二黄胶囊对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠细胞免疫的影响

目的观察二黄胶囊对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠(EAE)细胞免疫的影响。方法皮下注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)与完全弗氏佐剂(CFA)混合的抗原,辅以腹腔注射百日咳毒素(PTX),建立EAE模型。造模后每天记录各组小鼠体质量及神经功能评分;用流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞;采用HE染色进行脑组织病理学观察。结果模型组小鼠造模后第9天陆续发病,第22天达到高峰,发病急性期(造模后第25天)T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+明显比正常组增高(P<0.01),CD4/CD8比值也有所升高(P<0.05);发病缓解期(造模后第40天)T淋巴细胞亚群CD8+和NK细胞明显下降(P<0.05);病理检查发现EAE小鼠脑组织神经元细胞核固缩,小静脉周围炎性细胞浸润形成袖套样改变。二黄胶囊治疗后,EAE小鼠神经功能评分比模型组明显降低(P<0.05),脑组织炎性浸润程度减轻,发病急性期外周血T淋巴细胞亚群CD4+/CD8+比值显著降低(P<0.01);恢复期T淋巴细胞亚群(CD3+、CD8+)及NK细胞明显增加(P<0.05)。结论二黄胶囊可在EAE小鼠发病的不同时期通过调节T淋巴细胞亚群(CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+)及NK细胞而起到防治EAE作用。     

CD-1遗传背景小鼠EAE模型:遗传背景对临床表现的影响

目的:制作不同基因背景小鼠自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型,比较不同遗传背景小鼠发病?神经功能评分和病理变化的差异?方法:用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白抗原(MOG35-55)免疫C57BL/6和CD-1基因背景小鼠,用完全弗氏佐剂作为抗原载体,并在不同时间点用精制百日咳毒素增强免疫效果,建立自身免疫性脑脊髓炎模型;记录小鼠发病时间与表现,每天进行神经功能评分,并取其脑和脊髓组织进行病理学检查和以CD4?IL-17为靶标的免疫组化染色?结果:C57BL/6组小鼠发病高峰期出现于初次免疫后17~25 d,表现典型的拖尾?单侧或双侧后肢瘫痪等改变,神经功能评分在3分左右;CD-1组小鼠发病高峰期较C57BL/6组推迟,出现于免疫后35~40 d,可见相似的拖尾及偏瘫表现,神经功能评分在2.8分左右?病理检查可见C57BL/6模型小鼠脑?脊髓出现炎症性细胞浸润,而CD-1小鼠的炎性改变相对较轻?且主要出现于脊髓;罗克沙尔固蓝染色法鉴定显示,模型小鼠脑脊髓组织出现脱髓鞘病变,以C57BL/6小鼠更为严重?免疫组织化学法显示2种模型小鼠发病高峰期均存在不同程度的CD4+及IL-17+ 炎性细胞的浸润?结论:不同的遗传背景对EAE模型发病?临床表现和病理改变有明显影响;CD-1小鼠亦可运用于制作慢性迁延性EAE模型,更符合人类多发性硬化的特点?     

来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠T细胞亚群及Th1型细胞因子的影响

目的 探讨来氟米特（Leflunomide,LEF）对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）小鼠模型发病防治作用及可能的免疫学机制.方法 将30只雌性C57BL/6小鼠随机分为EAE对照组及高、低剂量LEF防治组,每组10只.通过注射髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55 （MOG35-55）免疫介导构建EAE模型.从造模前3d开始起EAE对照组及高、低剂量LEF防治组分别予以生理盐水8 mg/（kg·d）、LEF 2 mg/（kg·d）灌胃,连续10d.观察小鼠发病情况及外周血中T细胞亚群及IFN-γ、IL-2水平的变化.结果 LEF各防治组小鼠临床症状较轻,发病高峰期外周血T细胞亚群CD4＋、CD8＋分布比例较EAE对照组明显升高（P＜0.01）,CD4＋/CD8＋值明显降低（P＜0.01）;发病高峰期外周血IL-2、INF-含量较EAE对照组明显降低（P＜0.01）,且高剂量降低更明显（P＜0.01）.结论 LEF对EAE具有防治作用,效果与LEF剂量有关,其防治作用可能与调节T淋巴细胞亚群分布及抑制IFN-γ、IL-2水平有关.     

α-黑素细胞刺激素对EAE豚鼠外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例的影响

目的探讨α-MSH对EAE发病保护作用及免疫学机制。方法 40只雌性豚鼠随机分为正常对照组、EAE对照组和EAE高、低剂量治疗组。采用粗制髓鞘碱性蛋白（cMBP）诱发急性EAE,EAE高、低剂量治疗组自造模前7d始分别按1mg/（kg.d）及0.25mg/（kg.d）予腹腔注射注射α-MSH直至试验结束。观察豚鼠神经功能障碍评分变化,并用流式细胞方法测定CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例。结果 EAE高、低剂量治疗组神经功能障碍评分较EAE对照组显著降低（P〈0.01,P〈0.05）,高剂量治疗组降低更明显（P〈0.05）。EAE对照组豚鼠发病高峰期外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例较正常对照组下降（P〈0.01）,高、低剂量治疗组CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例较EAE对照组升高（P〈0.01,P〈0.05）以高剂量治疗组升高最显著（P〈0.05）。EAE各组豚鼠发病高峰期外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg细胞比例与高峰期神经功能障碍评分呈负相关（r=-0.83,P〈0.05）。结论α-MSH对EAE豚鼠发病具有保护作用,其作用机制可能是通过增加外周血CD4＋CD25＋FoxP3＋Treg比例,增强对活化的自身反应性T细胞的抑制,发挥调节作用的。     

血管活性肠肽调控CD4~+CD25~+Treg/Th17平衡对实验性自身免疫性脑脊髓炎防治作用的影响

目的探讨血管活性肠肽(vocative intestinal peptide,VIP)调控CD4~+CD25~+Treg/Th17平衡对防治实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的影响。方法 60只健康雌性wistar大鼠随机分成正常对照组、EAE对照组、VIP低剂量防治组和VIP高剂量防治组。利用髓鞘碱性蛋白(MBP)~+完全福氏佐剂(CFA)诱导建立EAE模型。自造模当日起,每隔一日分别对VIP低、高剂量防治组大鼠腹腔注射VIP 4nmol/kg(0.2 m L)、16 nmol/kg(0.8 m L),正常对照组及EAE对照组注射0.8 m L生理盐水,连续10 d。观察大鼠发病情况;HE染色观察脑组织基本病理改变;流式细胞仪检测脾组织CD4~+CD25~+Treg、Th17细胞比例;ELISA法检测脑组织中TGF-β1、IL-17A因子含量变化。结果与EAE对照组比较,VIP各剂量防治组大鼠发病潜伏期延长、进展期缩短、发病高峰期神经功能障碍评分(NDS)降低;HE染色显示正常对照组大鼠脑组织中未见炎细胞浸润,VIP各剂量防治组大鼠脑组织中炎细胞浸润程度较EAE组明显下降;与EAE对照组比较,VIP各剂量组大鼠脾组织中CD4~+CD25~+Treg细胞亚群比例升高,Th17细胞亚群比例降低,且各组间存一定的量效关系;VIP各剂量组大鼠脑组织中TGF-β1含量较EAE组明显升高,IL-17A含量较EAE组明显降低,且各组间存在一定剂量依赖关系。结论 VIP通过上调CD4~+CD25~+Treg细胞比例,促进TGF-β1因子分泌,同时下调Th17细胞比例,抑制IL-17A因子表达,从而减轻脑组织炎症细胞的浸润程度,发挥对EAE的防治作用。     

人参皂苷Rg1抑制小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用及免疫机制

目的 观察人参皂苷Rg1对实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis, EAE）的抑制作用及其对脾淋巴细胞T细胞亚群和外周血细胞因子水平的影响。方法 采用C57BL/6小鼠皮下多点注射MOG35-55、百日咳毒素的方法复制EAE模型。将EAE小鼠随机分为模型组,人参皂苷Rg1低、中、高剂量组,同时设置正常对照组,每组6只。首次免疫后第10天予以不同剂量Rg1腹腔注射,连续给药14 d。第35天处死小鼠后取脊髓,观察各组小鼠脊髓炎症细胞浸润和脱髓鞘等病理变化,采用流式细胞仪检测小鼠脾淋巴细胞Th1、Th17、Treg细胞亚群,采用ELISA法检测外周血白细胞介素（interleukin,IL）-17A、干扰素γ（interferon gamma, IFN-γ）、IL-6、IL-10水平。结果 与模型组比较,人参皂苷Rg1低、中、高剂量组小鼠神经症状评分显著下降（P＜0.05）,脊髓炎症细胞浸润评分和脱髓鞘评分显著降低（P＜0.05）,脾淋巴细胞CD4+、CD8+、Th1、Th17 T细胞亚群比例显著降低（P＜0.05）,Treg（CD4+CD25+FoxP3+）比例显著升高（P＜0.05）,外周血IFN-γ、IL-17A、IL-16水平显著降低（P＜0.05）,IL-10水平显著升高（P＜0.05）,人参皂苷Rg1的作用呈现明显的剂量依赖性。结论 人参皂苷Rg1可显著改善EAE小鼠的临床症状,减轻中枢神经系统脱髓鞘和炎症细胞浸润,其作用可能与调控Th17、Th1、Treg细胞亚群失衡,抑制炎症细胞因子表达相关。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型的构建

目的 通过髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG_35-55)多肽两次免疫C57BL/6J小鼠,构建实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型。方法 将8周龄C57BL/6J雌性小鼠按随机数字表法分为EAE组和对照组,每组10只。EAE组采用MOG_35-55多肽与完全弗式佐剂混合后的抗原乳剂,于小鼠双侧腹股沟和后肢分4点皮下注射,首次免疫后6 d注射相同剂量的抗原乳剂加强免疫,并且于首次免疫后0、48 h腹腔注射百日咳毒素;对照组采用不含MOG_35-55多肽的CFA,其余方法同EAE组。观察两组小鼠的行为学表现并进行神经功能评分;免疫后第19天,取两组小鼠的脑和脊髓组织进行Black Gold髓鞘染色和髓鞘碱性蛋白(MBP)免疫荧光染色,检测其脱髓鞘情况;小胶质细胞特异性标志物(Iba-1)免疫荧光染色检测两组脑和脊髓组织中小胶质细胞的增殖活化情况。结果 EAE组小鼠在首次免疫后第12天左右开始发病,第19天症状达到高峰,随后开始缓解,发病率为100%,而对照组小鼠只在首次免疫后第14天出现短暂的尾巴无力症状。Black Gold髓鞘...     

雌激素对实验性自身免疫性脑脊髓炎的保护作用

目的 检测雌激素在小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)中的预防性治疗作用并初步探讨其体内作用机制.方法 用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)和完全弗氏佐剂(CFA)免疫C57BL/6J小鼠制备EAE模型;雌激素于建模始每日皮下注射50 μmol/L进行治疗,通过发病指数评分、脊髓病理分析、炎症因子水平检测,并应用流式细胞仪(FACS)及实时荧光定量PCR(qPCR)评价治疗效果;进一步通过分析小鼠脾细胞及脊髓相关功能分子CD4/PD-l、CD19/PD-L1、CD4/CD25/Foxp3、CD19/CD21/CD23及CD 19/CD5/CDl dhigh的表达变化,探讨雌激素可能的作用机制.结果 雌激素预防性治疗可有效延缓EAE小鼠的发病,减轻脱髓鞘病变.病理结果显示,雌激素治疗能减少小鼠脊髓组织炎性细胞的浸润,同时下调外周炎性因子TNF-a及IL-17A的分泌表达(P＜0.01);与模型组相比,雌激素治疗下调T淋巴细胞表面活化分子CD69的表达(P＞0.05)并可显著上调CD4+T细胞表面PD-1的表达(P＜0.05);同时,雌激素治疗后PD-1的配体CD19+B细胞表面PD-L1的表达明显上调(P＜0.01),脾细胞中CD19+CD21highCD23low(P＜0.01)及CD19+CD5+CD1dhigh(P＜0.01)的比例也有不同程度的升高,但对脾细胞中CD4+CD25Toxp3*的表达无明显作用.结论 雌激素预防性治疗可延缓EAE小鼠的发病进程,其作用机制可能与上调PD-1/PD-L1通路并上调调节性B细胞水平有关.     

实验性自身免疫性脑脊髓炎神经细胞内钙离子的变化及其意义

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneencephalomyelitis,EAE)发病初期及高峰期活体脑片内Ca2+荧光强度的变化,明确神经细胞内Ca2+的变化与病情演变的关系。方法采用激光共聚焦扫描显微镜(laserscanconfocalmicroscope,LSCM)对荧光探剂fluo3/AM负载的活体脑片进行观察,比较EAE发病初期组、高峰期组及正常对照组小鼠脑片的皮层、实质区域Ca2+的相对荧光强度。结果EAE发病初期组及空白对照组小鼠大脑皮层的Ca2+荧光强度均明显高于脑实质部位(P<0.05)、EAE高峰期组大脑皮层及脑内局灶区域的Ca2+相对荧光强度高于EAE初发病组(P<0.05)。结论EAE小鼠大脑皮层及脑内局灶区域均存在着神经细胞内的Ca2+内流,这种改变随着EAE病情的进展而增强。     

丁苯酞联合骨髓间充质干细胞治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的疗效及机制研究

目的 探索丁苯探索丁苯酞(3-n-butylphthalide,NBP)和骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)联合治疗小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的疗效和机制.方法 用髓鞘少突...     

不同剂量MoG35-55对EAE小鼠p—JAK1、BDNF表达的影响

目的：比较不同剂量髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55（myelin oligodendrocyte glycoprotein 35-55,MOG35-55）多肽片段免疫诱导 C57BL/6小鼠实验性变态反应性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）其磷酸化酪氨酸蛋白激酶1（phospho-Janus kinase 1,p-JAK1）,脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF）表达的变化。方法将 C57BL/6小鼠采用数字表法随机分为对照组、MOG35-5550μg（MOG-50）组和 MOG35-55200μg（MOG-200）组。 EAE 小鼠分别以每只动物50μg 或200μg MOG35-55的抗原皮下多点注射诱导造模,对照组乳剂中不含 MOG35-55。观察各组小鼠的发病率、病死率、体质量、神经功能评分的变化。并用 Western blotting 法检测酪氨酸蛋白激酶1（Janus kinase 1,JAK1）及 p-JAK1在皮质中的表达情况;免疫组织化学染色的方法检测 BDNF 在皮质中的表达情况。结果 MOG35-5550μg 和200μg 均能成功诱导 EAE 模型,并增强 p-JAK1的表达,减少 BDNF 的表达。其中 MOG-200组在体质量减轻、神经功能评分及 p-JAK1表达方面较 MOG-50组作用明显,且与对照组相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MOG-200组 p-JAK1、BDNF 变化明显,可以作为研究药物干预作用的理想模型。     

Protective effect of Tanreqing injection on axon myelin damage in the brain of mouse model for experimental autoimmune encephalomyelitis

ObjectiveTo evaluate the effect of Tanreqing injection on axon myelin in the mouse brain of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE).MethodsAn EAE model was established by myelin oligodendrocyte glycoprotein (MOG)_35-55 immunization in C57BL/6 mice. Mice were randomly divided into the following groups: normal, model, prednisone acetate (PA) (6 mg/kg), Tanreqing high dose (5.14 mL/kg), Tanreqing low dose (2.57 mL/kg). On the day of immunization, both Tanreqing groups were treated by intraperitoneal injection, with the PA group treated by intragastrical perfusion after T cell response, and the other groups treated with saline. Changes in body weight, neurological deficit score, incidence rate, mortality rate, and course of disease were observed for all mice. Brain tissue was isolated and stained with hematoxylin-eosin, and pathological investigations performed to evaluate axon myelin damage by transmission electron microscopy (TEM). Myelin basic protein and microtubule associated protein-2 were analyzed by immunohistochemistry.ResultsTanreqing injection significantly prolonged EAE latency and decreased the neurological deficit score, alleviated infiltration of inflammatory cells in the focus area, up-regulated hippocampal MBP expression at the acute stage and the remission stage, and increased microtubule associated protein-2 expression in the EAE brain to varying degrees in the acute stage. TEM analysis indicated that Tanreqing injection alleviates myelin damage in the EAE mouse and maintains the integrity of circular layer structures and alleviates axon mitochondrial swelling.ConclusionTanreqing injection alleviates EAE symptoms.     

mMIP-1α-DT390核酸制剂治疗实验性变态反应性脑脊髓炎的研究

目的 新型重组免疫毒素mMIP-1α-DT390核酸制剂对实验性变态反应性脑脊髓炎治疗的效果研究.方法 用MBP免疫C57BL/6小鼠诱发EAE,建立人多发性硬化症的动物模型.将构建的真核质粒SRα-mMIP-1α-DT390直接导入EAE模型小鼠C57BL/6肌肉,使重组免疫毒素在其骨骼肌内高效表达.通过对模型小鼠的临床症状的评分、病理切片所显示的中枢神经系统炎症细胞浸润的情况及流式细胞技术检测的外周T细胞的动态变化等指标对核酸制剂的疗效进行评估.结果 新型免疫毒素mMIP-1α-DT390核酸制剂治疗EAE模型小鼠,使小鼠临床症状得到改善:发病延迟、平均临床评分下降、症状严重程度降低;神经系统的病理切片显示治疗后小鼠的脑部活化的淋巴细胞浸润减轻;流式细胞仪检测结果显示治疗后小鼠外周血T细胞数量下降,而B淋巴细胞基本维持正常水平.结论 所有检测指标均提示该免疫毒素mMIP-1α-DT390核酸制剂可有效的治疗自身免疫性疾病.     

GBE 对COPD 大鼠血清和肺泡灌洗液中IL-1、IL-8 含量的影响

目的 探讨银杏叶提取物（GBE）对慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠血清和肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素1（IL-1）、白细胞介素8（IL-8）含量的影响。方法 将90 只清洁级Wistar 大鼠称重后,随机分为A、B、C、D、E、F 组,每组15 只。B、C、D、E、F 5 组采用烟雾吸入等复合因素复制COPD 大鼠模型;C、D 组分别在1 ～ 14 d 和29 ～ 42 d 用GBE 干预;E、F 组分别在1 ～ 14 d 和29 ～ 42 d 用红霉素干预,实验结束取各组大鼠肺动脉血和BALF,检测各组血清和BALF 中IL-1、IL-8 的含量。结果 A、C、D、E、F 组与B 组相比,血清中IL-1、IL-8 含量及BALF 中IL-1 含量低于B 组（P <0.05）。在降低血清IL-1 水平方面,早期GBE 干预优于晚期;在降低大鼠血清和BALF 中IL-1、IL-8 水平方面,GBE 与红霉素比较差异无统计学意义（P >0.05）。结论 GBE 具有抑制COPD 气道及全身炎症反应的作用。     

Fasudil对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠致脑炎性T细胞的免疫调节作用

目的：探讨法舒地尔(Fasudil)修饰的脾单个核细胞(mononuclear cells,MNCs)治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的疗效及可能的分子机制。方法：雌性C57BL/6小鼠采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35–55诱导,建立主动免疫EAE模型,免疫后第9天制备脾MNCs,和/无Fasudil培养。作用72 h后收集上述细胞,检测T细胞亚群的变化、Rho激酶(Rho kinase,ROCK)活性和细胞因子水平;以5×107个细胞/只小鼠腹腔注射诱导,建立被动转移EAE模型,并将小鼠分为PBS-MNCs组和Fasudil-MNCs组,每组8只。观察各组小鼠临床评分和体质量变化。结果：免疫第9天EAE小鼠脾致脑炎性MNCs可通过被动转移实验诱导EAE模型的建立,而体外Fasudil修饰的MNCs不能诱导EAE的发生;与PBS-MNCs组相比,Fasudil-MNCs组小鼠体质量减轻较少(P<0.05)。体外实验显示：Fasudil处理的MNCs ROCK活性降低(P<0.01);Fasudil可抑制IFN-γ和IL-17的CD4+T细胞比例(IFN-γ：P<0.01;IL-17：P<0.05),并增强TGF-β和IL-10的CD4+T细胞分泌(均P<0.001);此外,Fasudil可降低细胞因子IL-17水平(P<0.001)和增强细胞因子IL-10分泌(P<0.05)。结论：Fasudil介导的细胞治疗通过抑制辅助性T细胞1(helper T cell 1,Th1)和Th17炎性反应,促进Th2免疫调节作用,影响EAE的发生和发展。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型的建立及其病理学和影像学表现

目的：建立实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）小鼠模型并做病理学及影像学鉴定,为研究多发性硬化的发病机制奠定基础。方法：C57BL/6雌性小鼠80只,分为EAE1组、EAE2组、EAE3组、EAE4组,各15只,用MOG35-55抗原加完全弗氏佐剂不同注射方法制作EAE小鼠模型;佐剂组10只用生理盐水代替MOG35-55制备免疫乳剂,对照组10只仅注射生理盐水;用MRI对小鼠脑和脊髓进行扫描,HE、LFB染色和Bielschowskys银染观察小鼠脑和脊髓病理学改变。结果：免疫后第14天,EAE1组、EAE2组、EAE3组、EAE4组小鼠开始出现EAE临床症状,发病率分别为80%、80%、73%、67%;EAE2组、EAE3组小鼠临床症状评分与EAE1组比较,P〉0.05,EAE4组小鼠临床症状评分与EAE1组比较,P〈0.05;佐剂组与对照组小鼠均未出现临床神经系统症状;EAE小鼠脑和脊髓小血管周围炎细胞浸润呈袖套状或脱髓鞘改变,神经元变性及轴突损伤,MRI可显示脑和脊髓病灶。结论：应用背部、颈部、腋窝、蹊部多点注射可提高EAE发病率,1次免疫与两次免疫小鼠对EAE发病率的影响没有明显差别。     

PKA干预淫羊藿苷治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎对中枢神经CREB表达的影响*

目的 研究淫羊藿苷（ICA）治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）对环磷腺苷效应元件结合蛋白（CREB）的影响,并探讨ICA治疗的作用机制。方法 复制C57BL/6小鼠EAE模型,并将其分为3组,每组 6只。模型对照组：予生理盐水3?ml/d灌胃;ICA组：予以ICA 300?mg/（kg·d）灌胃;ICA+H89组：予以ICA 300?mg/（kg·d）灌胃并予以蛋白激酶A（PKA）特异性阻断剂H89 5?mg/（kg·d）腹腔注射;另取6只未经模型复制的C57BL/6小鼠同等条件下饲养作为正常对照组,予生理盐水3?ml/d灌胃。EAE小鼠在发病达高峰时开始给药,1次/d,连续给药5?d。每日进行神经损害评分,至给药结束后次日。给药结束后次日进行神经损害评分后处死小鼠,立即采集脊髓颈膨大部分进行Western blotting检测,检测CREB的表达。结果 ICA组小鼠神经损害表现明显改善,与治疗前比较差异有统计学意义（P?<0.05）,而ICA+H89组小鼠及模型对照组小鼠神经损害评分均无改善,治疗前后比较差异无统计学意义（P?>0.05）。模型对照组脊髓组织中CREB的表达较正常对照组降低（P?<0.05）。ICA组治疗后CREB的表达与模型对照组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,ICA组CREB的表达升高。但同时给予ICA与H89治疗的小鼠并不能提高脊髓组织中CREB的表达,与模型组比较差异无统计学意义（P?>0.05）。结论 ICA可能是通过PKA途径提高中枢神经系统中CREB的表达,从而发挥对EAE的治疗作用。     

黄藤素注射液抗脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用

目的 研究黄藤素注射液抗脂多糖致小鼠急性肺损伤的作用.方法 健康雄性成年昆明小鼠72只,随机分为6组:正常对照组;LPS组(气管滴入脂多糖LPS 5 mg/kg);氢化可的松组(腹腔注射氢化可的松3.3mg/kg,每日1次,连续3 d,第4天气管滴入LPS 5 mg/kg);黄藤素低、中、高剂量组(分别腹腔注射黄藤素2mg/kg、10 mg/kg和50 mg/kg,每日1次,连续3 d,第4天气管滴入LPS 5 mg/kg).在气管滴入LPS后24 h处死各组小鼠,部分小鼠取出肺组织进行称重计算肺系数,部分小鼠行支气管肺泡灌洗,对炎症细胞进行计数.结果LPS组小鼠肺系数明显高于正常对照组(P<0.05);氢化可的松组和黄藤素低、中、高剂量组小鼠肺系数明显低于LPS组(P<0.05).对于BALF中炎症细胞及中性粒细胞比例,LPS组明显高于正常对照组(P<0.01),与LPS组相比,氢化可的松组和黄藤素中剂量组和高剂量组明显降低(P<0.01).结论 黄藤素注射液能够明显减轻脂多糖致小鼠急性肺损伤炎症反应程度.