猪急性坏死性胰腺炎模型制备及肠屏障功能的改变

目前人们逐渐认识到肠道在重症急性胰腺炎（SAP）中的作用,肠屏障功能障碍和肠内细菌易位是导致SAP并发败血症及多器官功能衰竭（MODS）的一个重要因素。因此,肠道被认为是“MODS”的发动机”’。本研究的目的是建立猪急性坏死性胰腺炎（ANP）模型,并观察小肠黏膜的形态及功能改变,从而收集更多关于SAP肠屏障功能障碍的证据。     

伴高脂血症的急性胰腺炎大鼠肠屏障功能的改变

近年来高脂血症与急性胰腺炎(AP)之间的关系越来越受到人们的关注.高脂血症已成为AP的一个较常见的病因,并能诱发和加重AP的病情进展,但具体机制尚未阐明.由于近年来肠道屏障功能障碍在AP病情进展中所起的作用得到揭示,故本实验试图从肠道屏障功能改变方面对高脂血症与AP之间的关系做一探讨.     

急性坏死性胰腺炎肠粘膜屏障功能障碍及生长激素的作用

目的 探讨急性坏死性胰腺炎（ＡＮＰ）肠粘膜屏障形态和功能的变化及生长激素（ＧＨ）的作用。方法 采用胰胆管内逆行注射５％牛磺胆酸钠溶液诱导大鼠ＡＮＰ。实验分３组：假手术组、ＡＮＰ＋生理盐水（ＮＳ）组、及ＡＮＰ＋ＧＨ组。术后２４h取末端回肠,观察病理形态变化;应用＾１２５Ⅰ－白蛋白测定肠壁通透性;ＲＴ－ＰＣＲ检测胰岛素样生长因子（ＩＧＦ－１）mＲＮＡ表达。结果 ＡＮＰ大鼠肠粘膜间质充血水肿,炎症细胞浸     

血管活性肠肽对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的 探讨血管活性肠肽(VIP)对ANP大鼠肠黏膜损伤的影响.方法 54只SD大鼠随机分成假手术组(SO)、ANP组和VIP组,每组分制模后1 h、6 h、12 h 3个时间点,各6只.采用4%牛磺胆酸钠胰胆管逆行注射制备ANP模型,VIP组在制模后5 min腹腔内注射VIP 5 nmol.ELISA法检测血浆及肠组织匀浆VIP水平;MB-80微生物快速动态检测系统检测血浆内毒素水平;RT-PCR法检测肠黏膜组织TNF-α、IL-6、IL-10 mRNA表达;肠黏膜行病理学检查.结果 ANP组肠黏膜结构损害明显,VIP组病变减轻.ANP组血浆及肠黏膜VIP水平在制模后6 h分别为(49.582 ±3.735)pg/ml和(87.731 ±4.601)pg/g pro,均显著低于SO组(P＜0.05),制模后12 h分别为(65.192±5.785)pg/ml和(110.978 ±6.420)pg/g pro,高于SO组;ANP组制模后6 h血浆内毒素水平、肠黏膜TNF-α、IL-6、IL-10mRNA表达量分别为(29.570±5.127)pg/ml、0.861±0.081、1.150±0.187和0.786±0.102,均显著高于SO组(P＜0.05).VIP组制模后6 h血浆内毒素水平、肠黏膜TNF-α、IL-6 mRNA表达分别为(20.486 ±2.811)pg/ml、0.707 ±0.095和0.889 ±0.136,均较ANP组下降(P＜0.05);IL-10 mRNA表达为0.992 ±0.126,较ANP组增高(P＜0.05).结论 VIP对ANP大鼠肠黏膜损伤具有明显的保护作用.     

重症急性胰腺炎肠屏障功能障碍研究

重症急性胰腺炎患者常伴有肠屏障功能障碍,正常肠道屏障由机械屏障、化学屏障、免疫屏障与微生物屏障4部分构成.肠屏障功能障碍通常指上述4种屏障功能出现不同程度的破坏,本文就重症急性胰腺炎肠道屏障功能障碍时上述4种屏障的病理生理改变作一概述.     

急性胰腺炎肠屏障功能障碍研究及治疗进展

急性胰腺炎尤其是重症急性胰腺炎病程中肠道屏障功能障碍,导致肠黏膜通透性增加,引起细菌及内毒素移位,造成全身炎症反应,多器官功能衰竭,死亡率高。肠道缺血缺氧、炎症介质及细胞因子过度生成、肠动力障碍、菌群失调、免疫障碍共同作用导致肠道屏障功能障碍。及早保护肠道屏障功能可改善急性胰腺炎患者的预后。     

谷氨酰胺对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用及机制

重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)时的细菌感染主要是由于肠黏膜屏障破坏导致肠道细菌易位所致.谷氨酰胺作为肠黏膜的重要能源物质,同时也是核苷酸合成的重要底物,能够起到保护肠黏膜屏障,增强肠道免疫功能,降低炎症介质和细胞因子释放的作用.但其具体机制尚不清楚.本实验旨在评价谷氨酰胺灌肠对急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠肠黏膜屏障的保护作用,探讨其机制.     

急性出血性坏死性胰腺炎细菌移位时肠微循环的改变

１材料和方法９９ｍＴＣ放射性生物微球的制备与器官血流量的检测．放射性生物微球按王景贤ｅｔａｌ［１］的方法制备，器官血流量按Ｘｕｅｔａｌ［２］的方法检测．按薛建国ｅｔａｌ［３］方法制ＡＨＮＰ动物模型．经病理切片证实．实验动物分三组：Ⅰ．血流实验组；Ⅱ．...     

急性坏死性胰腺炎继发感染的幼猪模型建立

目的 建立适合影像学研究的大动物ANP继发感染模型.方法 将30只幼猪分为实验组(20只)与对照组(10只).先采用主胰管逆行插管注射5%牛磺胆酸钠和5%胰蛋白酶混合液(0.5ml/kg体重)制备ANP模型,并将主胰管近端结扎.2～3 d后采用CT引导下细针穿刺技术向胰腺坏死区内注射大肠杆菌(108/ml)3～4 ml,对照组注入灭活大肠杆菌.制模后行多层螺旋CT增强扫描,并行CTSI评分.检测血WBC、血淀粉酶,做血液细菌培养.注射大肠杆菌后5 d处死动物,于感染灶或坏死灶处抽液涂片及细菌培养,周围组织常规病理检测.结果 实验组ANP继发感染成功率80.0%(16/20),共发现17处感染灶,感染灶细菌培养阳性率100%(17/17),血培养阳性率68.8%(11/16);对照组制模成功率70.0%(7/10),剔除1头污染外,仅发现1处感染灶,细菌培养及血培养阳性率均为14.3%(1/7).两组血WBC及淀粉酶在制模后均明显升高,变化趋势相似,但实验组血WBG明显高于同期对照组(P<0.01).两组CTSI分值均≥4分,严重程度均为中重度.结论 在建立ANP模型基础上采用CT引导下向坏死区内注射细菌的方法 可成功建立ANP继发感染大动物模型,尤其适合影像学研究.     

乌司他丁对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 观察乌司他丁干预急性坏死性胰腺炎(ANP)大鼠后血TNF-α、二胺氧化酶(DAO)及肠黏膜组织紧密连接蛋白-1( zonula occludens-1,ZO-1)表达水平的变化,探讨其可能机制.方法 按完全随机法将SD雄性大鼠随机分为假手术组、ANP组及乌司他丁组.采用5％牛磺胆酸钠逆行注入胆胰管的方法制模.制模后6、24h取血检测TNF-α、DAO活性,胰腺及回肠组织常规病理检查,RT-PCR及免疫组化法检测回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白的表达.结果 术后6h,ANP组胰腺大片坏死,大量炎细胞浸润;回肠黏膜绒毛上皮坏死、血管出血、炎细胞浸润.乌司他丁组的胰腺及回肠组织损伤较ANP组减轻.假手术组、ANP组、乌司他丁组术后6h的血TNF-α水平分别为(10.83±0.96)、( 181.89±4.93)、(128.23±2.40) ng/L;DAO活性分别为(354.79±3.67)、(117.21±5.58)、(282.98±9.12) U/L;回肠组织ZO-1蛋白表达量分别为(10.00±1.87)、(1.20±0.84)、(5.80±2.86)分;Z(O)-1 mRNA表达量为0.878±0.015、0.466±0.023、0.778±0.033.ANP组血TNF-α水平较假手术组明显升高,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较对照组明显降低(P值均＜0.05);乌司他丁组的血TNF-α水平较ANP组降低,DAO活性、回肠组织ZO-1 mRNA及蛋白表达较ANP组明显升高(P值均＜0.05).结论 乌司他丁可能通过抑制TNF-α的过度释放、提高血浆中DAO活性,从而上调回肠组织中ZO-1 mRNA和蛋白表达,进而保护肠黏膜屏障.     

L-精氨酸诱导小鼠急性坏死性胰腺炎肠屏障损伤的实验研究

背景:研究表明,肠屏障功能障碍与急性坏死性胰腺炎(ANP)的发生、发展密切相关。目的:探讨L-精氨酸诱导的ANP小鼠肠屏障损伤及其加重ANP的机制。方法:将30只C57BL/6小鼠随机分为假手术组(SO组)和ANP组。ANP组小鼠给予腹腔注射8%L-精氨酸(4.5 g/kg)共两次,间隔为1 h; SO组则腹腔注射等体积0.9%NaCl溶液。造模24 h、48 h和72 h后处死小鼠,行HE染色评估胰腺和肠道病理学评分,检测血清淀粉酶、脂肪酶水平,以ELISA法评估炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)和肠道通透性(DAO、D-乳酸、LPS)水平,蛋白质印迹法检测胰腺组织和肠道组织TLR4、MyD88蛋白表达。结果:与SO组相比,ANP组相应时间点胰腺组织和回肠组织病理学评分显著增高(P0.05),血清淀粉酶、脂肪酶、炎症因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)、肠道通透性指标(DAO、D-乳酸、LPS)水平均显著增高(P0.05),胰腺组织和回肠组织TLR4、MyD88蛋白表达显著增高(P0.05)。结论:L-精氨酸诱导的ANP小鼠肠道通透性增加,LPS释放增多,可能通过激活TLR4-My D88信号通路促进肠道、全身炎症反应,进而加重ANP。     

乙醇与肠屏障功能改变

随着经济社会的发展,人民生活水平的提高,由饮入酒精所致的乙醇相关性疾病的发病率越来越高,乙醇可致肠黏膜屏障损伤,引起肠道的细菌、毒素或抗原等移位进入血液循环,最终可能导致内毒素血症甚至多脏器衰竭。乙醇致肠屏障损伤的病理机制日益受到关注。肠屏障是指肠道能防止肠腔内细菌、毒素、抗原等穿过肠黏膜进入血液循环的结构和功能的总和,从结构和功能上可分为机械屏障、生物屏障、免疫屏障和化学屏障。乙醇及其代谢产物通过这4个屏障对肠道功能造成破坏而引发相关疾病。现将国内外相关研究进展综述如下。     

大黄对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜屏障及肠道菌群的作用研究

研究发现,重症急性胰腺炎（SAP）常并发肠黏膜屏障功能障碍（IBD）,出现肠道细菌易位,继发肠源性感染。感染相关并发症导致的病死人数占SAP患者病死总人数的80％。中药大黄作为一种溢清泻下的药物已应用于临床,但其详细机制不清。本研究旨在观察大黄对急性坏死性胰腺炎（ANP）大鼠肠黏膜屏障及肠道菌群的保护作用。     

肠源性内毒素对急性坏死性胰腺炎大鼠肠道屏障功能的影响

随着对重症急性胰腺炎(SAP)研究的深入,肠道屏障功能障碍在胰腺炎加重机制中的作用越来越受到重视.肠屏障功能障碍可引起肠道内毒素易位,导致肠源性感染的发生[1-2],而肠源性内毒素本身,是否会对肠道屏障功能产生影响,尚需进一步探讨.     

益生元对急性胰腺炎大鼠肠屏障功能的影响

目的 研究肠道补充益生元对急性胰腺炎肠上皮细胞紧密连接和屏障功能的影响.方法 Wistar大鼠腹腔注射左精氨酸建立AP模型,按随机数字法分组法分成对照组、AP组、益生元组.益生元组于造模前7 d开始给予益生元4 g·kg-1·d-1.建模后12 h处死大鼠,心脏取血检测血浆二胺氧化酶(DAO)活性,观察空肠病理变化、采用免疫组化方法检测紧密结合蛋白Occludin的含量.结果 AP组的血浆DAO活性为(7.29±0.68)U/L,显著高于对照组的(2.01±0.34)U/L(P＜0.01)和益生元组的(3.44±0.59)U/L(P＜0.05).AP组肠上皮occludin蛋白表达的灰度值为95.1±9.2,明显高于对照组的44.7±8.2和益生元组的59.7±7.8(P＜0.01).益生元组occludin表达也显著高于对照组(P＜0.05).结论 AP大鼠补充益生菌可增加肠上皮occludin蛋白表达,维持肠上皮紧密连接,维持正常的肠道通透性,从而达到保护肠黏膜屏障的效果.     

肠屏障功能障碍与重症急性胰腺炎

重症急性胰腺炎(SAP)常伴有肠屏障功能障碍(IBFD),IBFD可导致细菌、内毒素易位使SAP的病情进一步加重.SAP时IBFD的发生与炎症介质、微循环障碍、腹内高压、肠动力障碍、免疫功能障碍等因素有关,保护肠黏膜屏障对改善SAP的预后具有重要意义.     

早期肠内营养联合肠屏障保护合剂对重症急性胰腺炎肠屏障功能的影响

目的初步探讨持续性早期肠内营养(enteral nutrition，EN)联合肠屏障保护合剂对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis，SAP)患者肠屏障功能障碍的影响。方法选择10例SAP患者，入院后48～72h后经空肠予以持续性肠内营养配合常规治疗，观察患者一般情况、腹部症状及体征并行APACHE-Ⅱ评分。治疗前及治疗后每隔1周检测血清淀粉酶、白蛋白、转铁蛋白、CRP、肿瘤坏死因子-α、白介素-1β及血浆内毒素、D-乳酸(D-lactate)、二胺氧化酶(diamine oxidase，DAO)浓度。治疗前及治疗后每隔1周予SAP患者肠通透性测试液(内含乳果糖2g、甘露醇1g)后，留取6h尿液，检测尿液乳果糖／甘露醇比值。每隔2周行腹部CT扫描复查胰腺形态学变化。治疗前及治疗后每隔1周留取粪便，提取粪便总DNA，获得反映肠道菌群组成特征的(enterobacterial repetitive intergenic consensus，ERIC)指纹图谱。结果(1)10例患者都能较好地耐受肠内营养的实施，无人发生腹胀、腹泻、呕吐等不良反应。除1人有糖尿病史而发生酮症酸中毒外．无人发生高血糖及高脂血症。(2)患者APACHE-Ⅱ评分逐渐下降，CT扫描显示胰腺组织坏死区域范围显著缩小，胰周渗出吸收明显。1例患者在疾病后期因胰腺组织感染而行手术治疗，其余患者无人发生胰腺及胰外组织感染，无人发生多脏器功能障碍，最后均治愈出院。(3)患者血清白蛋白及转铁蛋白水平由治疗前低于正常值至经EN治疗后逐渐升高。(4)患者血浆D-乳酸、DAO水平及尿乳果糖／甘露醇于EN治疗后明显下降，并随着时间的延长而呈逐渐下降趋势，差异显著。(5)患者血浆内毒素浓度于EN治疗后明显下降，并随着时间的延长而逐渐下降。(6)血清TNF-α和IL-1β由治疗前的峰值至经治疗后逐渐下降。(7)SAP治疗前及治疗后第7、14天，患者优势ERIC条带数目、结构分布大致相似，无显著变化。结论EN能改善SAP患者营养状况。SAP时实施EN联合肠屏障保护合剂安全可行，有助于保护SAP患者肠屏障功能．减少内毒素移位，减轻全身炎症反应。     

清胰汤对急性坏死性胰腺炎大鼠肠黏膜机械屏障的保护作用

重症急性胰腺炎(SAP)发病机制除了胰酶激活学说,还有细菌及内毒素易位学说,其与肠屏障有关.针对SAP时如何保护肠黏膜屏障,减少肠道细菌易位和减轻内毒素血症成为近年来研究的热点[1-3].清胰汤是中药治疗SAP的经典方之一,本试验观察清胰汤对大鼠急性坏死性胰腺炎(ANP)时小肠病理组织学和超微结构变化的影响,探讨其保护肠黏膜屏障的机制.     

早期肠内营养联合肠屏障保护合剂对重症急性胰腺炎肠屏障功能的影响

目的初步探讨持续性早期肠内营养(enteral nutrition, EN)联合肠屏障保护合剂对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis, SAP)患者肠屏障功能障碍的影响.方法选择10例SAP患者,入院后48 ～ 72 h后经空肠予以持续性肠内营养配合常规治疗,观察患者一般情况、腹部症状及体征并行APACHE-Ⅱ评分.治疗前及治疗后每隔1周检测血清淀粉酶、白蛋白、转铁蛋白、CRP、肿瘤坏死因子-α、白介素-1β及血浆内毒素、D-乳酸(D-lactate)、二胺氧化酶(diamine oxidase, DAO)浓度.治疗前及治疗后每隔1周予SAP患者肠通透性测试液(内含乳果糖2 g、甘露醇1 g)后,留取6 h尿液,检测尿液乳果糖/甘露醇比值.每隔2周行腹部CT扫描复查胰腺形态学变化.治疗前及治疗后每隔1周留取粪便,提取粪便总DNA,获得反映肠道菌群组成特征的(enterobacterial repetitive intergenic consensus, ERIC)指纹图谱.结果 (1)10例患者都能较好地耐受肠内营养的实施,无人发生腹胀、腹泻、呕吐等不良反应.除1人有糖尿病史而发生酮症酸中毒外,无人发生高血糖及高脂血症.(2)患者APACHE-Ⅱ评分逐渐下降,CT扫描显示胰腺组织坏死区域范围显著缩小,胰周渗出吸收明显.1例患者在疾病后期因胰腺组织感染而行手术治疗,其余患者无人发生胰腺及胰外组织感染,无人发生多脏器功能障碍,最后均治愈出院.(3)患者血清白蛋白及转铁蛋白水平由治疗前低于正常值至经EN治疗后逐渐升高.(4)患者血浆D-乳酸、DAO水平及尿乳果糖/甘露醇于EN治疗后明显下降,并随着时间的延长而呈逐渐下降趋势,差异显著.(5)患者血浆内毒素浓度于EN治疗后明显下降,并随着时间的延长而逐渐下降.(6)血清TNF-α和IL-1β由治疗前的峰值至经治疗后逐渐下降.(7)SAP治疗前及治疗后第7、14天,患者优势ERIC条带数目、结构分布大致相似,无显著变化. 结论 EN能改善SAP患者营养状况.SAP时实施EN联合肠屏障保护合剂安全可行,有助于保护SAP患者肠屏障功能,减少内毒素移位,减轻全身炎症反应.     

谷氨酰胺对重症急性胰腺炎患者肠黏膜屏障功能的影响

肠黏膜屏障功能破坏、肠源性细菌易位在重症急性胰腺炎(SAP)的胰腺坏死组织继发感染中起主导作用[1].因此防治肠道屏障功能障碍是SAP治疗中的重要环节.本文观察谷氨酰胺(glutamine,Gln)对SAP患者肠黏膜屏障功能的影响,探讨其临床应用价值.