HPLC-UV法测定比格犬血浆中吡非尼酮浓度及其药代动力学

目的:建立测定比格犬血浆中吡非尼酮浓度的方法,用于研究其在比格犬体内的药代动力学。方法:血浆样品用10%高氯酸沉淀蛋白后取上清液直接进样,采用HPLC-UV法测定。色谱柱为汉邦Lichrospher C18柱(250 mm×4.6 mmID,5μm),流动相为乙腈-0.2%醋酸水(23∶77),流速1.0 mL/min,检测波长310 nm,内标为水杨酸。结果:线性范围为0.075~76.67μg/mL,方法回收率在100.2%~103.3%之间,日内和日间的精密度均小于6%。结论:该方法样品前处理过程简便,灵敏度高,重现性好,符合血浆样品的测定要求,可应用于吡非尼酮比格犬体内的药代动力学研究。     

LC-MS法测定犬血浆中舒巴坦浓度及其与头孢他啶合用的药代动力学研究

目的:建立犬血浆中舒巴坦浓度的LC-MS测定方法,对Beagle犬单用和与头孢他啶注射剂合用后舒巴坦血药浓度进行定量研究,考察头孢他啶对舒巴坦药代动力学行为的影响.方法:血浆中加入内标地高辛,用乙腈沉淀蛋白,取上清液进行LC-MS测定.色谱柱为Shim-pack ODS 5.0 μm,250 mm×2.0 mm I.D.,流动相A:500 ml水 20 μl三乙胺 0.6 mg氯化铵,流动相B:甲醇.以0.2 ml/min的流速进行梯度洗脱;动物实验采用三交叉实验设计.结果:舒巴坦线性范围为0.31～80.00 μg/ml,最低检测浓度为0.31 μg/ml,方法回收率大于90%,日内日间变异系数低浓度小于20%,中高浓度小于15%.应用本法测定9条Beagle犬单用和与头孢他啶合用后舒巴坦的血药浓度经时过程,静脉注射13 mg/kg的舒巴坦与26 mg/kg头孢他啶合用后,估算的AUC360、t1/2, Cl和Vd分别为3865.29±1115.13 μg·min/ml,57.72±6.37 min,3.50±0.85 ml/min/kg和0.29±0.09 l/kg,与单用13 mg/kg舒巴坦的AUC360 3669.89±922.17 μg·min/ml,t1/2 66.98±11.07 min,Cl 3.56±0.75 ml/min/kg和Vd 0.34±0.08 l/kg 相近.结论:本方法可用于犬血浆中舒巴坦的浓度测定及其药代动力学研究.头孢他啶不影响舒巴坦的药代动力学行为.     

LC-MS法测定人血浆中赖诺普利及其在药代动力学中的应用

目的:建立人血浆中赖诺普利的LC-MS测定法。方法:血浆样品以10 mmol/L的盐酸溶液酸化后经固相萃取小柱提取,采用选择性离子检测方法测定其血药浓度。色谱柱为Lichrospher ODS柱,流动相为甲醇-40 mmol/L醋酸铵水溶液(含0.1%甲酸)(45∶55),内标为依那普利拉,检测仪器为Agilent 1100四极杆质谱检测器,离子源为ESI源,检测离子为m/z:406.2(赖诺普利)、m/z:349.2(内标),裂解电压为150 V。结果:在1~300 ng/mL范围内赖诺普利与内标峰面积比值与浓度线性关系良好,最低定量限为1 ng/mL。本方法回收率为73.46%~80.79%,批内和批间的精密度均小于15%。结论:该方法经考察符合生物样品的分析要求,可以应用于临床血药浓度的测定和药代动力学研究。     

西嗪伪麻缓释胶囊中盐酸伪麻黄碱在犬血浆中LC-MS法测定及其药代动力学

目的:建立LC-MS法测定犬血浆中盐酸伪麻黄碱浓度,以缓释成分盐酸伪麻黄碱为指标,观察犬单剂量ig西嗪伪麻缓释胶囊后血药浓度经时过程,估算相应的药代动力学参数.方法:血浆中加入内标苯丙醇胺,碱化后用乙醚提取,采用选择性离子检测方法测定其血药浓度.色谱柱为Shim-pack ODS(5.0 μm,250 mm×2.0 mm ID),流动相为超纯水(内含0.2%醋酸 0.005 mmol/L 醋酸铵溶液)-乙腈 (80∶20,v/v),流速0.2 ml/min,柱温40 ℃.Beagle犬给药采用双交叉实验设计,剂量为120 mg.结果:盐酸伪麻黄碱线性范围:0.016～2.00 μg/ml;最低检测浓度为0.016 μg/ml,方法回收率大于90%,日内日间变异均小于10%.Beagle犬单剂量ig西嗪伪麻缓释胶囊后,测得盐酸伪麻黄碱cmax为(0.71±0.16) μg/ml,tmax为(2.3±0.8) h,t1/2为(7.15±1.08) h,MRT为(11.36±1.54) h,AUC0-τ为(5.86±0.93) μg·h/ml.以扑尔伪麻片为对照,西嗪伪麻缓释胶囊相对生物利用度为(96.3±10.9)%,两制剂经方差分析显示tmax和cmax有显著差异.西嗪伪麻缓释胶囊具有一定的缓释特征.结论:本方法专属性强,准确性好,可用于盐酸伪麻黄碱血药浓度测定和药代动力学研究.     

LC-MS/MS法测定人血浆中奈比洛尔浓度及其在中国人体内的药代动力学

本文建立了一种快速测定人血浆中奈比洛尔血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国健康人体内的药代动力学行为。以氨氯地平作为内标,采用C₁₈反相柱(150 mm×2.0 mm,4.6 μm),柱温35 ℃。流动相为乙腈-水（含0.05%甲酸）（45∶55）,流速0.2 mL/min;电喷雾离子化（ESI）,正离子扫描,选择性反应监测（SRM）药和内标分别为：奈比洛尔m/z 406.2→151.0;氨氯地平m/z 409.0→238.2。在本文建立的方法下,奈比洛尔在0.025~25 ng/mL呈良好的线性关系,r=0.998 6,最低检测浓度为0.008 ng/mL,低、中、高浓度下的回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。健康受试者口服5 mg奈比洛尔片后的t_1/2,AUC_0-t,c_max,MRT分别为：(14.4±5.5) h,(7.35±2.48)ng?h/mL,(1.05±0.35) ng/mL,(16.5±5.3) h。结果表明：该方法专属性强,适用于奈比洛尔血样的定量分析。     

LC-MS法测定大鼠血浆中长春瑞滨浓度及其药动学研究

目的:建立生物样本中长春瑞滨的LC-MS测定方法,研究长春瑞滨大鼠体内的药动学过程。方法:生物样本经乙酸乙酯萃取后,用LC-MS法测定长春瑞滨浓度。色谱柱为Shimadzu ODS(150 mm×2.0 mm,5μm),以梯度洗脱方式进行色谱分离,流速为0.2 mL/min,采用电喷雾(ESI)离子源以正离子方式检测。大鼠尾静脉注射长春瑞滨乳剂,剂量为2.0、4.0和8.0 mg/kg,采用DAS 2.0计算药动学参数。结果:内源性杂质不干扰长春瑞滨的测定,且未出现明显的基质效应;线性范围为0.01~5.0μg/mL(r=0.999 4),回收率大于90%,最低检测限为0.002μg/mL(S/N>3);精密度及准确度均符合生物样本测定要求。大鼠静脉注射长春瑞滨后,广泛分布于各组织中;在研究的剂量范围内,AUC与剂量间均呈良好的线性关系。结论:本实验建立的血药浓度测定方法简便、灵敏、特异,适用于大鼠血浆中长春瑞滨浓度的测定及药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中雷洛昔芬及其临床药代动力学研究

目的:建立人血浆中雷洛昔芬(Raloxifene,RAL)的LC-MS/MS测定方法,研究口服RAL60 mg/d后RAL及其葡萄糖醛酸代谢产物的体内药代动力学过程。方法:绝经后女性志愿者单剂量口服雷洛昔芬60 mg/d,在0、0.5、1、2、4、6、8、24、48、72 h时间点采集血液样品,分离血浆后,经乙腈沉淀蛋白后采用液-液萃取法提取,进行LC-MS/MS分析。RAL及其代谢产物雷洛昔芬-6葡萄糖醛酸苷(M1)、雷洛昔芬-4’葡萄糖醛酸苷(M2)的多重反应监测的离子对分别为m/z 474.2/112.2、650.3/474.2和650.3/474.2。结果:RAL及其代谢物M1、M2的定量下限分别为0.195、0.975和3.9 nmol/L,提取回收率为77.14%～83.64%。人体中RAL及其代谢物M1、M2的药代动力学参数:RAL、M1和M2的C_(max)分别为(0.45±0.043)、(92.22±12.84)、(466.71±113.50) nmol/L;AUC_(0～t)分别为(19.55±0.65)、(2 133.25±326.91)、(7 344.45±819.18)μmol h/L;T_(1/2)分别为(69.48±25.26)、(100.10±29.80)、(29.65±0.92) h。结论:建立的LC-MS/MS分析方法准确灵敏,适用于RAL的临床药代动力学研究。RAL吸收后被快速代谢成了M1、M2,其体内药代动力学特点是半衰期长。建议RAL的临床药代动力学研究需同时检测其葡萄糖醛酸化代谢产物。     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的：建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法：血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果：血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为（2.46±1.25）h;Tmax为（1.96±1.00）h;Cmax为（1.70±1.48）ng/mL;AUC0-24为（7.08±5.27）ng.h/mL;AUC0-∞为（8.11±5.83）ng.h/mL。结论：该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中辛伐他汀浓度

目的:建立测定人血浆中辛伐他汀浓度的LC-MS/MS测定方法,并研究辛伐他汀片在人体内的药代动力学。方法:血浆样品经乙酸乙酯萃取后,在正离子检测方式下选择多反应监测扫描方式进行质谱分析。结果:血浆中的内源性物质对样品测定无干扰,专属性良好。辛伐他汀的线性范围为0.1~10ng/mL,最低定量限为0.1ng/mL,平均提取回收率为81.4%,日内、日间精密度和准确度均符合生物样品分析的要求。测定的辛伐他汀片在人体内T1/2为(2.46±1.25)h;Tmax为(1.96±1.00)h;Cmax为(1.70±1.48)ng/mL;AUC0-24为(7.08±5.27)ng.h/mL;AUC0-∞为(8.11±5.83)ng.h/mL。结论:该方法操作简便、灵敏度高、重现性好,可以满足本实验低浓度药物测定及药代动力学研究。     

LC-MS法测定人血浆中克拉霉素的浓度

目的:建立正常人血浆中克拉霉素浓度的LC-MS测定方法.方法:血浆样品经碱化后用乙醚提取,采用选择性离子检测方法测定其血药浓度.检测仪器为岛津LCMS-2010四极杆质谱检测器,离子源为ESI源,检测离子:克拉霉素m/z:748.5[M H] ,罗红霉素m/z:837.5[M H] ,14-羟基克拉霉素m/z:764.5[M H] ;色谱柱为Shim-pack ODS(5.0 μm,250 mm×2.0 mmI.D.);流动相为0.05%醋酸-乙腈(40:60v/v).结果:克拉霉素的线性范围为0.0625～8.00μg/ml,方法的回收率为86%～98%,日内和日间的精密度均小于17%.结论:该方法经考察符合血浆样品的测定要求,可以应用于临床血药浓度的测定和药代动力学研究.     

RP-HPLC法测定Beagle犬血浆中间尼索地平浓度及其药代动力学

目的:建立间尼索地平的高效液相色谱分析方法,研究其在Beagle犬体内的药代动力学。方法:血浆样品经液-液萃取后,用HPLC法进行分析。色谱柱为Diamond C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-20 mmol/L KH2PO4(60∶40);流速为1 mL/min;紫外检测波长为237 nm。结果:Beagle犬口服3种不同浓度的间尼索地平(1.0,2.5,12.5 mg/kg)后,血药浓度经时曲线均呈现明显的双峰现象。第1次达峰时间在1 h左右,第2次达峰时间在2-3 h,血药浓度峰值cmax较低。cmax与AUC均与剂量呈正相关。结论:间尼索地平经口服给药后,吸收较迅速,cmax较低可能与肝脏的首过效应有关;双峰现象可能与药物存在肝肠循环有关。     

同时测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度的LC-MS/MS法及其药代动力学研究

目的：建立并验证小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢物的LC-MS/MS检测方法,研究氯吡格雷在小鼠体内的药代动力学特征。方法：以吡罗昔康为内标,经乙腈沉淀蛋白后,采用电喷雾离子源（ESI）正离子扫描模式多反应监测（multiple reaction monitoring,MRM）方式检测氯吡格雷及其活性代谢物、羧酸代谢物和葡萄糖醛酸代谢物的血药浓度。色谱柱为安捷伦Poroshell 120 SB-C18柱（100 mm×2.1 mm,2.7 μm）;流动相为水（含0.1%甲酸）和乙腈（含0.1%甲酸）并按梯度洗脱。小鼠单次灌胃给予氯吡格雷10 mg/kg,测定氯吡格雷及其3种主要代谢物的血药浓度,并研究其药代动力学特征。结果：氯吡格雷及其代谢产物在一定测定范围内均呈现良好的线性关系（r > 0.99）,提取回收率均大于80%,未见明显基质效应,其日内、日间精密度均较好（RSD <15%）,准确度相对误差（RE）为-2.40%~5.00%,稳定性较好。在小鼠的药代动力学研究中,该方法能达到预期的实验要求。结论：所建立的LC-MS/MS分析方法能快速、准确地测定小鼠血浆中氯吡格雷及其代谢产物浓度,其专属性、回收率、基质效应、稳定性、精密度和准确度等均符合生物样品测定要求。     

LC-MS法测定人血浆中氨氯地平浓度及其生物等效性评价

目的建立液相-质谱联用（LC-MS）法测定人血浆中氨氯地平浓度，并进行两种制剂的生物等效性评价。方法采用随机双交叉试验设计，18名健康受试者口服受试制剂和参比制剂5mg，用LC-MS法测定人血浆中氨氯地平浓度。结果受试制剂和参比制剂的主要药动学参数：AUC0→t分别为（104．01±26．03）和（101．91±24．67）ng·h·ml^-1；AUC0→∞分别为（113．96±30．66）和（110．29±27．67）ng·h·ml^-1；Cmax分别为（2．44±0．40）和（2．43±0．38）ng·ml^-1；tmax分别为（7．28±2．92）和（7．50±3．04）h；t1／2分别为（33．33±6．30）和（30．93±4．18）h。受试制剂的相对生物利用度为（103．34±6．69）％。两种制剂主要动力学参数经统计学检验无显著性差异（P〉0．05）。结论该方法简单、快捷、准确，氨氯地平片的受试制剂和参比制剂具有生物等效性。     

LC-MS/MS法测定人血中埃博霉素B浓度及其在Ⅰ期临床药代动力学研究中的应用

建立一种快速测定人全血中埃博霉素B血药浓度的LC-MS/MS法,并研究其在中国晚期肿瘤患者体内的Ⅰ期临床药代动力学行为。以埃博霉素A作为内标,采用C18色谱柱(150 mm×2.0 mm,4.6μm),柱温40℃。流动相为乙腈-水(含0.05%甲酸)(64∶36),流速0.2 mL/min,电喷雾离子化(ESI),正离子扫描,多反应监测(MRM)。药物和内标分别为埃博霉素B(m/z 508.3→490.4)和埃博霉素A(m/z 494.3→476.1)。在本文建立的方法下,埃博霉素B在0.1～20 ng/mL以及5～500 ng/mL呈良好的线性关系(r=0.999 5和0.999 4),方法回收率、日内及日间精密度均符合方法学要求。该方法适用于埃博霉素B血样的定量分析。     

LC-MS/MS测定大鼠血浆中的野漆树苷及其药代动力学研究

目的：建立大鼠血浆中野漆树苷的LC-MS/MS测定方法,并研究静脉注射后野漆树苷在大鼠体内的药代动力学特征。方法大鼠血浆样品经乙酸乙酯萃取处理,用色谱柱Phenomenex C8（30 mm×2.00 mm,3μm）进行分离,以甲醇-水为流动相梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,负离子模式,多反应监测（MRM）,选择离子分别为野漆树苷（m/z 577.6→269.1）,内标柚皮素（m/z 271.0→151.0）,将建立的方法应用于测定大鼠静脉注射野漆树苷后血浆的药物浓度,并采用DAS 2.0计算得主要药代动力学参数。结果大鼠血浆中野漆树苷在1～2000μg/L浓度范围内线性关系良好,日内、日间精密度（RSD）均＜10%,准确度（RE）在±7%之间,低、中、高3个浓度下提取回收率为86.8%～91.0%,无明显基质效应且稳定性良好。大鼠静注该药（5 mg/kg）后AUC0-t为（72627.8±18067.9）μg·min/L,t1/2为（52.1±14.3）min,CLz为（0.07±0.02）L/（min·kg）。结论该检测方法简单、快速、灵敏、准确,适用于野漆树苷血药浓度监测及其药动学研究。药代动力学参数表明大鼠静注该药后体内消除较快。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中芹黄春浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的：研究大鼠分别灌胃和静脉给药芹黄春（芹菜素-7-O-β-D吡喃葡萄糖苷）溶液后,血浆中的芹黄春药物浓度及其药代动力学性质。方法6只雌性Sprague Dawley大鼠随机分为两组,每组3只,分别经灌胃(10 mg/kg)和静脉注射(2 mg/kg)给予芹黄春溶液后,按设计的时间点从大鼠眼内眦静脉丛采集血液样品,置于肝素化的离心管中,低温离心得血浆。采用甲醇沉淀法处理血浆生物样品,利用LC-MS/MS方法对血浆生物样品进行分析。药代动力学参数由Kinetica 2000软件进行计算。结果芹黄春浓度在1~2000 ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9974),定量下限为1 ng/mL,低(8 ng/mL)、中(100 ng/mL)、高(1200 ng/mL)3个浓度的提取回收率均大于90%,日内日间精密度和稳定性的RSD均小于12.8%,日内日间准确度在91.5%~107%,方法学考察均符合要求。大鼠经静脉注射和灌胃芹黄春后,Cmax分别为(2363±96) ng/mL和(13.3±5.8) ng/mL,AUC0~∞分别为(796±201) h· ng/mL和(28.9±9.2) h· ng/mL,大鼠经静脉注射和后t1/2为(1.20±0.17) h,芹黄春的口服生物利用度约为0.6%。结论所建立的LC-MS/MS分析方法方便、快速,灵敏度高,准确度好,可用于大鼠血浆芹黄春浓度测定及其药代动力学的研究。