槲皮素对人类乳腺癌细胞增殖的影响

目的观察槲皮素（Quercetin，Que）对人类乳腺癌细胞株增殖的影响。方法采用MTT法测定槲皮素对雌激素依赖性乳腺癌细胞MCF-7和非雌激素依赖性乳腺癌细胞MDA-MB231细胞增殖作用，并以雌激素受体拮抗剂ICI182、780为工具药来评价槲皮素发挥雌激素样作用与雌激素受体（ER）的关系，采用流式细胞术对MCF-7细胞的增殖情况进行分析。结果与溶剂对照组相比较，Que（10-50μmol／L）能显著促进MCF-7细胞的增殖，而抑制ER阴性MDA-MB231细胞，并将MCF-7细胞周期由G1期向S期推进，促进DNA合成，提高细胞分裂增殖指数，且Que促进MCF-7细胞增殖作用被ER拮抗剂所拮抗。结论Que具有雌激素活性，此作用是通过ER介导的。     

结血蒿醇提物对小鼠脾细胞增殖和活化的抑制作用

目的:观察藏药结血蒿75%乙醇提取物对体外丝裂原刀豆蛋白 A（ConcanavalinA,ConA）刺激的小鼠脾细胞活化和增殖的抑制作用。方法:用ConA刺激小鼠脾细胞,分别用四甲基偶氮唑盐染色法（MTT法）,流式细胞术等方法观察结血蒿醇提物对细胞增殖和活化的作用。结果:结血蒿醇提物对体外ConA刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化均有显著的抑制,作用呈剂量依赖性。结论:结血蒿醇提物可抑制ConA刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化,提示其具有免疫抑制活性。     

柴胡皂苷d对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体机制

目的:研究柴胡皂苷d(SSd)对氧化应激诱导的肝星状细胞HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响及其雌激素受体(ER)机制,探讨植物雌激素对肝纤维化的作用机制,为临床应用植物雌激素提供理论依据。方法:体外培养大鼠肝星状细胞HSC-T6,采用免疫组化法,检测SSd对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内α-SMA蛋白表达的影响;采用Western blot法,观察SSd对氧化应激诱导的HSC-T6活化细胞内AP-1、NF-κB表达的影响。结果:氧化应激处理HSC-T6细胞后,α-SMA、AP-1和P65/NF-κB表达明显增加。如使用雌二醇(E2)或SSd预处理HSC-T6细胞24h后再接受氧化应激处理,三种蛋白表达明显降低,这种作用可被雌激素受体(ER)完全拮抗剂ICI-182780和ERβ拮抗剂THC抑制。结论 :E2、SSd可能通过调控ERβ,进而抑制核转录因子AP-1和P65/NF-κB的表达起到抑制HSC-T6活化的作用。     

β-谷甾醇对T47D细胞增殖和细胞周期的影响及作用机制探讨

目的：观察β-谷甾醇（BSS）对雌激素受体（ER）阳性人乳腺癌T47D细胞的作用,并进一步探讨其可能的作用机制。方法：以ER拮抗剂ICI182780为工具药,采用MTT细胞增殖实验观察不同浓度BSS对T47D细胞增殖的影响;利用流式细胞术检测其对T47D细胞周期的影响;利用Western-blot和Real-timePCR技术检测其对细胞周期蛋白D1（CyclinD1）蛋白及mRNA表达的影响。结果：高浓度BSS抑制T47D细胞增殖,使细胞分裂增殖指数降低,且ICI182780不能完全拮抗其对T47D细胞的增殖抑制作用;低浓度BSS可促进T47D细胞增殖,提高细胞分裂增殖指数,且ICI182780可完全拮抗其促增殖作用。Western-blot及Real-timePCR结果显示：低浓度BSS可诱导T47D细胞CyclinD1蛋白和mRNA表达,并且ICI182780能够抑制此诱导作用。结论：BSS通过ER介导调节CyclinD1蛋白与mRNA水平的表达,从而影响ER阳性人乳腺癌T47D细胞增殖活性和细胞周期,发挥植物雌激素样作用。     

HQ0805对小鼠淋巴细胞体外活化的抑制作用

目的:研究中药提取物HQ0805对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子IL-2的影响.方法:无菌制备小鼠脾淋巴细胞,分别用不同浓度的HQ0805作用于静止状态及ConA活化的脾淋巴细胞,用MIT法测定HQ0805对淋巴细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测HQ0805对脾细胞培养上清液中细胞因子IL-2的影响.结果:HQ0805明显抑制静止状态与活化状态T淋巴细胞的增殖,并呈剂量依赖性;抑制IL-2的分泌.结论:HQ080抑制小鼠脾淋巴细胞的增殖,可能与抑制IL-2有关.     

淫羊藿素和脱水淫羊藿素对人类乳腺癌细胞T47D增殖和细胞周期的影响

目的 探讨淫羊藿素和脱水淫羊藿索对人类乳腺癌细胞株T47D增殖和细胞周期的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法测定淫羊藿素和脱水淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌细胞T47D的细胞增殖作用.并以雌激素受体拮抗剂ICI 182,780和雌激素受体ERB激动剂DPN为工具药来评价淫羊藿素和脱水淫羊藿素发挥雌激素样作用与雌激素受体的关系,流式细胞术对T47D细胞的增殖情况进行分析.结果 淫羊藿素和脱水淫羊藿素在10-8～10-6范围内能促进T47D细胞的增殖,并将T47D细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数,且淫羊藿素和脱水淫羊藿素促进T47D细胞增殖作用被雌激素受体拮抗剂所拮抗.结论 淫羊藿素和脱水淫羊藿素具有雌激素活性,此作用可能是通过雌激素受体(ER)介导的.     

ER介导鼠尾草酚抑制乳腺癌细胞MCF-7增殖效应的分子机制研究

目的研究迷迭香活性提取物鼠尾草酚抑制雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7增殖效应的分子机制。方法以雌激素受体ER-α、ER-β特异性拮抗剂MPP、PHTPP为工具药,采用MTT法观察鼠尾草酚对MCF-7细胞增殖的影响,采用流式细胞术检测不同浓度鼠尾草酚对MCF-7细胞周期的影响;采用Western blot法检测MCF-7细胞周期蛋白Cyclin B1的表达情况。结果1×10~(-4)～1×10~(-7)mol/L鼠尾草酚能明显抑制MCF-7细胞的增殖,抑制作用被雌激素受体拮抗剂ICI 182,780减弱,被ER-α拮抗剂增强,被ER-β拮抗剂减弱;鼠尾草酚使MCF-7细胞产生S期阻滞现象,同时使Cyclin B1表达减少。结论鼠尾草酚能抑制雌激素受体阳性乳腺癌细胞MCF-7的增殖,其作用机制可能是通过雌激素受体介导,其中ER-β比ER-α起着更主要的作用;同时,鼠尾草酚能使MCF-7细胞阻滞在S期可能是其抑制MCF-7细胞增殖、分裂的作用机制之一。     

黑大豆乙醇提取物的雌激素样作用及其机制研究

目的:评价黑大豆乙醇提取物(black soybean ethanol extract,BSE)的雌激素样作用及其作用机制。方法:采用富含雌激素受体的雌激素依赖性人乳腺癌细胞株MCF-7细胞,分别以E-SCREEN法观察BSE对其增殖的影响、以RT-PCR法观察BSE对其雌激素效应基因mRNA表达的影响,并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价BSE发挥雌激素样作用的机制。结果:与溶剂对照组相比较,BSE(10～200μg.mL^-1)能显著促进MCF-7细胞的增殖,100μg.mL^-1时作用达到最大;BSE能明显诱导MCF-7细胞pS₂,孕激素受体(PR)基因mRNA的表达,并与药物浓度有一定相关性;以上作用均能被雌激素受体拮抗剂所完全拮抗。结论:BSE能促进MCF-7细胞的增殖,诱导雌激素效应基因mRNA的表达,即BSE能通过雌激素受体发挥雌激素样作用。     

玉屏风散对小鼠变应性接触性皮炎及脾淋巴细胞增殖的影响

目的：观察玉屏风散不同提取部位对小鼠接触性皮炎及脾淋巴细胞增殖的影响。方法：用二硝基氟苯诱导小鼠变应性接触性皮炎，观察玉屏风散不同提取部位对其的干预作用；用MTT法检测玉屏风散不同提取部位对小鼠脾脏T、B淋巴细胞活化增殖活动的影响。结果：玉屏风散水提液和醇沉液能减轻小鼠耳廓的肿胀程度但对免疫器官无显著的抑制作用；水提液能显著促进静息脾细胞增殖，醇沉液、挥发油及全方各组的高剂量亦有促进作用；水提液能抑制ConA诱导的脾细胞增殖，全方亦有抑制作用；各部份对LPS诱导的脾细胞增殖未观察到明显的影响。结论：玉屏风散对小鼠接触性皮炎有改善作用，不同提取部位对脾细胞的活化增殖的影响随细胞状态的不同而有所差异。     

农药氰戊菊酯与雌二醇联合作用对乳腺癌MCF-7细胞的影响

目的:旨在通过乳腺癌MCF-7细胞对农药氰戊菊酯和雌二醇联合作用进行研究,评价氰戊菊酯和雌二醇联合作用的环境雌激素活性。方法:MTT法检测氰戊菊酯和雌二醇联合对MCF-7细胞生长的作用;用流式细胞仪检测氰戊菊酯和雌二醇联合对MCF-7细胞周期分布情况;采用Western Blot法测定氰戊菊酯和雌二醇联合对MCF-7细胞ERK1/2,P-ERK1/2蛋白表达的影响。结果:MTT结果显示,氰戊菊酯与雌二醇联合后能促进MCF-7细胞增殖,但增殖作用比单独应用氰戊菊酯或雌二醇效应低,两者呈拮抗作用;流式细胞仪分析氰戊菊酯和雌二醇联合作用后与空白组比较,增殖效应不明显;Western Blot结果显示,氰戊菊酯和雌二醇联合对ERK1/2蛋白无明显影响,但可以促进P-ERK1/2蛋白的表达,但与氰戊菊酯和雌二醇单独作用比较,P-ERK1/2蛋白的表达较弱。结论:氰戊菊酯与雌二醇联合作用于MCF-7细胞,增殖效应低于单独作用组,两者联用具有拮抗作用,可通过对ERK信号传导通路的影响而发挥促进细胞增殖的作用。     

淫羊藿素对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞作用的影响

目的:探讨淫羊藿素(ICT)对雌激素依赖性乳腺癌MCF-7细胞的作用.方法::以在37℃、5％ CO2培养箱培养的人乳腺癌MCF-7为研究对象,用不同浓度的淫羊藿素单独作用及与雌二醇联合作用,测定人乳腺癌MCF-7细胞的增殖率,并检测该过程中雌激素受体ERα的表达情况.结果:当ICT浓度大于1×10-10mol·L-1时单独使用能促进ERα阳性人乳腺癌MCF-7细胞增殖,能诱导ERα基因的表达;淫羊藿素与雌二醇联合作用抑制MCF-7细胞增殖,抑制ERα的表达.结论:淫羊藿素与雌二醇联合作用具有抑制E2诱导的人乳腺癌MCF-7细胞增殖作用;淫羊藿素与雌二醇联合作用可抑制ERα基因的表达.     

阿魏酸对人类乳腺癌细胞增殖作用机制的实验研究

目的:考察阿魏酸对人类乳腺癌细胞的增殖作用及可能的作用机制。方法:利用体外培养的ER阳性人乳腺癌细胞系T47D细胞和ER阴性人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,通过MTT增殖实验、流式细胞技术检测细胞周期分布、测定ER亚型蛋白表达和用实时荧光定量RT-PCR法检测阿魏酸对雌激素效应基因pS2的调控作用。结果:1×10-5~1×10-7mol.L-1的阿魏酸可促进T47D细胞增殖(P0.05),1×10-8mol.L-1雌激素受体拮抗剂FaslodexTM能抑制这种增殖效应。实验浓度阿魏酸以及它们与1×10-8mol.L-1雌激素受体拮抗剂FaslodexTM共孵育对MDA-MB-231细胞的增殖作用无论在时效或者量效方面均无显著的统计学意义。阿魏酸能使T47D细胞S期细胞数增加,细胞分裂增殖指数升高(P0.05);随着细胞的孵育时间延长至48 h,细胞分裂增殖指数与孵育24 h相比显著降低(P0.01),实验浓度阿魏酸以及它们与1×10-8mol.L-1雌激素受体拮抗剂FaslodexTM共孵育使T47D细胞S期和G2M期细胞比例下降,G0-G1期比例升高,细胞周期停滞于G0-G1期。1×10-7,1×10-6mol.L-1阿魏酸可诱导T47D细胞ERα蛋白表达水平显著升高(P0.01),而对ERβ蛋白表达水平无显著影响。1×10-7,1×10-6mol.L-1阿魏酸均上调T47D细胞雌激素依赖性基因pS2mRNA表达。结论:阿魏酸通过促进ER阳性乳腺癌细胞增殖、上调ERα蛋白和雌激素依赖性基因pS2mRNA表达水平,有植物雌激素样作用。     

赤豆的雌激素样作用及其对人类乳腺癌MCF-7细胞孕激素受体水平的影响

目的：评价赤豆的雌激素样作用及其对人类乳腺癌MCF-7细胞孕激素受体水平的影响。方法：采用富含雌激素受体的雌激素依赖性人乳腺癌细胞株MCF-7细胞，分别以E-SCREEN法观察赤豆提取物对其增殖的影响，以RT-PCR法、Western blot法观察赤豆对孕激素受体mRNA和蛋白表达的影响，并以雌激素受体拮抗剂ICI182,780为工具药来评价赤豆提取物发挥雌激素样作用的机制。结果：与溶剂对照组比较，赤豆（10～200 μg·mL^-1）能显著促进MCF-7细胞的增殖，100 μg·mL^-1时作用达到最大；赤豆提取物能明显诱导MCF-7细胞孕激素受体(PR)基因mRNA和蛋白的表达，以上作用均能被雌激素受体拮抗剂所完全拮抗。结论：赤豆提取物具有雌激素活性，此作用是通过雌激素受体(ER)介导的。     

黄连解毒汤不同提取部位及相关单体对小鼠脾淋巴细胞增殖作用研究

目的:研究黄连解毒汤不同提取部位及小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁对小鼠T、B淋巴细胞增殖的影响。方法:建立体外脾T、B淋巴细胞模型,运用MTT比色法分析比较黄连解毒汤的不同提取部位及其主要化学成分与丝裂原(ConA、LPS)共同作用时对小鼠脾T、B淋巴细胞增殖作用的影响。结果黄连解毒汤全方水提部位(H2O部位)、醇提总部位(EtOH部位)、二氯甲烷萃取部位(CH2Cl2部位)和正丁醇萃取部位(n-Bu部位)对未活化或LPS和ConA诱导的脾T、B淋巴细胞具有不同程度的促进或抑制作用。小檗碱、黄芩苷(10μM)能促进未活化小鼠脾淋巴细胞增殖,而栀子苷、芦丁(50μM)对未活化小鼠脾淋巴细胞的增殖作用不明显。对于脂多糖(LPS)或刀豆蛋白A(ConA)诱导的脾淋巴细胞,小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁均能抑制其增殖。结论:黄连解毒汤不同提取部位及其中主要化学成分小檗碱、黄芩苷、栀子苷、芦丁对T、B淋巴细胞均有不同程度的增殖作用。     

人参炔醇抑制实验性迟发型超敏反应

目的:考察人参炔醇(PAN)对实验性迟发型超敏反应的影响及可能作用途径。方法:应用2,4-二硝基氯苯(DNCB)造成小鼠变态反应性接触性皮炎(ACD)模型,考察PAN诱导相给药对耳廓肿胀的影响,并进行病理组织学检查;MTT法检测PAN对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响。ELISA方法检测ConA刺激的脾细胞培养上清IFN-γ水平。结果:PAN10 mg.kg-1诱导相给药可明显抑制小鼠耳肿胀;病理组织学结果显示PAN可减轻模型小鼠局部水肿及血管扩张,减少淋巴细胞浸润;PAN对ConA诱导的T细胞增殖有明显的抑制作用,而对静息状态的脾细胞未观察到显著影响;PAN10μmol.L-1起明显抑制体外ConA刺激脾细胞的IFN-γ分泌,且作用在早期(6 h)即已呈现。结论:PAN对实验性迟发型超敏反应有显著的抑制作用,该作用可能与抑制T细胞增殖和IFN-γ的分泌有关。     

发酵虫草菌粉多糖成分的理化性质及其对ConA抑制L-O_2细胞增殖活性的影响

目的:将发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖进行分离纯化,并观察纯化产物对ConA抑制人正常肝细胞(L-O_2细胞株)增殖活性的拮抗作用。方法:发酵虫草菌粉(Cs-4)通过水提醇沉、复溶、透析、浓缩、冷冻干燥得粗多糖,采用DEAE-纤维素离子交换、sephadex-G-100柱色谱分离纯化粗多糖,MTT法检测细胞增殖活性。结果:发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖经分离纯化得到均一成分,命名为CSMP-60-B-I。高效凝胶渗透色谱法测得其相对峰高分子量为32 336 Da。毛细管电泳测得单糖组成为木糖-阿拉伯糖-葡萄糖-半乳糖-甘露糖(0.09∶0.20∶1.00∶3.70∶3.58)。高浓度ConA能抑制L-O_2细胞增殖,而加入CSMP-60-B-I后,这种抑制作用大大减弱。结论:发酵虫草菌粉(Cs-4)粗多糖的分离纯化产物CSMP-60-B-I对ConA抑制L-O_2细胞增殖活性有拮抗作用,提示其可能有保肝作用。     

6种中药活性成分植物雌激素作用的比较研究

 目的观察蜕皮甾酮等6种中药活性成分对MCF-7细胞增殖、细胞周期的影响,以探讨它们的植物雌激素样作用及其可能机制。方法采用MTT细胞增殖实验观察6种中药活性成分:蜕皮甾酮、红花黄色素A、丹参酮I、丹参酮ⅡA、补骨脂素、异补骨脂素对雌激素受体(ER)阳性细胞系MCF-7增殖的影响,并以雌激素受体拮抗剂IC I182,780干预,探讨其发挥雌激素样作用的可能机制。同时,通过流式细胞术检测这些活性成分对MCF-7细胞增殖周期的影响。结果蜕皮甾酮、红花黄色素A、补骨脂素、异补骨脂素能够促进ER阳性细胞系MCF-7增殖,并将细胞周期由G1期向S期推进,促进DNA合成,提高细胞分裂增殖指数。同时,加入ER拮抗剂IC I182,780可抑制其促增殖作用。丹参酮I和丹参酮ⅡA能够抑制ER阳性细胞系MCF-7增殖,但对其细胞周期影响不显著。同时,加入ER拮抗剂IC I182,780可减弱其对MCF-7增殖的抑制作用。结论蜕皮甾酮、红花黄色素A、补骨脂素、异补骨脂素能够促进MCF-7增殖,而丹参酮I和丹参酮ⅡA可抑制MCF-7细胞增殖,其作用均是通过ER介导的。     

结血蒿醇提物对小鼠脾细胞增殖和活化的抑制作用

目的：观察藏药结血蒿75%乙醇提取物对体外丝裂原刀豆蛋白A（Concanavalin A,ConA）刺激的小鼠脾细胞活化和增殖的抑制作用.方法：用Con A刺激小鼠脾细胞,分别用四甲基偶氮唑盐染色法（MTT 法）,流式细胞术等方法观察结血蒿醇提物对细胞增殖和活化的作用.结果：结血蒿醇提物对体外Con A刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化均有显著的抑制,作用呈剂量依赖性.结论：结血蒿醇提物可抑制C0n A刺激的小鼠脾细胞的增殖和活化,提示其具有免疫抑制活性.     

泡桐花提取物的雌激素活性筛选及其对OVA致过敏性哮喘小鼠的保护作用

目的:探讨泡桐花提取物雌激素活性及其对卵清白蛋白(OVA)致过敏性哮喘小鼠的保护作用。方法:体外采用MCF-7细胞模型筛选出泡桐花提取物具有雌激素样活性，采用雌激素受体拮抗剂(ICI182,780)、雌激素受体α拮抗剂(MPP)、雌激素受体β拮抗剂(THC)与雌激素膜受体GPR30拮抗剂(G15)干预雌激素活性有效剂量下的MCF-7细胞增殖，探讨其雌激素受体作用途径;采用小鼠子宫增重试验，计算性未成熟小鼠的子宫指数，以ELISA法检测血清雌二醇(E₂)、促卵泡生成素(FSH)与黄体生成素(LH)含量;采用Westren blot法测定小鼠子宫中雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)和雌激素膜受体(GPR30)表达水平，进一步体内验证泡桐花提取物雌激素活性;OVA致过敏性哮喘小鼠模型，分为正常对照组、模型对照组、地塞米松0.5 mg/kg组、泡桐花提取物155、310、620 mg/kg组，每组8只，同时设置雌激素受体拮抗剂ICI182,780组，雾化激发前30 min共同作用小鼠，连续7 d，末次给药24 h后，小鼠脱颈处死，计算免疫器官脾脏和胸腺指数，E...     

一贯煎对大鼠肝星状细胞雌激素受体的影响

目的:观察一贯煎含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)雌激素受体α(ERα)、雌激素受体β(ERβ)2种亚型基因表达的影响,探讨其抗肝纤维化的作用机制。方法:体外培养活化的大鼠HSC-T6细胞,分为空白组、雌二醇组和一贯煎高、中、低剂量组,共5组,空白组加入空白鼠血清,药物组加入相应的含药血清进行干预,培养24 h、48 h、72 h后,分别收集细胞和上清液,保存备用。MTT法检测细胞增殖情况;ELISA法检测细胞上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量;Real time-PCR方法检测ERα、ERβ mRNA的表达。结果:一贯煎高剂量组表现对细胞增殖有明显的抑制作用,能够降低细胞上清液中Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原含量,且作用较雌二醇显著(P0.05);一贯煎在提高HSC-T6细胞ERα、ERβ mRNA的表达方面作用较雌激素含药血清组弱,差异无统计学意义。结论:一贯煎能够抑制肝星状细胞活化,其机制可能是通过提高肝星状细胞的雌激素受体表达而起作用。