上海市中小学女生CYP3A酶活性分析

目的:分析女中小学生CYP3A酶活性及其变化趋势。方法:用HPLC梯度洗脱法测定573名女中小学生尿液中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的含量,并通过计算其比值分析CYP3A的活性。结果:在青春期开始发育时CYP3A酶的活性降低,且发育后酶活性个体差异变大。结论:中小学女生年龄跨越大,临床使用经CYP3A酶代谢的药物时应根据身体发育情况适当调整。     

上海地区210名12周岁儿童CYP3A活性分布

目的:了解上海地区12岁儿童CYP3A酶活性的分布。方法:采用HPLC法测定尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的浓度,以6β-羟基氢化可的松/氢化可的松的浓度比来表示CYP3A酶的活性。结果:210名受检者CYP3A酶的活性为(5.0±2.3),其中男性为(4.7±2.3),女性为(5.4±2.4)。结论:12岁儿童CYP3A酶活性无性别差异,正常值范围为0.96~26.55。     

上海市6～12岁儿童CYP3A酶活性分布

目的了解上海地区6～12岁儿童CYP3A酶活性分布情况。方法采用高效液相色谱法［固定相：HP Hypersil ODS分析柱(250 mm×4 mm，5 μm)；流动相：CH3CN(A相)和7.56 mmol·L^-1 (NH4)2SO4(B相)，梯度洗脱，柱温：30 ℃；流速：1.0 mL·min^-1；紫外检测波长：240 nm；取处理完毕的样品20 μL进样］测定入选志愿者尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的浓度，以6β-羟基氢化可的松与氢化可的松的浓度比值来表示CYP3A酶的活性。结果450例受检者CYP3A酶的活性均值为(3.75±2.82)，均值95%可信区间为3.41～4.12。结论6～12岁儿童CYP3A酶活性无性别差异，正常值范围为0.49～28.71。     

上海地区初中生CYP3A酶活性分布

目的了解上海地区初中生CYP3A酶活性的分布。方法采用HPLC法测定尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的浓度,以6β-羟基氢化可的松/氢化可的松的浓度比来表示CYP3A酶的活性。结果980名受检者CYP3A酶的活性为5.21±2.32,年龄(X)与CYP3A酶的活性(Y)的线性方程为:Y=0.342X 0.900。结论上海地区初中生CYP3A酶活性无性别差异,其正常值范围为1.00~27.16。     

性别与青春期发育对CYP3A酶活性的影响

目的研究性别及青春期发育对人体CYP3A酶活性的影响。方法采用高效液相色谱梯度洗脱法测定并计算569例中小学生尿液中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的含量，以两者的浓度比值表示CYP3A酶的活性，分析青春期发育前后CYP3A酶活性的变化及性别对CYP3A酶活性的影响。结果性别间的F值为0.734 271，青春期发育前后的F值为22.620 83。不同性别间CYP3A酶的活性差异无显著性，青春期发育后CYP3A酶的活性较发育前明显降低(P＜0.01)。结论性别对CYP3A酶的活性无影响，青春期发育对CYP3A酶的活性有较大影响。学龄期儿童CYP3A酶的活性比青春期学生高。     

上海地区208名儿童CYP3A活性分布

目的:了解上海地区3岁儿童CYP3A酶活性的分布。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的浓度,以6β-羟基氢化可的松/氢化可的松的浓度比来表示CYP3A酶的活性。结果:208名受检者CYP3A酶的活性为4.0±1.9,其中男性为4.2±1.9,女性为3.7±1.8。结论:3岁儿童CYP3A酶活性无性别差异,正常值范围为1.13~13.77。     

内源性氢化可的松为探针的体内CYP3A活性测定

目的建立测定精神病患者体内CYP3A酶活性的方法。方法直接收集20例精神病住院患者晨尿液,测定尿液中内源性氢化可的松与6β-羟基氢化可的松的含量,以6β-羟基氢化可的松/氢化可的松来评估CYP3A酶的活性。结果患者尿液中6β-羟基氢化可的松与氢化可的松的比值为(8.12±4.36)。结论CYP3A酶的活性可以通过测定6β-羟基氢化可的松与氢化可的松的比值进行预测。     

高效液相色谱法测定分析中小学男生CYP3A活性

目的通过高效液相色谱法测定CYP3A酶活性,研究中小学男生CYP3A酶活性变化及其趋势。方法用高效液相色谱法梯度洗脱法测定并计算515名中小学男生尿液中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的比值,以反映CYP3A的活性。通过统计分析,研究CYP3A的活性的变化及其趋势。结果酶的活性在青春期前后都较平稳,但在开始发育时出现酶活性降低,有统计学意义,且发育后酶活性个体差异变大。结论中小学男生年龄跨越大,临床用经CYP3A酶代谢药物时,应根据身体发育情况适当调整。     

探针药物法测定CYP450 3A的活性

目的：以睾酮为探针药物采用高效液相色谱法测定GYP4503A的活性。方法：采用大鼠肝微粒体体外代谢模型,以有机溶剂乙腈终止反应并沉淀蛋白,上清液进高效液相色谱分析。根据Lineweaver-Burk双倒数作图法方程式计算酶动力学参数。结果：在蛋白浓度为1．0mg·mL^-1,反应时间为5min时酶促反应近似直线进行,测得酶动力学参数Km值为38．84μmol·L^-1,Vmax值为1．83μmol·L^-1·min^-1·mg^-1 protein。结论：本方法简便、有效,适合实验室用于测定CYP4503A的活性,为进一步研究药物相互作用奠定了基础。     

以睾酮为探针测定大鼠CYP3A酶活性的实验研究

目的建立一种简便、快速、可靠的以睾酮作为探针药物,评价大鼠CYP3A酶活性的高效液相色谱检测方法。方法色谱柱为HypersilBDSC18柱(4.6mm×150mm,5μm),柱温为25℃,检测波长为254nm,内标为氢化可的松,流动相为甲醇-10mmol·L-1Na2HPO4水溶液(pH8.25)(55∶45),流速为1mL·min-1。睾酮以大鼠肝微粒体温孵后,用乙酸乙酯萃取,离心取上清液挥干后用甲醇-水(1∶1)复溶进样分析。结果睾酮和氢化可的松的保留时间分别为17.74min和6.05min;睾酮的孵育产物6β-羟基睾酮的保留时间为4.72min,回归方程为Y=0.0756X-0.0214(r=0.9980),线性范围为0.3125～20μg·mL-1,检测限下限质量浓度为(0.078±0.016)μg·mL-1(S/N≥3),提取回收率为79.3%～95.1%,方法回收率为98.0%～104.0%,低、中、高三个浓度日内、日间RSD均小于10.4%;温孵体系中其他内源性物质不干扰测定。结论所建立的HPLC稳定、高效,适合睾酮及其代谢产物6β-羟基睾酮的测定,可应用于药物对大鼠CYP3A酶活性的评价。     

Expression,Activity and Regulation of CYP3A in Human and Rodent Brain

The importance of cytochrome P450 (CYP) 3A enzymes in human drug metabolism is well established. The function of these enzymes has been characterized extensively in liver and intestinal tissues but much less is known about their expression, regulation and functional activity in the brain. Several lines of evidence point to the presence and function of multiple forms of CYP enzymes, including CYP3A, in both human and rodent brain. Expression studies suggest that CYP3A enzymes show regional differences in their distribution in the brain, where they may play a role in steroid metabolism. They also metabolize many psychoactive drugs and may have a profound effect on their efficacy and safety. This review explores the tissue, cellular, and subcellular expression of CYP3A isoforms in human and rodent brain and provides insight into their functional roles and regulation.     

中药止咳橘红颗粒对CYP3A4和CYP1A2抑制作用的研究

目的：在人体内研究止咳橘红对CYP3A4和CYP1A2的抑制作用，以预测止咳橘红与常用临床药物的相互作用。方法：咪哒唑仑和咖啡因分别作为CYP3A4和A2的探针药物，采取交叉设计，10名受试者在服用3d止咳橘红的前后均服用7.5mg咪哒唑仑和100mg咖啡因，服药后采血测定两者及代谢产物的代谢动力学参数，探讨针药物及代谢物的浓度用HPLC-MS法测定，Cmax,tmax从药时曲线中直接读出，AUC用梯形法计算，Ke用3P87程序进行拟合计算，分析服药前后CYP3A4和CYP1A2被抑制的情况，结果 服用止咳橘红后，咪哒唑仑的代谢受到了轻微的抑制，它的血药浓度，达峰时间和药时曲线下面积都有了升高趋势，但无显著差异。而咖啡因的代谢未受到影响。结论 止咳橘红对CYP3A4的活性有较弱的抑制作用，能够导致CYP3A4底物咪哒唑仑代谢的轻微抑制，而对CYP1A2的活性没有影响。止咳橘红长期使用或超过治疗剂量使用时是否会对CYP3A4产生显著性影响。尚需进一步的研究证明。     

高效液相色谱法检测人肝微粒体CYP3A活性

目的：测定普罗帕酮和N 去丙基普罗帕酮的比值以表达人肝微粒体中CYP3A的活性。方法：以1 mg·mL 1微粒体蛋白浓度37℃孵育普罗帕酮1 h，以HPLC测定普罗帕酮和N 去丙基普罗帕酮的含量。结果： 普罗帕酮和N 去丙基普罗帕酮的线性方程分别为Y＝0.452 0X＋0.003 029(r＝0.999 7)；Y＝1.137 3X＋0.012 740(r＝0.998 5)。结论：N 去丙基普罗帕酮与普罗帕酮的最大比值为1.54，CYP3A具有饱和性。     

Pharmacokinetics of midazolam in CYP3A4- and CYP3A5-genotyped subjects

Objective We investigated whether differences in pharmacokinetics of midazolam, a CYP3A probe, could be demonstrated between subjects with different CYP3A4 and CYP3A5 genotypes.Methods Plasma concentrations of midazolam, and of total (conjugated + unconjugated) 1OH-midazolam, and 4OH-midazolam were measured after the oral administration of 7.5 mg or of 75 µg of midazolam in 21 healthy subjects.Results CYP3A5*7, CYP3A4*1E, CYP3A4*2, CYP3A4*4, CYP3A4*5, CYP3A4*6, CYP3A4*8, CYP3A4*11, CYP3A4*12, CYP3A4*13, CYP3A4*17 and CYP3A4*18 alleles were not identified in the 21 subjects. CYP3A5*3, CYP3A5*6, CYP3A4*1B and CYP3A4*1F alleles were identified in 20, 1, 4 and 2 subjects, respectively. No statistically significant differences were observed for the AUC_inf values between the different genotypes after the 75-µg or the 7.5-mg dose.Conclusion Presently, CYP3A4 and CYP3A5 genotyping methods do not sufficiently reflect the inter-individual variability of CYP3A activity.     

CYP3A5~*3和CYP3A4~*18B基因多态性对肾移植患者环孢素药代动力学的影响

目的回顾性研究肾脏移植后1mon,CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因多态性对CsA药代动力学参数的影响。方法采用PCR-RFLP方法分析了63名肾脏移植患者CYP3A5*3和CYP3A4*18B基因型;荧光偏正免疫法用于检测肾移植患者静脉全血中的CsA浓度。结果在63名肾移植患者中,CYP3A5*3和CYP3A4*18B突变等位基因发生频率分别为0.770(95CI:0.767～0.773),0.235(95CI:0.235～0.241),而且这些等位基因表现出完全连锁不平衡。在移植术后1mon内,携带CYP3A4*1/*1野生型纯合子患者的C0以及剂量校正谷血浓度(C0/D)均明显高于携带CYP3A4*1/*18B杂合子或CYP3A4*18B/*18B突变型纯合子患者(P<0.05,Mann-WhitneyUtest);CYP3A5*1/*1基因型组的给药剂量明显高于CYP3A5*1/*3或CYP3A5*3/*3基因型组(P=0.004<0.01,Kruakal-Wallistest);CYP34*18B和CYP3A5*3联合考虑,对于CYP3A5表达组,同样发现C0、C0/D在CYP3A4*1/*1组C0以及C0/D均明显高于CYP3A4*1/*18B或CYP3A4*18B/*18B组(P<0.05,Mann-WhitneyUtest);而其他药动学参数在CYP3A5*3及CYP3A4*18B各组间相比差异则没有统计学意义。结论CYP3A5*3和(或)CYP3A4*18B基因多态性对肾移植后1monCsA药代动力学有一定影响,移植前CYP3A5*3基因型的分析仍需进一步研究。     

五味子甲素对CYP3A活性的影响及其体内外相关性研究

目的:通过"探针"法探讨五味子甲素体内、外对大鼠肝微粒体CYP3A活性的影响及其相关性。方法:选取咪达唑仑作为CYP3A探针,用高效液相色谱法测定五味子甲素体外孵育给药和体内灌胃给药后大鼠肝微粒体酶CYP3A活性,通过药动学参数K_m确定其体内、外作用的相关性。结果:体外试验结果表明,五味子甲素非竞争性抑制咪达唑仑的代谢,其K_i为5.5μmol·L^-1,体内试验亦证实了五味子甲素能显著抑制肝微粒体CYP3A酶活性（P<0.01）并呈剂量依赖性,其体内给药的K_i值为30.67 mg·kg^-1。体内外K_m值十分接近。结论:五味子甲素在体内和体外均可非竞争性抑制大鼠肝微粒体酶CYP3A活性,其对CYP3A影响的体内、体外结果具有良好的相关性。