银屑病患者皮损中转化生长因子-β1及受体基因表达的研究

目的 研究银屑病患者皮损及非皮损处转化生长因子-β1(TGF-β1)、转化生长因子β受体(TGF-βRⅡ)及CD105的基因(mRNA)表达,并初步探讨其临床意义。方法 采用异硫氰酸胍法抽提皮肤组织中的RNA;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测皮肤组织中mRNA的表达。结果 银屑病患者皮损组织TGF-β1及TGF-βRⅡmRNA的表达均低于非皮损组织及正常人(P<0.05);非皮损组织及正常人皮肤组织中mRNA的表达量差异无显著性(P>0.05)。而银屑病皮损组织CD105的mRNA表达量高于非皮损组及正常人(P<0.05);非皮损组织和正常人皮肤组织比较P>0.05。结论 银屑病皮损中TGF-β1及TGF-βRⅡ表达降低和CD105的表达上调可能与银屑病的表皮过度增殖及真皮炎症细胞浸润有关。     

硬皮病患者皮损转化生长因子β1、β2 mRNA的表达

目的 探讨转化生长因子(TGF)β1和β2在硬皮病发病中的作用。方法 采用原位逆转录聚合酶链反应技术检测17例硬皮病患者皮损中TGF-β1、β2mRNA的原位表达情况,并以10例正常人皮肤组织作为对照。结果 TGF-β1mRNA在硬皮病组表达阳性率和表达程度均高于对照组(P<0.05);TGF-β2mRNA在硬皮病组表达阳性率和表达程度与对照组相近(P>0.05);硬皮病皮损中TGF-β1mRNA表达阳性率和表达程度均高于TGF-β2mRNA(P<0.05).结论 TGF-β1mRNA在硬皮病皮损中高度表达,提示其在硬皮病病理纤维化的形成过程中起一定作用。     

皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中Smad7、Smurf1和Smurf2的表达

目的 探讨Smad7、Smurf1和Smurf2在基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中表达水平的变化及其意义。方法 采用实时定量聚合酶链反应和免疫组化技术分别检测基底细胞癌、鳞状细胞癌及正常人对照皮肤中Smad7、Smurf1和Smurf2的表达。结果 Smad7、Smurf1和Smurf2在基底细胞癌和鳞状细胞癌中的表达较正常表皮显著升高。结论 基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中Smad7、Smurf1和Smurf2的表达增强可能干扰转化生长因子β（TGFβ）信号转导通路的多个环节，使TGFβ抑制上皮增生的作用不能有效发挥，从而有助于上述表皮肿瘤的异常增殖。     

尖锐湿疣中转化生长因子β受体、受体活化Smad和共有Smad的表达

目的 探讨尖锐湿疣中转化生长因子β（TGF-β）信号转导途径TGFβ受体（TGFβR）、受体活化Smad和共有Smad蛋白的表达情况。方法 采用EliVisionTMplus免疫组织化学技术分别检测20例尖锐湿疣和15例正常人对照皮肤中TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、磷酸化Smad2/3（p-Smad2/3）和Smad4的表达。结果 TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4在对照正常人皮肤的表皮中均有表达。尖锐湿疣表皮中TGFβRⅠ、TGFβRⅡ、Smad1/2/3、p-Smad2/3和Smad4的免疫组化染色强度均明显低于对照正常人皮肤的表皮（P < 0.05或P < 0.01）。结论 尖锐湿疣表皮中存在着TGFβR、受体活化Smad和共有Smad蛋白的表达下调或缺失，可干扰TGFβ信号向下游的转导。失去TGFβ抑制作用的表皮角质形成细胞可出现异常增殖，导致尖锐湿疣表皮过度增殖病理改变的形成。     

角质形成细胞生长因子及神经细胞生长因子在银屑病患者皮损中的表达

目的 探讨角质形成细胞生长因子(KGF)及神经细胞生长因子(NGF)与银屑病的关系及银屑病皮损中间质细胞与角质形成细胞的相互作用。方法 应用免疫组化技术分别检测33例银屑病患者皮损、8例非皮损和13例正常人皮肤中KGF、KGF受体、NGF、NGF受体的表达。结果 KGF、KGF受体在银屑病患者基底层和棘细胞下层有极强的表达,与非皮损组及正常对照组间差异有显着性(P<0.05),而非皮损组与正常对照组间差异无显着性(P>0.05).KGF、KGF受体在真皮层未见表达。NGF、NGF受体则主要表达在颗粒层和棘细胞上层,皮损组与非皮损组之间及非皮损组与正常组之间均差异有显着性(P<0.05)。结论 银屑病患者皮损中KGF及NGF可能介导了角质形成细胞的增殖与分化不全;银屑病皮损中存在着间质细胞和角质形成细胞相互作用的紊乱。     

干细胞因子及其受体在寻常型白癜风表皮中的表达

目的 探讨SCF/c-kit信号通路在白癜风发病中的作用。方法 采用免疫组化和RT-PCR法检测17例寻常型稳定期白癜风患者和10例正常对照标本中表皮角质形成细胞的干细胞因子表达及基底层黑素细胞c-kit的表达情况。结果 白癜风非皮损区干细胞因子、c-kit蛋白表达与正常对照无明显差异(P>0.05),皮损区干细胞因子表达显著高于正常对照皮肤(P<0.05),而c-kit表达显著低于正常对照皮肤(P<0.05)。白癜风非皮损区表皮干细胞因子、c-kit mRNA表达平均水平与正常对照近似(P>0.05);皮损区干细胞因子mRNA表达水平高于非皮损区及正常对照组差异有统计学意义(P<0.05);皮损区c-kit mRNA表达水平显著低于非皮损区及正常对照组(P<0.05)。结论 SCF/c-kit的异常表达可能与白癜风的发病有关。     

转化生长因子β及其受体Ⅰ、Ⅱ在银屑病皮损中的表达

目的　探讨转化生长因子 β(TGF β)及其受体Ⅰ、Ⅱ在银屑病角质形成细胞中的表达及其与银屑病的关系。方法　采用免疫组化方法检测TGF β1,TGF β2 ,TGF βRI,TGF βRⅡ在银屑病皮损、皮损周边正常皮肤及正常对照皮肤的原位表达。结果　与正常皮肤相比 ,TGF β1、TGF β2 、TGF βRⅠ和TGF βRⅡ在银屑病表皮基底层表达明显减弱或缺失 ;TGF βRⅡ在棘层至颗粒层的阳性表达率增加。结论　TGF β/TGF βR在银屑病皮损基底层的表达下调或缺乏 ,可能在银屑病角质形成细胞过度增殖中发挥作用 ,而且TGF β/TGF βR系统也可能与银屑病细胞异常分化有关     

Ber EP4与EMA染色在皮肤基底细胞上皮瘤和鳞状细胞癌诊断中的意义

目的 观察BerEP4和EMA染色在皮肤基底细胞上皮瘤和鳞状细胞癌诊断中的意义.方法 用免疫组化SP法检测BerEP4和EMA在皮肤基底细胞上皮瘤、鳞状细胞癌、光线性角化病、Bowen病、脂溢性角化病、寻常疣和基底鳞状细胞癌皮损肿瘤成分及周围组织、皮肤附属腺体中的表达.结果 所有基底细胞上皮瘤和基底鳞状细胞癌肿瘤细胞呈BerEP4阳性,而鳞状细胞癌、光线性角化病、Bowen病、脂溢性角化病和寻常疣呈BerEP4阴性;多数鳞状细胞癌、Bowen病和部分光线性角化病肿瘤细胞及病变区域呈EMA阳性,而基底细胞上皮瘤、基底鳞状细胞癌、脂溢性角化病和寻常疣呈EMA阴性.结论 联合使用BerEP4和EMA能很好地协助诊断皮肤基底细胞上皮瘤、基底鳞状细胞癌、癌前病变及一些良性增生性皮肤病.     

皮肤鳞状细胞癌和基底细胞上皮瘤膜型基质金属蛋白酶-1、基质金属蛋白酶-2表达

目的 探讨皮肤鳞状细胞癌(简称鳞癌)和基底细胞上皮瘤(简称BCE)膜型基质金属蛋白酶-1(MT1-MMP)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达及其与临床病理特征的关系。方法 应用原位杂交和ABC免疫组化技术检测48例皮肤鳞癌和41例BCE手术切除标本中MT1-MMP、MMP-2表达。结果 鳞癌中MT1-MMP、MMP-2表达明显高于BCE(P<0.05),且二者的表达呈显著正相关(r=0.370,P<0.05)。MT1-MMP表达在高分化或伴有淋巴结转移的鳞癌中明显上调(P<0.05),而MMP-2表达增加仅见于伴有淋巴结转移的鳞癌(P<0.05)。鳞癌和BCE中MT1-MMP、MMP-2表达与患者性别、年龄、病程、发病部位、原发/转移病灶及BCE侵袭性无关(P>0.05)。结论 MT1-MMP、MMP-2表达上调与皮肤鳞癌的淋巴结转移有关。MT1-MMP、MMP-2表达水平不能区别BCE是否具有侵袭性。     

环氧合酶-2和血管内皮生长因子mRNA在皮肤鳞状细胞癌组织中的表达

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA在皮肤鳞状细胞癌(SCC)和正常人皮肤组织中的表达以及它们之间相互关系。方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,检测24例SCC和10例正常人皮肤组织中COX-2和VEGF mRNA的表达。结果 RT-PCR结果显示,在正常人皮肤组织中COX-2和VEGF mRNA呈较弱表达或无表达,吸光度平均值分别为(0.01±0.01)和(0.02±0.02);有79.2%(19/24)SCC组织中COX-2 mRNA表达水平增高,平均值为(0.56±0.48),与正常皮肤组织比较差异有统计学意义(P<0.05);VEGF mRNA在SCC组织中全部高表达(24/ 24,100%),平均值为(0.66±0.35),与正常人皮肤组织比较差异有统计学意义(P<0.05)。经相关性分析两者之间的表达呈明显正相关(r=0.86)。结论 COX-2可能与SCC血管形成有关,且其作用可能通过上调VEGF通道来发挥作用。     

皮肤基底细胞癌组织中血管内皮细胞生长因子受体-2的表达

目的 研究血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)在皮肤基底细胞癌(BCC)组织中的表达情况.方法 提取BCC组织的mRNA,以RT-PCR法检测标本中VEGFR-2mRNA的表达.同时应用蛋白质印迹法检测VEGFR-2蛋白的表达,免疫荧光法检测VEGFR-2在BCC组织中的定位.结果 BCC组织标本mRNA和蛋白水平中均可以检测到VEGFR-2的表达,并较正常人对照有显著增加.VEGFR-2在BCC细胞主要表现为膜性分布.结论 皮肤BCC组织细胞能够高异常表达VEGFR-2,可能是导致BCC细胞肿瘤性增殖的原因之一.     

寻常性银屑病患者皮损中Caspase-3和bcl-xL的表达

目的 探讨Caspase-3和bcl-xL在银屑病皮损中的表达及意义。方法 采用免疫组化法对26例寻常性银屑病患者的皮损及其周边外观正常皮肤和10例正常人对照皮肤中Caspase-3和bcl-xL的表达进行了检测。结果 正常人对照皮肤、银屑病皮损及其周边外观正常皮肤的表皮均表达Caspase-3,其中皮损处的表达明显增强(P<0.0001);除皮损表皮中散在表达bcl-xL外,正常人对照皮肤、银屑病皮损周边外观正常皮肤的表皮中不表达bcl-xL。结论 Caspase-3和bcl-xL可能通过诱导银屑病皮损角质形成细胞的凋亡而参与了银屑病的发病。     

皮肤基底细胞癌T钙黏蛋白的表达及其DNA异常甲基化分析

目的 检测皮肤基底细胞癌(BCC)中T钙黏蛋白的表达以及异常甲基化.方法 采用免疫组化法和CpG岛甲基化特异性PCR方法,对29例BCC和19例正常人暴光部位皮肤的组织标本进行T钙黏蛋白的表达及甲基化检测.结果 正常皮肤皆表达T钙黏蛋白,29例BCC中8例(27.59%)检测到T钙黏蛋白表达(P<0.05),9例BCC(31.03%)和19例正常皮肤中的1例(5.26%)检测到T钙黏蛋白启动子区域的异常甲基化(P<0.05).结论 T钙黏蛋白表达降低与皮肤基底细胞癌的发病机制相关,T钙黏蛋白启动子区域的异常甲基化与蛋白低表达可能相关.     

基底细胞癌和鳞状细胞癌皮损中Smad2、Smad3和Smad4 mRNA表达下调

目的：检测转化生长因子β（TBF-β）/Smad信号转导途径中Smad2、Smad3和Smad4mRNA在基底细胞癌（BCC）和鳞状细胞癌（SCC）中的表达水平。方法：应用反转录一实时定量聚合酶链式反应（PCR）方法分别检测BCC、SCC与正常对照皮肤中Smad2、Smad3和Smad4mRNA的表达情况。结果：BCC和SCC皮损中Smad2、Smad3和Smad4mRNA的表达水平均显著低于正常人对照皮肤。结论：皮肤BCC和SCC中Smad2、Smad3和Smad4表达下调可直接或间接导致TGF-β抑制上皮细胞异常增殖和转化的作用受阻，从而有助于上述表皮肿瘤的形成和发展。     

神经性皮炎皮损处神经纤维的数量及其与朗格汉斯细胞关系的研究

目的探讨神经性皮炎患者皮损处神经纤维的数量变化及其与朗格汉斯细胞接触的关系.方法用辣根过氧化物酶结合的链霉亲和素-生物素技术观察24例神经性皮炎患者皮损处神经纤维的表达及数量变化.用免疫荧光双标记及共聚焦激光扫描显微镜技术观察神经性皮炎患者皮损处神经纤维与朗格汉斯细胞接触数量关系.用实时定量PCR方法检测皮损处神经生长因子mRNA的表达情况.结果 神经性皮炎患者皮损处神经纤维长度显著增加,与皮损周边对照(t=6.90,P<0.001)及正常人对照(t=5.71,P<0.001)比较差异有统计学意义.皮损表皮内有神经纤维接触的朗格汉斯细胞占朗格汉斯细胞总数的百分数明显增多,与皮损周边对照(X²=43.91,P<0.001)及正常人对照(X²=46.11,P<0.001)比较差异有统计学意义.皮损处神经生长因子mRNA高表达,与皮损周边对照(t=3.25,P<0.01)及正常人对照(t=3.67,P<0.01)比较差异有统计学意义.结论 神经性皮炎患者皮损处存在高水平活性的NGF导致神经纤维增生.     

寻常型银屑病患者血管内皮生长因子及单核细胞趋化因子-1表达的研究

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)在银屑病患者皮肤中的表达及其意义。方法 用免疫组化法检测银屑病患者皮损、非皮损及正常人皮肤中VEGF、MCP-1的表达与分布。用双抗体夹心酶联免疫吸附法检测患者血清中VEGF、MCP-1水平。结果 ①银屑病患者皮损及非皮损中VEGF表达较正常人皮肤明显增强(P<0.05).皮损中MCP-1表达较非皮损及正常人皮肤明显增强(P<0.05).②患者血清中VEGF水平明显高于正常人(P<0.05),MCP-1水平与正常人比较差异无显着性(P>0.05).③皮损角质形成细胞中VEGF、MCP-1的表达与PASI评分无显着相关性(P>0.05)。结论 VEGF、MCP-1的表达增强在银屑病的发病机制中可能起重要作用。     

银屑病表皮转化生长因子β受体Ⅰ和Ⅱ原位表达的研究

为探讨转化生长因子β受体Ⅰ型和Ⅱ型对银屑病表皮角质形成细胞增殖的影响，采用免疫组化EnVision多聚复合物二步法对银屑病及正常人表皮转化生长因子β受体Ⅰ和Ⅱ原位表达进行比较研究，结果银屑病患者皮损表皮处TGF－βRⅠ和Ⅱ的表达减少或缺失；非皮损处和正常人表皮组织TGF－βRⅠ和Ⅱ呈阳性表达，主要在基底层和棘层下部。转化生长因子β受体Ⅰ型和Ⅱ型功能下调可能与银屑病患者的表皮过度增殖有关。     

斑块状银屑病表皮干扰素-γ受体mRNA表达的研究

目的 探讨斑块状银屑病患者表皮干扰素-γ受体mRNA的表达及其在发病机制中的作用.方法 采集28例斑块状银屑病患者皮损及周围外观正常皮肤,28例正常人皮肤作为对照,分离表皮,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测干扰素-γ受体mRNA表达水平.PASI评分法评估银屑病的严重程度.结果 斑块状银屑病患者皮损和非皮损表皮干扰素-γ受体mRNA的表达率为100%,对照样本的表达率为17.86%(5/28);患者皮损、非皮损和对照表皮干扰素-γ受体mRNA的表达水平均值分别为1.002±0.563、0.188±0.095、0.005±0.012,皮损处的表达水平明显高于非皮损处(t=7.54,P<0.01),非皮损处明显高于正常人对照;进行期与稳定期皮损的表达水平分别为1.210±0.489和0.379±0.163,进行期显著高于稳定期(t=4.37,P<0.01);而皮损处的表达水平与PASI评分值无相关性.结论 表皮干扰素-γ受体mRNA的表达可能与银屑病皮损的形成和病情的活动性有关.     

Patched-1和Gli-1在银屑病皮损中的表达

目的 探讨Patched-1、Gli-1在银屑病皮损中的表达。方法 应用免疫组化和原位杂交的方法,检测银屑病皮损及正常人皮肤中Patched-1、Gli-1的表达和分布情况。结果 在银屑病皮损中Patched-1表达高于正常人皮肤(免疫组化χ²=6.53,P<0.05;原位杂交χ²=7.93,P<0.05),Gli-1表达显著高于正常人皮肤(免疫组化χ²=19.21,P<0.01;原位杂交χ²=14.34,P<0.01),主要分布于表皮细胞胞浆中,在毛囊、浸润的炎细胞及血管内皮细胞中也有阳性表达。结论 银屑病皮损表皮中Patched-1和Gli-1均处于高表达状态,Hedgehog信号转导通路可能在银屑病发病中起一定作用。     

寻常性银屑病皮损中神经生长因子受体P75NTR和TrkA的表达

目的 探讨神经生长因子受体P75^NTR和TrkA在寻常性银屑病发病机制中的作用。方法 应用原位杂交和免疫组化技术对38例寻常性银屑病患者(进行期21例,静止期17例)皮损区、非皮损区及10例正常人皮肤组织中P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平进行检测。结果 与正常人比较,寻常性银屑病皮损及非皮损区P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平明显上调,且皮损中的表达明显高于非皮损区(P<0.01);进行期患者皮损与非皮损区P75^NTR和TrkA受体mRNA及蛋白表达水平分别高于静止期(P<0.01)。结论 神经生长因子受体P75^NTR和TrkA mRNA及蛋白水平在进行期、静止期寻常性银屑病皮损及非皮损区的不同表达,提示神经生长因子可能参与了银屑病的发病。