Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA在风心病心肌中表达及其与c—myc基因表达相关？…

目的：了解风湿性心脏病心肌中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ基因的表达定位情况及意义。方法；用人Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针和ｃ－ｍｙｃ基因探针，对３２例风湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析，结果：（１）病变心肌间质中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增强，Ⅰ型较正常成年心肌中增高１．６７倍，Ⅲ型增高４．３６倍；（２）病变心肌细胞核内出现Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ－ｍｙｃ基因阳性表达，     

Ⅰ、Ⅲ 型前胶原 mRNA 在风心病心肌中表达及其与 c-myc 基因表达相关性的研究

目的：了解风湿性心脏病心肌中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ ｍｙｃ基因的表达定位情况及意义。方法：用人Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｃＤＮＡ探针和ｃ ｍｙｃ基因探针，对３２例风湿性二尖瓣乳头肌进行分子原位杂交并进行图像分析。结果：①病变心肌间质中Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达明显增强，Ⅰ型较正常成年心肌中增高１６７倍，Ⅲ型增高４３６倍；②病变心肌细胞核内出现Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ和ｃ ｍｙｃ基因阳性表达，胎儿心肌亦有类似表达；③Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ阳性表达量与ｃ ｍｙｃ基因阳性表达呈正相关关系。结论：①发现在病理情况下心肌细胞参与了胶原的生成与代谢，对胶原的合成和分泌具有重要作用。②ｃ ｍｙｃ基因对风湿性病变心肌的胶原代谢过程起调控作用。③风心病心肌胶原增生和调控发生在转录和转录后水平，心肌细胞重现了胎儿期合成胶原的表型。     

川芎嗪和764—3对成纤维细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

川芎嗪和７６４－３均有抑制纤维化的作用。本工作观察了川芎嗪和７６４－３对体外培养的成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达的影响结果表明，加入川芎嗪２４ｈ对Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３２４ｈ对Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３（终浓度为１５μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达无明显作用，对Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达非但不抑制反而有明显促进作用。作     

CCl4诱导大鼠肝纤维化过程中α1（I）,α1（Ⅲ）及α1（Ⅳ）前胶？…

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化过程中α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达状况进行观察。结果证实α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达均有增加，但三者的变化并不同步。纤维化早期首先是α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ表达增加。随后是α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ，后者在整个肝纤维化过程中呈优势性表达。α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的增加又滞后于α１（Ⅲ     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及TGF-β_1 mRNA的表达

目的：探讨增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。结果：Ｈ和Ｋ组织中ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ（１．１９７±０．２３７,１．２０４±０．２４３）表达均高于正常瘢痕和正常皮肤（０．３２７±０．０８１,０．３３１±０．０７８）,Ｐ＜０．０１;Ｋ选择性地Ⅰ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强,而Ｈ组织中Ⅰ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,导致ＫⅠ、Ⅲ前胶原ｍＲＮＡ比值明显高于Ｈ（８．１６４±０．３００,１．６６６±０．２０１,Ｐ＜０．０１）。结论：Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达类型及强度不同,提示在Ｋ和Ｈ发生发展中具有不同的分子机理：ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕疙瘩的发病机理中具有不同的分子机理;ＴＧＦ－β１在增生性瘢痕和瘢痕疙瘩的发病机理中具有一定作用。     

CCl_4诱导大鼠肝纤维化过程中α1（Ⅰ）、α1（Ⅲ）及α1（Ⅳ）前胶原基因表达的动态观察

利用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术对ＣＣｌ４诱导大鼠肝纤维化过程中α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达状况进行观察。结果证实α１（Ⅰ）、α１（Ⅲ）及α１（Ⅳ）３种前胶原ｍＲＮＡ的表达均有增加，但三者的变化并不同步。纤维化早期首先是α１（Ⅳ）前胶原ｍＲＮＡ表达增加。随后是α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ，后者在整个肝纤维化过程中呈优势性表达。α１（Ⅰ）前胶原ｍＲＮＡ的增加又滞后于α１（Ⅲ）且上升缓慢，至第２０周时才逐渐与α１（Ⅲ）前胶原ｍＲＮＡ含量相近。可能是由于存在反馈性抑制的缘故，使得前胶原基因表达的上调并非呈直线递增而是曲线上升。     

人晶状体上皮细胞Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA的表达

目的 旨在从基因转录水平确定培养的人太体上皮细胞是否具有表达Ⅰ、Ⅲ型胶原的生物学特性。方法采用人眼晶状体囊膜进行晶状体上皮细胞体外的原代培养;细胞融合后,抽提ＲＮＡ,应用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析技术进行探测人昌状体上皮细胞的基因转录产物。结果 人晶 状体上皮细胞的基因转录存在有Ⅰ、Ⅲ型胶胶原ｍＲＮＡ的表达,表达的二型前胶原ｍＲＮＡ均存在有长度为５．８、５．４、４．８ｋｂ的片段,Ⅰ型前胶原ｍＲＮ     

转化生长因子—β1及其受体的表达与大鼠肝纤维化关系 …

探讨肝纤维化形成过程转化生长因子－β及其受体的表达对胶原合成的影响。方法：采用免疫组化和斑点杂交技术,观察实验性大鼠肝纤维化过程肝内ＴＧＦ－β１,ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达的动态变化。结果随着肝纤维化程度的加重,肝内ＴＧＦ－β１、ＴＧＦ－βＲⅡ和Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ及其蛋白表达均明显增加,组间比较均有显著差异（Ｐ〈０．０５或Ｐ〈０．０１）。ＴＧＦ－β１与Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲ     

人冠状动脉Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化与动脉粥样硬化形成、进展的关系

目的观察Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA和胶原蛋白在正常和动脉粥样硬化病变的人冠状动脉内的分布和表达，探讨Ⅰ、Ⅲ型胶原增生及其比例变化在人冠状动脉粥样硬化病变形成、进展过程中的作用。方法应用HE、天狼星红染色和免疫组化染色对人冠状动脉不同类型病变及年轻人和老年人斑病变的Ⅰ、Ⅲ型胶原的分布进行比较观察；用原位核酸分子杂交技术，对正常及班块病变的Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达进行比较分析．结果①随着病变的进展，冠状动脉内膜中Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维的分本增多，同时斑块病变Ⅰ型和Ⅲ型前胶原mRNA表达增高；②年轻人斑块平滑肌细胞增殖较活跃，并以Ⅲ型胶原增多为主，老年人斑块平滑肌细胞数量减少，大多以Ⅰ型胶原增多为主。结论动脉粥样硬化病变时Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA的表达与Ⅰ、Ⅲ型胶原增多相关；动脉壁内平滑肌细胞的增殖状态、Ⅰ和Ⅲ型胶原的增多及其两者间的比例变化可能在动脉粥样硬化病变的演变、进展过程中起着重要作用。     

川芎嗪和764－3对成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响

川芎嗪和７６４－３均有抑制纤维化的作用。本工作观察了川芎嗪和７６４－３对体外培养的成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达的影响结果表明，加入川芎嗪（终浓度３０μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ｉ、Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达均有明显抑制作用；加入７６４－３（终浓度为１５μｇ／ｍｌ）２４ｈ对Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达无明显作用，对Ｉ型前胶原ｍＲ－ＮＡ表达非但不抑制反而有明显促进作用。作者对７６４－３这种作用的可能原因做了初步讨论。     

高血压大鼠心肌间质细胞形态及I、II型胶原基因表达

目的：探讨高血压心肌胶原重构的细胞分子机制。方法：将１９只自发性易卒中型高血压大鼠ＳＨＲｓｐ（Ｓ）及１３只正常血压大鼠ＷＫＹ（Ｗ）分为３４周龄（Ｓ３４６只；Ｗ３４４只；）和５４周龄（Ｓ５４１３只；Ｗ５４９只）２组心肌进行胶原特染，ｍＲＮＡ原位杂交及超微结构观察。结果：Ｓ和Ｗ比较，心肌间质胶原容积百分比：３４周龄组增加了３９倍，５４周龄组增加了５９倍；血管周围胶原面积／血管内径面积之比：３４周龄组增加了５４倍，５４周龄组增加了３４倍；间质成纤维细胞增生活跃；心肌间质细胞有丰富表达的Ⅰ及Ⅲ型胶原ｍＲＮＡ。结论：高血压心肌胶原重构与心肌间质成纤维细胞增生活跃，胶原基因表达、合成和分泌增加有关。     

Ⅰ型胶原—整合素α2β1系统对成骨细胞生物学特性的调控

为进一步探讨Ⅰ型胶原及其受体系统是否为成骨细胞功能活动所必需,使用Ⅰ型胶原和整合素α２β１的一抗阻断Ⅰ型胶原－整合素α２β１系统,以细胞计数法比较成骨细胞的增殖能力,流式细胞仪分析成骨细胞的凋亡情况,ＲＴ－ＰＣＲ技术研究Ⅰ型胶原、整合素α２β１及骨钙素的ｍＲＮＡ表达情况。结果发现阻断Ⅰ型胶原－整合素α２β１系统后,成骨细胞的增殖能力减弱,凋亡率增高,Ⅰ型胶原、整合素α２β１及骨钙素的ｍＲＮＡ表达减     

扩张型心肌病纤维化心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原及相关血清指标的变化

目的 了解扩张型心肌病（DCM）心肌纤维化Ⅰ、Ⅲ型胶原改建的病理基础及相关血清指标的变化，为防治该病提供新的理论依据。方法 用病理染色、免疫组化对7例扩张型心肌病行心脏移植的患者左室心肌和7例正常心肌进行病理形态学和Ⅰ、Ⅲ型胶原免疫组化观察，放免法检测血清Ⅲ型、Ⅳ型前胶原（PⅢP、PⅣP、层粘连蛋白（LN）的含量。结果 扩心病心肌细胞变性，肥大伴局灶性坏死。心肌间质中胶原纤维弥漫增生，排列紊乱，这是扩心病的主要病理特征，免疫组化定位发现Ⅰ、Ⅲ型胶原在扩心病心肌间质呈明显增生分布，Ⅰ型胶原多于Ⅲ型胶原（P＜0.01）。心肌细胞内亦有Ⅰ型胶原的阳性表达，血清PⅢP，PⅣP,LN 明显增高（P＜0.05）。结论 心肌细胞变性、肥大，间质胶原大量增生改建是扩张型心肌病心肌纤维化的病理基础，也是心功能障碍的主要原因。     

风湿性心脏病二尖瓣和心肌间质病理组织学及免疫组化观察

为进一步了解风湿性心脏病二尖瓣和心肌间质的病理基础及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原分布与病变间的关系，为临床防治该病提供新的理论依据。方法用ＨＥ和ＡＢＣ等特殊染色法，对２６例风湿性二尖瓣病变和１０例正常心脏二尖瓣进行病理形态学及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ胶原的免疫组化观察。结果瓣膜结构和心肌间质中胶原纤维呈弥漫性增生，并呈透明变性及淀粉样变，有的伴局灶性坏死和钙化。这是慢性风湿性心脏病的显著病理特征之一。ＡＢＣ法作Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原免疫组化定位，发现Ⅰ、Ⅲ型胶原在风湿损害的瓣膜、腱索及心肌间质中均呈明显增生分布。成纤维细胞合成、分泌胶原活跃。心肌细胞亦有Ⅰ、Ⅲ型胶原抗原的阳性表达。结论胶原增生程度与炎症损伤程度呈正相关，且是瓣膜及心肌纤维化、硬化的病理基础。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ,Ⅲ型前胶原及TGF—β1mRNA的 …

探讨增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ、Ⅲ型前胶原及ＴＧＦ－β１基因表达改变的相互关系及临床意义。方法：总ＲＮＡ抽提试剂盒抽提总ＲＮＡ,斑点杂交检测Ⅰ、Ⅲ型前原及ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ稳态水平的改变。     

增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中Ⅰ,Ⅲ型前胶原mRNA原位表达？…

目的：了解Ⅰ,Ⅲ型前胶原基因在增生性瘢痕（Ｈ）和瘢痕疙瘩（Ｋ）组织中表达的空间分布,方法：非同位素原位杂交。结果：Ｋ与Ｈ组织中Ｉ型前胶原ｍＲＮＡ表达均增强,Ｈ中呈弥散分布,而Ｋ中却主要位于网状真皮层的上部,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达增强仅见于Ｈ中,结论 Ｋ和Ｈ组织中胶原蛋白基因表达强度及空间分布的差异可能是两者不同临床表现及生物学行为的分子病理学基础。     

芦沙坦对心脏成纤维细胞胶原Ⅰ,Ⅲ型mRNA表达水平的影响

用培养的新生鼠心肌成纤维细胞,加血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）孵育,考察引起心肌肥厚的生长因子ＡｎｇⅡ对胶原基因转录水平的影响。ＲＴ－ＰＣＲ结果显示ＡｎｇⅡ可刺激胶原Ⅰ,Ⅲ型ｍＲＮＡ表达水平显著增加,此作用可被ＡＴ,受体拮抗剂芦沙坦所抑制。     

高糖状态下心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达变化的观察

目的探讨高糖对大鼠心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原表达的影响。方法采用胰酶消化法和差速贴壁分离法获取心肌成纤维细胞,采用正常糖(5.5mmol/L,对照组)和高糖(25mmol/L,高糖组)干预。用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)观察Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白水平的变化。结果与对照组比较,高糖刺激12h可使心肌成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型前胶原mRNA表达增加,Ⅰ、Ⅲ前胶原mRNA表达在12h升高,在24h达高峰,Ⅰ型前胶原mRNA升高幅度高于Ⅲ型前胶原mRNA;高糖刺激48h可使Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达增加,Ⅰ型胶原蛋白升高幅度高于Ⅲ型胶原。结论高糖可促进大鼠心肌成纤维细胞合成Ⅰ、Ⅲ型胶原。     

干扰素α对肝纤维化鼠星状细胞I和Ⅲ型前胶原mRNA表达及胶原？…

目的 观察干扰素α对大鼠纤维化时星状细胞增殖,Ｉ,Ⅲ型前胶原ｍＲＮＡ表达和肝脏胶原沉积的影响。方法 以ＣＣｌ４制造肝纤维化模型,培养肝星状细胞,抽提ＲＮＡ,用地高辛标记Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｃＤｎＡ探针,Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交分析Ｉ,Ⅲ型前胶原和胶原酶ｍＲＮＡ表达,Ｄｏｔｂｌｏｔ测定大鼠肝Ｉ,Ⅲ型胶原沉积,分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－脯氨酸掺入观察干扰素α对星状细胞增殖和胶原合成的影响。结果 干扰     

Ⅲ型胶原在人和大鼠肝纤维化中的意义

为了深入研究Ⅲ型胶原在纤维化中的意义，本工作应用核酸分子杂交和免疫组化技术，对人体慢性肝病和大鼠肝纤维化模型（早期）肝组织中Ⅲ型胶原蛋白不同阶段的表达产物（前胶原ｍＲＮＡ、前胶原端肽和胶原蛋白）作定性、定量和定位检测，同时对Ⅰ型胶原作相应观察，兼以结蛋白和α－平滑肌肌动蛋白分别作为贮脂细胞和肌成纤维细胞的标记。结果显示肝纤维化早期和活动期主要是Ⅲ型胶原合成增多，并证明间质细胞特别是炎症活动区窦旁贮脂细胞及其相关细胞是肝纤维化时主要的胶原生成细胞。