微囊化细胞或微囊化材料在糖尿病中的应用

目的：评价当前国内外微囊化人工细胞技术在糖尿病中的应用效果。 方法：检索PUBMED数据库中1980/2009有关人工细胞微囊技术进展在糖尿病中应用的文献,检索词 “microcapsule, islet, transplantation”,并限定文献语言种类为English;同时检索中国期刊全文数据库1999/2009有关人工细胞微囊技术进展在糖尿病中应用的文献,检索词为“微囊,胰岛,移植”。按纳入与排除标准收集所有相关动物随机对照及临床试验,评价其质量及提取数据。 结果：共纳入25篇文献,包括46例1型糖尿病患者,106只实验鼠,20头实验猪,25只实验猴。结果显示,与对照组相比,未囊化组与微囊化组胰岛细胞移植均可分泌胰岛素和降低血糖,微囊胰岛细胞组的胰岛细胞作用和存活时间更长。微囊具有较好的免疫隔离作用。 结论：微囊胰岛细胞移植后能改善和调节糖尿病的糖代谢异常,且微囊的免疫隔离作用能消除或减轻受体对异体或异种免疫排斥反应,减少或消除对免疫抑制剂的依赖。合适的囊材、合理的工艺、先进的制囊设备和胰岛分离提纯技术、适宜的移植位置能增强微囊胰岛细胞的抗机械强度,提高生物相容性,提高胰岛细胞移植的成功率,改善人工胰岛细胞的功能,延长存活时间。 关键词：微囊化;材料;胰岛;移植;糖尿病     

氯氮平对体外培养大鼠胰岛分泌功能的影响

目的 研究不同浓度氯氮平在不同条件下对外培养大鼠胰岛分泌功能的影响。方法 利用细胞培养技术,在不同葡萄糖浓度(3.3 mmol/L或16.7 mmol/L)和不同作用时间(1 h或4 h)下,以0.2、1、5或10 μmol/L氯氮平作用于大鼠胰岛,用放射免疫分析法测定培养上清液中胰岛素浓度,与相应对照组比较。结果 培养液葡萄糖浓度为3.3 mmol/L,培养1 h,氯氮平各浓度组胰岛素分泌量与对照组相比无显著性差异;培养4 h,4种浓度氯氮平均抑制胰岛素分泌,但各浓度组间无显著性差异。培养液葡萄糖浓度为16.7 mmoL/L,培养1 h或4 h,4种浓度氯氮平均不影响胰岛素分泌。结论 氯氮平抑制基础胰岛素分泌,与剂量无关;胰岛素分泌缺陷和胰岛素抵抗的共同作用可能是氯氮平引起糖代谢异常的机制。     

胰岛细胞移植过程中细胞受损的提示

目的：探讨胰岛细胞移植中早期胰岛细胞的损害程度及原因 方法：采用脑死亡自愿捐赠器官的供者胰腺，测定不同的冷却血时间胰岛细胞损害程度。将胰岛细胞与血液进行培养，观察移植早期可能出现的胰岛细胞损害。 结果：胰腺切取顺利，在冷却血5 h以内胰岛细胞活性率都在80％以上，超过8 h活性胰岛细胞数量只有19％甚至更低；人类胰岛暴露于未经抗凝的人类血中,胰岛将诱发一个迅速血细胞消耗。进行血小板激、中性粒细胞和单核细胞计数，HLA错配组（1.0±0.72×109/L，0.54±0.24×109/L，0.01±0.00×109/L），HLA匹配组（6.0±0.27×109/L，0.63±0.19×109/L，0.03±0.01×109/L），无论HLA错配还是匹配与对照组相比较血细胞都发生明显的消耗；加入肝素后血细胞计数HLA错配组（57.2±21.10×109/L，1.74±0.87×109/L，0.75±0.24×109/L），HLA匹配组（67.9±19.0×109/L，3.42±0.61×109/L，0.47±0.08×109/L）与对照组比较P<0.05，反应明显减轻；进行胰岛细胞体外培养24 h活性胰岛细胞数量分别为：匹配组（1.085±0.167×105/L ），错配组(0.697±0.193×105/L)。P<0.05，具有显著性差异，良好组织相容性有利于胰岛细胞存活。 结论：胰岛细胞的冷缺血时间对于其活性的影响很大；移植到血液的胰岛细胞会有普遍性的损害及HLA相关性损害。     

不同细胞因子组合体外诱导人脐血干细胞向胰岛样细胞分化

背景：由干细胞分化而来的胰岛样细胞存在数量少、胰岛素分泌量少以及能否达到临床移植要求等问题。 目的：观察不同细胞因子组合对人脐血干细胞体外向胰岛样细胞诱导分化的影响。 设计、时间及地点：细胞学体外对照观察,于2007-05/09在辽宁省血液中心输血医学研究所细胞研究中心完成。 材料：脐血来源于足月分娩的健康产妇,由沈阳市德济医院提供。 方法：密度梯度离心法体外分离人脐血单个核细胞,诱导1组首先以低糖DMEM培养液进行培养,添加20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子和20 μg/L表皮生长因子,培养成巢蛋白阳性细胞后改为高糖DMEM培养液,添加2% B27和10 mmol/L尼可酰胺。诱导2组直接以高糖DMEM培养液进行培养,添加20 mmol/L尼可酰胺、20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子、20 μg/L肝细胞生长因子、2% B27及0.1 mmol/Lβ-巯基乙醇。对照组只添加与诱导组相同的培养液,不加入任何细胞因子。 主要观察指标：诱导分化后对贴壁细胞进行形态学观察、胰岛素抗体的细胞免疫荧光染色及双硫腙染色鉴定。 结果：体外培养的人脐血干细胞通过细胞因子组合诱导后,可见散在的胰岛样细胞或成群的胰岛样细胞群,呈Insulin阳性反应。诱导1组细胞散在或成群分布,诱导2组则多为散在分布的胰岛样细胞,且细胞相对较小,几乎没有胰岛细胞团。双硫腙染色后诱导1组有少部分较大的胰岛样细胞呈阴性,诱导2组细胞均呈棕红色阳性表达,未诱导的对照组细胞呈阴性。 结论：人脐血干细胞通过不同细胞因子组合诱导后具有向胰岛样细胞分化的潜能,但诱导1组中部分细胞可能是非胰岛素细胞,而诱导2组胰岛样细胞均一性较差,可能与胰岛细胞种类较多、大小不一有关。     

HU-MSCS诱导为胰岛样细胞移植治疗糖尿病大鼠的研究

摘要目的: 观察人脐带间充质干细胞体外诱导分化为胰岛β样细胞及治疗糖尿病大鼠的效果方法：经培养，当细胞融合至70%~80%，诱导人脐带间充质干细胞向胰岛样细胞团分化，并用双硫腙染色法进行鉴定。采用完全随机法将40只SD大鼠分为正常对照组6只，链脲佐菌素组34只。空腹12h后，链脲佐菌素组腹腔注射链脲佐菌素（70mg/kg）和柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L) 。大鼠分别于注射前、后48 h、第5 d和第8 d空腹断尾采血, 测定全血血糖浓度。选用连续2次血糖浓度高于16.7mmol/L的大鼠作为糖尿病模型。采用完全随机法从已成模的糖尿病大鼠中选出30只分为3组：胰岛样细胞移植组12只，进行肾被膜下胰岛样细胞团移植, 每只大鼠注入胰岛样细胞2×106 个；脐带间充质干细胞组12只，肾被膜下注入未进行诱导的脐带间充质干细胞, 细胞数2×106个；糖尿病对照组6 只, 肾被膜下移植不含细胞的培养液。3 组大鼠均于移植前及移植后48 h 测定空腹血糖浓度, 每周定点测空腹血糖及称体重1次。结果:（1）成功将人脐带间充质干细胞体外诱导分化为胰岛样细胞团, 双硫腙染色阳性。（2）胰岛样细胞团移植组大鼠移植2周，血糖浓度显著降低, 且血糖下降的趋势一直维持至第6周。脐带间充质干细胞组移植2周，血糖浓度显著下降，但是4周后血糖浓度出现上升。糖尿病对照组大鼠血糖浓度一直处于糖尿病血糖浓度范围内。结论：人脐带间充质干细胞体外可诱导分化为胰岛样细胞团，并对糖尿病大鼠有治疗作用。     

大鼠胰岛细胞经门静脉肝内移植模型的建立

背景：由于肝脏既是胰岛素的作用部位,又是相对的免疫特惠区,排斥反应小,肝窦及其小静脉结构还有利于胰岛的居留和生长,可供移植容积大,有利于胰岛的生存,因此肝脏是一个较为理想的移植部位。 目的：建立一种经门静脉胰岛细胞肝内移植治疗SD大鼠1型糖尿病的动物模型。 方法：采用文献方法制备SD大鼠胰岛细胞。以腹腔注射链尿佐菌素诱导建立SD大鼠1型糖尿病模型,随机数字表法分为2组：实验组经门静脉主干穿刺输注SD大鼠胰岛1 000 胰岛当量1.5 mL;对照组经门静脉主干穿刺输注无血清1640液1.5 mL。术后未给予免疫抑制剂,观察两组大鼠出血量、血糖、胰岛素水平及肝脏组织形态学变化。 结果与结论：所有大鼠均移植成活,门静脉穿刺一次成功率90%,出血量< 0.5 mL。胰岛移植大鼠血糖降为正常的时间1~6(3.7±1.7) d,移植胰岛存活时间为2~15(8.4±4.1) d。术后2周内实验组大鼠空腹血清胰岛素水平明显高于对照组(P < 0.05,P < 0.01)。病理结果证实,移植大鼠肝细胞形态、肝小叶结构均正常,肝实质未见坏死灶,血管内无血栓形成;门静脉主干未见狭窄,亦未发生感染,说明胰岛细胞在肝窦内存活并能发挥功能。证实大鼠胰岛经门静脉主干穿刺输注肝内移植是胰岛移植基础研究的理想模型。     

成骨细胞对葡萄糖水平的感知作用

背景：新近研究表明,骨钙素可提高胰岛素分泌水平、胰岛素敏感性,并且可阻止脂肪的积累,参与糖脂代谢,发挥此作用的主要是羧化不全骨钙素。 目的：观察不同浓度葡萄糖对成骨细胞羧化不全骨钙素分泌水平的影响。 方法：切下人肋骨骨小梁剪碎,胰酶消化后以PBS彻底冲洗直至于倒置显微镜下观察骨片表面及清洗液中无粘着及漂浮的细胞,以DMEM完全培养液清洗骨小梁1次,移入培养瓶内培养,每周更换培养液1次,1周后可见成骨细胞自骨片移出,4~6周细胞融合成单层可作传代培养。取生长活跃的传二三代细胞接种于6孔板中分成5组,待细胞融合至80%以含5.6,7.6,9.6,12.6,20.6 mmol/L葡萄糖的培养基刺激成骨细胞,同时加入维生素K2使其在培养液中最终浓度为10-5 mol/L。培养半小时后收集上清液,以放免法检测成骨细胞培养上清液中羧化不全骨钙素水平,并以上清液中总骨钙素进行校正,计算羧化不全骨钙素率。 结果与结论：在不同葡萄糖浓度下成骨细胞羧化不全骨钙素分泌水平不同,7.6,9.6,20.6 mmol/L葡萄糖浓度组羧化不全骨钙素率高于5.6 mmol/L葡萄糖浓度组[(0.27±0.02),(0.29±0.04),(0.12±0.02)%,P < 0.05]。提示成骨细胞可感知葡萄糖浓度变化,在5.6~9.6 mmol/L葡萄糖刺激下成骨细胞可呈剂量依赖性地提高自身羧化不全骨钙素分泌水平,进一步提高葡萄糖浓度时羧化不全骨钙素水平反而降低。     

牛磺酸对微囊化肝细胞生长的影响***☆

目的：微胶囊中存在一定程度的高渗透压胁迫，可造成细胞生长代谢减慢，为改善微囊化肝细胞的生长，尝试应用抗渗透压胁迫物质牛磺酸，观察其对微囊化肝细胞生长的影响。 方法: 实验于2006-07/08在中国科学院大连化学物理研究所生物医学材料工程实验室完成。将HepG2细胞悬液(非微囊化细胞)和微囊化HepG2分别接种于牛磺酸浓度为0，0.6，0.8和1.2 mmol/L的MEM培养液中，在37 ℃体积分数为0.05的CO2中培养。MTT法测定非微囊化和微囊化HepG2细胞的生长活性，相差显微镜观察囊内细胞生长状态。 结果：①非微囊化HepG2细胞：0.6，0.8和1.2 mmol/L的牛磺酸对其生长无影响，吸光度值比较差异无显著意义（P > 0.05）。②微囊化HepG2细胞：0.6，0.8 mmol/L牛磺酸对微囊化肝细胞的生长亦无影响（P > 0.05）；但1.2 mmol/L牛磺酸可以显著改善微囊化肝细胞的生长，其吸光度值高于0 mmol/L牛磺酸组（P < 0.05），并促进细胞的聚集。 结论：1.2 mmol/L牛磺酸可以改善微囊化肝细胞的生长并抵制微囊内的高渗透压胁迫对细胞的生长抑制作用。     

利培酮和氯氮平对体外培养大鼠胰岛分泌功能的影响

目的探讨利培酮与氯氮平对体外培养胰岛分泌功能的影响。方法 利用细胞培养技术,在不同的葡萄糖浓度(3.3 mmoL／L或16.7 mmol／L)和不同作用时间(1 h或4 h)下,以1 μmol／L利培酮或氯氮平分别作用于体外培养大鼠胰岛,用放射免疫法测定培养上清液中胰岛素浓度,并与相应的对照组比较。结果(1)培养液葡萄糖浓度为3.3 mmol／L,作用1 h,利培酮组和氯氮平组胰岛素分泌量与对照组比较,差异无显著性意义(均P>0.05);作用4 h,氯氮平抑制胰岛素分泌[相对胰岛素分泌量为65％(53％-73％)],差异有显著性意义(P<0.05)。培养液葡萄糖浓度为16.7 mmol／L,作用1 h或4 h,利培酮组和氯氮平组胰岛素分泌量与对照组比较,差异无显著性意义(均P>0.05)。(2)培养液葡萄糖浓度为3.3 mmol／L时,氯氮平作用4 h对胰岛素分泌的抑制程度明显低于作用1 h时[相对胰岛素分泌量为88％(77％~137％)],差异有非常显著性意义(P<0.01),其余的差异无显著性。结论 氯氮平抑制离体大鼠胰岛分泌胰岛素,而利培酮对之无影响;二者引起血糖代谢障碍的机制可能不同。     

阿司匹林抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖及p44/42 MAPK的表达

目的观察阿司匹林(ASA)对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖和磷酸化p44/42丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)表达的影响.方法体外培养SD大鼠血管平滑肌细胞,应用不同浓度的ASA(1 mmol/L、2 mmol/L、5 mmol/L及10 mmol/L)分别作用并设立对照进行比较,采用MTS/PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态,利用p44/42磷酸化抗MAPK抗体的蛋白免疫印迹法测定磷酸化p44/42MAPK蛋白表达. 结果各组的细胞增殖率分别为对照组0.79±0.14;ASA1 mmol/L组0.81±0.16;ASA 2 mmol/L组0.83±0.08;ASA 5 mmol/L组0.60±0.07;ASA 10 mmol/L组0.35±0.05.统计分析显示5 mmol/L和10 mmol/L的ASA分别能明显抑制大鼠血管平滑肌细胞的增殖(P＜0.05).ASA对大鼠血管平滑肌细胞的磷酸化p44/P42 MAPK蛋白表达有显著的抑制作用(P0.05). 结论 ASA对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞增殖和磷酸化p44/42MAPK蛋白表达均有明显的抑制作用.     

The effect of age of onset of PD on risk of dementia

Background Dementia occurs in the majority of patients with Parkinson’s disease (PD). Late onset of PD has been reported to be associated with a higher risk for dementia. However, age at onset (AAO) and age at baseline assessment are often correlated. The aim of this study was to explore whether AAO of PD symptoms is a risk factor for dementia independent of the general effect of age. Methods Two community-based studies of PD in New York (n = 281) and Rogaland county, Norway (n = 227) and two population-based groups of healthy elderly from New York (n = 180) and Odense, Denmark (n = 2414) were followed prospectively for 3–4 years and assessed for dementia according to DSM-IIIR. All PD and control cases underwent neurological examination and were followed with neurological and neuropsychological assessments. We used Cox proportional hazards regression based on three different time scales to explore the effect of AAO of PD on risk of dementia, adjusting for age at baseline and other demographic and clinical variables. Findings In both PD groups and in the pooled analyses, there was a significant effect of age at baseline assessment on the time to develop dementia, but there was no effect of AAO independent of age itself. Consistent with these results, there was no increased relative effect of age on the time to develop dementia in PD cases compared with controls. Interpretation This study shows that it is the general effect of age, rather than AAO that is associated with incident dementia in subjects with PD. Received in revised form: 22 December 2005     

腺垂体功能减退症临床特征变化分析

目的探讨腺垂体功能减退症患者的病因结构变化及临床表现。方法回顾性分析我院2013-01—2016-12住院及门诊78例腺垂体功能减退症患者的临床资料。结果男32例(41.03%),女46例(58.97%);诊断时年龄11~89岁,平均62.5岁;鞍区占位(包括术前及术后)52例(66.67%),席汉综合征8例(10.26%),空泡蝶鞍9例(11.65%),病因不明8例(10.26%),垂体-下丘脑发育不良1例(1.28%)。首次就诊科室:纳差厌食、恶心呕吐就诊于消化内科36例(46.15%)最常见。ACTH+TSH+Gn+G激素缺乏为19例最多,占24.36%,ACTH+TSH+Gn缺乏15例,占19.23%。结论腺垂体功能减退症病因结构发生变化,发病人群、首发症状及受累激素也不同,患者女性多于男性,发病年龄偏高,症状不典型,分布于临床多个科室,其中以低钠血症为首发临床表现就诊消化内科最多。     

Standards of instrumentation of EMG

Standardization of Electromyography (EMG) instrumentation is of particular importance to ensure high quality recordings. This consensus report on “Standards of Instrumentation of EMG” is an update and extension of the earlier IFCN Guidelines published in 1999. First, a panel of experts in different fields from different geographical distributions was invited to submit a section on their particular interest and expertise. Then, the merged document was circulated for comments and edits until a consensus emerged.The first sections in this document cover technical aspects such as instrumentation, EMG hardware and software including amplifiers and filters, digital signal analysis and instrumentation settings. Other sections cover the topics such as temporary storage, trigger and delay line, averaging, electrode types, stimulation techniques for optimal and standardised EMG examinations, and the artefacts electromyographers may face and safety rules they should follow. Finally, storage of data and databases, report generators and external communication are summarized.     

Effects of prevention of afferentation of the development of the chick optic lobe

BONDY, S. C., M. E. HARRINGTON AND C. L. ANDERSON. Effects of prevention of afferentation on the developmentof the chick optic lobe. BRAIN RES. BULL. 3(5) 411–413, 1978.—The effects of unilateral extirpation of the right optic cup of the three-day incubated chick embryo upon the rate of synthesis and the stability of DNA in the non-innervated optic lobe, have been studied. This surgical procedure prevents innervation of the optic lobe contralateral to the removed eye, while the other optic lobe is normally innervated by retinal ganglion cells of the remaining eye. At the 20th day of incubation, the DNA content of the non-innervated lobe was below that of the paired lobe receiving normal innervation. This deficiency of cell number was caused by two events; death of an excess number of neurons formed early in embryogenesis and a reduced rate of glial proliferation in the later stages of incubation.     

Release of endogenous catecholamines from slices of hypothalamus of rats

The release of endogenous catecholamines from superfused slices of rat hypothalamus was studied under basal conditions and during release evoked by 40 mM K⁺. Catecholamines in superfusates, and in extracts of the tissue after stimulation, were isolated by column chromatography and quantitated by liquid chromatography with electrochemical detection. Norepinephrine (NE) was not consistently demonstrable in superfusate collected under basal conditions, but 40 mM K⁺ caused the release of from 2 to 4 ng/g of tissue per min. The addition of cocaine to the superfusate caused increases in basal and evoked release of NE. Epinephrine (E) could be measured in superfusates of slices from male but not female rats and then only when cocaine was added to the superfusate. Accordingly, the concentration of E in hypothalamus was greater in male rats than in female rats. Dopamine (DA) was not consistently measurable in the spontaneous overflow from slices either in the presence or absence of cocaine. K⁺-evoked release of DA could be demonstrated in slices from female rats. The addition of cocaine increased the evoked release of DA from slices from both sexes. Corticosterone, added to cocaine, had no effects on the efflux of any of the catecholamines. The experiments suggest that neuronal reuptake of all catecholamines is very efficient in the hypothalamus both under basal conditions and during evoked release.     

《绵阳市社会心理服务工作管理办法》解读

2018年,国家卫生健康委员会等10部委联合发布《关于印发全国社会心理服务体系建设试点工作方案的通知》,四川省绵阳市被列为全国第一批试点地区。绵阳市人民政府依据《中华人民共和国精神卫生法》等相关法律法规和文件精神,结合前期调查研究和社会心理服务工作的试点实际,编制出台了《绵阳市社会心理服务工作管理办法》,并于2021年12月25日起施行。本文围绕社会心理服务的相关概念、办法总则、重点内容、保障措施等方面进行解读,以期为社会心理服务工作的规范、持续和有效开展提供参考。     

帕金森病运动症状进展分析

目的分析帕金森病(PD)患者运动症状进展特点。方法采用PD统一评分量表(UPDRS)Ⅲ对912例PD患者进行评估。结果与病程1年的患者比较,除病程1~2年的患者外,其他病程患者的UPDRSⅢ评分、强直分、姿势或步态异常分、轴性症状总分、言语分、步态分显著升高(均P0.05),病程5~6年及14年患者的震颤分,病程5~6年、7~8年、9~13年、14年患者的运动迟缓分、姿势分显著升高(P0.05~0.01)。轴性症状进展速度高于UPDRSⅢ评分。结论 PD患者病程早期UPDRSⅢ评分进展快,震颤症状进展独立于其他症状,轴性症状评分较UPDRSⅢ更敏感地反映疾病加重趋势。     

阿立哌唑对精神分裂症患者生活质量的影响

目的:比较阿立哌唑与利培酮对精神分裂症患者生活质量的影响。方法:60例精神分裂患者随机平分为两组各30例,分别给予阿立哌唑和利培酮治疗。疗程8周。用生活质量综合评定问卷-74(GQOLI-74)、阳性与阴性症状量表(PANSS)及副反应量表(TESS)评定疗效及不良反应。结果:阿立哌唑与利培酮均能显著提高精神分裂症患者生活质量,但阿立哌唑在改善GQOLI-74总分、躯体健康及社会功能维度优于利培酮。结论:阿立哌唑治疗有利于提高精神分裂症患者生活质量。     

Frequency of accumulation of filaments in adaxonal cytoplasm of Schwann cells of myelinated fibers of rat spinal roots

Summary The frequency of accumulation of 6-nm filaments in the adaxonal cytoplasm of Schwann cells in the 6th lumbar dorsal and ventral roots was evaluated in 4-, 8-, 26- and 45-week-old Sprague-Dawley rats. The frequency was higher in 4- and 8-week-old (growing) rats than in 26- and 45-week old (mature) rats, and also higher in ventral than in dorsal roots in 4-, 8- and 26-week old rats. There were no clusters on certain groups of myelinated fibers according to the size of transverse axonal area, in both the ventral and dorsal roots. Therefore, this accumulation may reflect certain functions of the adaxonal cytoplasm of Schwann cell during natural growth and maturation of the axon and myelin sheath.     

他汀类药物的使用和颅内动脉瘤破裂相关性分析

目的 探讨他汀类药物对颅内动脉瘤破裂的影响。方法 2010年3月至2014年3月收治颅内囊状动脉瘤67例,其中破裂者32例,未破裂者35例。采用多变量Logistic回归评估他汀类药物的使用和颅内动脉瘤破裂的关系。结果 破裂组术前使用他汀类药物4例（12.5%,4/32）,未破裂组16例（45.7%,16/35）。破裂组服用他汀类药物的百分比显著低于未破裂组（P<0.01）。纠正潜在的混杂干扰后（or值: 0.30,95%可信空间:0.12~="" 0.64）显示,颅内动脉瘤破裂与他汀类药物的使用呈显著负相关,也与高血清总胆固醇浓度有关。结论 本结果提示他汀类药物对颅内动脉瘤破裂有一定的预防效果。