补肾方药对去卵巢大鼠端脑、海马晚期糖化终末产物及β-淀粉样肽含量的影响

目的探讨补肾方药对去卵巢大鼠端脑、海马晚期糖化终末产物(AGEPs)及β-淀粉样肽(AβP)含量的影响。方法将30只9月龄SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组和补肾方药组。于卵巢切除4周后灌胃给药,连续治疗16周,分别用竞争性ELISA法、放免法检测端脑、海马AGEPs及AβP的含量;荧光法检测血清、尿可溶性AGE-肽的含量;并观察大鼠行为学及海马形态学变化。结果与假手术组比较,去卵巢组逃避正确率明显降低(P<0．01),端脑AβP、血清可溶性AGE-肽的含量明显升高(P<0．05);端脑、海马AGEPs含量有升高的趋势,但无统计学意义;嗜银染色可见神经纤维增粗,大脑皮质颞叶出现老年斑。补肾方药组端脑AGEPs、AβP含量及海马AβP含量明显减少(P<0．05),尿中可溶性AGE-肽明显增加(P<0．05),学习记忆以及神经元变性得到明显改善。结论补肾方药能降低端脑AGEPs的积累及端脑、海马组织的AβP含量,改善由雌激素缺乏所致的学习记忆下降,其机理可能是通过肾脏对AGE-肽排泄增加实现的。     

清脑通络方对老年性阿尔茨海默病大鼠海马突触结构的重建作用

目的:观察清脑通络方对老年性阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型大鼠海马突触结构的影响。方法:将大鼠随机分为青年组、老年组、模型组、石杉碱甲组、清脑通络方组。除青年组和老年组外,其他各组大鼠注射D-半乳糖和鹅膏蕈氨酸到基底前脑进行造模。造模成功后,清脑通络方组大鼠灌胃清脑通络方6 g/(kg·d),石杉碱甲组大鼠灌胃石杉碱甲0.3 mg/(kg·d),青年组、老年组、模型组大鼠以等体积生理盐水灌胃,连续4周。电镜观察大鼠海马CA1区和CA3区分子层突触特征,用体视学方法分析海马CA1区和CA3区突触数密度(N_v)、突触连接带面密度(S_v)和突触连接带平均面积(S)。结果:老年组大鼠CA1区和CA3区突触数密度、突触面密度与青年组比较无明显变化。与老年组比较,模型组大鼠CA1区和CA3区突触数密度、突触面密度显著降低(P0.01)。与模型组比较,清脑通络方组大鼠在CA1区和CA3区的突触数密度、突触面密度显著增加(P0.05,P0.01);石杉碱甲组大鼠在CA1区和CA3区的突触数密度增加,在CA3区突触面密度增加(P0.01)。与石杉碱甲组比较,清脑通络方组大鼠在CA1区的突触面密度增加(P0.01)。结论:清脑通络方对老年性AD大鼠海马突触密度有显著的改善作用。     

皮质酮损伤大鼠海马神经细胞病理模型的建立及补肾方药的作用

目的:以高浓度皮质酮(Corticosterone,CORT)损伤细胞制作原代培养的海马病理细胞模型,观察左归丸、右归丸对模型细胞的作用。方法:以新生SD乳鼠海马组织为材料,原代培养大鼠海马神经细胞;采用10-4mol/LCORT损伤细胞制作海马病理细胞模型,并用RU38486拮抗皮质酮的损伤作用。采用四甲基氮唑兰(MTT)法测定培养细胞的活性,RT-PCR法检测培养细胞皮质酮受体(GR)mRNA的表达变化,以及观察左归丸、右归丸对模型细胞上述各项指标变化的影响。结果:细胞的培养液中CORT浓度为10-4mol/L时,海马神经的细胞活性和GRmRNA表达均下降;左归丸、右归丸可以增强细胞活性和上调GRmRNA的表达。结论:浓度为10-4mol/L的CORT可以损伤细胞,制作原代培养的海马病理细胞模型;左归丸、右归丸对模型细胞的各项指标变化有明显的改善作用。     

补肾方药对去卵巢大鼠骨密度及血清雌激素水平影响的实验研究

目的：探讨补肾方药对去卵巢大鼠骨质疏松的防治作用及其作用机制。方法：采用切除大鼠双侧卵巢的方法造成骨质疏松模型，然后给予补肾方药治疗。结果：补肾方药可使卵巢切除大鼠骨密度(BMD)增加，血清雌激素水平(E2)增加。结论：补肾方药可以防治卵巢切除大鼠所致的骨质疏松症，升高血清雌二醇可能是其作用机制之一。     

去卵巢大鼠性激素和骨钙素的含量变化及补肾中药对其影响

本文采用摘除大鼠的双侧卵巢的方法模拟因雌激素水平低下造成的骨质疏松症，观察去卵巢大鼠血清Ｅ２，ＦＳＨ，ＬＨ，ＢＧＨ含量的变化以及补肾中药对它们的影响。结果显示：去卵巢后大鼠血清Ｅ２，ＢＧＰ含量均显著下降；ＬＨ，ＦＳＨ含量均明显上升。补肾中药虽对去巢大鼠Ｅ２水平无明显改变，但能明显升高去卵巢大鼠ＢＧＰ的含量，疗效接近雌激素治疗组。     

脑尔康对实验性AD模型大鼠脑内兴奋性氨基酸含量的影响

要目的:观察中药脑尔康对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠胆碱乙酰转移酶(ChaT)、兴奋性氨基酸含量的影响及可能机制。方法:雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、多奈哌齐组、脑尔康组。采用大鼠双侧海马一次性注射Aβ_(142)制作AD模型,对照组注射等剂量生理盐水。造模成功后第3天开始空白组和模型组给予生理盐水ig(0.5mL·d~1);多奈哌齐组及脑尔康组分别给予相应药物ig(14.3 mL·d~1),均每天一次。4周后,用Morris水迷宫法进行行为学测试,取材,免疫组化法观察ChaT表达,高效液相色谱分析法测定备组大鼠海马内兴奋性氨基酸含量。结果:①与模型组比较,多奈哌齐组及脑尔康组大鼠脑内ChaT表达明显增多(P0.01);③与模型组比较,多奈哌齐组及脑尔康组兴奋性氨基酸水平有有明显的下降(P0.01),且二者之间的结果无明显差异。结论:脑尔康可能通过对ChaT表达的保护作用以及下调AD模型大鼠海马内兴奋性氨基酸含量解除兴奋性氨基酸的毒性作用,达到防治AD的目的。     

脑还丹对痴呆模型大鼠炎性因子及海马超微结构的影响

目的:探讨脑还丹对Aβ_(25-35)诱导的痴呆模型大鼠炎性因子表达及海马区超微结构的影响。方法:原代海马神经元分为对照组、β-淀粉样蛋白(Aβ)组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组、银杏叶片组,对照组和Aβ组加入对照组血清,其他各组分别加入对应的含药血清,72 h后,Aβ组、脑还丹低剂量组、脑还丹高剂量组、银杏叶片组加入Aβ_(25-35)作用72 h,测量各组海马细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA水平,并检测海马神经元存活率。另外,用Aβ行立体定位制造痴呆大鼠模型,分组同上,分别给予生理盐水及高剂量脑还丹、低剂量脑还丹、银杏叶片治疗,1个月后取海马标本,观察海马区神经元超微结构。结果:(1)Aβ组海马细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA水平明显高于对照组(P0.01),脑还丹高剂量组、脑还丹低剂量组和银杏叶片组海马细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA水平均低于Aβ组(P0.01),其中以脑还丹高剂量组IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA水平最低。(2)Aβ组海马神经元存活率低于对照组(P0.01);脑还丹高剂量组、脑还丹低剂量组和银杏叶片组海马神经元存活率高于Aβ组(P0.01),其中以脑还丹高剂量组海马神经元存活率最高。(3)Aβ组大鼠海马区出现脂褐素堆积,溶酶体增大、空化,粗面内质网结构破坏,核糖体减少,线粒体减少,细胞核变形,突触减少和结构破坏。脑还丹组及银杏叶片组上述变化较Aβ组减轻。结论:脑还丹能通过减少炎性反应降低海马神经元损伤,从而改善神经退行性病变。     

补肾中药对去卵巢大鼠骨组织ER、OPG表达的促进作用

通过检测去卵巢大鼠给予补肾中药后腰椎内ERmRNA及OPG mRNA的表达,进一步探讨补肾中药防治骨质疏松的分子机制.将雌性3月龄SD大鼠48只,随机分为卵巢切除 补肾中药防治(HDP),卵巢切除 雌激素(倍美力)防治(ER),骨质疏松(卵巢切除)(OVX)及正常对照组(SHAM)4组,每组12只.术后12周处死大鼠,取L3椎体,异硫氰酸胍一步法提取总RNA,嵌套式反转录聚合酶链反应(NRT-PCR),扩增待检测各组ERmRNA及OPGmRNA的表达.同时取L4椎体,行骨组织形态计量学检测.结果显示HDP组ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率分别为75.0%和66.7%;EP组ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率均为83.3%;OVX组各例ER mRNA均无表达,2例OPG mRNA呈弱阳性表达(阳性率为16.7%);SHAM组呈ER mRNA及OPG mRNA阳性表达.χ2检验,HDP组与ER组比较ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率均无显著性差异(P＞0.05);该两组与OVX组比较,ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率均有高度显著性差异(P＜0.01);而与SHAM组比较,HDP组ERmRNA,ER组ER mRNA及OPG mRNA阳性表达率无显著性差异(P＞0.05),但HDP组OPG mRNA阳性表达率有显著性差异(0.01＜P＜0.05).骨组织形态计量学检测,OVX组骨体积、骨小梁厚度及骨小梁数目均比SHAM组显著减少,而骨小梁间隔显著增大.同EP组相似,HDP组骨体积、骨小梁厚度显著增加,虽也使骨小梁间隔稍有减少,但与OVX组比较无统计学差异.表明补肾中药通过直接作用于骨组织中ER,增强ER mRNA的表达,并刺激OPG的分泌,从而有望替代雌激素,对去卵巢大鼠的骨质疏松有明显的防治作用.     

补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型小鼠海马脑红蛋白表达的影响

目的探讨补肾活血针刺法对阿尔茨海默病模型快速老化小鼠P8(SAMP8)学习记忆能力的影响及作用机制。方法将20只5月龄雄性SAMP8小鼠随机分为针刺治疗组、模型对照组各10只,另设5月龄雄性抗快速老化小鼠(SAMR1)10只作为正常对照组。针刺治疗组予以补肾活血针刺法干预,选穴百会、血海、肾俞、膈俞,采用捻转补泻手法。模型对照组及正常对照组未予特殊处理。干预4周后,取各组小鼠海马组织,采用免疫组化法检测脑红蛋白(Ngb)的表达情况。结果模型对照组小鼠海马组织Ngb的表达水平较正常对照组减弱(P<0.01);与模型对照组相比,针刺治疗组小鼠海马组织Ngb的表达水平明显升高(P<0.01)。结论补肾活血针刺干预能够明显增强SAMP8小鼠海马组织Ngb的表达,这可能是其改善SAMP8小鼠学习记忆能力的潜在分子机制之一。     

补肾方药对去卵巢大鼠主动脉晚期糖化终末产物及血脂的影响

目的：探讨补肾方药对去卵巢大鼠主动脉晚期糖化终末产物(AGEs)、血脂和过氧化物的影响。方法：将6月龄雌性别大鼠随机分为假手术组、去卵巢组和补肾方药组。大鼠去除双侧卵巢2周后治疗13周。禁食24h,取血处死动物,取主动脉,分别测定主动脉AGEs、血脂和血清过氧化物含量。结果：各组大鼠总胆固醇(TC)、载脂蛋白B(apoB)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)差异无显著性(P＞0．05)。与假手术组比较,去卵巢组主动脉AGEs、甘油三酯(TG)、氧化低密度脂蛋白(OX-LDL)、丙二醛(MDA)均明显升高(P＜0．05或P＜0．01);高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白A-I(apoA-1)和超氧化物歧化酶(SOD)活性均显著降低(均P＜0．01)。与去卵巢组比较,补肾方药组主动脉AGEs、血清MDA和OX-LDL均明显降低(P＜0．05或P＜0．01);HDL-C、apoA-I和SOD活性均显著升高(均P＜0．01)。结论：补肾方药通过降低去卵巢大鼠主动脉AGEs含量,降低大鼠血清OX-LDL和MDA水平,升高HDL-C、apoA-I水平和SOD活性,从而发挥其对心血管的保护作用。     

补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用

目的　探讨补肾方对去卵巢大鼠学习记忆的调整作用 ,为中医“肾”与“智”的关系及补肾治疗阿尔茨海默病 ( Alzheimer's disease,AD)提供实验基础。方法　将雌性 SD大鼠 4 0只 ,随机分成卵巢切除组、假手术组、卵巢切除 +补肾方治疗高、低剂量组。治疗 12周 ,测定各组动物血清雌二醇 ( E2 )、血清钙含量 ;Y -电迷宫检测学习记忆能力 ;测定海马组织乙酰胆碱 ( Ach)含量、乙酰胆碱酯酶 ( Ach E)活性 ;HE染色观察海马组织形态学变化。结果去卵巢 18周 ,大鼠学习记忆力明显下降 ;海马组织 Ach含量下降 ;海马锥体细胞层、分子层、多形细胞层细胞浓缩 ,出现大小不同空泡 ,锥体细胞顶树突消失 ,细胞排列紊乱 ,嗜银染色可见神经纤维增粗 ,大脑皮质颞叶出现老年斑。补肾方能提高血清 E2 、血清钙水平 ( P<0 .0 5 ) ,明显提高学习记忆成绩 ,并能提高海马组织 Ach含量及 Ach E活性 ( P<0 .0 5 ) ,对海马神经元的变性具有明显的改善作用。结论　补肾方对雌激素缺乏所致的学习记忆能力下降具有明显的改善作用 ,其机制可能是通过提高血清 E2 水平 ,调节 Ca,P代谢 ,从而提高中枢胆碱能神经系统功能实现的     

槲皮素对阿尔茨海默病大鼠学习记忆影响及与海马细胞凋亡关系的研究

目的 观察槲皮素(Que)对阿尔茨海默病(Alzheimer’s desease，AD)模型大鼠学习记忆影响并探讨其与海马细胞凋亡的关系。方法 用立体定位技术对海马CA1区微量注射喹啉酸(QA)造成AD模型；Y形迷宫检测大鼠学习记忆水平；电子显微镜、流式细胞仪检测海马细胞凋亡。结果 Que可明显提高QA所致痴呆大鼠学习记忆水平，显著降低海马细胞凋亡率。结论 Que对AD大鼠的保护作用与降低海马细胞凋亡率有关。     

三七总皂苷对Alzheimer''''s病大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用

目的:观察三七总皂苷(PNS)对老年性痴呆(AD)大鼠模型大脑胆碱能神经病理损害的保护作用.方法:以d-半乳糖腹腔注射致亚急性损伤合并鹅膏蕈氨酸(IBA)损毁双侧大脑Meynert基底核建立AD大鼠动物模型,利用免疫组织化学方法检测大脑切片胆碱乙酰基转移酶(ChAT)免疫反应活性及阳性神经元数量及形态学改变.结果:PNS能明显减轻由d-半乳糖损害和鹅膏蕈氨酸损毁导致的大脑胆碱能神经元数量减少和ChAT水平降低.结论:PNS对AD大鼠模型大脑胆碱能神经的病理损害具有保护作用.     

调心方对麻醉大鼠海马长时程增强的作用

目的 :观察调心方对麻醉大鼠海马诱发长时程增强 (LTP)的易化和增强作用。方法 :采用麻醉大鼠海马诱发LTP实验技术 ,以 60Hz 2 0串、60Hz 3 0串和θ波串为串刺激分别诱发LTP ,串刺激前 3 0min单次口服给予调心方。结果 :单次口服给予调心方 (5 5 88g/kg)对大鼠海马穿通路正常的突触活动和LTP的维持均没有产生影响 ,但其可以提高大鼠海马穿通路LTP的诱发成功率。结论 :调心方具有一定易化LTP生成的作用 ,这可能是其改善学习记忆功能的机制之一。     

银杏内酯B对胆固醇和apoE4共损伤海马神经元胆碱能系统的保护作用

[目的]探讨银杏内酯B对高胆固醇和载脂蛋白E4(apoE4)诱导海马神经元胆碱能系统损伤的保护作用。[方法]应用胆固醇和apoE4共处理海马神经元,分别采用微量羟胺比色法,羟胺比色法和放射化学法测定海马神经元乙酰胆碱含量,乙酰胆碱酯酶和胆碱乙酰基转移酶活性。[结果]银杏内酯B可以提高乙酰胆碱酯酶活性和乙酰胆碱水平,对乙酰胆碱酯酶作用不明显。[结论]高胆固醇和apoE4损伤海马神经元胆碱能系统,参与老年性痴呆发生,银杏内酯B对损伤神经元有保护作用。     

芥子碱对大鼠脑匀浆和血清中乙酰胆碱酯酶的抑制作用

目的:考察中药单体芥子碱(3,5-二甲基,4-羟基苯丙烯酰胆碱,sinapine)对大鼠血清和大鼠大脑匀浆乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的体外抑制作用。方法:大鼠眼球取血后断头,取大脑,匀浆,用双缩脲法测定脑组织匀浆总蛋白含量。采用乙酰胆碱脂酶试剂盒和改良Ellman比色法测定AChE的活力,检测芥子碱对大鼠血清和脑匀浆乙酰胆碱酯酶的抑制作用。结果:芥子碱明显抑制大鼠大脑匀浆AChE的活力,而对血浆AChE活性的抑制相对较弱,对脑匀浆和血清AChE的抑制IC₅₀分别为3.66和22.1μmol.L^-1,IC₅₀血清/IC₅₀脑=6.042(倍)。结论:芥子碱能显著抑制脑组织AChE活性,有可能作为中枢乙酰胆碱酯酶抑制剂(acholinesterase inhibi-tors,AChEIs)具有防治阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)的应用前景。     

当归芍药散研究概况

综述了近年来有关当归芍药散在组方、工艺、植化、药理和临床方面的研究概况,提议今后可充分借助现代化的分析手段对该经典古方进行确认和分析,为当归芍药散今后的研究提供较为全面详尽的资料参考。     

Shibimijihwang-tang elevates intracellular ATP and choline content in the cerebral cortex of ovariectomized rats

Shibimijihwang-tang (SJT) has been used traditionally to improve systemic blood circulation and biological energy production in patients with circulatory and neuronal diseases. The object of this study is to determine the effect of SJT extract on the intracellular adenosine triphosphate (ATP) and choline content in the cerebral cortex of ovariectomized (OVX) rats. Bilateral ovaries of 8-week-old rats were removed. Rats were maintained for 12 weeks to deplete ovarian steroid hormones, followed by treatment with SJT at 500 mg/kg body weight per day for 12 weeks. High rate of body weight increase in the OVX rats was markedly reduced by treatment with SJT, but the change in body weight of normal rats was not affected by it. SJT also significantly reduced the decline of cerebral weight in the OVX rats (P<0.05). Tissue glucose content in the cerebral cortex of OVX rats was significantly increased by SJT treatment (P<0.05). A decline in cerebral ATP content in OVX rats was dramatically restored by SJT administration (P<0.01), but SJT did not change the cerebral ATP content in normal rats. Cerebral choline content also declined following ovariectomy. This reduction was significantly elevated by SJT treatment (P<0.05), but SJT did not affect the change in cerebral choline in normal rats. Taken together, these results demonstrate that SJT can reduce the decrease in brain weight, cerebral ATP and choline content caused by deprivation of ovarian steroid hormones. This suggests that pharmacological properties of SJT may play a role in improvement of reduced cerebral energy production and cholinergic neurotransmitter synthesis caused by deficiency of ovarian steroid hormones in the cerebroneuronal cells of postmenopausal women.     

脾阴虚痴呆证病结合模型建立及滋补脾阴方药干预的实验研究

目的:为有效模拟临床,建立脾阴虚痴呆证病结合大鼠模型,并观察滋补脾阴(Zi-Bu-Pi-Yin,ZBPY)方药对其影响。方法:采用经典方法建立脾阴虚模型,随后将凝集态β-淀粉样蛋白1-40(β-Amyloid1-40,Aβ1-40)定位注射到双侧海马,应用ZBPY方药干预,观察各组体征变化。通过跳台仪和Morris水迷宫进行行为学测试,比较各组学习记忆能力的改变。结果:脾阴虚组和脾阴虚痴呆组表现出饮水量增加(P<0.01),肛温升高(P<0.01)等阴虚内热征象;痴呆组和脾阴虚痴呆组学习记忆力降低(P<0.05);脾阴虚痴呆 ZBPY组阴虚表现和学习记忆力均有所改善(P<0.05)。结论:本研究在完善阿尔茨海默病的证病结合模型方面作了尝试,观察了证、病、证病结合模型在体征和行为学方面的变化;ZBPY方药对脾阴虚痴呆大鼠的阴虚表现及学习记忆能力均有一定改善作用。