八肽胆囊收缩素对大鼠大脑皮质蛋白激酶CI知性的影响

目的：探讨胆囊收综素受体（CCK receptor)在中枢神经系统的信号传递机制。方法：采用分离的大鼠大脑皮质神经细胞，观察CCK8，CCKA受体拮抗剂L－364，718和CCKB受体拮抗剂L－365，260对大鼠大脑皮质蛋白激酶C（PKC）活性的影响，结果：CCK8在10^-11-10^-6mol/L范围内可刺激PKCI知性的增加，超过10^-6mol/L后，逐渐趋于饱和，CCKA受体拮抗剂L－364，718，CCKB受体拮抗剂L－365，260均可根据剂量的大小不同程度地抑制CCK8引起的PKC活性改变，但两者IC50相差60倍，L－365，260在较低浓度时即能明显拮抗CCK8引起的PKC活性变化。结论：本研究结果提示，CCK8可能通过CCKB受体引起PKC活性变化，而PKC可能是CCKB受体的重要信号传递机制之一。^     

八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导神经元死亡的损坏抗作用及机制研究

以谷氨酸、ＮＭＤＡ作用原代培养的大鼠大脑皮层神经元，随药物浓度递增，作用时间延长，细胞存活率逐渐下降。八肽胆囊收缩素对谷氨酸、ＮＭＤＡ诱导的神经元死亡具有明显的拮抗作用，在其浓度为１×１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ时其拮抗率为７７．８±４．４％和７５．４±６．７％，ＣＣＫＢ受体拮抗剂Ｌ－３６５２６０可完全阻断八肽胆囊收缩素的保护作用，而ＣＣＫＡ受体拮抗剂Ｌ－３６４７１８无此作用。应用Ｆｕｒａ－２荧光技术测定     

八肽胆囊收缩对谷氨酸神经毒性的拮抗作用

目的；探讨八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对谷氨酸神经兴奋毒性的作用。方法；采神经元原代分离培养技术，应用电镜观察经不同药物处理后的大鼠大脑皮层神经元的形态学变化，同时测定细胞上清液中ＬＤＨ活性值，并进行ｔ检验等统计学分析。结果；ＣＣＫ－８能明显改善由谷氨酸诱导的神经元结构的破坏和减少神经元损伤后的ＬＤＨ的释放，该作用可被ＣＣＫＢ受体拮抗剂阻断。结论；ＣＣＫ－８可通过Ｂ受体介导产生对谷氨酸神经毒性的所     

腹腔与侧脑室注射八肽胆囊收缩素对大鼠中枢催产素含量的影响

采用放射免疫测定法比较腹腔注射和侧脑室注射八肽胆囊收缩素(CCK-8)后中枢各脑区及脊髓内催产素含量的变化.结果表明,腹腔注射CCK-8可使垂体、下丘脑、桥脑及脊髓内催产素含量明显增加(P<0.05,P<0.01);侧脑室注射CCK-8后,仅垂体内催产素含量增加(10min后P<0.05,20min后P<0.01),其他脑区及脊髓内催产素(OXT)含量未见有统计学意义的变化(P>0.05).提示CCK-8对中枢脑区及脊髓内OXT含量增加的影响以外周性传入机制为主.     

杏仁核内微量注射八肽胆囊收缩素对大鼠胃内压和胃运动的影响

向大鼠杏仁基底内侧核（ＢＭＡ）内微量注射八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）、ＣＣＫ受体阻断剂（Ａ型或Ｂ型），进行胃内压和胃运动的记录和分析。结果如下：ＣＣＫ－８（５０ｎｇ／１μｌ）注射后胃内压（ＩＧＰ）和胃蠕动频率（ＧＭＦ）显著下降（Ｐ＜０．０１）；单独微量注射ＣＣＫ－Ａ受体阻断剂Ｌ３６４７１８（１００ｎｇ／１μｌ）或ＣＣＫ－Ｂ受体阻断剂Ｌ３６５２６０（１００ｎｇ／１μｌ），对胃内压和胃运动无明显影响；先给Ｌ３６４７１８（１００ｎｇ／１μｌ）再给予ＣＣＫ－８，则ＩＧＰ，ＧＭＦ的抑制不再出现；先给Ｌ３６５２６０则ＣＣＫ－８对ＩＧＰ和ＧＭＦ的抑制仍出现；在ＢＭＡ附近，如终纹连合部（ＢＳＴＩＡ）和杏仁皮质核（ＰＬＣｏ）内注射ＣＣＫ－８均不出现胃内压、胃运动的抑制作用。提示，ＢＭＡ内ＣＣＫ－８对胃运动、胃内压有抑制作用，这种抑制作用与ＢＭＡ内的ＣＣＫ－Ａ受体有关，而ＣＣＫ－Ｂ受体可能不参加此抑制作用。     

八肽胆囊收缩素对抗吗啡对大鼠离体十二指肠电与机械活动的影响

本实验采用同步描记离体十二指肠电与机械活动的方法，探讨了八肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对抗吗啡对大鼠离体二二指肠电与机械活动的影响及其机制。实验结果表明，乙酰胆碱（ＡＣｈ）可使大鼠离体十二指肠电活动的峰电位振幅增大，数目增多，其收缩幅芳随之增大，呈正变关系。吗啡能抑制ＡＣｈ的此种作用，使电痊和收缩活动发生负变。ＣＣＫ－８可选择性对抗吗啡的这种抑制作用。     

八肽胆囊收缩素对谷氨酸诱导神经元死亡的拮抗作用及机制研究

以谷氨酸、ＮＭＤＡ作用原代培养的大鼠大脑皮层神经元，随药物浓度递增，作用时间延长，细胞存活率逐渐下降。八肽胆囊收缩素对谷氨酸、ＮＭＤＡ诱导的神经元死亡具有明显的拮抗作用，在其浓度为１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ时其拮抗率为７７８±４４％和７５４±６７％。ＣＣＫＢ受体拮抗剂Ｌ－３６５２６０可完全阻断八肽胆囊收缩素的保护作用，而ＣＣＫＡ受体拮抗剂Ｌ－３６４７１８无此作用。应用Ｆｕｒａ－２荧光技术测定新生大鼠大脑皮层神经元细胞内游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ），八肽胆囊收缩素可明显抑制ＮＭＤＡ诱导的神经元［Ｃａ２＋］ｉ升高，在浓度为１×１０－７ｍｏｌ／Ｌ时其抑制率为９５７％。结果显示：八肽胆囊收缩素可能通过其Ｂ受体产生拮抗谷氨酸神经兴奋毒性作用，抑制Ｃａ２＋内流是其产生拮抗作用的机制之一。     

八肽胆囊收缩素对兔创伤性休克的影响

目的观察静注入肽胆囊收缩素（ＣＣＫ－８）对创伤性休克时平均动脉压（ＭＡＰ）及心率（ＨＲ）的影响。方法家兔若干分组分别静注ＣＣＫ－８、生理盐水（ＮＳ）及ＣＣＫ－８加丙谷胺（ＰＲＯＧ）动脉放血后用木榔头打击后腿股三角肌打击１～２ｍｉｎ后致ｍＡＰ下降至６．７～８ｋＰａ时停止，记录休克时ＭＡＰ及ＨＲ。结果ＣＣＫ－８可使创伤性休克兔ＭＡＰ显著升高，持续３０分钟以上，ＨＲ变化无统计学意义，２小时存活率达１００％，而丙谷胺加ＣＣＫ－８对创伤性休克兔的ＭＡＰ和ＨＲ值无明显影响。结论静注ＣＣＫ－８能加速创伤性休克时ＭＡＰ的恢复，并且此过程可能是通过ＣＣＫ－８受体而实现的。     

大鼠大脑皮质胆囊收缩素受体的体外结合分析法研究

用Ｂｏｌｔｏｎ－Ｈｕｎｔｅｒ试剂联结法标记胆囊收缩素（ＣＣＫ８）,得１２５Ｉ－ＢＨ－ＣＣＫ８,其比放射性为３．４ＴＢｑ／ｍｍｏｌ,放射化学纯度大于９６％。取其与自制的大鼠大脑皮质细胞膜进行受体放射分析,发现标记配体与大鼠大脑皮质ＣＣＫ受体的结合具有温度和时间依赖性,可饱和性,可逆性及特异性。经Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析获大鼠大脑皮质细胞膜ＣＣＫ受体Ｋｄ值为１．０９８ｎｍｏｌ／Ｌ,Ｂｍａｘ为１９７．５ｆｍｏｌ／ｍｇ蛋白。     

建立大鼠糖尿病模型研究替米沙坦对大鼠肾脏内氧化应激的抑制作用及对其蛋白激酶C的影响

目的 探讨替米沙坦对2型糖尿病大鼠肾脏氧化应激（OS）和蛋白激酶C（PKC）活性的影响。方法 将实验动物分为正常对照组、糖尿病组及替米沙坦治疗组。检测各组第4、5、11、17周的血糖、血胰岛素、血脂（TG、TC）,11、17周的血肌酐（Scr）、血尿素氮（BUN）、尿微白蛋白排泄率（UAE）、肾组织中丙二醛（MDA）含量、铜,锌-超氧化物歧化酶（Cu,Zn-SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化酶（GSH-Px）及PKC活性。结果 与糖尿病组相比,替米沙坦治疗组血糖、血胰岛素及血脂无明显变化。而Ser、BUN、UAE、肾脏MDA含量、肾细胞膜PKC均明显下降,肾脏抗氧化酶活性（Cu,Zn-SOD、CAT、GSH-Px）则明显上升。做相关性分析发现肾脏内MDA含量的变化及抗氧化酶活性的变化与细胞膜、细胞质PKC活性的变化相关。结论 替米沙坦可以抑制2型糖尿病大鼠肾脏内的氧化应激,并且这种抑制作用可能与其下调蛋白激酶C活性有关。     

二尖瓣病变患者左房心肌总蛋白激酶C活性及亚类含量的变化

目的　探讨二尖瓣病变患者左房心肌总蛋白激酶 C(PKC)活性及 PKCα、β亚类含量与心房颤动(AF)之间可能存在的关系。方法　 35例患者分为四组 ,A组 :二尖瓣狭窄 (MS)伴 AF;B组 :为窦性心率 (SR)的二尖瓣狭窄 ;C组 :二尖瓣关闭不全 (MR)伴 AF;D组 :为 SR的二尖瓣关闭不全。分别检测各组总 PKC活性及 PKCα、PKCβ亚类含量。结果　各组间总 PKC活性无明显差异 (P>0 .0 5 )。伴有 AF的二尖瓣病变患者 (MS或 MR)其左房心肌 PKCα含量低于 SR的二尖瓣病变患者 (MS或 MR) ;而 PKCβ含量却高于 SR的二尖瓣病变患者 ,但上述差异尚未达到统计处理的显著性水平 (P>0 .0 5 )。结论　左房心肌总 PKC活性与二尖瓣病变患者 AF发生的关系不明显 ,但左房心肌 PKC亚类含量水平的变化与 AF的关系值得进一步研究     

兔心肌细胞蛋白质中可能的PKCε直接底物的鉴定

目的：利用PKCε酶促放射性磷酸化标记兔心肌细胞蛋白质，鉴定出其可能的直接底物。为进一步研究奠定基础。结果：通过PKCε特异底物竞争抑制、PKCε特异抑制剂Ro31—8220、兔心肌细胞蛋白质热变性等分析措施，初步用PKCε酶促放射性磷酸化标记，从兔心肌细胞蛋白质中鉴定出表观分子量为57kd，35kd，23kd和20kd的蛋白质的磷酸化与PKCE酶活性相关，其中57kd，23kd和20kd3种蛋白质可被PKCε在体外直接磷酸化，并且其磷酸化不受蛋白激酶抑制剂PD98059和SB320358的影响。结论：57kd，23kd和20kd种蛋白质有可能是PKCε直接底物。     

蛋白激酶C和蛋白酪氨酸激酶活性对缺血再灌注心肌细胞凋亡影响的实验研究

为探讨缺血预适应（Ｉｓｃｈｅｍｉｃ Ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ,ＩＰ）早期以及蛋白激酶Ｃ（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｃ,ＰＫＣ）及蛋白酷氨酸激酶（Ｐｅｏｔｅｉｎ Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｋｉｎａｓｅ,ＰＴＫ）激动剂和抑制剂对缺血再灌注（Ｉ／Ｒ）心肌细胞凋亡的影响以及ＩＰ效能发挥通路中央ＰＫＣ和ＰＴＫ的关系。用ＴＵＮＥＬ法检测Ｉ／Ｒ心肌细胞凋亡。结果显示：１、ＩＰ早期能显著降低Ｉ／Ｒ心肌细胞凋亡（     

抗抑郁药物对慢性应激抑郁模型大鼠海马蛋白激酶C表达的干预作用

目的探讨氟西汀与噻奈普汀对慢性应激模型大鼠海马蛋白激酶C(PKC)表达的影响。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为抑郁模型组、氟西汀组、噻奈普汀组和正常对照组,各15只。模型组、氟西汀组和噻奈普汀组大鼠给予21 d的应激刺激,此期间正常对照组正常饲养,刺激期间氟西汀组每天灌胃氟西汀(10 mg/kg),噻奈普汀组每天灌胃噻奈普汀(50 mg/kg),模型组和正常对照组大鼠每天灌胃等体积的0.9%氯化钠注射液。行为学检测应用开场法和液体消耗实验。采用Western-blotting法检测各组大鼠海马PKC的表达情况。结果应激后,模型组大鼠水平穿越格数、竖立次数、修饰次数、糖水消耗百分比均显著低于正常对照组(P<0.01);氟西汀组水平穿越格数、竖立次数、修饰次数和糖水消耗百分比均显著高于模型组(P<0.05);噻奈普汀组糖水消耗百分比显著高于模型组(P<0.05)。在Western-blotting法检测中,模型组大鼠海马PKC的表达水平显著低于正常对照组(P<0.01);氟西汀组大鼠海马PKC的表达水平显著高于模型组(P<0.01),与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);噻奈普汀组大鼠海马PKC的表达水平显著高于模型组(P<0.01),但仍显著低于正常对照组(P<0.01)。结论氟西汀可以逆转慢性应激抑郁模型大鼠海马中PKC表达的降低;噻奈普汀可以部分逆转慢性应激抑郁模型大鼠海马中PKC表达的降低。     

蛋白激酶C在人绒毛膜癌JAR细胞中作用的研究

目的：研究蛋白激酶C(protein kinaseC，PKC)对人绒毛膜癌JAR细胞分泌人绒毛膜促性腺激素(hCG)的影响，进一步探讨PKC在调控JAR细胞hCG分泌中的作用。方法：不同浓度的PKC激动剂phorbol 12—myristrate l3—acetate(PMA)急性和慢性刺激、PKC抑制剂chelerythrine chlorine(CHEL)分别作用JAR细胞，用ELASA法测定hCG分泌量变化，以及蛋白印迹(Western blot)法测定细胞内磷酸化丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase，MAPK)的改变。结果：不同浓度PMA急性刺激时，抑制JAR细胞hCG分泌，在200nmol/L时，其抑制作用最强；不同浓度PMA慢性刺激时，JAR细胞hCG分泌量增加，在200nmol／L时，其作用最强。CHEL作用JAR细胞时，hCG分泌量升高，在600nmol/L时，其作用最强。对照组及各实验组都有活性的MAPK的表达，与对照组相比，PMA慢性刺激组、CHEL组MAPK磷酸化水平升高;PMA急性刺激组MAPK磷酸化水平降低。结论：PKC参与调节JAR细胞hCG的分泌，活性升高时，下调MAPK磷酸化，使JAR细胞hCG分泌减少，而活性降低时，增强MAPK磷酸化，JAR细胞hCG分泌量增加。MAPK通路激活是PKC介导的JAR细胞分泌hCG的重要机制。     

低浓度铅对鼠脑海马神经细胞蛋白激酶C的影响

目的：为了探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，测定染铅鼠脑海马区神经细胞的ＰＫＣ活性的改变。方法：用慢性染铅Ｗｉｓｔａｒ大鼠为动物模型，用［γ－２３Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定ＰＫＣ活性。结果：染铅鼠海马神经细胞内胞浆ＰＫＣ活性明显升高（Ｐ＜０．０１），胞膜ＰＫＣ活性亦升高，但无统计学意义。结论：神经细胞胞浆ＰＫＣ对铅有高度敏感性，可能是铅致神经毒性作用的关键调节物。     

福辛普利干预对阿霉素大鼠蛋白激酶C及心肌重塑的影响

目的探讨福辛普利对阿霉素大鼠蛋白激酶C（PKC）表达与心肌胶原重塑的影响。方法将32只SD大鼠随机分为正常对照组（NC组,n=8）、模型组（ADM组,n=12）及福辛普利组（F组,n=12）,ADM组和F组制作心肌重塑模型,观察心肌的病理学改变;检测大鼠心肌组织PKC的表达及Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原的表达并计算二者比值。结果F组大鼠大部分心肌组织损伤较ADM组明显减轻。F组心肌组织PKC表达,Ⅰ、Ⅲ型心肌胶原的表达及Ⅰ／Ⅲ比值较ADM组降低,但较NC组升高。结论PKC参与阿霉素诱导大鼠心肌纤维化。福辛普利干预能改善阿霉素诱导大鼠心肌纤维化,其机制可能与影响大鼠心肌细胞PKC表达有关。     

aFGF和Genistein对AGZY-83A细胞内PKC活性及[Ca~(2 )]i的影响

目的 :探讨 a FGF及 TPK抑制剂 Genistein对 AGZY- 83A细胞内 PKC活性及游离 Ca2 浓度的影响。方法 :用不同浓度的 a FGF和 Genistein诱导 AGZY- 83A细胞 ,(γ- P32 ) - ATP标记的 Histone 为底物 ,液体闪烁测定PKC活性 ;Fura- 2 / AM负载荧光光度法测定细胞内游离 Ca2 浓度。结果 :a FGF诱导后 ,细胞内 PKC活性及 Ca2 浓度升高 ,且与 a FGF呈剂量依赖效应。Genistein抑制细胞内 PKC活性及 Ca2 浓度 ,也呈剂量依赖效应。Genistein对 a FGF诱导的 PKC活性抑制更显著。结论 :进一步证明 PKC和 Ca2 确是 TPK的下游信号分子。