大鼠全脑缺血再灌注额叶、海马、丘脑IGF-1的表达

目的 探讨全脑缺血再灌注大鼠额叶、海马、丘脑胰岛素生长因子( IGF-1)的含量变化,揭示IGF-1对额叶、海马、丘脑缺血再灌注损伤的动态保护作用.方法选用Wistar老龄大鼠,雌雄随机分组,对照组5只,实验组分为全脑缺血15 min组,缺血15 min再灌注1h、6h、2d、4d、9d组,每组5只.用免疫组化ABC法检测缺血再灌注不同时相额叶、海马、丘脑IGF-1含量.结果正常老龄大鼠额叶、海马、丘脑均有少量IGF-1表达;缺血再灌注1h～2d,丘脑IGF-1表达明显增加,以后快速减少;缺血再灌注6h-2d,海马IGF-1表达明显增加,以后也快速减少;额叶仅于缺血再灌注2d出现一过性表达增加.结论对于缺血缺氧,丘脑和海马具有反应快捷的IGF-1神经保护机制,而额叶具有迟发性短暂的IGF-1神经保护机制.     

大鼠局部脑缺血再灌注下丘脑CRH和BDNF的表达

目的 探讨局部脑缺血／再灌注（I／R）对下丘脑促肾上腺皮质激素释放素（CRH）、脑源性营养因子（BDNF）和下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法 采用免疫组化方法对老龄大鼠局部脑缺血下丘脑的CRH和BDNF表达进行动态观察。结果 假手术对照组大鼠下丘脑有少量CRH和中量BDNF表达；I／R 1h内CRH和BDNF表达无明显变化；I／R 6h CRH表达出现短暂一过性消失，随后迅速恢复表达，并增至中量表达；I／R 6h后BDNF很快呈大量表达。结论 下丘脑是富含BDNF的脑组织，脑缺血后CRH分泌细胞并非立刻进入活动增强状态；脑缺血2d后CRH分泌细胞活动进入增强期：下丘脑BDNF的含量与CRH的含量呈正相关：BDNF对维系HPA活动状态可能具有重要作用。     

全麻药丙泊酚通过上调MT-3减轻沙鼠全脑缺血再灌注损伤

目的探讨全麻药丙泊酚(Propofol)通过上调MT-3减轻沙鼠全脑缺血再灌注损伤。方法选取健康雄性清洁级蒙古沙土鼠30只,用随机数列表分为假手术组、模型组和丙泊酚组。检测各组大鼠脑组织神经功能评分、MT-3 mRNA的表达量、海马组织MT-3的蛋白表达量和大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)的量。结果 Propofol可以增加全脑缺血再灌注大鼠的Garcia JH评分、MT-3基因mRNA的表达水平和蛋白量的表达、脑组织中SOD水平;降低MDA和NO水平。结论 Propofol通过上调MT-3减轻沙鼠全脑缺血再灌注损伤。     

APP17肽对卵巢去势大鼠学习、记忆功能和海马神经NT-3、NF表达的影响

目的　探讨APP1 7肽是否能提高去卵巢大鼠学习、记忆功能及作用机制。方法　雌性大鼠分三组 :①正常组 ,②去卵巢组 ,③用APP1 7肽保护去卵巢组。通过水迷宫测试 ,观察行为学的改变。而后灌注固定 ,取大脑组织冰冻切片 ,做NT 3、NF免疫组化染色。结果　 (1 )行为学检查 :给予APP1 7肽的卵巢去势大鼠游完全程的时间及错误反应次数均较未给予APP1 7肽的卵巢去势大鼠少 (P<0 0 5)。 (2 )用APP1 7肽保护的卵巢去势大鼠海马区神经元神经营养素 3(NT 3)、神经丝蛋白 (NF)的表达与正常大鼠相似 ,阳性细胞计数及平均灰度 (反映染色强度 )与卵巢去势大鼠比较差异显著 (P <0 0 5)。结论　卵巢去势大鼠存在学习、记忆障碍 ,APP1 7肽具有防治因雌激素缺乏而致神经元退变的功效     

大鼠脑缺血再灌注后脑组织CD40L、MMP-3的表达

目的探讨大鼠脑组织中CD40L和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)在脑缺血再灌注损伤中的表达。方法采用线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型(MCAO)。将Wistar大鼠随机分组,假手术组(sham组)、缺血再灌注组(IR组,又分为6h、24h、48h、72h、7d亚组)。采用免疫组化法检测大鼠脑组织中CD40L、MMP-3的表达。结果CD40L、MMP-3在假手术组不表达,再灌注6h后CD40L和MMP-3开始表达,24h表达明显增加,48h达高峰,72h开始下降,7d时有微量表达。神经功能评分与脑含水量变化与其一致。结论大鼠脑组织中的CD40L、MMP-3参与了脑缺血再灌注损伤。     

全脑缺血再灌注大鼠小脑EGF的动态表达

目的 探讨全脑缺血再灌注大鼠小脑表皮生长因子(Epidermal Growth Factor,EGF)含量的变化,揭示EGF对小脑缺血再灌注损伤的动态保护作用.方法 选用Wistar老龄大鼠,雌雄随机分组,假手术组5只,实验组分为全脑缺血15 min再灌注1 h、6 h、2 d、4 d、9 d组,每组5只.用免疫组化ABC法检测缺血再灌注不同时相小脑的EGF含量.结果 正常老龄大鼠小脑四层结构均有少量EGF表达.在缺血再灌注9 d期间,小脑分子层和梨状细胞层仅于再灌注2 d时出现一过性EGF表达增加,而颗粒细胞层于再灌注2～4 d期间EGF表达持续增加,但小脑髓质却始终呈现低水平EGF表达.结论 小脑对缺血再灌注损伤缺乏快捷的EGF神经保护作用;小脑大部分组织具有迟发性EGF的神经保护作用;小脑分子层和梨状细胞层EGF的保护作用较短暂;小脑颗粒细胞层EGF的神经保护作用长于小脑其他各层;小脑髓质缺乏EGF的保护作用.     

全脑缺血再灌注大鼠小脑GDNF的动态表达

目的探讨全脑缺血再灌注大鼠小脑胶质细胞源性神经营养因子(glial cell-derived neurotrophic factor,GDNF)的动态表达,揭示GD-NF对小脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法选用老龄Wistar大鼠30只,雌雄随机分组,对照组5只,实验组25只。采用Pulsinelli-Brierley 4血管阻塞改良法制作全脑缺血再灌注模型。实验组分全脑缺血15 min再灌注1 h、6 h、2 d、4 d、9 d组,每组均5只。对照组不做椎动脉电凝和颈总动脉断流。应用免疫组化ABC法研究小脑GDNF的动态表达。结果正常老龄大鼠小脑各层组织均有一定量GDNF表达;小脑分子层和髓质于缺血再灌注1 h~9 d,GDNF表达均无明显动态变化;小脑梨状细胞层缺血再灌注2~4 d其表达显著增加,且以2 d表达最高,9 d时降至对照组水平;小脑颗粒细胞层GDNF的表达仅于2 d时高于对照组。结论在全脑缺血再灌注损伤时,小脑分子层和髓质缺乏应激的GDNF神经元保护作用;小脑梨状细胞层和颗粒细胞层具有短期的GDNF神经元保护作用。     

大鼠全脑缺血再灌注后脑红蛋白的表达

目的探讨大鼠全脑缺血/再灌注损伤后大脑皮质及海马回中脑红蛋白(NGB)的演变。方法将60只标准健康大鼠随机分为对照组(30只)与实验组(30只)。实验组采用四血管阻塞法建立大鼠全脑缺血/再灌注损伤的模型。用免疫组织化学SABC法,原位杂交法检测大鼠皮质及海马区NGB的表达,测量其光密度值,用苏木素-伊红染色检测存活锥体细胞数。结果两组大鼠大脑海马区NGB及NGBmRNA表达在12、24、48h时与对照组比较,差异均有统计学意义(P0.05);实验组大鼠大脑皮质NGB及NGBmRNA光密度在缺血再灌注后3h较对照组无明显变化(P0.05),灌注后24h达高峰,与3、6、12、48h比较差异均有统计学意义(P0.05);实验组大脑海马区存活锥体细胞数随再灌注时间的延长而减少,各时间点两组比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论大鼠全脑缺血/再灌注后,NGB表达上调参与了脑神经元的保护。     

CGRP对大鼠全脑缺血再灌注ATP酶活性的影响

目的研究降钙素基因相关肽(CGRP)对大鼠全脑缺血再灌注(I/R)脑组织ATP酶活性变化的影响及神经保护机制.方法45只SD大鼠,随机分为假手术组、对照组、CGRP)组.采用四血管阻断方法制备SD大鼠全脑I/R模型,定磷比色法测定全脑I/R及全脑I/R CGRP治疗大鼠海马Na ,K -ATP、Ca2 -ATP酶活性.结果与假手术组比较,大鼠全脑I/R后海马Na ,K -ATP、Ca2 -ATP酶活性降低.CGRP对I/R后海马Na ,K -ATP、Ca2 -ATP酶活性降低有明显的抑制作用.结论CGRP对大鼠全脑I/R脑组织损伤有保护作用.     

3’-甲氧基葛根素抗大鼠脑缺血再灌注损伤作用

目的探讨3’-甲氧基葛根素（3＇-MOP）在大鼠脑缺血再灌损伤中的神经保护作用。方法24只大鼠随机分为脑缺血再灌组（IR组）、IR＋3’-MOP组和对照组。HE染色观察海马CA1区神经元的组织形态学变化;TUNEL染色检测海马CA1区神经元阳性凋亡细胞数。结果IR＋3＇-MOP组海马CA1区神经元的损伤减轻,细胞存活数显著多于IR组,而凋亡细胞数显著少于IR组。结论3＇-MOP可经抑制凋亡的发生,减轻海马CA1区神经元缺血再灌损伤。     

大鼠全脑缺血后谷氨酸转运体的表达

目的探讨3种谷氨酸转运体亚型（EAAT-1、EAAT-2、EAAT-3）在全脑缺血大鼠脑内表达的动态变化。方法取SD雄性大鼠42只，随机分为对照组、假手术组（各6只）及全脑缺血组（30只）。采用胸部挤压法建立全脑缺血模型。应用免疫组化方法，观察脑缺血后6h、24h、48h、72h、7d及对照组、假手术组大鼠3种谷氨酸转运体在海马CA1、CA3及皮质运动区的表达。在光镜及电镜下观察脑组织病理学改变。结果在海马CA1、CA3及皮质运动区，EAAT-2的表达在缺血后下降，随后逐渐升高；EAAT-3在海马CA1、皮质运动区的表达为逐渐下降趋势，在海马CA3区变化不明显；而EAAT-1在3个区域变化不规律。在大鼠缺血早期神经细胞损伤以坏死为主，缺血后期出现细胞凋亡现象。结论谷氨酸转运体表达变化参与了全脑缺血后的病理生理学过程。EAAT-2表达的降低与早期神经细胞的坏死有关，而EAAT-3表达升高则参与缺血损伤的耐受过程。     

3′-甲氧基葛根素抗大鼠脑缺血再灌注损伤作用

目的 探讨3′-甲氧基葛根素(3′-MOP)在大鼠脑缺血再灌损伤中的神经保护作用.方法 24只大鼠随机分为脑缺血再灌组(IR组)、IR+3′-MOP组和对照组.HE染色观察海马CA1区神经元的组织形态学变化;TUNEL染色检测海马CA1区神经元阳性凋亡细胞数.结果 IR+3′-MOP组海马CA1区神经元的损伤减轻,细胞存活数显著多于IR组,而凋亡细胞数显著少于IR组.结论 3′-MOP 可经抑制凋亡的发生,减轻海马CA1区神经元缺血再灌损伤.     

激光多普勒血流仪优化大鼠全脑缺血再灌注模型

目的使用激光多普勒血流仪(LDF)优化大鼠全脑缺血再灌注模型。方法采用夹闭双侧颈总动脉合并低血压的方法建立大鼠全脑缺血再灌注损伤模型。激光多普勒血流仪监测大鼠手术过程中的脑血流变化。水迷宫检测大鼠空间学习记忆能力。HE染色观察大鼠脑组织病理学改变。黄嘌呤氧化酶法,TBA法分别测定大鼠皮层海马中SOD活性改变,MDA含量变化。结果 LDF监测组大鼠全部存活,而无LDF监测组大鼠术后有3只死亡。手术组大鼠在缺血过程中脑血流降低70%,夹闭完成后,血流恢复至缺血前的80%。与假手术组大鼠比较,缺血再灌注大鼠寻台潜伏期、寻台路径显著增加,大脑皮层海马神经元出现严重核固缩、细胞丢失、神经元数目减少,细胞层次紊乱,SOD活性降低,MDA含量显著增加。结论 LDF监测能降低全脑缺血再灌注大鼠死亡率,提高造模成功率;此模型可用于脑缺血再灌注损伤的基础实验研究。     

脑缺血再灌注高血压大鼠神经肽Y和超微结构变化

目的观察易卒中型肾血管性高血压大鼠(RHRSP)脑缺血再灌注过程中不同时间点脑组织神经肽Y(NPY)表达和细胞超微结构的动态变化。方法制作RHRSP模型,用线栓法制作左侧大脑中动脉闭塞模型,用放射免疫法、干湿重法、图像分析和透射电镜等技术检测脑缺血6h再灌注6、72、168h时脑组织NPY、水含量、梗死面积百分率和超微结构的动态变化。结果再灌注组脑组织NPY和含水量均明显高于对照组和假手术组(P<0·01),72h达高峰;脑梗死面积百分率显著增高,168h时开始下降,但仍高于对照组和假手术组(P<0·01)。再灌注不同时间点分别出现不同程度的神经元和血管壁超微结构损害。结论NPY可能参与了RHRSP缺血再灌注脑损伤的病理学过程。     

大鼠脑缺血/再灌注损伤后血管内皮细胞生长因子的表达

目的　探讨大鼠局灶性脑缺血 /再灌注后脑组织内血管内皮细胞生长因子 (VEGF)的表达及意义。方法　制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型 ,应用免疫组化 S- P法检测 VEGF蛋白的表达。结果　缺血再灌注损伤后 VEGF表达增加 ,随再灌注时间的延长 ,在缺血灶周边区 ,阳性表达的小血管数量明显增多。结论　脑缺血再灌注损伤可以诱导 VEGF表达增强 ,VEGF可促进毛细血管增生。     

大鼠局灶性脑缺血再灌注后Nogo-A表达和神经元凋亡

目的：探讨大鼠脑缺血再灌注后轴突生长抑制因子Nogo-A表达和神经细胞凋亡。方法：36只成年健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组和缺血1h再灌注2h、6h、12h、1d,2d、3d、7d、14d组,每组4只。应用线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型,分别用TUNEL法和免疫组织化学法观察神经细胞凋亡和Nogo-A表达。结果：假手术组海马、皮质和纹状体区可见少量凋亡神经细胞。再灌注2h凋亡细胞逐渐增多,3～7h达高峰,随后下降。Nogo-A表达于再灌注2h开始明显增加,并一直保持在较高水平。结论：脑缺血再灌注后Nogo-A表达增高,细胞凋亡也增加。     

红景天苷对全脑缺血再灌注大鼠脑水肿和神经功能的影响

目的 探讨红景天苷原料药对全脑缺血再灌注大鼠脑水肿和神经功能的影响.方法 100只Sp rague-Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组以及红景天苷12、24和48 mg/kg组,每组20只;各组再分为6h、24 h、72 h和7 d组,每组5只.四血管闭塞法建立大鼠全脑缺血模型.各组均在模型制作后即刻开始灌...     

黄芪多糖对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨黄芪多糖对大鼠全脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 SD雄性大鼠50只,随机分为五组(n=10):假手术组、模型组、尼莫地平组(2 mg/kg)和黄芪多糖低、高剂量组(10,30 mg/kg)。采用Pulsinelli四动脉阻断法造成全脑缺血再灌注损伤模型(CIR)。黄芪多糖组每日腹腔注射黄芪多糖,连续7 d。测定脑组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)以及丙二醛(MDA)的变化。结果黄芪多糖可使大鼠脑缺血再灌注脑组织中NO含量降低、NOS活力降低、LDH活性显著降低以及MDA含量明显减少(P0.01),SOD活性显著增强(P0.01)。结论黄芪多糖对大鼠全脑缺血再灌注损伤有明显保护作用。     

雄激素对大鼠脑缺血/再灌注损伤后脑内顶叶皮层eNOS及iNOS表达的影响

目的探讨雄激素对大鼠脑缺血/再灌注（I/R）损伤后,脑内内皮型一氧化氮合酶（eNOS）和诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响。方法将大鼠45只随机均分为去势组、雄激素组和假手术组,喂养2周后,各组再按照I/R后不同时间点分为6,24和72 h 3个亚组,共9组,每组均5只。采用W estern b lot检测不同处理组脑内顶叶皮层中eNOS和iNOS表达的变化。结果随着再灌注时间的延长,各组大鼠eNOS的表达水平均有下降的趋势;而去势组和假手术组大鼠iNOS表达的水平均有上升的趋势。与假手术组相比,再灌注各时间点雄激素处理组eNOS的水平显著升高（P<0.01）,去势组大鼠eNOS的水平明显降低（P<0.05）。而iNOS的表达水平则呈现出相反的趋势:即雄激素处理组明显低于正常水平（P<0.05）;而去势组大鼠则显著升高（P<0.05）。结论脑I/R后,在雄激素存在的情况下,eNOS的表达水平升高,而iNOS的表达水平降低;去势组eNOS的表达水平下降,而iNOS的表达水平上升,提示雄激素对脑I/R损伤可能具有保护作用。