骨髓间充质干细胞治疗重症急性胰腺炎实验研究

目的 研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)移植对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)急性炎症反应的调控及组织修复的机制.方法 将40只大鼠随机分为正常组、SAP模型组、MSC移植组、MSC+粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)联合组.SAP大鼠注射EDU标记的MSC和G-CSF治疗SAP引起的急性重度胰腺损伤.通过检测MSC向内皮细胞、胰腺细胞分化的转化率,研究MSC对胰腺损伤的再生和修复作用;通过检测血清白细胞介素(IL)中的IL-6、IL-10的浓度以及淀粉酶的含量,研究MSC对SAP炎症介质的影响及急性炎症反应的调控机制.结果 MSC、MSC+ G-CSF组相对于SAP组血清淀粉酶浓度有不同程度的降低,炎性介质IL-6的变化趋势与血清淀粉酶一致,而细胞因子合成抑制因子IL10含量逐渐升高.流式结果显示有少量MSC转化为内皮细胞和胰腺细胞.结论 MSC不但能通过其在抗炎症介质释放、减轻急性免疫反应等方面的重要功能达到控制SAP急性炎症反应的作用,而且MSC还可通过分化为胰腺细胞和内皮细胞修复受损胰腺.     

骨髓间充质干细胞对急性重症胰腺炎大鼠的炎症抑制作用及对TLR4/NF-κBp65通路的关系

背景与目的:急性重症胰腺炎(SAP)为临床常见急危重症之一,炎症反应在其发生发展中发挥重要作用.目前认为骨髓间充质干细胞(MSC)移植具有修复SAP胰腺组织损伤潜能,但具体功能尚不清楚.本研究在SAP大鼠模型上探讨骨髓MSC对SAP炎症的抑制作用及机制.方法:分离、培养、鉴定SD骨髓MSC,并制成1.0×106/mL的...     

褪黑素干预大鼠重症急性胰腺炎的研究

重症急性胰腺炎(SAP)是临床上常见的危重疾病,病情进展迅速,早期干预重症急性胰腺炎成为目前重要的研究课题.近年来的研究表明,趋化因子在SAP发病机制中有重要作用,对趋化因子的调节可望成为SAP治疗新靶点.褪黑素(MT)可以下调炎症介质的表达,减轻急性炎症反应.本实验通过建立大鼠SAP模型,给予MT预处理,观察MT对SAP大鼠中趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、巨噬细胞炎性蛋白-2(MIP-2)表达的影响.探讨MT对大鼠SAP的保护作用及其可能作用机制.     

骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠肾损害干预的研究

目的 探讨骨髓间充质干细胞对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肾损害的干预效果及机制.方法 将鉴定过的骨髓间充质干细胞注射到SAP大鼠体内,观察血清淀粉酶、肌酐、尿素氮及肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1变化;透射电镜下观察肾脏间质毛细血管超微结构变化;免疫组织化学对肾脏AQP1定位;荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测肾脏水通道蛋白1(AQP1) mRNA变化,Western blot检测肾脏AQP1蛋白变化.结果 (1)培养的细胞经流式细胞术检测,CD29阳性细胞率为99.30％,CD90阳性细胞率为93.50％,CD34阳性细胞率为0.82％,CD45阳性细胞率为2.22％;(2)间充质干细胞干预后,SAP大鼠6、12、24h血清淀粉酶、肌酐、尿素氮及TNF-α、IL-1低于对应时间点未干预的SAP大鼠,两者差异有统计学意义(P＜0.05);(3)间充质干细胞干预后,SAP大鼠6、12、24 h肾脏间质毛细血管变化均轻于对应时间点未注射SAP大鼠;(4)间充质干细胞干预后,SAP大鼠12、24 h AQPl mRNA均高于对应时间点未干预的SAP大鼠,两者差异有统计学意义(P＜0.05);6、12、24 h AQP1蛋白均高于对应时间点未干预的SAP大鼠,两者差异有统计学意义(P＜0.05).结论 骨髓间充质干细胞能减轻SAP大鼠肾损害,其机制可能同抑制炎性因子表达,减轻间质毛细血管损害,阻滞肾脏AQP1表达下调有关.     

大承气汤和活血清胰汤对重型急性胰腺炎肺损伤治疗的实验研究

目的:研究重型急性胰腺炎(SAP)急性肺损伤的发生机制以及中西医结合治疗的机理.方法:应用大鼠重型急性胰腺炎模型,对比观察大承气汤(DT)、活血清胰汤(HQ)和善得定(SS)三种治疗方法对SAP模型大鼠肺泡巨噬细胞计数、活性以及巨噬细胞分泌的肿瘤细胞坏死因子(TNF)、白细胞介素-1(IL-1)和白细胞介素-6(IL-6)的影响.结果:SAP模型组肺泡巨噬细胞计数及活性、IL-1、IL-6和TNF明显高于对照组(P＜0.01),各治疗组肺泡巨噬细胞计数及活性、IL-1、IL-6和TNF明显低于SAP模型组(P＜0.05).结论:在SAP急性肺损伤中巨噬细胞聚集于肺泡并分泌大量细胞因子,大承气汤、活血清胰汤和善得定可以抑制肺泡巨噬细胞活化和分泌细胞因子,从而对SAP急性肺损伤起到保护作用.     

脂肪间充质干细胞对重症急性胰腺炎大鼠炎性损伤的调节作用

目的:探讨脂肪间充质干细胞(hADSC)对重症急性胰腺炎大鼠炎性损伤的调节作用以及相关机制。方法:将54只健康清洁级SD大鼠随机分为3组:正常对照组、SAP组、hADSC组,采用L-精氨酸溶液(20g/L)腹腔注射法建立重症急性胰腺炎(SAP)模型。SAP组、hADSC组分别通过尾静脉途径注入等量的PBS或hADSC,采用血清淀粉酶检测试剂盒(碘-淀粉比色法)检测血清淀粉酶水平;ELISA试剂盒检测血清TNF-α、IL-6水平;HE染色观察大鼠胰腺病理形态改变;实时定量PCR及免疫印迹法检测细胞核转录因子(NF-κB P65)表达情况。结果:SAP组大鼠血清淀粉酶、TNF-α、IL-6水平较正常对照组明显升高(P0.01),HE染色可见胰腺细胞水肿、坏死,炎性细胞大量浸润;NF-κB P65蛋白及m RNA表达显著上调(P0.01);hADSC组血清学指标较SAP组显著降低(P0.05),HE染色可见胰腺组织炎性损伤情况明显改善,Westernbolt及RT-qPCR结果显示NF-κB P65表达较SAP组显著下调(P0.05)。结论:hADSC能够抑制重症急性胰腺炎大鼠炎性反应水平,减轻胰腺炎性损伤,此过程可能与下调NF-κB P65表达有关。     

骨髓间充质干细胞对急性出血坏死性胰腺炎大鼠血清细胞因子浓度的影响

白细胞过度激活及细胞因子级联反应是引起重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)全身炎症反应综合征、多器官功能衰竭以至死亡的重要原因.本文通过观察骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)对急性出血坏死性胰腺炎大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-10浓度变化以及胰腺组织形态学改变、肺功能的影响,初步探讨BMSCs在急性出血坏死性胰腺炎炎症早期的治疗作用及机制.     

重症急性胰腺炎严重并发症5例诊治分析

重症急性胰腺炎(SAP)的病死率仍高达20.00％～23.00％,特别是SAP的亚型暴发性急性胰腺炎(FAP)的病死率可高达42.00％～53.57％,并且治疗无章可循,SAP患者中约25％为FAP、SAP或FAP并发腹腔室隔综合症、胰腺脑病(PE)、多器官功能障碍时其病死率可高达62.50％ ～75.00％[¨.我们收治5例SAP的严重并发症诊治,现报道如下.     

急性胰腺炎外周血中性粒细胞凋亡及XIAP表达的意义

目的 探讨急性胰腺炎(AP)外周血中性粒细胞(PMN)的凋亡及X连锁凋亡抑制蛋白(XI-AP)的表达意义.方法 采用流式细胞仪分别测定重急性胰腺炎(SAP)组,轻症急性胰腺炎(MAP)组和正常对照(NC)组外周血PMN的凋亡情况,采用RT-PCR和Western Blotting技术测定各外周血PMN中XIAP mRNA及蛋白的表达,分析PMN凋亡及XIAP表达与疾病严重程度的关系.结果 PMN凋亡SAP组为(2.15±0.40)%,MAP组(4.16±0.14)%,NC组为(4.31±0.12)%,SAP组和MAP组PMN凋亡较NC组明显减少(P<0.05),而SAP组PMN凋亡显著少于MAP组P<0.01).SAP及MAP组XIAP mRNA的表达较NC组增加(P<0.05),而SAP组显著高于MAP组(P<0.01).各组PMN XIAP蛋白水平与其mRNA水平一致.结论 IAP可能参与介导SAP外周血PMN的凋亡延迟,且与疾病的严重程度有关.     

骨髓间充质干细胞治疗大鼠重症急性胰腺炎的实验研究

目的:研究骨髓间充质干细胞(bmMSCs)在重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型治疗中的应用。方法:经胆管逆行注射牛磺胆酸钠诱导形成大鼠SAP模型。将大鼠随机分为5组:对照组、SAP组、SAP+bmMSCs(尾静脉)组、SAP+bmMSCs(腹腔)组和SAP+bmMSCs(尾静脉+腹腔)组,每组18只。在bmMSCs注射各组,诱导SAP后3 h分别通过尾静脉、腹膜内和尾静脉加腹膜内途径注射用DAPI标记的bmMSCs。分别在实验开始后的第24、48、72 h分别处死6只大鼠,并收集胰腺组织和血液,测定其中血清抗炎细胞因子(IL-10)和炎症细胞因子(IL-1β、TNF-α、IL-6)的水平。光学显微镜下观察胰腺的病理变化,同时在荧光显微镜下检测DAPI标记的体内bmMSCs分布。结果:与对照组相比,SAP组大鼠的胰腺组织有明显的出血、水肿、炎症和坏死。与SAP组相比,3种方式bmMSCs移植组胰腺的炎症、水肿、出血和坏死均明显减少(P0.05)。在3种方式bmMSCs移植组中,bmMSCs显著降低促炎细胞因子(TNF-α、IL-6和IL-1β)的水平,但是增加了SAP大鼠的抗炎细胞因子(IL-10)水平(P0.05)。在SAP+bmMSCs(尾静脉+腹腔)移植组中,TNF-α、IL-6和IL-1β水平进一步降低,IL-10水平进一步升高(P0.05);同时,在该组中观察到更多的bmMSCs存在。结论:与腹腔注射法相比,通过尾静脉+腹腔注射或尾静脉注射bmMSCs,可以观察到更多的bmMSCs存在于胰腺组织中,大鼠恢复的更好。     

脂氧素A4对重症急性胰腺炎大鼠肺组织一氧化氮表达的影响

重症急性胰腺炎(Severe Acute Pancreatitis,SAP)急性肺损伤(Acute Lung Injury,ALI)多见,SAP继发ALI率高达60％ ～ 70％,并成为SAP的主要死亡原因之一.脂氧素( lipoxin,LX)是近年来发现的一种内源性抗炎介质,产生于炎症后期,能促进炎症反应的及时消退[1].本研究就脂氧素对SAP继发的肺损伤是否有治疗作用作一探讨.     

高原重症急性胰腺炎大鼠肾脏病理损害及肾功能变化研究

有关不同海拔高度重症急性胰腺炎(SAP)并发急性肾功能损害时肾脏病理改变的报道甚少,我们对不同海拔高度SAP大鼠不同病程阶段肾脏病理改变进行了观察,并测定了肾功能,以探讨高原低氧环境对SAP肾脏损害的影响.     

重症急性胰腺炎患者QT间期离散度的临床意义

目的 探讨QT间期离散度(QT interval dispersion,QTd)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)患者早期心脏损害的诊断价值及其预后判断意义.方法 对收治具有完整心电图资料的58例SAP(SAP组)及189例轻型急性胰腺炎(MAP组)患者资料进行回顾性分析,另选60例门诊健康体检者的心电图作为健康对照组.分别测定12导联心电图QT间期,并计算QTd、心率校正QTd(heart rate corrected QTd,QTcd).结果 SAP组较MAP组及健康对照组QTd、QTcd显著延长(P＜0.01),MAP组较健康对照组QTd、QTcd无明显延长(P＞0.05).结论 QTd、QTcd对SAP患者的早期心脏损害有较大诊断价值,对SAP患者的预后也有较大帮助,可作为评价SAP患者心功能状态的一项辅助指标.     

动态检测血清白介素-18对急性胰腺炎病情及预后评价的意义

目的 探索急性胰腺炎患者血清中自介素-18(IL-18)水平变化情况,及其与患者入院时APACHE Ⅱ评分及患者预后之间的关系.方法 按照急性胰腺炎的临床诊断及分级标准分组选择AP患者34例,其中重症胰腺炎(SAP)患者12例,轻型急性胰腺炎(MAP)患者22例,正常对照组16例.用ELISA法检测血清IL-18浓度.结果 血清中IL-18浓度在MAP和SAP两组患者之间均存在统计学差异(P<0.01),SAP组明显高于MAP组,且IL-18水平动态变化与APACHEⅡ评分呈正相关.结论 血清IL-18参与了急性胰腺炎的炎症反应过程,可以作为预测急性胰腺炎严重程度的指标.     

重症急性胰腺炎器官功能维护重要性及实施方案

<正>急性胰腺炎(acute pancreatitis, AP)按照临床病情可分为轻症急性胰腺炎(mild acute pancreatitis, MAP),中重症急性胰腺炎(moderately severe pancreatitis, MSAP)和重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。SAP的特点即为持续性(48 h)的器官功能衰竭(单个或多个器官)。在SAP早期,难以控制的全身性瀑布式炎症反应不     

丙酮酸乙酯在大鼠重症急性胰腺炎肝损伤的作用机制

重症急性胰腺炎(SAP)发病急、进展快、病死率高.在临床中合并肝损伤高达85.06%[1].目前研究认为炎性细胞因子在SAP并发肝损伤发挥了重要作用.抑制炎症因子产生有可能减轻肝损伤.丙酮酸乙酯(EP)具有良好的抗炎作用,本文探讨其在SAP并发肝损伤的作用机制.     

血清降钙素原与C-反应蛋白检测在重症急性胰腺炎诊断中的应用价值

目的 探讨血清降钙素原(PCT)与C-反应蛋白(CRP)检测在重症急性胰腺炎(SAP)诊断中的应用价值.方法 选取2019-01—2020-06间濮阳县人民医院收治的38例SAP患者作为SAP组,选取同期在该院行体检的38例健康者为对照组.分别在来院清晨检测血清PCT、CRP,并将检测结果进行比较分析.结果 SAP组的...     

阻断肠道淋巴通道对重症急性胰腺炎大鼠肠道细菌易位的影响

肠道细菌易位是胰腺炎发生感染、促进全身炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能障碍综合征(MODS),致重症急性胰腺炎(SAP)病人死亡的重要原因[1].但对SAP时细菌易位途径的认识尚未达成共识.该研究旨在探讨肠道淋巴通道途径在SAP致肠道细菌易位中的作用.     

地塞米松对重症胰腺炎急性肺损伤时水通道蛋白表达的影响

急性呼吸窘迫综合征(ARDS)是急性重症胰腺炎(SAP)常见而严重的并发症之一,死亡率超过50%。有95%的早期死亡病例中存在肺水肿和肺淤血的表现,防治肺损伤成为降低SAP早期死亡率的重要措施。既往研究中我们发现在SAP急性肺损伤时水通道蛋白1(Aquaporin 1,AQP-1)表达减少,本实验就SAP肺损伤时地塞米松对AQP-1的影响作进一步研究。     

核因子-κB的活化在急性胰腺炎大鼠的中性粒细胞凋亡延迟中的作用

重症急性胰腺炎(SAP)是一个死亡率极高的疾病,O'Neills等[1]研究结果表明,SAP时外周血中性粒细胞(PMN)凋亡受到抑制.核因子-κB(NF-κB)作为一个重要的核转录因子,在细胞凋亡中发挥着重要的作用.本研究旨在观察NF-κB的活化在SAP大鼠外周血PMN凋亡中的调控作用.