促红细胞生成素在成骨细胞分化中的实验研究

目的 研究促红细胞生成素(EPO)对成骨细胞分化和功能的影响以及EPO-EPO受体(EPOR)信号在成骨细胞中的作用,探讨EPO在骨稳态中的作用及其机制.方法 体外培养小鼠骨髓基质细胞系(ST2),加入EPO蛋白,采用实时荧光定量聚合酶链式反应方法检测成骨分化相关基因的变化,采用碱性磷酸酶(ALP)和茜素红染色方法观察成骨细胞骨形成功能.采用RNA干扰技术沉默EPOR基因,检测阻断EPO-EPOR信号通路后成骨细胞分化和功能的变化.结果 骨髓基质细胞表达EPOR,EPO与受体EPOR结合后,可诱导其向成骨细胞分化,增加Runx2、Alp和Coll等成骨细胞相关基因的表达,同时增加ALP蛋白的表达和钙结节的沉积.EPOR基因沉默后,成骨相关基因的表达受到抑制.结论 EPO通过EPOR信号促进成骨细胞的分化和功能.     

促红细胞生成素促进骨髓基质细胞成骨分化的实验研究

目的:研究促红细胞生成素(EPO)通过ephrinB2/EphB4信号通路在细胞成骨分化中的作用。探讨EPO在骨稳态中的作用及其机制。方法:体外培养小鼠骨髓基质细胞系(ST2),加入EPO后,采用real-time PCR方法检测EphB4的表达以及成骨细胞相关基因的表达,采用ALP活性检测和茜素红染色观察EPO对成骨细胞功能的影响;在体外培养的ST2细胞中加入ephrinB2-Fc蛋白,模拟破骨细胞-成骨细胞共培养,使ephrinB-EphB4正向信号激活,采用上述方法检测其对成骨细胞的影响;进一步采用RNAi技术,使EphB4基因沉默,检测EPO对成骨细胞的影响。结果:EPO能增加ST2细胞RUNX2、ALP和Col1等成骨细胞相关基因的表达,同时伴随ST2细胞表面EphB4的表达升高,ALP活性和钙结节也增加;在模拟破骨细胞-成骨细胞共培养体系中,EPO也能促进ST2细胞的成骨向分化和功能;EphB4基因沉默后,EPO对ST2细胞的作用被减弱。结论:EPO能促进成骨细胞的分化和功能,该作用是通过ephrinB2/EphB4信号介导的。     

生物力刺激和促丝裂原激活蛋白激酶对骨改建的影响

生物力信号转导是骨生物学研究的热点之一.通过研究流体剪切力、细胞外基质形变等生物力刺激下成骨细胞系的应答发现,生物力信号转导涉及促丝裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号转导通路在内的多种信号系统.生物力刺激作用于整联蛋白、钙离子通道和脂筏等感受器,激活MAPK信号转导通路并通过级联反应调节下游分子的活性,如核心结合因子-α1和激活蛋白1等转录因子,进而调控成骨细胞的功能.同时生物力刺激诱导的MAPK信号转导通路与雌激素受体、甲状旁腺素受体和1,25-二羟胆骨化醇受体等信号转导通路存在交联作用,是生物力信号转导的重要途径.     

沉默交配型信息调节因子2同源蛋白1与骨和软骨代谢的关系

沉默交配型信息调节因子2同源蛋白（SIRT）1是一种依赖于烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的第3类去乙酰化酶,在骨与软骨的代谢中发挥着重要的作用。SIRT1通过促进成骨细胞生成、骨量增长、抑制破骨细胞生成,调节骨的发育和重建。此外,SIRT1还可促进骨髓间质干细胞的成骨向分化。在软骨代谢过程中,SIRT1对于软骨的改建必不可少。SIRT1在骨与软骨过程中的作用与无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族信号转导通路、核因子-κB信号转导通路、叉头转录因子O和甲状旁腺素密切相关。本文就沉默信息调节因子SIRT1在骨与软骨代谢中的作用、SIRT1调节骨代谢的信号转导通路等研究进展作一综述。     

刺猬蛋白和无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族在成骨细胞分化增殖中的作用

骨发生发育受到多种信号转导通路的调节,其中刺猬蛋白(HH)和无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族(WNT)信号转导通路协调成骨细胞的分化、增殖和成熟。本文就HH调节颞下颌关节的发生发育,核心结合因子-A1通过HH调节软骨细胞的增殖和成熟,HH调节梅克尔软骨分化,WNT信号转导通路在神经系统形成、成骨细胞分化增殖和全身骨骼发育中的作用,HH和WNT中的经典的β-连环蛋白促进成骨细胞分化和增殖,抑制软骨细胞和调节细胞分化和增殖等研究进展作一综述。     

促丝裂原激活蛋白激酶在牙髓干细胞向成牙本质细胞分化和牙髓损伤修复中的作用

通过诱导牙髓干细胞（DPSC）向成牙本质细胞方向分化,龋源性牙髓炎的治疗将不再局限于根管治疗这一临床选择,修复治疗也不再成为缺失牙治疗的唯一方案。促丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）,尤其是P38MAPK通过直接或间接磷酸化特定的转录因子,将细胞外刺激信号转导至细胞及其核内,从而引起一系列细胞生物学反应,如细胞增殖、分化、转化和程序性死亡。骨形态发生蛋白-2、矿物三氧化物聚合体和Biodentine皆可诱导DPSC向成牙本质细胞分化,而三者正是通过MAPK信号转导通路发挥作用的。在组织工程支架诱导DPSC分化过程中,支架材料通过激活P38MAPK信号转导通路促进了DPSC的分化。此外,MAPK信号转导通路参与牙髓损伤修复中DPSC的迁移、黏附和分化,参与牙髓损伤修复中牙本质的形成。由于MAPK信号转导通路在细胞增殖、分化和生存等过程中都起着十分关键的作用,因此,深入研究其反应分子、作用底物和作用机制有着重要的理论和临床意义。     

微小RNA21与干细胞之间的关系

微小RNA（miRNA）参与早期胚胎发生以及细胞增殖和分化、细胞生存和程序性死亡、细胞代谢和能量平衡等一系列重要的生命过程。其中,miRNA21通过调节转化生长因子（TGF）β-Smad信号转导通路促进间质干细胞（MSC）成脂分化和抑制人脂肪源干细胞增殖。骨形态发生蛋白（BMP）受体（BMPR）2为BMP9诱导干细胞成骨分化所必需,而BMPR2是miRNA21的作用标靶,即miRNA21与干细胞成骨分化相关。在MSC分化过程中, miRNA21通过抑制萌芽（SPRY）1和SPRY2蛋白表达,调节细胞外信号调节激酶-促丝裂原激活蛋白激酶信号转导通路活性的大小和持续时间,增加MSC的分化潜能。miRNA21过表达可以促进低氧或无血清条件下MSC的生存,而下调miRNA21则会加快MSC程序性死亡。明确miRNA21的生物学功能及其对干细胞分化的调控机制,旨在为干细胞在组织工程技术和疾病防治等方面的应用奠定依据。     

三七总皂及其诱导成骨的试验和机制

三七总皂苷(PNS) 可调节多种成体干细胞的分化,与骨形成密切相关.以微波、超声和超临界流体技术提取PNS,较传统提取时间大大缩短,提取效率大大提高.PNS的诱导成骨试验包括体外试验和体内试验.体外试验显示,PNS可明显促进骨髓基质干细胞的成骨分化及增殖;体内试验显示,PNS可使骨矿化提前.PNS既可通过调节骨形态发生蛋白、胰岛素样生长因子和白细胞介素-6等细胞因子,促进骨改建;还可通过促丝裂原激活蛋白激酶、无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点家族、核因子-κB等信号转导通路调节破骨细胞分化,促进骨形成.羟磷灰石作为支架材料具有良好的成骨作用,将其与PNS复合,PNS可定向缓慢地作用于骨缺损部位并在骨缺损组织周围始终保持一定的质量浓度,从而加速骨缺损修复.     

EPO对人牙髓干细胞增殖及分化的影响

目的体外探究促红细胞生成素(EPO)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)增殖及分化的影响。方法体外常规培养hDPSCs后,不同浓度EPO(0、0.1、1、10、20、50 U/ml)刺激hDPSCs,CCK-8法检测细胞增殖能力变化;采用碱性磷酸酶(ALP)染色及活性测定、茜素红染色、Real-time PCR来研究EPO对hDPSCs分化的影响。结果 10U/ml EPO可以促进hDPSCs的增殖(P<0.05);20U/ml EPO组碱性磷酸酶染色加深,活性提高,钙化结节形成增多;成血管成牙成骨向分化相关基因VEGF、bFGF、DSPP、Runx2、ALP的表达上调(P<0.05)。结论适宜浓度的EPO可以促进hDPSCs的增殖及分化。     

胞外信号调控激酶1/2在机械力促进核心结合因子α1表达的相关研究

核心结合因子α1(Cbfα1)是骨形成的关键基因,是决定间充质细胞向成骨细胞系分化的特异性转录因子。通过调节Cbfα1的表达可以调控骨细胞的发生和分化,维持正常的骨骼发育。机械力可激活一些信号通路进而促进Cbfα1的表达,进一步调控骨的发育和形成,胞外信号调控激酶(ERK)1/2信号通路是其中一条关键通路。     

Immunohistochemical detection of phosphorylated JNK, p38 MAPK, and ERK5 in ameloblastic tumors

BACKGROUND: To evaluate roles of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) in oncogenesis and cytodifferentiation of odontogenic tumors, expression of phosphorylated JNK (p-JNK), p38 MAPK (p-p38 MAPK), and ERK5 (p-ERK5) was analyzed in ameloblastic tumors as well as in tooth germs. METHODS: Ten tooth germs, 47 ameloblastomas, and 5 malignant ameloblastic tumors were examined immunohistochemically with the antibodies against p-JNK, p-p38 MAPK, and p-ERK5. RESULTS: Immunoreactivity for p-JNK was detected in epithelial or neoplastic cells detached from the basement membrane in 7 tooth germs and 7 ameloblastomas, and the expression levels of p-JNK in ameloblastic tumors were significantly lower than that in tooth germs. Expression of p-p38 MAPK was found in epithelial or neoplastic cells in tooth germs and ameloblastic tumors except for two ameloblastomas, and increased expression was found in keratinizing cells of acanthomatous ameloblastomas. The expression level of p-p38 MAPK in ameloblastomas was significantly higher than the levels in tooth germs and malignant ameloblastic tumors. Immunoreactivity for p-ERK5 was found predominantly in epithelial or neoplastic cells near the basement membrane in tooth germs and ameloblastic tumors. The expression levels of p-ERK5 in ameloblastic tumors were slightly higher than that in tooth germs, and plexiform ameloblastomas showed significantly higher p-ERK5 expression than follicular ameloblastomas. CONCLUSION: Expression of p-JNK, p-p38 MAPK, and p-ERK5 in tooth germs and ameloblastic tumors suggests that these MAPK signaling pathways contribute to cell proliferation, differentiation, or apoptosis in both normal and neoplastic odontogenic tissues. Altered expression of these phosphorylated MAPKs in ameloblastic tumors may be involved in oncogenesis and tumor cell differentiation.     

成牙本质细胞分化的分子机制

成牙本质细胞的分化是一个由多种分子参与调控的复杂过程，涉及到生长因子、受体分子、信号分子、转录因子、牙本质基质蛋白等分子的信号转导网络。本文对其信号转导各个环节的研究进行了概述。     

Translocation of the α-isozyme of protein kinase C during stimulation of rat parotid acinar cells by phorbol ester and carbachol

Protein kinase C activity was detected in the cytosolic fraction of quiescent parotid acinar cells; the particulate fraction contained a much smaller proportion of the enzyme. Protein kinase C activity was increased in the membrane fraction and decreased in the cytosol after exposure of intact cells to phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) or the muscarinic-receptor agonist carbachol. The effect of PMA was potentiated by a subthreshold concentration of ionomycin. Immunoblot analysis with anti-protein kinase C antibodies revealed that the protein kinase C-α isoform is expressed in rat parotid cells. Other Ca²⁺dependent isoforms were not detected. Further, agonist stimulation caused the redistribution of protein kinase C-α from cytosol to a membrane fraction. Agonists may promote parotid acinar cell activity, including amylase secretion, by increasing the affinity of protein kinase C-α for the membrane fraction, presumably via a rise in Ca²⁺ and diacylglycerol derived from polyphosphoinositide hydrolysis.     

破骨细胞分化因子及其信号转导通路

破骨细胞负责骨吸收,来源于骨髓单核-巨噬细胞系,其分化需巨噬细胞发育必需集落刺激因子的参与。破骨细胞形成和分化过程中所必须的细胞间信号转导则由骨保护蛋189白(OPG)以及核因子-κB(NF-κB)受体活化因子(RANK)及其配体(RANKL)系统介导。RANKL-RANK-OPG信号转导通路在多种因子共同参与下,通过NF-κB、促丝裂原激活蛋白激酶和磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B等信号转导通路实现信号转导。肿瘤坏死因子-α可刺激成骨细胞产生粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和白细胞介素(IL)-6等因子,诱使破骨细胞前体分化为破骨细胞。一氧化氮和雌激素影响破骨细胞前体的分化。整联蛋白-αvβ3在破骨细胞诱导酪氨酸磷酸化与富含脯氨酸的酪氨酸激酶2及非受体依赖型蛋白酪氨酸激酶Src家族中的衔接蛋白P130 Crk相关的底物蛋白激活中至关重要,使骨产生吸收作用。在破骨细胞及其前体中,转化生长因子-β受体、类固醇家庭受体、G-蛋白偶联受体、IL-1和非酪氨酸激酶细胞因子等对于破骨细胞功能的影响十分重要。     

哺乳动物的外周味觉受体和信号转导及调节机制

味觉是一种极为复杂和重要的感觉。哺乳动物借助高度敏感专一的味觉感受器,对外界环境中的化学物质进行识别、探寻食物和调节食欲并作出相应的好恶甚至规避性的行为应答。味觉信号转导机制是目前口腔基础研究领域的热点和难点。在过去的数年里,味觉受体、信号转导及调节机制受到了极大的关注,本文就味觉细胞的类型和功能、外周味觉受体及信号转导机制、外周味觉信号调节机制研究进展作一综述。     

骨形成蛋白信号转导通路中的Smads相关转录因子

骨形成蛋白(BMPs)是一类多功能的细胞生长因子,具有广泛而多样的生物学效应。Smads蛋白是将BMPs胞外信号从细胞膜转导至细胞核并进一步调节靶基因转录的关键中介分子。在细胞核内,各种Smads结合蛋白通过不同的机制与Smads转录复合物相互作用,促进或抑制BMPs相关基因的转录。本文着重对BMPs-Smads信号转导途径、细胞核内Smads相互作用蛋白包括核转录因子、共激活及共抑制因子做一综述。