mediated p53 expression on neuron autophagy following traumatic brain injury in rats

Background  Activation of c-Jun NH₂-terminal kinase (JNK) has been implicated in neuron apoptosis as well as autophagy in response to various stressors after traumatic brain injury (TBI). However, the underlying molecular pathway remains unclear. Our study assessed whether JNK-mediated p53 phosphorylation might be an important mechanism for enhancing neuron autophagy in response to TBI.

Methods  A total of 186 male Sprague-Dawley (SD) rats (300–350 g) were used in this study. By randomized block method rats were randomly divided into four groups: sham-operated (n=46), TBI (n=60), TBI + dimethyl sulfoxide (DMSO) (n=40), and TBI + SP600125 (n=40). JNK was treated with SP600125, a specific JNK inhibitor. JNK, p-P53, Beclin-1, damage-regulated autophagy modulator (DRAM) and p-bcl-2 were evaluated by Western blotting analysis. The cellular localization and expression of Beclin-1 and DRAM was observed by immunofluorescence and immunohistochemistry, and the expression of Beclin-1-Bcl-2/Bcl-xL complexes was evaluated by immunoprecipitation. Multiple-group comparisons were conducted using analysis of variance (ANOVA). P values of less than 0.05 were considered statistically significant.

Results  It was observed that the expression of JNK, p-P53, Beclin-1, DRAM and p-bcl-2 was increasing after TBI, and the expression of Beclin-1 and DRAM was mainly located in the cytoplasm of neurons. But these were significantly inhibited in SP600125 group compared with sham group and TBI+SP600125 group (P <0.05). The expression of Beclin-1-Bcl-2/Bcl-xL complexes was reduced after TBI.

Conclusion  JNK-mediated p53 phosphorylation might be an important mechanism for enhancing neuron autophagy in response to TBI.

     

阿片类镇痛药对发育期大脑神经毒性作用的研究进展

 阿片类药物是临床常用的镇痛药,主要通过激动中枢神经系统特定部位的阿片受体产生镇痛作用。而对于发育中的大脑,阿片受体和内源性阿片肽在神经元和胶质细胞的增殖、分化及存活中起重要调节作用。围产期孕妇或婴幼儿应用阿片类镇痛药可能会干扰正常的内源性阿片通路,影响神经细胞的发育。目前,国内外对于阿片类镇痛药的神经毒性作用仍有争议,本文综述了近年来阿片类镇痛药对发育期大脑神经毒性作用的研究进展。     

不同发育阶段大鼠脑髓鞘化的研究

目的 研究大鼠不同发育阶段脑髓鞘化的发展及规律.方法 应用LFB髓鞘染色、MBP免疫组化及Wes-tern blot观察不同发育阶段大鼠脑髓鞘的分布及变化.结果 LFB及MBP免疫组化染色E18、P0、P2均未见着色,P7大鼠胼胝体中部少量LFB着色,P15两种染色均呈阳性,P30着色加深,与P90、P720类似.通过Western blot检测MBP蛋白在孕中后期已有表达,出生后随日龄增长逐渐增加,至老年期表达量最高.结论 大鼠脑髓鞘化从P15已经开始,P30接近成熟;观察髓鞘的最佳时间在30 d以后.     

甲基汞对小鼠睾丸生殖细胞周期的影响

目的:研究甲基汞对小鼠睾丸生殖细胞周期的影响.方法:采用流式细胞术技术观察小鼠睾丸生殖细胞周期的变化.结果:随着甲基汞染毒剂量的增加,G0/G1期细胞没有明显变化;S时相细胞的百分数逐渐减少,甲基汞1/50 LD50和1/10 LD50组S时相细胞百分数与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05);G2/M时相细胞百分数则显著增加,各染毒剂量组与阴性对照组比较差异有显著性(P<0.05).结论:不同剂量的甲基汞可以引起S时相细胞百分数减少,DNA合成受到抑制,并出现G2期细胞阻滞.     

新生大鼠缺氧缺血再灌注后海马神经元凋亡与c-Jun蛋白的表达检测

目的:检测新生大鼠缺氧缺血再灌注后即刻早期基因c-jun的表达与海马神经元的凋亡.方法:49只7d龄SD大鼠经弹性管穿线阻断右颈总动脉3 h,予低氧1 h,制备缺氧缺血脑损伤(HIBD)模型,并于再灌注3 h、6h、12 h、24 h、48 h、96 h、7 d处死大鼠,取脑组织.采用免疫组织化学SABC法检测海马CA1、CA3区c-Jun蛋白的表达.采用TUNEL染色法计数海马CA1、CA3区凋亡神经元.8只7 d龄SD大鼠仅手术不行HIBD及再灌注(对照组).结果:海马CA1、CA3区c-Jun的表达和凋亡细胞数于HIBD再灌注3 h、6 h、12 h、24 h、48 h、96 h均高于对照组(P＜0.05),c-Jun的表达于再灌注6 h达高峰,锥体神经元凋亡于再灌注24 h达高峰.再灌注7 d组c-Jun蛋白的表达及凋亡细胞数与对照组相比差异均无统计学意义.结论:c-Jun可能参与轻度HIBD后神经元的凋亡与修复.     

改善全麻药发育期神经毒性的研究进展

 全麻药在孕、产妇及婴幼儿的应用非常广泛。有关啮齿类、哺乳类及非人灵长类的基础研究表明,全麻药可对发育中大脑产生神经毒性,造成神经细胞凋亡和神经发育受损。因此,探究改善全麻药发育期神经毒性的措施及机制对于制定临床麻醉方案,指导产科及儿科麻醉具有重要意义。本文主要综述近年来改善全麻药发育期神经毒性的研究进展,涉及的措施包括应用麻醉辅助药、内分泌激素类药物、植物提取物及营养类物质等。     

产前糖皮质激素应用对胎鼠脑发育的影响

目的:探讨产前应用不同剂量糖皮质激素(antenatal corticorsteriod theray,ACT)对胎鼠脑发育的影响.方法:对怀孕第17天的SD大鼠每天肌注地塞米松0.8 mg/kg,肌注1次的为1剂组、肌注3次的为3剂组和肌注4次的为4剂组,没有使用地塞米松的为对照组.对各组孕鼠所生的胎鼠,分别于生后第1、第7和第14天测量体重、全脑重量、脑细胞凋亡情况并与对照组作比较.结果:实验组胎鼠的体重、全脑重量较对照组明显下降,尤以4剂组最明显;脑细胞凋亡数3剂组、4剂组与对照组在第1天有差别,第7天和第14天差别减弱.结论:ACT对胎鼠的体重、全脑重量、脑细胞凋亡等产生不良影响,剂量越大副作用越明显.     

大鼠不同发育期脑神经元核抗原的表达研究

目的研究正常大鼠不同发育阶段脑神经元核抗原(neuronal nuclei,NeuN)的表达。方法应用免疫组化及West-ern blot观察不同发育阶段大鼠NeuN的表达及变化。结果各发育阶段大鼠脑皮质及海马NeuN免疫组化阳性染色细胞随日龄逐渐增加,积分光密度值P0、P2、P7、P15各组之间比较差异有统计学意义。P15、P30、P90 3组间差异无统计学意义。Westernblot检测各组全脑NeuN相对光密度值随大鼠日龄逐渐增大,至P30达高峰,其后有所下降。除P15、P30组之间差异无统计学意义外,其余各组之间差异均有统计学意义。结论大鼠脑NeuN蛋白自出生时已有少量表达,P2~P15迅速增加,P30已达高峰,提示大鼠脑灰质发育优先于白质。     

溶解红细胞对大鼠脑出血后脑水肿的影响

目的：研究溶解红细胞对脑出血后脑水肿的影响.方法：运用立体定向技术分A、B、C 3组制作大鼠脑出血模型,向大鼠基底节分别注入50μl生理盐水、自体全血、溶解红细胞.观察各组大鼠脑组织病理改变、脑含水量和伊文斯兰含量的变化以及血红素环解加氧酶（HO-1）阳性细胞表达及细胞凋亡程度变化.结果：A、B、C 3组脑含水量（%）,伊文斯兰含量（μg/g）,HO-1染色阳性细胞数,凋亡染色阳性细胞数均依次增高,3组间比较差异具有统计学意义（P＜0.05）.B、C组均可见脑细胞高度水肿,细胞间隙明显增大,C组最明显,B组次之.结论：溶解红细胞能造成脑损伤,脑出血后脑水肿的形成与溶解红细胞具有密切关系.     

HO-1对抗汞引起的肾细胞凋亡

目的探讨血红素氧合酶-1(HO-1)对汞引起肾细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法64只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、单纯染汞组、HO-1诱导组和HO-1抑制组,每组16只。先分别腹腔注射生理盐水、空白液、血晶素、锌原卟啉Ⅸ(ZnPPⅨ)预处理,8 h后处死各组内半数鼠取肾查HO-1表达水平,余鼠除对照组注射生理盐水外,其余3组均腹腔注射HgCl2(2 mg.kg-1),24 h后检测血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及肾内总抗氧化能力(TAOC)、丙二醛(MDA)、Bcl-2蛋白表达水平与细胞凋亡指数(AI)。结果与对照组比较,单纯染汞组TAOC降低而MDA、Cr、BUN、Bcl-2表达水平和AI均明显增加(P<0.01),HO-1抑制组除Bcl-2表达受抑外,其余指标的变化与单纯染汞组相似,但更为显著。HO-1诱导组与单纯染汞组及HO-1抑制组比较,TAOC及Bcl-2表达均显著升高,而MDA、Cr、BUN及AI则明显降低(均P<0.01)。结论HO-1通过抗氧化、上调Bcl-2蛋白表达水平而对抗汞引起的肾细胞凋亡作用。