自体CD34^＋细胞移植治疗晚期肿瘤

目的采用CD34+细胞体外分选技术对晚期肿瘤患者进行自体CD34+细胞移植,以降低自体移植后肿瘤复发率.方法对15例Ⅲ～Ⅵ期肿瘤患者(多发性骨髓瘤11例,乳癌2例,非霍奇金淋巴瘤和髓母细胞瘤各1例)采用Clini MACS临床型细胞富集仪,利用磁性分选技术收集CD34+和CD34-细胞组分,患者于预处理后,输注分选后的CD34+细胞.结果CD34+细胞体外纯化富集可使CD34细胞获得2.0～5.0个对数的去除;回输CD34+细胞中位数为2.4×10 6/kg,CD34+细胞回收率为64%,纯度为98.2%;移植后白细胞恢复至》1.0×10 9/L和血小板》20×10 9/L的天数(中位数)分别为14 d和13 d.患者总体生存率66.7%(10/15),无疾病生存率53.3%(8/15).结论CD34+细胞移植后获得迅速、稳定的造血重建.体外CD34+细胞纯化富集后移植可望提高晚期肿瘤患者自体移植疗效.     

纯化的自体CD34~+细胞移植治疗恶性血液病临床对照观察

 目的　分析CD34+ 纯化自体造血干细胞移植治疗恶性血液病的临床疗效。方法　 11例病人进行了CD34+ 纯化自体造血干细胞移植 ,8例患者进行了未分选的自体造血干细胞移植 ,动员方案为CTX+Vp 16联合G CSF。CD34+ 细胞分选采用CliniMACS系统。结果　分选后CD34+ 细胞纯度达到(88.99± 6 .88) % ,回收率达到 (6 9.0 6± 17.0 7) %。 11例分选患者感染率为 (5 / 11例 ) ,复发率为 (1/ 11例 ) ,死亡率为 (3/ 11例 )。外周血中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L时间为 (11± 1)天 ,血小板 >2 0× 10 9/L为(13± 3)天 ,8例未行CD34+ 分选患者的感染率 (4/ 8例 ) ,复发率为 (3/ 8例 ) ,死亡率为 (5 / 8例 )。外周血中性粒细胞 >0 .5× 10 9/L时间 (11± 1)天和血小板 >2 0× 10 9/L(14± 4 )天。结论　利用CliniMACs系统体外进行外周血CD34+ 细胞的富集与纯化纯度、回收率均满意 ,自体移植后造血功能重建顺利 ;与对照相比造血重建时间、感染率...     

自体外周血CD34^＋造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤

[目的]探讨自体外周血CD+34造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的可行性。[方法]应用CliniMACS系统分选纯化 患者外周血CD+34造血干细胞,用流式细胞仪检测分选纯化 结果。选马法兰200mg/m2作为预处理方案。[结果]分选纯化结 果,单个核细胞数为3.7136×108,活性率96.6％,CD+34细胞数 3.68018×108,即5.52×106/kg。移植后患者骨髓像获得完全缓 解。移植相关并发症少且易于控制。[结论]自体外周血CD+34 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤是安全、有效、可行的 。     

应用C1iniMACS细胞分选系统纯化自体外周血干细胞的探讨

目的 探讨应用CliniMACS细胞分选系统纯化自体外周血干细胞的效果。方法 4例非霍奇金淋巴瘤患者,经Vp-16+G-CSF动员后,采集外周血中造血干细胞,并用CliniMACS细胞分选系统作干细胞纯化分选,3例患者作2次采集后行1次分选,1例患者经3次采集后作2次分选。通过单个核细胞计数及流式细胞术测定CD34+细胞,分析纯化效果。结果 4例患者进行7例次干细胞采集,循环量6000～8 000ml,采集前体内CD34+细胞数为每千克体重(12.77±11.21)×106,经采集得到CD34+细胞数为每千克体重(4.70±4.17)×106,CD34+细胞采集效率为(40.91±33.35)％,对5例次磁珠分选结果,标记前CD34+细胞数为每千克体重(6.07±3.18)×106,分选后获得的CD34+细胞数为每千克体重(4.03±2.28)×106,CD34+细胞回收率为(64.19±13.35)％。终产物细胞悬液量为40～45 ml,CD34+细胞纯度为(83.18±6.76)％。结论 应用CliniMACS细胞分选系统获得纯化的自体造血干细胞,可应用于支持大剂量化疗治疗实体肿瘤。     

外周血CD_(34)~+细胞检测对外周血干细胞采集结果及时机选择的意义

 目的　研究外周血CD+34 细胞数对采集结果的意义,并探索可用于临床指导外周干细胞采集时机选择的参考阈值。方法　2007年1月至2009年12月共57例次自体造血干细胞移植动员采集患者,以环磷酰胺（CTX）化疗+粒细胞集落刺激因子（G-CSF）（5～10 μg／kg）动员,COBE分离仪（Spectra Version 6）行外周血造血干细胞采集,应用流式细胞术监测外周血中CD+34 细胞绝对计数。结果　采集产品单个核细胞（MNC）中位数4.6×108／kg（0.3×108／kg～10.5×108／kg）,CD+34 细胞中位数2.4×106／kg（0.16×106／kg～34.9×106／kg）,外周血CD+34 细胞数是产品MNC和CD+34 细胞总量唯一相关指标,外周血白细胞（WBC）与采集产品MNC和CD+34 细胞数无关。进一步分析提示外周血CD+34 计数≥15／μl,单次采集效率提高,CD+34 细胞采集量达1×106／kg和2×106／kg比例为81 %和60 %,采集产品MNC和CD+34 总数明显提高。提示外周血CD+34 细胞数15／μl可作为启动采集。ROC分析发现外周血CD+34 细胞 25（26.5～28.6）／μl,单次采集足量CD+34 细胞概率最大。结论　外周血CD+34 细胞计数是外周血自体干细胞采集重要的相关指标,CD+34 细胞 15／μl可作为采集时机选择的阈值。     

自体外周血CD+3434造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤

[目的]探讨自体外周血 CD+34造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的可行性。[方法]应用 Clini MACS系统分选纯化 患者外周血 CD+34造血干细胞,用流式细胞仪检测分选纯化 结果。选马法兰 200mg/m2作为预处理方案。[结果]分选纯化结 果,单个核细胞数为 3.7136× 10 8,活性率 96.6％, CD+34细胞数 3.68018× 10 8,即 5.52× 10 6/kg。移植后患者骨髓像获得完全缓 解。移植相关并发症少且易于控制。[结论]自体外周血 CD+34 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤是安全、有效、可行的 。     

自体造血干细胞移植治疗复发难治非霍奇金淋巴瘤

目的探讨高剂量放化疗联合自体造血干细胞移植治疗复发、耐药侵袭性和高度侵袭性非霍奇金淋巴瘤(NHL)的疗效和安全性。方法23例复发和11例耐药的NHL患者接受了解救化疗和自体造血干细胞采集,采集后进行了自体造血干细胞支持下的高剂量放化疗。结果采集到的全部患者干细胞数均达到了移植要求,CD34+细胞中位数为6.06×106/kg。接受移植的患者经高剂量放化疗治疗后全部出现Ⅳ度骨髓抑制,出现1例移植相关死亡。移植后23例完全缓解,6例部分缓解,5例进展。缓解的患者中,10例复发,中位疾病进展时间(TTP)为7.9个月,复发患者中7例死亡。1例发生第二肿瘤。5年总生存率为60.5%,5年无复发总生存率为58.2%。结论高剂量放化疗联合自体造血干细胞移植治疗复发耐药的侵袭和高度侵袭性NHL疗效高、安全性好,但对于预后差的患者尚需探讨新的方法。     

自体外周血CD_(34)~ 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤

[目的]探讨自体外周血CD 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的可行性。[方法]应用CliniMACS系统分选纯化患者外周血CD 造血干细胞 ,用流式细胞仪检测分选纯化结果。选马法兰200mg/m2 作为预处理方案。[结果]分选纯化结果 ,单个核细胞数为3.7136×108,活性率96.6% ,CD 细胞数3.68018×108,即5.52×106/kg。移植后患者骨髓像获得完全缓解。移植相关并发症少且易于控制。[结论]自体外周血CD 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤是安全、有效、可行的。     

造血干细胞移植治疗恶性血液病疗效分析

 目的　比较自体与异体造血干细胞移植 (HSCT)治疗白血病和非霍杰金氏淋巴瘤 (NHL)的疗效和移植相关死亡。方法　 2 2 2例白血病和NHL中 ,112例接受自体HSCT、110例接受异体HSCT ,其中38例急性早幼粒细胞白血病 (M3 )和 36例NHL均为自体HSCT。移植预处理方案包括 :14 9例TBI +Cy、2 3例改良Bucy、5 0例MACC方案。 结果　全部患者均获得造血重建 ,在自体与异体移植后白细胞>1.0× 10 9/L和血小板 >2 0× 10 9/L的时间 ,二组分别为 (14 .3± 6 .1)d和 (17.8± 9.2 )d与 (15 .1±4 .6 )d和 (19.6± 10 .3)d ,二组比较造血重建时间无差异 (P >0 .0 1)。非M3 白血病自体与异体移植后 5年估计无病生存率为 (5 2 .0± 5 .8) %和 (6 2 .4± 6 .2 ) %、复发率为 (44 .7%和 14 .5 % ) ,M3 白血病自体移植无病生存率 (93.6± 4 .4 ) %、复发率 5 .3% ,NHL自体移植无病生存率 (6 6 .3± 8.0 ) %、复发率 2 2...     

自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗对进展期肿瘤患者细胞免疫功能的影响

目的 探讨自体肿瘤疫苗的作用机制。方法 15例进展期肿瘤患者术后,以自体肿瘤疫苗辅助主动免疫治疗。术后第4周开始免疫接种(共4次,每次间隔7～10 d);接种前3 d及4次接种后1周,采集外周血,分离单个核细胞,测定CD8+-IFN-γ+,CD8+-IL-10+细胞比例及CD4+-IFN-γ+、CD4+-IL-10+细胞比例;同时采集血清检测血清IFN-γ、IL-10水平。结果 自体疫苗治疗后:①血清IFN-γ水平升高,由(6.08±2.79)pg/ml升至(12.31±5.42)pg/ml;而IL-10水平由(26.14±14.01)pg/ml降至(7.21±3.01)pg/ml,差异有显著性(P<0.05)。②CD8+-IFN-γ+双阳性细胞比例由(2.61±1.01)％升至(5.96±2.17)％;CD4+-IFN-γ+双阳性细胞比例由(3.25±1.52)％升至(6.20±3.87)％,差异有显著性(P<0.05)。③患者耐受性良好,无溃疡等严重不良反应发生。④临床随访10～26个月,15例患者无肿瘤复发或转移。结论 ①自体肿瘤疫苗可激发患者特异性细胞介导的免疫反应。②自体疫苗可改善患者的抗瘤免疫反应;③自体肿瘤疫苗主动特异性免疫治疗,对于杀灭残留癌细胞、抗转移及复发有重要作用。     

肿瘤细胞之间的交流

一个肿瘤细胞的产生并不意味着肿瘤发生.多个肿瘤细胞之间的对话使肿瘤成为一个异常的组织或器官.细胞接触、挤出、纠缠、迁移和变异维持着肿瘤细胞间的有序组织和肿瘤的持续生长.阻断肿瘤细胞之间的对话可能成为新的肿瘤治疗策略.     

造血细胞与内皮细胞的相互关系及其研究现状

 造血细胞和内皮细胞的相互关系已越来越为人们所重视,成为目前研究十分活跃的领域。造血细胞与内皮细胞表达某些共同的表面标记和基因,且两者能相互促进发育,内皮细胞在诱导造血细胞归巢方面也有一定作用,研究两者关系有较高的科研及临床应用价值,文章介绍了造血细胞和内皮细胞相互关系的研究现状。     

白血病细胞吞噬血细胞现象的观察

对８例白血病细胞吞噬血细胞现象作了较详细的观察描述。被吞噬的主要为红细胞。吞噬后形成假性玫瑰花环样。吞噬红细胞可能是白血病患者贫血原因之一。认为多个白血病细胞围吞一个中性粒细胞的现象值得进一步研究。对吞噬的机理和临床意义作了初步探讨。     

A child case of CD34, CD33, HLA-DR, CD7, CD56 stem cell leukemia with thymic involvement

It has been reported that the CD56⁺/CD7⁺/CD3⁻ phenotype of natural killer (NK) cells develop from the CD34⁺/HLA-DR⁻ bone marrow (BM) mononuclear cell population in long-term BM culture (LTBMC). An HLA-DR⁻/CD33⁺/CD56⁺/CD16⁻ myeloid/natural killer cell acute leukemia has been described. We report here a 7-year-old boy who developed stem cell acute leukemia with superior vena cava syndrome secondary to thymic involvement. Surface marker analyses revealed that the leukemia cells showed CD34⁺/HLA-DR⁻/CD33⁻/CD7⁺/CD56⁺ phenotype. When stimulated with phorbol ester in vitro the leukemic cells morphologically differentiated to myeloid cells developing CD13, CD15 and CD56 antigens. Our results suggest that CD34⁺/HLA-DR⁻/CD7⁺/CD56⁺ stem cell leukemia may arise from transformation of a pluripotent precursor cell, which could differentiate to both myeloid and NK cell lineages.     

个体化肿瘤特异TCR的筛选策略

基因修饰T细胞疗法在肿瘤治疗领域取得突破性进展，主要包括嵌合抗原受体基因修饰T（chimeric antigen receptor engineered T，CAR-T）细胞和T细胞受体基因修饰T（T-cell receptor modified T，TCR-T）细胞。虽然CAR-T细胞疗法在血液系统 肿瘤治疗领域呈现良好的临床治疗效果，但CAR-T细胞仅能识别肿瘤细胞膜抗原（占细胞全部抗原的比例约10%），而TCR-T细 胞可以识别人白细胞抗原（human leukocyte antigen，HLA）提呈的细胞内抗原，因此TCR-T细胞可以识别更多种类的肿瘤抗原，进 而实现对CAR-T细胞的合理补充。由于TCR-T细胞需要同时识别细胞内抗原和对应的HLA，而不同患者的HLA分型和表达的 肿瘤抗原都可能存在巨大差异，因此有必要为每个/每类肿瘤患者定制个体化的TCR-T细胞，其中的关键为筛选特异识别肿瘤抗 原的TCR。当前主要有筛选靶向“已知”肿瘤抗原TCR和筛选靶向“未知”肿瘤抗原TCR的两种策略，但其各有适用性，应针对每 个患者制定适合的筛选方法，以制备多种肿瘤特异性TCR-T细胞，从而实现个体化TCR-T细胞的肿瘤治疗。     

Inhibition of Glioma Cell Proliferation by Neural Stem Cell Factor

Summary Neural stem cells (NSC) have unique differentiation-, proliferation-, and motility properties. To investigate whether they secrete factors that interfere with the proliferation of glioma cells, we grew glioma cells in conditioned medium (CM) obtained from cultures of neurospheres including neural stem / progenitor cells (NSPC) isolated from embryonic (E14)- or adult mouse brain or fetal human brain. 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and BrdU-labeling assays showed that CM from NSPC (NSPC/CM) contained factor(s) that inhibited the proliferation of glioma cells by 28–87%. Filter-fractionation of NSPC/CM revealed that the 50,000–100,000 nominal molecular weight limit (NMWL) fraction contained the inhibitory activity. On the basis of these observations we transplanted 203G glioma cells and/or NSPC into the intrathecal space of the cisterna magna of mice to investigate whether NSPC interfere with the proliferation of glioma cells in vivo. Mice transplanted with both 203G and NSPC survived significantly longer than did mice transplanted only with 203G. We concluded that NSPC secrete factor(s) that may control glioma cell proliferation.     

APE1表达变化对人非小细胞肺癌细胞A549增殖的影响

目的:探讨脱嘌呤/脱嘧啶核酸内切酶1(apurinic/apyrimidinic endonuclease 1,APE1)对人非小细胞肺癌细胞A549增殖能力的影响,为肺癌的个性化靶向治疗提供理论依据。方法:使用脂质体转染法将重组表达质粒pSIREN-RetroQ-APE1-shRNA和pOZN-HA-APE1导入A549细胞,免疫印迹检测APE1表达情况。MTT、平板克隆实验、免疫印迹检测APE1对非小细胞肺癌细胞增殖的影响,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果:重组载体pSIREN-RetroQ-APE1-shRNA转染细胞后,显著抑制A549细胞中APE1蛋白的表达,与对照组相比,增殖速率明显下降(P＜0.05),平板克隆形成显著减少(P＜0.05),并阻止细胞周期G0/G1期向S期转化,降低CDK2表达。而过表达APE1可增加A549细胞活力,促进细胞增殖,促进细胞周期G0/G1期向S期转化。结论:APE1表达下调对非小细胞肺癌细胞A549生长具有抑制作用,为临床抑制肿瘤生长提供了新的作用靶点。     

红色胶状肾透明细胞癌的临床及病理特点——附2例报告

目的探讨大体标本为红色胶状肾透明细胞癌的临床特点。方法报告2例临床发现的特殊肾透明细胞癌的诊治情况,并回顾肾癌相关文献。结果临床2例肾透明细胞癌大体标本表现为均一红色,质软,胶状的特殊特点,其影像学及病理表现为典型肾透明细胞癌。结论在肾透明细胞癌大体标本可以表现为特殊的均一红色特点,其影像学为典型肾癌,大体标本与病理分期关系不明显。     

The important role of radiotherapy in patients with non-melanoma skin cancer and other cutaneous entities

Non-melanoma skin cancer is the commonest malignancy worldwide and a significant public health issue. Although most non-melanoma skin cancers are small and easily excised or ablated, a recommendation of definitive radiotherapy is often made in patients where the outcome (cosmetic and/or functional) will probably be better with radiotherapy compared to surgery. The aim of adjuvant radiotherapy is to reduce the risk of loco-regional recurrence and the role of palliative radiotherapy is important in improving the quality of life in patients with advanced and/or incurable disease. The aim of this review article is to broadly discuss the various clinical settings in which a recommendation of radiotherapy may be made and also includes a discussion on less frequently encountered cutaneous entities (e.g. in situ squamous cell carcinoma, keratocanthoma, lentigo maligna, cutaneous lymphomas and malignant fibrous tumours).     

小儿白血病NK、LAK细胞活性的研究

本文对22例正常人及21例白血病患儿NK、LAK细胞活性检测结果表明,缓解期白血病患儿NK、LAK细胞活性正常,活动期白血病患儿NK、LAK细胞活性低下,分别为10.4%±9.7%(正常值28%±13.4%)P<0.01,对K562为34.3%±14.4%(正常值52.8%±15.3%)P<0.001,对Raji为32.6%±14.7%(正常值52.8%±14.3%)P<0.01。NK细胞活性低下的原因与血液中存在的抑制淋巴细胞无关,可能系NK细胞本身缺陷所致,rIL—2能恢复活动期白血病NK细胞活性。