TRF检测法在核酸分析中的应用

综述了镧系离子时间分辨荧光检测法在核酸分析技术中的应用概况。介绍了ＤＥＬＦＩＡ系统、ＦＩＡｇｅｎ系统、ＥＡＬＬ系统和ＴＢＰ系统的使用特点，包括时间分辨荧光分析原理、镧系离子标记ＤＮＡ探针和运用时间分辨荧光技术检测ＰＣＲ产物的技术和方法。     

铽在生物活性分析中的应用

介绍了铽（Ｔｂ３＋）的理化性质、发光机理及其配体。综述了近年来Ｔｂ３＋在酶放大镧系发光法（ＥＡＬＬ）、多标记的时间分辨荧光免疫分析（ＴＲＦＩＡ）、直接固相ＴＲＦＩＡ、核酸分子杂交分析、生物大分子结构检测等方面的应用。     

抗—HCV BSA—时间分辨免疫荧光分析法的研究

抗 丙型肝炎病毒 (ＨＣＶ)是机体感染ＨＣＶ后出现的非中和性特异抗体 ,是ＨＣＶ感染的标志 ,具有重要的临床意义。笔者利用时间分辨荧光分析 (ＴＲＦＩ Ａ)技术[1] 建立了抗 ＨＣＶ时间分辨免疫荧光分析法 (ＩＦＭＡ) ,并在此基础上利用生物素 亲和素系统 (ＢＡＳ)建立了抗 ＨＣＶＢＡＳ ＩＦＭＡ ,现报道如下。材料与方法1.材料与仪器。ＨＣＶ抗原 (ＨＣＶＡｇ)、羊抗人ＩｇＧ单抗由上海科华公司提供。Ｎ 羟琥珀酰亚氨活化生物素 (ＮＨＳＢ)、链亲和素 (Ａｖｉｄｉｎ)、ＥｕＣｌ3 和二乙烯三胺五乙酸 (ＤＴＰＡ)为Ｓｉｇｍａ产品。Ｓｅ…     

铕标记人血清白蛋白的研究

铕标记人血清白蛋白的研究赵启仁，林汉，张福华，刘洁在时间分辨荧光免疫分析（ＴｒＦＩＡ）技术中，制备比活性高、免疫活性强的Ｅｕ标记物是关键之一．这需要用具有双功能基团的螯合剂将Ｅｕ３＋和抗原连接起来．已有的螯合剂有：１-（对-重氮苯基）-ＥＤＴＡ、氨基苯?..     

血清PSA测定质量控制分析研究

如何保证自动化免疫分析测定质量 ,使测定结果有良好的重复性及可比性 ,对科研及临床应用都具有重要意义。本研究结合参加ＩＡＥＡ的ＰＳＡ测定外部质量评价 (ＥＱＡ)课题 (ＩＡＥＡＲｅｓｅａｒｃｈＣｏｎｔｒａｃｔＮｏ 93 17/ＲＩ) ,对 1998年 5～ 12月间常规测定中内、外质量评估参数进行了分析 ,并对测定质量中出现的问题提出了改进意见。材料与方法1 仪器。ＥＧ＆ＧＷａｌｌａｃ自动时间分辨荧光免疫分析仪 (ＡｕｔｏＤＥＬＦＩＡ 12 3 5 )。2 试剂。总ＰＳＡ (Ｔ ＰＳＡ)及游离ＰＳＡ(Ｆ ＰＳＡ)测定采用Ｗａｌｌａｃ公司Ｐｒｏｓｔ…     

铽在生物活性分析中的应用

介绍了铽的理化性质，发光机理及其配体。综合了近扯为Ｔｂ＾３＋在酶放大系发光法、多标记的时间分辨荧光免疫分析，直接固相ＴＲＦＩＡ，核酸分子杂交分析，生物大分子结构检测等方面的应用。     

抗癌胚抗原单链抗体在荷人结直肠癌裸鼠体内的分布和放免显像

目的研究１２５Ｉ、１３１Ｉ标记抗癌胚抗原单链抗体（ＣＥＡＳｃＦｖ）在荷人结直肠癌裸鼠体内的分布和定位显像。方法采用Ｉｏｄｏｇｅｎ法制备１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ和１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ。２０只荷人结直肠癌裸鼠,腹腔注射１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ后１、３、６和２４ｈ进行裸鼠的体内分布研究,对３只荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ后１、３、６和２４ｈ进行裸鼠的定位显像研究。结果在荷人结直肠癌裸鼠腹腔注射１２５ＩＣＥＡＳｃＦｖ后３ｈ,肿瘤与血之比为１２８,６ｈ达５５０,２４ｈ达到最高,为６４６。腹腔注射１３１ＩＣＥＡＳｃＦｖ后,６ｈ肿瘤部位放射性明显浓聚,２４ｈ本底明显降低,肿瘤呈放射性热区。结论ＣＥＡＳｃＦｖ能提高靶／非靶组织比值,缩短显像时间,改善图像质量。     

海蛇乙醇浸出物灌胃对大鼠胶原性关节炎的防治作用(论著)

目的：探讨海蛇乙醇浸出物（ＡＥＢＦＳＳ）灌胃对大鼠胶原性关节炎（ＣＩＡ）的预防和治疗作用。方法：用自制的可溶性猪尾Ⅱ型胶原注入实验大鼠左后足造成胶原诱导性大鼠关节炎模型，观察用（预防性或治疗性）与不用ＡＥＢＦＳＳ对ＣＩＡ的影响。结果：在致炎前ＡＥＢＦＳＳ灌胃，当剂量达浸出蛋白４．０ｍｇ／ｋｇ，可明显推迟ＣＩＡ发病时间，降低ＣＩＡ患病率和减轻关节炎症状；在致炎后ＡＥＢＦＳＳ灌胃，可明显减轻关节炎症的程度，其作用在用药７天后开始表现明显。关节组织病理检查显示，ＡＥＢＦＳＳ显著减轻了患鼠关节的炎症程度。初步分析表明，ＡＥＢＦＳＳ灌胃既降低了ＣＩＡ患鼠血清抗ＣⅡ抗体水平，又对患鼠耳迟发型超敏反应（ＤＴＨ）产生了明显的抑制作用。结论：ＡＥＢＦＳＳ灌胃对大鼠胶原性关节炎有显著的防治作用；而其机理同时涉及Ｔ和Ｂ淋巴细胞免疫。     

基因重组干扰素γ对骨髓增生异常综合征

用基因重组干扰素（ＩＦＮ－γ）对４１例骨髓增生异常综合征（ＭＤＳ）病人造血祖细胞的作用进行了体外观察，结果：①ＩＦＮ－γ体外对非血液病对照组病人的红系祖细胞（ＣＦＵ－Ｅ）和粒系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）无明显促增殖作用，而对ＭＤＳ病人的ＣＦＵ－Ｅ和ＣＦＵ－ＧＭ有明显促增殖作用。其作用呈剂量依赖型，在ＩＵ／ｍｌ时作用最小，１００Ｕ／ｍｌ时作用最强；②ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ原ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ增殖正常组加入ＩＦＮ－γ后集落数增加最明显，而对增殖明显减低组集落数无明显增加；③ＩＦＮ－γ对ＭＤＳ不同亚型病人ＣＦＵＥ和ＣＦＵ－ＧＭ作用不同，其中对转化中原始细胞增多的难治性贫血（ＲＡＥＢ－Ｔ）型病人有效率较高。     

~(99m)Tc-MIBI心肌断层显像和超声心功能评价急性心肌梗塞溶栓血管再通时间的疗效

目的：探讨溶栓治疗血管再通时间的疗效及其有效时间窗。材料和方法：经静脉溶栓治疗后其梗塞相关血管（ＩＲＡ）有再灌注的急性心肌梗塞（ＡＭＩ）患者７１例，其中距发病≤６ｈＩＲＡ再通组５７例，＞６ｈＩＲＡ再通组１４例。患者均于发病２～３周行９９ｍＴｃ－ＭＩＢＩ心肌断层显像测定ＡＭＩ梗塞范围指数（梗塞面积与心室总面积之比，及二维超声测定左室射血分数（ＬＶＥＦ）。结果：距发病≤６ｈＩＲＡ再通组的梗塞范围指数和ＬＶＥＦ分别为０．３２６±０．０７５和０．５８２±０．０９７，距发病＞６ｈＩＲＡ再通组的梗塞范围指数和ＬＶＥＦ分别为０．３７３±０．０７１和０．５０８±０．０７７。两组间梗塞范围指数和ＬＶＥＦ均有显著差异。结论：ＡＭＩ患者静脉溶栓治疗ＩＲＡ早开通比晚开通者的心梗范围缩小，心功能得到更好保护。     

时间分辨荧光分析技术的研究进展及应用

时间分辨荧光分析(TRFA)技术是一种以镧系元素螫合物为标记物,测量其发射荧光的超灵敏的无放射性污染的标记分析技术,在生物分析中得到了广泛的应用。在近些年,研究发展了酶放大时间分辨荧光分析、时间分辨猝灭分析和分子信标等分析系统,其灵敏度更高,满足了不同的需求,使TRFA技术在临床诊断和科学研究中得到了更广泛的应用。     

高原红细胞增多症骨髓红系祖细胞体外培养的研究

目的：了解高原红细胞增多症（ＨＡＰＣ）骨髓红系组细胞增殖状况。方法：ＨＡＰＣ患者２５例，正常对照２２例身体健康者，应用造血祖细胞体外培养技术了解骨髓红系祖细胞（ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ）增殖能力，ＢＦＵ－Ｅ及ＣＦＵ－Ｅ对红细胞生成素（Ｅｐｏ）的反应能力，结果：ＨＡＰＣ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ，ＣＦＵ－Ｅ集落数分别高于正常对照。Ｅｐｏ对ＨＡＰＣ患者骨髓ＢＦＵ－Ｅ集落数差异显著（Ｐ〈０．０１）。结论：ＨＡＰＣ     

2002年参加IAEA防护剂量水平TLD比对的结果

卫生部二级标准剂量学实验室 (ＳＳＤＬ)是国际原子能机构 (ＩＡＥＡ)和世界卫生组织 (ＷＨＯ)共同负责的国际二级标准剂量学实验室网的成员之一。多年来一直坚持参加了ＩＡＥＡ组织的放射治疗、辐射防护剂量测量的国际比对 ,并取得了较好的结果。2 0 0 2年 6月 ,ＩＡＥＡ组织了 1次防护剂量水平的热释光(ＴＬＤ)国际比对 ,笔者参加了本次活动。此次ＴＬＤ比对统一由ＩＡＥＡ提供ＬｉＦ热释光元件 ,采用邮寄的方法 ,寄给每个ＳＳＤＬ ,然后由ＳＳＤＬ在防护水平的γ标准辐射场中完成照射后 ,再寄回ＩＡＥＡ的实验室测量 ,最后由ＩＡＥＡ对比…     

重组融合蛋白Fab／INF—αA的表达及其抗乙型肝炎病毒的作用

ＩＦＮ－αＡ是治疗乙型病毒性肝炎有效药物,但由于其临床应用的副作用及持久应答率不超过５０％,限制了其疗效的发挥［１］。作者通过ＤＮＡ重组技术和ＰＣＲ技术将抗乙型肝炎表面抗原抗体片段Ｆａｂ与ＩＦＮ－αＡ在分子水平上进行重组,构建了人抗乙肝表面抗原抗体Ｆａｂ片段／αＡ－干扰素融合蛋白原核表达载体［２］。本实验将筛选出阳性克隆的菌种进行诱导表达,测定表达的重组融合蛋白（Ｆａｂ／ＩＦＮ－αＡ）的ＩＦＮ－αＡ活性及抗体Ｆａｂ活性,并应用ＨＢＶＤＮＡ转染细胞系（ＨｅｐＧ２２１５细胞系）作模型［３］,通过检测…     

烟雾吸入伤后内皮素─1水平的变化及意义

目的：观察大鼠烟雾吸入伤后血浆及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中内皮素。１（ＥＴ－１）含量的动态变化，以探讨其与急性吸入性肺损伤发生发展的关系。方法：采用大鼠烟雾吸入伤模型，分别检测了正常对照及致伤２、６、１２和２４小时动物的动脉血气、肺水量、静态肺顺应性（Ｃｓｔ）、ＢＡＬＦ中总蛋白（ＴＰ和白蛋白（Ａｌｂ）、以及血浆和ＢＡＩＦ中ＥＴ－１量。结果：动物吸入伤后出现急性呼吸衰竭和严重肺水肿，Ｃｓｔ显著降低，ＢＡＩＦ中ＴＰ及Ａｌｂ进行性升高；血浆及ＢＡＬＦ中ＥＴ－１水平亦明显增加，且血浆ＥＴ－１的变化与Ｃｓｔ及ＢＡＬＦ中ＴＰ的改变相关显著。结论：ＥＴ－１在烟雾吸入伤后肺血管通透性增加和肺功能损害中可能有重要作用。     

在骨肉瘤细胞上筛选噬菌体-干扰素突变体及其临床意义

干扰素 (Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ ,ＩＦＮ)是肿瘤治疗中应用较成熟的一种细胞因子 ,在骨肿瘤的治疗方面也已得到广泛的应用〔1〕。目前存在的主要问题是 :ＩＦＮｓ的生物学活性较低 ;治疗效果的个体差异较大。为此 ,探讨了应用噬菌体表面呈现 (Ｐｈａｇｅｄｉｓｐｌａｙ)技术改造ＩＦＮｓ的可能性。1　材料与方法1 .1　噬菌体 干扰素ＡＢ环突变库的构建　将ＩＦＮα1ｃ/ 86Ｄ基因插入噬菌体载体 ｐＣＡＮＴＡＢ5Ｅ。采用盒式突变技术对干扰素受体结合区ＡＢ环的 2 9、31、32、35位氨基酸进行随机突变。构建了噬菌体 ＩＦＮα 1ｃ/ 86ＤＡＢ环…     

乳腺增强MRI

文内综述了乳腺Ｇｄ－ＤＴＰＡ增强ＭＲＩ的现状。重点介绍了自旋回波（ＳＥ）及梯度回波（ＦＬＡＳＨ、ＦＩＳＰ）序列正常及乳腺病变的增强ＭＲＩ表现和脂肪抑制技术在乳腺良恶性病变鉴别、术后乳腺及硅胶假体乳腺的评价等方面的实用价值。特别强调动态ＭＲ检查乳癌、腺瘤及小叶增生等的时间－强化曲线特征。     

利用杆状病毒早期启动子在昆虫细胞中持续表达人β－干扰素

在含苜蓿尺蠖核多角体病毒（ＡｃＮＰＶ）早期基因启动子的载体ｐＡｃＩＥ１中，插入人β－干扰囊（ＨｕＩＦＮ－β）基因，构建成转移载休ｐＩＥ１－ＩＢ；ｐＩＥ１－ＩＢ与含新霉素抗性基因（ＮＥＯ￣ｒ）的质粒ｐＩＥＩ－ＮＥＯ共转染秋粘虫细胞（Ｓｆ９细胞），使ＨｕＩＦＮ－β基因和ＮＥＯ￣ｒ基因整合到细胞基因组上产生转化细胞，含Ｇ４１８的培基分离新霉素抗性克隆，并增殖传代；转化细胞株传至５０代以上，不同传代水平细胞ＤＮＡ的点杂交证实ＨｕＩＦＮ－β基因已整合在细胞ＤＮＡ分子上，同时检测出干扰素（ＩＦＮ）的持续稳定表达，活性为５００—４０００ＩＵ／１０￣６细胞。抗天然ＨｕＩＦＮ－β抗体能完全中和所表达ＩＦＮ的抗病毒活性。     

电子束成像系统经济效益的分析

目的：对Ｉｍａｔｒｏｎ电子束成像系统（ＥＢＩＳ）的购买、安装、维修和运作成本进行评估，并与常规ＣＴ同样的成本作对比。材料和方法：分析Ｂｒｏｕｓｓａｉｓ医院ＥＢＩＳ和巴黎其他公立医院常规ＣＴ的购买、安装、维修保养及运作支出清单，并对二者进行比较。结果：ＥＢＩＳ的购买及安装费用为１５，０００，０００ＦＦ，每年的维修保养支出为其机器价格的９．５％，即９５０，０００ＦＦ（其中包括调换电子枪及靶的费用）。由于更换球管较频繁，故常规ＣＴ每年的维修保养费用为其售价的２１％。折算成每次扫描的成本，ＥＢＩＳ为４．７５ＦＦ，而常规ＣＴ为７．８８ＦＦ，熟悉机器运作及善于排除高压电源故障以后，ＥＢＩＳ的停机率为２．１８％（不包括保养时间）。结论：购买ＩｍａｔｒｏｎＥＢＩＳ花费较高，但其运作及维修保养费用则较低，由此看来，就成本而论ＥＢＩＳ对常规ＣＴ是具有竞争力的。     

核素心室显像对急性心肌梗塞远期预后的预测价值

目的：探讨平衡法核素心室显像（ＥＲＮＶ）对急性心肌梗塞（ＡＭＩ）远期预后的预测价值。方法：对８９例于发病后４—６周行ＥＲＮＶ检查的ＡＭＩ患者进行了２３（１２—４２）个月的随访。参照病人预后，将其分为２组：第一组为出院后出现心脏猝死（ＳＣＤ）和（或）心力衰竭（ＮＦ）者（ｎ＝２０）；第二组为出院后无心脏事件者（ｎ＝６９）。并按年龄、性别进行１：２配对。对可能影响其远期预后的１７个参数进行了分析。结果：ＳＣＤ发生率为２．２％；去除年龄及性别因素，左室侧壁射血分数（ＬＡＴ－ＥＦ）、血清肌酸磷酸激酶同工酶（ＣＫ－ＭＢ）是判断ＡＭＩ远期预后的独立有效的危险因子；建立了一预后指数公式：Ｚ＝２．４７６（ＬＡＴ－ＥＦ）＋０．７６０（ＣＫ－ＭＢ），Ｚ越大，ＳＣＤ或ＨＦ发生率越高。结论：ＥＲＮＶ在ＡＭＩ远期预后的预测中有重要作用。